Chk1在原发性肝癌和肝非肿瘤组织中的表达

目的:探讨细胞周期检测点启动DNA损伤修复的主要激酶Chk1蛋白在肝非肿瘤组织和原发性肝癌组织中的表达差异、以及与临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组织化学法检测15例肝非肿瘤组织(其中正常肝组织7例、肝硬化组织8例)和41例原发性肝癌组织Chk1蛋白的表达。结果:Chk1蛋白在原发性肝癌组织中表达阳性率为73.2%,在肝非肿瘤组织中表达阳性率为26.7%差异有统计学意义(P<0.05);Chk1蛋白在不同分化程度的原发性肝癌患者中的表达有差异,有统计学意义(P<0.05)。结论:Chk1在原发性肝癌中高表达可能与原发性肝癌的发生、发展有关。     

HBV相关性肝病患者循环血sPD-1、CXCL-10、CXCL-11表达水平检测及相关性分析

目的 分析乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病患者循环血可溶性程序性死亡因子(sPD-1)、CXCL-10、CXCL-11水平表达差异及意义。方法 采用酶联免疫法检测sPD-1,CXCL-10、CXCL-11,运用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量，采用化学发光法检测乙肝病毒感染标志物，及运用全自动生化分析仪测定肝功能指标。结果 健康对照组外周血sPD-1、CXCL-10、CXCL-11表达水平最低，与HBV携带者组比较差异无统计学意义(P>0.05);其他各组与对照组及HBV携带者组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。随着病情进展，外周血sPD-1、CXCL-10、CXCL-11表达水平明显升高，在重型乙型肝炎组最高，与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05);HBV相关性肝病循环血中总体sPD-1表达水平与HBV-DNA载量、ALT、AST表达水平均呈正相关(P<0.05);HBV相关性肝病循环血中总体CXCL-10、CXCL-11表达水平与HBV-DNA载量、ALT、AST表达水平亦呈正相关(P<0.05);HBV相关性肝病各组循环血中s...     

URP1基因在肺癌组织中的表达及其意义

目的研究URP1基因在肺癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化SP法检测152例肺癌组织和152例配对癌旁正常肺组织中的URP1表达情况。结果 URP1基因在肺癌组织中的表达明显高于正常肺组织(P0.05),在非小细胞肺癌中高表达,在小细胞肺癌中低表达;URP1在鳞癌的表达高于腺癌(P0.05)和大细胞癌(P0.05),腺癌与大细胞癌之间比较差异无统计学意义(P0.05);URP1基因表达水平与鳞癌的分化程度呈正相关(P0.05)。结论 URP1基因参与肺癌的发生及发展过程。     

ＧＤＦ１５在大鼠早期肝癌和人小肝癌组织中的表达

目的:针对前期应用基因芯片(Affymatix Rat 230.2.0)筛选出的大鼠早期肝癌中高表达的人同源基因GDF15(GrowthDifferentiation Factor 15),进一步在人小肝癌组织中检测其表达水平以探讨其作为人小肝癌候选诊断标志物的价值.方法:应用RT-PCR检测GDF15在大鼠早期肝癌结节中的表达以对芯片结果进行初步验证;进一步采用RT-PCR、实时荧光定量PCR对GDF15在随机配对的正常肝脏组织(n=10)与小肝癌n=10)中基因转录水平半定量和定量检测,同时用免疫组化鉴定其在正常肝脏组织n=10),癌旁组织n=26),小肝癌n=12)及大肝癌(n=14)中蛋白水平的表达.结果:GDF15在大鼠早期肝癌结节中较正常组织表达显著上调(P＜0.05),与芯片结果一致.在人小肝癌,其转录及蛋白水平的表达均明显高于正常肝脏组织(P＜0.05).免疫组化结果显示12例小肝癌中10例表达强阳性,其在细胞中的表达定位于细胞浆与细胞外基质.结论:分泌性蛋白GDF15在人小肝癌组织中高表达,提示其具有潜在的小肝癌筛选价值.     

