白花蛇舌草提取物抗多发性骨髓瘤细胞的机制研究

目的 探讨白花蛇舌草提取物（HDE）抗多发性骨髓瘤细胞的机制。方法 观察50、100、150μg/mL HDE、2.5、5、10uM三氧化二砷（As2O3）及25、50、100nM硼替佐米（Bortezomib）浓度对骨髓瘤细胞株的增殖抑制,细胞周期及诱导凋亡的影响,明确白花蛇舌草中具有抗肿瘤作用的单体成分,同时讨论HDE抗肿瘤作用机制。结果 不同浓度As2O3、硼替佐米及HDE作用于RPMI 8226及NCI-H929细胞增殖的抑制作用具有浓度及时间依赖性;浓度增加了25ug/ml,抑制率增加50%,HDE浓度为50-75μg/mL对细胞的抑制作用最为明显。 100nM硼替佐米作用于RPMI 8226及NCI-H929 24h,分别使G2/M期升至为70.10%、73.99%,150μg/mLHDE作用于RPMI 8226及NCI-H929 24h,分别使G0/G1期升至为45.15%、36.28%,而10uM As2O3作用于NCI-H929 24h,使G0/G1期升至为40.59%;3种药物均可诱导细胞凋亡,150μg/mLHDE作用于RPMI 8226及NCI-H929 48h,凋亡率为14.44±0.50%、24.90±0.76%。结论 HDE在一定浓度范围内对多发性骨髓瘤细胞具有较为明显剂量依赖的杀伤作用,其中在浓度50～75μg/mL对细胞的抑制作用增加最为明显。HDE是通过诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期来抑制骨髓瘤细胞增殖。     

白花蛇舌草-半枝莲药对提取物抗氧化及清除自由基活性研究

目的研究白花蛇舌草-半枝莲3种常见配比(2∶1、1∶1、1∶2) 药对提取物抗氧化及清除自由基活性。方法采用紫外分光光度法测定提取物总黄酮的量,HPLC法分析提取物组成;采用还原能力、螯合能力、清除 DPPH、?OH自由基能力及保护 DNA 免受?OH损伤能力等5种化学及生物学模型,研究并比较药对3种配比提取物抗氧化及清除自由基活性的差异。结果不同配比组方对药对提取浸膏总黄酮的量、组成、清除 DPPH 能力、清除?OH能力及螯合Fe2+离子能力均有较大影响。而还原能力及保护 DNA 免受?OH损失作用与药对中各单药材所占比重相关性不大。结论药对提取浸膏提取率、总黄酮的量、组成及抗氧化活性均受配比的影响,其中1∶2配比药对的活性较强。     

白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用的实验研究

目的探讨白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用。方法通过体外无菌传代培养人胃癌细胞SGC-7901,将白花蛇舌草提取物以0．05mg/mL、0．1mg／mL、0．15mg／mL、0．2mg／mL四个不同浓度作用于该细胞,24h后采用MTF法检测细胞活性及数量。结果药物组0．05mg／mL和0．1mg／mL浓度孔的吸光值与对照组相比无显著性差异（P〉0．05）,而0．15mg／mL和0．2mg／mL浓度孔的吸光值明显小于对照组（P〈0．05）。结论白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖有一定的抑制作用,且抑制作用的强弱可能跟药物浓度有关,值得进一步研究。     

白花蛇舌草提取物对白血病HL-60细胞的抑制作用

目的：探讨白花蛇舌草提取物对HL-60细胞的抑制作用及其机制。方法：采用四氮唑蓝（M1Tr）抑制试验检测白花蛇舌草提取物对HL-60细胞的抑制作用。结果：白花蛇舌草提取物对HL-60细胞有明显的抑制作用,并且呈剂量一时间依赖关系。结论：白花蛇舌草提取物可能是通过直接影响肿瘤细胞的能量代谢,从而抑制HL-60细胞生长。     

白花蛇舌草不同提取工艺对抗肿瘤活性的影响

目的 为研制低毒高效的抗癌制剂，确定不同的白花蛇舌草提取物（汤剂，亲脂提取物，粗多糖）的抗肿瘤作用。方法 采用水提取法，醇提取法，脱脂水提醇沉法分别制备了白花蛇舌草汤剂，亲脂提取物和粗多糖，用S-180细胞植入小鼠作为模型。进行了抑制肿瘤的试验。结果 白花蛇舌草的水提液（汤剂）对S-180肿瘤细胞没有明显的抑制作用。白花蛇舌草水溶性的多糖和亲脂提取物对S-180肿瘤细胞具有显著的抑制作用；在抑瘤的同时，多糖部分具有对化学损伤的保护作用；水溶性的多糖和亲脂提取物合并给药并未显示协同抗肿瘤活性。结论 白花蛇舌草的脂溶性部位和多糖具有良好的抗肿瘤应用前景。分别提取比简单的水提取效果好。     

白花蛇舌草提取物体外抑制K562细胞增殖实验研究

目的：观察白花蛇舌草提取物（HDE）体外对人白血病细胞株K562增殖的影响,探讨HDE 用于治疗白血病的作用机制。方法：以白血病K562细胞株为靶细胞,观察不同浓度的HDE对 K562细胞增殖的影响,及胞内线粒体跨膜电位（ΔΨm）的水平;检测低浓度HDE处理前后胞内Sur? vivin、Bcl-2基因表达。结果：HDE（6.4mL/L）能明显抑制K562细胞增殖,且与浓度呈正相关（P< 0.05或P<0.01）。通过流式细胞术对碳氰化合物类亲脂性荧光染料（JC-1）检测发现,HDE能使靶 细胞内ΔΨm降低,且与HDE处理浓度呈负相关;K562细胞经低浓度HDE（3.2mL/L）处理3周后, Survivin、Bcl-2基因表达均低于未经处理细胞的2.7倍和1.6倍。结论：HDE可能通过降低线粒体 跨膜电位,抑制抗凋亡基因的表达,抑制K562白血病细胞增殖。     

白花蛇舌草与水线草的鉴别

白花蛇舌草为常用中药,具有清热解毒、利尿消肿之功效,《中国药典》１９９５年版一部附录有收载,为茜草科植物白花蛇草（ＨｅｄｙｏｔｉｓｄｉｆｕｓａＷｉｌ）的干燥全草（１）。笔者在工作中发现有某种同科同属植物水线草（ＨｅｄｙｏｔｉｓＣｏｒｙｍｂｏｓａＬａｎ...     

基于分子网络的半枝莲-白花蛇舌草治疗胃癌的多尺度作用机制研究*

目的 探讨半枝莲-白花蛇舌草治疗胃癌的作用机制。方法 通过化学信息学获得化学组分并构建成分数据集;基于OB和DL参数筛选活性成分;利用支持向量机与随机森林算法筛选作用靶点;分子对接法验证靶点;基于挖掘的数据构建有效成分-靶点、有效成分-靶点-功能网络。结果 研究筛选出35个有效成分和64个靶点。其中重要靶点为AR、ESR1、CA2、PTPN1、PIM1和CDK2。功能分析显示关键靶点主要作用在钙信号、cGMP-PKG、雌激素和cAMP 4条信号通路上。结论 半枝莲-白花蛇舌草的有效成分与其作用靶点形成互作网络,并调控关键信号通路来治疗胃癌。该研究体现了中药治疗肿瘤的多成分、多靶点与多尺度机制,有一定临床参考价值。     

白花蛇舌草组织培养研究

目的为白花蛇舌草的药材生产提供优质的种苗。方法用植物组织培养方法对白花蛇舌草进行快速繁殖研究。结果选出白花蛇舌草的最佳愈伤化培养基为MS 2,4-D 4.0mg/L Kt 0.5 mg/L、最佳分化培养基为MS BA 3.0 IAA 0.4、生根培养基1/2MS IBA 0.4 mg/L,,并分生出大量的白花蛇舌草试管苗。结论为白花蛇舌草的快速繁殖研究提供了一定的科学依据。      

半枝莲化学成分及药理作用研究进展

半枝莲（Scutellaria barbarta D.Don）植物中的化学成分因具有清热解毒及抗肿瘤等药理作用,而受到科研人员的关注。本文通过对国内外文献研究与分析,对半枝莲植物中黄酮类、二萜类、多糖类等结构类型化学成分以及药理作用研究进展等方面进行了较全面的综述,为进一步合理利用半枝莲植物提供了有价值的参考。     

藏红花素对人膀胱移行细胞BIU-87细胞抗增殖作用研究

目的 研究藏红花素(crocin)对人膀胱移行细胞株BIU-87增殖的作用及机制.方法 MTT法测定crocin抗增殖效应,FCM分析细胞周期分布,RT-PCR技术测定Cyclin D1, p27kip1 mRNA表达变化,Western blot检测Cyclin D1,p27kip1蛋白表达变化.结果 crocin对细胞生长有抑制作用,且呈时间-剂量依赖关系.FCM检测显示,crocin可使细胞阻滞于G0/G1期;3.2mmol/L crocin作用于BIU-87细胞后RT-PCR结果显示,Cyclin D1 mRNA表达明显下调,p27 mRNA无显著变化;Western blot结果表明Cyclin D1蛋白明显下调;p27kip1蛋白表达显著增加.结论 crocin对细胞有抗增殖作用,可阻滞细胞于G0/G1期,其可影响Cyclin D1 mRNA转录,但并不影响p27 mRNA表达水平,并调控Cyclin D1、p27kip1蛋白表达.     