脑梗死患者血清CXCL-16、GDF-15、PLA2水平变化及意义*

目的 研究脑梗死患者的血清CXC趋化因子16（CXCL-16）、血清生长分化因子15（GDF-15）、脂蛋白相关磷脂酶A2（PLA2）的水平变化及对脑梗死患者临床诊治的指导意义。方法 选取2016年6月— 2017年6月沧州市中心医院98例脑梗死患者为观察组,同期该院进行体检的50例健康志愿者作为对照组。所有受试者于入院时抽血检测各组的CXCL-16、GDF-15、PLA2、C反应蛋白（CRP）水平,综合评价脑梗死患者各项指标的水平变化及对临床诊断的意义。结果 ①观察组患者的CXCL-16、GDF-15、PLA2、CRP水平与对照组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）。②将观察组患者按美国国立卫生院神经功能缺损评分（NIHSS）分组,患者的CXCL16、GDF-15、PLA2水平随着NIHSS分值的增加而升高,组间比较,差异有统计学意义（P?< 0.05）,而各组间的CRP水平差异无统计学意义（P?>0.05）。③将患者按病灶大小分组,患者的CXCL16、GDF-15、 PLA2水平随病灶的增大而升高（P?<0.05）,而各组间的CRP水平差异无统计学意义（P?>0.05）。④观察组患者治疗后出院时的CXCL-16、GDF-15、PLA2、CRP水平与对照组比较,差异无统计学意义（P?>0.05）,观察组患者的这些指标水平降至正常水平。结论 CXCL-16、GDF-15、PLA2水平随患者病情程度的变化而改变,可作为预测脑梗死患者发病、病情评估及判断预后的生物学标志物。     

凋膜止崩方对子宫内膜增生症模型大鼠子宫内膜MMP-1和TIMP-1蛋白表达的影响

目的:探讨凋膜止崩方靶向干预前后MMP-1和TIMP-1在子宫内膜增生症模型大鼠子宫内膜组织中的表达情况。方法:建立大鼠子宫内膜增生症模型,设立空白组(A)、模型对照组(B)、实验大剂量组(C)、实验小剂量组(D),并进行相应的处理。采用Western-blotting方法检测4组大鼠子宫内膜组织中MMP-1和TIMP-1蛋白的表达。结果:模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中TIMP-1/MMP-1的比值明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1/MMP-1的比值均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:凋膜止崩方治疗子宫内膜增生症的机制可能是通过上调大鼠子宫内膜组织中MMP-1蛋白的表达,下调TIMP-1蛋白的表达,从而加速了子宫内膜组织中ECM的水解,导致子宫内膜崩解、脱落,达到祛除大鼠增生过长子宫内膜作用。     

Wnt诱导分泌蛋白-1在PHC中的表达及意义

目的 探讨Wnt诱导分泌蛋白-1(Wnt induced secreted protein-1, WISP-1)在原发性肝癌(primary hepatic carcinoma, PHC)中表达水平变化及其意义。方法 收集34例PHC患者及12例肝血管瘤患者手术组织标本(包括肿瘤组织及其相应的癌旁/瘤旁组织),用RT-qPCR方法检测各组WISP-1基因表达水平,用Western印迹法测定WISP-1蛋白表达水平,分析WISP-1表达与PHC患者临床特征的相关性。结果 WISP-1基因在70.6%(24/34)的PHC患者中高表达,肝癌组织中WISP-1的平均表达水平是正常肝组织的(2.65±1.16)倍,差异有统计学意义(P=0.011);Western印迹法测定的蛋白表达水平与基因表达水平一致。WISP-1基因表达与肝癌的病理分级及肿瘤分期有明显相关性,而与年龄、性别、AFP水平、肝癌类型及肿瘤位置无明显相关性。结论 WISP-1在PHC中高表达,并与其病程进展相关,WISP-1可能是治疗PHC的潜在靶点。     

整合素α5的表达下调抑制肝癌Bel-7404细胞的增殖、侵袭及转移

目的 分析整合素α5（ITGA5）与肝癌分级及肝癌患者总体生存率之间的关系,进一步研究整合素ITGA5基因沉默后对人肝癌Bel-7404细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其作用机制探讨。方法（1）利用UALCAN分析ITGA5在肝癌组织及正常组织中的表达,以及在不同分级肝癌组织中的表达及其差异统计;通过GEPIA在线分析ITGA5表达量与肝癌患者生存情况的关系。（2）培养前期已经构建的ITGA5沉默细胞系,采用Western blot方法检测ITGA5蛋白水平的表达,以鉴定ITGA5基因沉默的效果。（3）采用平板克隆形成实验、Transwell等实验方法检测ITGA5基因沉默后Bel-7404细胞的增殖、侵袭迁移能力的变化。（4）通过Oncomine癌标本数据库分析肝癌组织及对照组织中ITGA5与PI3K表达及分析其相关性。结果（1）ITGA5在肝癌中的表达显著高于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）;在不同肝癌分级中,Grade 1的ITGA5 表达量显著低于Grade 2,Grade 2的 ITGA5表达量显著低于Grade 3,差异均有统计学意义（P<0.05）。ITGA5高表达组的总体生存率（OS）显著低于低表达组,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）Western blot鉴定ITGA5基因沉默组的蛋白质表达水平比空白、阴性对照组明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（3）平板克隆形成实验结果显示,基因沉默组比空白、阴性对照组的克隆形成率降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;Transwell结果显示,基因沉默组细胞穿膜数均比空白及阴性对照组显著降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（4）ITGA5和PI3K在肝癌组织中高表达且呈正相关,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 ITGA5与肝癌进展及肝癌患者预后密切相关,其表达下调抑制肝癌细胞的增殖、侵袭迁移;ITGA5可能通过调控PI3K信号通路促进促进肝癌增殖及转移。     