As2O3诱导人膀胱癌BIU-87细胞株凋亡及其对细胞周期的影响

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人膀胱癌BIU-87细胞株生长抑制作用,并探讨对细胞周期及凋亡的影响.方法:CellTiter 96 Aqueous One 试剂检测BIU-87细胞株增殖活力;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化;流式细胞术分析细胞周期及凋亡.结果:As2O3与BIU-87细胞株生长抑制率之间有明显的浓度依赖关系 (P<0.01),IC50为28.92 μmol/L;荧光显微镜下观察到经As2O3作用的BIU-87细胞核膜消失,核染色质呈大小不等的小圆形碎片;流式细胞术结果表明30 μmol/L的As2O3处理BIU-87细胞株48 h后,G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例增加,凋亡率为47.37%.结论:As2O3能显著抑制BIU-87细胞株增殖;使细胞阻滞在S期,并进一步诱导细胞凋亡.     

Apoptosis inducing effects of arsenic trioxide on human bladder cancer cell line BIU-87

Objective　To explore the apoptosis inducing effects of arsenic trioxide (As2O3) on human bladder cancer cells and elucidate possible mechanisms. Methods　After treatment with As2O3, the growth inhibition rates of human bladder cancer cell line BIU-87 were studied by MTT and cell counts methods. DNA synthesis rates were detected by 3　H-TdR assay. The morphological changes of cancer cells were observed by light and electronic microscopy and cell apoptosis rates were detected by TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL). bcl-2 gene expression of BIU-87 cells was observed by strept avidin-biotin complex (SABC) immunohistochemical method. Results　As2O3 could effectively inhibit the growth of BIU-87 (P&lt;0.05), which were time and concentration dependent. The inhibition rate of 4.0?μmol/L As2O3 for DNA synthesis of cancer cells was 55.64% (P&lt;0.01). Partial cancer cells presented the characteristic morphological changes of apoptosis which depended on the time of exposure to drug (P&lt;0.05). bcl-2 expression of BIU-87 cells was decreased significantly (P&lt;0.05). Conclusion　As2O3 can significantly induce apoptosis in bladder cancer cells by down-regulating the expression of the bcl-2 gene and inhibiting DNA synthesis. This provides a potentially effective method for prevention and cure of human bladder cancer.     

不同免疫抑制剂对人膀胱肿瘤细胞抑制作用的比较研究

目的 观察常用免疫抑制剂(环孢素A、霉酚酸酯、他克莫司、雷帕霉素)对人膀胱癌细胞系T24和5637的体外抑制作用,并比较其作用强弱. 方法 MTT法测定各实验组细胞吸光度值,以观察不同药物对两种肿瘤细胞生长的抑制作用;侵袭小室法测定经药物处理后穿透生物膜的细胞数,以观察药物对细胞侵袭力的抑制效应. 结果 对T24细胞24 h抑制率(%)分别为:环孢素A 33.66±2.08,霉酚酸酯25.13±1.15,他克莫司41.16±2.23,雷帕霉素41.79±3.55.对5637细胞24 h抑制率(%)分别为:环孢素A39.00±1.30,霉酚酸酯25.25±4.58,他克莫司32.38 2.34,雷帕霉素39.89±1.07.T24细胞经各药物处理后穿透生物膜的细胞数分别为:环孢素A 13.25±1.88,霉酚酸酯18.31±2.41、他克莫司11.44±2.10、雷帕霉素11.50±1.93.5637细胞经各药物处理后穿透生物膜的细胞数分别为:环孢素A8.31±1.85,霉酚酸酯11.19±1.83、他克莫司10.19 1.22、雷帕霉素7.38±2.09. 结论 现有的常用免疫抑制剂对人膀胱肿瘤细胞均有明显抑制作用,以雷帕霉素作用较强.     