DNA倍体和Survivin蛋白在卵巢肿瘤组织中的表达

目的探讨卵巢肿瘤组织DNA含量、Survivin蛋白的表达及二者的相关性。方法采用流式细胞术检测卵巢肿瘤组织细胞DNA含量,免疫组化法检测卵巢恶性肿瘤组织中Survivin蛋白的表达,以正常卵巢组织作为对照组。结果恶性卵巢肿瘤组、交界性卵巢肿瘤组中DNA异倍体率及DNA含量均明显高于正常对照组(均P<0.05);恶性卵巢肿瘤组织中不同病理分化程度的组织DNA含量间比较差异有统计学意义(t值分别为4.09、5.02、3.33,P<0.05)。恶性卵巢肿瘤组织、交界性卵巢肿瘤组织Survivin蛋白表达与正常对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);DNA异倍体肿瘤Survivin蛋白表达阳性率明显高于DNA二倍体肿瘤,差异有统计学意义(χ2=3.45,P<0.05)。结论 (1)恶性卵巢肿瘤及交界性卵巢肿瘤DNA异倍体率明显高于正常卵巢组织,且DNA含量与病理分级有关;(2)凋亡抑制因子Survivin蛋白在卵巢癌组织中高表达;(3)Survivin蛋白的表达与DNA倍体类型有相关性。     

间隙连接基因Cx32在肝细胞癌与肝炎中的表达意义分析

目的探讨间隙连接基因Cx32在肝细胞癌与肝炎中的表达意义,为肝细胞癌的治疗提供参考。方法应用蛋白杂交和RT-PCR技术分别检测Cx32蛋白和Cx32mRNA在30例肝细胞癌组织、30例肝炎组织和30例正常肝组织中的表达水平。结果肝癌组织Cx32蛋白杂交产物灰度值显著低于正常肝组织(P<0.01),并显著低于肝炎组织(P<0.05),而肝炎组织和正常肝组织中该蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。Cx32mRNA肝细胞癌组织、肝炎组织及正常肝脏中的表达含量类似,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Cx32基因作为抑癌基因,在肝癌组织中Cx32蛋白表达下调,可能是肝癌组织的重要机制之一,而Cx32蛋白缺失可能与Cx32基因在转录后的翻译或翻译后蛋白质的加工修饰过程异常相关。     

重度子痫前期胎盘组织中sVCAM-1、GDF-15的表达及其临床意义

目的 探讨重度子痫前期（SPE）胎盘组织中可溶性血管内皮黏附分子-1（sVCAM-1）、生长分化因子-15（GDF-15）的表达及临床意义。方法 选取2018年5月—2021年5月江苏大学附属医院行剖宫产术终止妊娠的204例妊娠高血压患者，其中单纯妊娠高血压患者87例（妊娠高血压组），子痫前期（PE）患者52例（PE组），SPE患者65例（SPE组），另选取同期该院产检住院行剖宫产分娩的健康妊娠孕妇52例为对照组。通过实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测所有研究对象胎盘组织中sVCAM-1、GDF-15的表达。分析不同人群胎盘组织中sVCAM-1 mRNA、GDF-15 mRNA相对表达量，Pearson法分析sVCAM-1 mRNA与GDF-15 mRNA的相关性；多因素Logistic回归模型分析影响SPE发生的因素。结果 对照组胎盘组织中sVCAM-1 mRNA、GDF-15 mRNA相对表达量低于妊娠高血压组、PE组及SPE组（P <0.05），妊娠高血压组sVCAM-1 mRNA、GDF-15 mRNA相对表达量低于PE组和SPE组（P <0.05），PE组sVCAM-1 mRNA、GDF-15 mRNA相对表达量均低于SPE组（P <0.05）。Pearson相关性分析结果显示，SPE组sVCAM-1 mRNA与GDF-15 mRNA呈正相关（P <0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，sVCAM-1 mRNA［O^R=3.550（95% CI：1.461，8.628）］、GDF-15 mRNA［O^R=4.059（95% CI：1.670，9.865）］是SPE发生的影响因素（P <0.05）。结论 胎盘组织中sVCAM-1、GDF-15的异常表达可能与PE发病有关，sVCAM-1、GDF-15高表达可能使PE患者进展为SPE。     

肿瘤-睾丸抗原SSX1和SSX4 mRNA在肝细胞癌中的表达

目的 检测肿瘤-睾丸抗原（CTA）SSX1和SSX4 mRNA在肝细胞癌（HCC）及外周血中的表达,探讨CTA抗原SSX1和SSX4 在HCC中表达有无特异性.方法 应用逆转录-聚合酶链反应（PT-PCR）方法对35例HCC患者癌组织和相应的癌旁组织SSX1和SSX4 基因表达进行检测,对其中6例PT-PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定：HCC确诊后第2周对30例患者外周血中SSX1基因进行检测. 结果 35例HCC患者中,SSX1和SSX4 的表达率分别为77.1%（27/35）和65.7%（23/35）;癌旁组织,12例肝硬化和15例正常肝组织未检测到SSX1和SSX4 的表达.6例DNA序列测定结果显示PT-PCR产物为SSX1和SSX4 的cDXA.SSX1和SSX4 的表达与患者年龄,性别,肿瘤大小,血清甲胎蛋白（AFP）水平,乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染无相关关系（均P＞0.05）.外周血中未检测到SSX1表达.结论 SSX1和SSX4在HCC中呈高度特异性表达,是制备HCC疫苗理想的靶向分子,多种CTA联合表达为多效价疫苗治疗HCC提供了理论基础.     

脆性位点基因WWOX mRNA在肝细胞癌中的表达及临床病理意义

目的 检测WWOX野生型mRNA及其异常转录剪接体在肝细胞癌中的表达情况,并分析其临床病理意义.方法 采用Real-time RT-PCR和RT-PCR方法检测44例肝细胞癌(HCC)、相应癌旁肝组织和5例正常肝组织中WWOX野生型mRNA及转录剪接体Variant1、Variant4及Variant6的表达,同时分析...     

SOAT1在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：观察甾醇O-酰基转移酶1（SOAT1）在肝细胞癌（HCC）组织及癌旁组织中的表达,探索其与患者预后及临床病理特征之间的相关性。方法：从癌症基因组图谱（TCGA）数据库收集HCC数据集,下载SOAT1 mRNA表达谱及预后资料,比较SOAT1 mRNA在50例正常肝组织与374例HCC组织中的表达,分析表达量与患者预后相关性。收集53例HCC患者石蜡组织标本,采用免疫组织化学方法检测癌和癌旁组织中SOAT1的蛋白表达水平,并分析其与临床病理特征之间的相关性。结果：TCGA数据库数据分析显示,与癌旁正常组织比较,SOAT1在HCC中表达显著升高（P＜0.01）。预后生存分析发现SOAT1高表达患者的5年生存率较低（P＜ 0.05）。免疫组织化学结果显示,与癌旁组织相比,HCC组织中SOAT1蛋白表达量显著升高（P＜0.05）。癌组织中SOAT1蛋白表达量与肿瘤临床分期及微血管癌栓形成相关（P＜0.05）。结论：SOAT1在HCC组织中表达增高,并与HCC癌患者的临床病理特征密切相关,其表达与肿瘤恶性程度高度相关。     

肝癌患者高表达神经细胞黏附分子 L1预后差

目的：神经细胞黏附分子 L1(L1 CAM)在肝癌中的表达及其与临床预后的关系。方法对110例肝癌样本用Western blot 及 qRT-PCR 方法检测 L1CAM 蛋白和 mRNA 的表达,分析了 L1CAM 表达与肝癌患者总体生存率的关系。结果肝癌组织 L1CAM 蛋白、mRNA 表达水平显著高于对应非肿瘤组织(P <0.01);在中-低分化肝癌患者 L1CAM 表达量高于高分化肝癌患者(P <0.01);L1CAM mRNA 的表达与肿瘤的分化程度、TNM 分期密切相关(P <0.05);采用 Kaplan-Meier 法生存分析,高表达 L1CAM 患者预后差(P <0.01)。结论L1CAM 与肝癌的发生、发展具有相关性,或许可作为评估肝癌患者预后的指标之一。     