Preliminary study of the in vitro growth inhibition of human bladder cancer cell line BIU-87 by arsenic trioxide

Arsenic trioxide (As,O, ) is the major effectivecomponent of Pishuang. Because of its toxic and sideeffects, it was not widely used in clinic for a lOng period. In addition, it was believed that arsenic compound could result in chromosome abnormality, sis…     

肠道菌群对半枝莲中活性成分的代谢及其抑制CYP1A1酶的影响

  目的   研究半枝莲提取物经肠道菌转化前后主要化学成分含量的变化及其对CYP1A1酶抑制能力的影响。   方法   采用超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(UPLC-Q-TRAP-MS)技术检测半枝莲提取液在肠道菌中温孵0、0.5、1、2、4、6、12、24 h后主要活性成分的经时变化过程;通过CYP1A1酶活性分析实验研究半枝莲提取液经肠道菌转化不同时间点后对CYP1A1酶抑制作用的变化,并进一步研究半枝莲中主要黄酮类成分,野黄芩素、木犀草素、汉黄芩素及其苷对CYP1A1酶的抑制作用;利用分子对接验证野黄芩素、木犀草素、汉黄芩素与CYP1A1之间的结合情况。   结果   半枝莲提取液经过肠道菌转化后,野黄芩素含量先增加后减少,木犀草素、汉黄芩素含量增加,黄酮苷类成分野黄芩苷、木犀草苷、汉黄芩苷含量随时间延长显著减少,而二萜类成分半枝莲碱A、半枝莲碱B、半枝莲碱X含量无明显变化;半枝莲提取液经肠道菌温孵2、4、6 h后对CYP1A1酶活性的抑制作用增强,而12 h后这种增强作用逐渐减弱;野黄芩素、木犀草素、汉黄芩素与CYP1A1蛋白对接后的结合自由能分别为-6.33、-6.61、-7.09 kcal/mol,配体与CYP1A1中Phe224形成的π-π堆积作用为主要相互作用。   结论   半枝莲中的黄酮类化合物是其发挥抑制CYP1A1酶活作用的主要活性物质,可能与半枝莲的清热解毒功效有关。      

榄香烯联合热疗诱导膀胱癌BIU-87细胞凋亡及对p-Akt表达的影响

目的探讨榄香烯联合热疗诱导人膀胱癌细胞株-87（BIU-87）膀胱癌细胞凋亡及对磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）蛋白表达的影响。方法采用流式细胞仪和透射电子显微镜分析和观察不同浓度榄香烯与热疗单独或联合对BIU-87膀胱癌细胞作用结果;Westernblotting检测榄香烯（40mg／L）与热疗单独或联合作用于人BIU膀胱癌细胞24h后p-Akt蛋白的表达。结果榄香烯联合热疗处理后BIU-87细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变,不同浓度的榄香烯组、热疗组和榄香烯联合热疗组作用于人BIU-87膀胱癌细胞24h均可使细胞凋亡率增加,但榄香烯联合热疗组的作用显著强于前两者;凋亡率增加的同时下调了p-Akt蛋白的表达。结论榄香烯联合热疗可诱导人BIU-87膀胱癌细胞凋亡,且过程中下调了p-Akt蛋白的表达。     

氧化苦参碱体外诱导膀胱癌T24细胞凋亡

目的观察氧化苦参碱对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法不同浓度(0.625、1.25、2.5 mg/mL)氧化苦参碱作用于膀胱癌T24细胞,采用流式细胞术、光镜及电镜观察其诱导膀胱癌T24细胞的凋亡作用。用RT-PCR检测细胞凋亡相关基因survivin及caspase-3转录水平的改变。免疫印迹法检测survivin和caspase-3蛋白的表达情况。结果氧化苦参碱作用人膀胱癌细胞后,光镜及电镜下均见到典型的细胞凋亡形态,流式细胞术观察发现凋亡峰。同时观察到氧化苦参碱抑制survivin的转录和表达,对caspase-3有上调作用(P<0.05)。结论氧化苦参碱可能通过抑制survivin、上调caspase-3表达诱导膀胱癌T24细胞发生凋亡。     

蛋白激酶抑制剂PKC412对膀胱癌T24细胞生长增殖的影响

目的:观察蛋白激酶C(PKC)抑制剂N苯甲酰星孢菌素(PKC412)对膀胱癌T24细胞株生长、增殖、侵袭功能和细胞周期的影响.方法:用不同浓度PKC412(0.01,0.1,1.0,10 μmol/L)作用于对数生长期T24细胞24,48,72 h.采用软琼脂克隆形成试验测定T24细胞克隆形成抑制率,MTT法检测细胞生...