Wnt-5a在原发性肝细胞癌发生中的表达及临床意义

目的 检测Wnt-5a基因和基因产物在原发性肝细胞癌中的表达,探讨Wnt-5a基因在肝癌发生过程中的作用和临床意义.方法 采用实时定量PCR技术,检测Wnt-5a mRNA在26例新鲜肝细胞癌和癌旁组织中的含量;用免疫组化法观察Wnt-5a蛋白在85例肝细胞癌和癌旁组织、15例肝硬化组织中的表达.结果 Wnt-5a mRNA在肝癌及癌旁组织中的相对含量分别为0.102 127±0.158 620和0.020 106±0.022 075,两者间差异有统计学意义（P＜0.05）;Wnt-5a蛋白在肝细胞癌、癌旁组织和肝硬化中的阳性率分别为21.2％ （18/85）、81.26％ （69/85）和86.7％ （13/15）,Wnt-5a在肝癌组织中的阳性表达显著低于肝硬化和癌旁组织,差异有统计学意义（P ＜0.01）;Wnt-5a蛋白在肝癌中的表达与肿瘤的TNM分期和血清甲胎蛋白（AFP）含量有关（P＜0.05）.结论 Wnt-5a基因在HCC基因转录中呈上调表达,而在蛋白水平显示为缺失和下调表达,提示肿瘤细胞是在蛋白翻译水平而不是转录水平干扰了Wnt-5a基因功能.     

肝细胞癌组织中ZEB-1的表达及意义

目的 探讨ZEB-1在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学SP法和蛋白质印迹分析法检测ZEB-1在62例HCC组织、48例相应癌旁肝硬化组织和10例正常肝组织中的表达,并分析其与HCC临床病理特征的关系.结果 免疫组化结果显示ZEB-1在HCC组织及癌旁肝硬化组织中呈阳性表达,阳性率分别为93.5％(58/62)和83.3(40/48).蛋白质印迹分析显示ZEB-1蛋白在HCC组织中的表达高于相应癌旁肝硬化组织和正常肝组织(P＜0.05).ZEB-1在HCC组织中的表达与临床分期、肿瘤分化程度、有无发生转移、有无门脉癌栓及有无术后复发等因素相关(P＜0.05),与肿瘤直径、肿瘤数目、血清AFP水平等因素无关(P＞0.05).结论 ZEB-1的高表达与肝癌的发生、发展密切相关,并且有可能参与HCC细胞的上皮间质转化而促进肝癌的侵袭和转移.     

长链非编码RNA UCA1在肝癌肝内转移患者中的表达及临床意义

目的 探讨长链非编码RNA尿路上皮癌相关1(UCA1)在肝癌肝内转移患者肿瘤组织和血浆中的表达及临床意义.方法 收集2015年1月至2016年1月第二军医大学长海医院确诊为肝癌肝内转移并手术切除的20例患者的肿瘤组织和术前、术后血浆样本,20例肝癌患者的肿瘤组织和血浆样本,以及20例健康受试者的血浆样本.采用qPCR法测定肿瘤组织及血浆样本中UCA1 mRNA的表达,并分析UCA1 mRNA表达与Child-Pugh分级、原发灶肿瘤大小、年龄、性别、饮酒史等临床病理特征的关系.结果 肝癌肝内转移患者肿瘤组织与血浆中UCA1 mRNA表达均高于肝癌患者(P＜0.01),术后血浆中UCA1 rnRNA表达低于术前(P＜0.05).肝癌肝内转移患者肿瘤组织UCA1mRNA的表达与原发灶肿瘤大小(P=0.025)和Child-Pugh分级(P=0.006)有关.结论 血浆UCA1可能是肝癌转移诊断和病情监测的标志物,UCA1的表达水平与肝癌发展密切相关.     

肝癌患者syndecan-1基因蛋白的表达和意义

目的 :探讨syndecan 1蛋白与肝细胞肝癌的关系。方法 :应用免疫组化技术 (ABC法 )检测syndecan 1在肝细胞肝癌中的表达。结果 :发现在 31例肝癌组织中的syndecan 1阴性表达 18例 ,分化不良的肝癌syndecan 1阴性表达率高于分化较好者 (80 .0 %比 37.5 % ,P <0 .0 5 ) ;直径 >5cm的肝癌syndecan 1阴性表达率高于直径≤ 5cm肝癌 (85 9%比 35 3% ,P <0 .0 1) ;大体标本或镜下癌栓syndecan 1阴性表达率高于无癌栓的肝癌 (91 7%比 6 8% ,P <0 .0 1)。syndecan 1的阴性表达与患者的性别、年龄、血清甲胎球蛋白水平、乙型肝炎病毒感染、肝硬化有无、包膜的有无等因素均无明显的相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :syndecan 1的低表达与肝癌增大、分化程度低、侵袭转移发生等恶性表型相关 ,可能对这些表型起负调节作用 ,可视其为抑癌基因。