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相似文献
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1.
目的通过研究锌指Krüppel样转录因子2(Klf2)及红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)/BTB-CNC异体同源体1(Bach1)在经香烟烟雾提取物(CSE)刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达,了解其感受氧化应激对靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)的调控作用。方法采用酶消化法提取大鼠原代气管-支气管上皮细胞,并用10%CSE干预细胞6 h,收集细胞,双酶法检测γ-GCS活性;通过免疫细胞化学法观察Nrf2/Bach1的核转位;采用Western blot和RT-PCR技术研究细胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表达。结果大鼠气管-支气管上皮细胞经CSE诱导后其γ-GCS活性明显增高。免疫细胞化学结果显示Nrf2经CSE刺激后出现由核外向核内的转位,Bach1经CSE刺激后出现由核内向核外的转位。Western blot结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白水平较对照组显著升高(P〈0.05);RT-PCR结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS mRNA水平较对照组显著升高(P〈0.05)。直线相关分析表明γ-GCS蛋白表达与Klf2、Nrf2、Bach1呈正相关(P〈0.05)。结论 CSE可能通过转录因子Klf2、Nrf2、Bach1调节γ-GCS的表达。  相似文献   

2.
目的 探讨丁苯酞的肾保护机制及核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化还原反应元件(Nrf2-ARE)通路在肾间质纤维化中的作用.方法 清洁级CD-1小鼠分为4组:假手术组、模型组、治疗组、阳性对照组.假手术组、模型组均给予等量生理盐水灌胃.治疗组、阳性对照组分别给予丁苯酞、贝那普利灌胃.将各组小鼠分别于术后第3、7、14天处死,取梗阻侧肾组织,通过免疫组织化学染色、RT-PCR等实验手段检测肾组织Ⅰ型胶原蛋白、Nrf2及γ-GCS蛋白及mRNA的表达水平.并将Nrf2与γ-GCS及Ⅰ型胶原蛋白与γ-GCS进行相关性分析.结果 免疫组织化学及RT-PCR结果均显示模型组Ⅰ型胶原蛋白mRNA及蛋白较假手术组有明显升高,并且随着梗阻时间的延长表达逐渐增多.治疗组及阳性对照组小鼠在各时间点较模型组表达显著减少.动态观察Nrf2 mRNA的表达,结果显示:与同期假手术组相比,术后3、7、14d模型组小鼠肾组织中Nrf2、r-GCS、Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达均增加,给予丁苯酞干预后,Nrf2 mRNA在7、14 d时治疗组与模型组比较表达均显著增加(P<0.05),治疗组Nrf2在各时间点表达均强于阳性对照组(P<0.05).RT-PCR学检测γ-GCS mRNA变化趋势同于Nrf2,其肾保护效应随时间延长呈增强趋势.相关性分析显示:Nrf2与γ-GCS呈正相关(r=0.950,P<0.05),γ-GCS与Ⅰ型胶原蛋白呈负相关(r=-0.629,P<0.05).结论 丁苯酞有抗肾间质纤维化作用,机制可能与激活Nrf2-ARE信号通路,提高肾间质中Nrf2、抗氧化酶r-GCS活性水平有关.  相似文献   

3.
目的探讨参芪补肺方对大鼠肺组织红系衍生核因子相关因子-2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(gamma-glutamylcysteines-ynthetase,γ-GCS)的mRNA及蛋白表达水平的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、富露施组,每组各10只。除空白组外,其余3组均采用香烟烟雾熏制和经鼻给予脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)制作慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠模型,且给予相应干预,连续灌胃30 d。于第38天对大鼠进行麻醉并提取肺组织,通过RT-PCR法检测Nrf2和γ-GCS的mRNA表达水平,通过免疫组化法、Western blot法检测Nrf2和γ-GCS蛋白表达水平。结果中药组、富露施组大鼠Nrf2、γ-GCS的mRNA和蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);中药组大鼠Nrf2、γ-GCS的mRNA和蛋白表达与富露施组组间比较差异无统计学意义(P0.05),疗效相当。结论参芪补肺方能够通过降低Nrf2、γ-GCS的mRNA及蛋白的表达,减轻COPD大鼠的氧化应激反应。  相似文献   

4.
目的研究慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠模型中白细胞介素10(IL-lO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)在血清和肺组织中的表达,探讨IL-10在慢阻肺气道炎症中的作用及调控机制。方法成年雄性SD大鼠45只,分为模型组30只,对照组15只,采用反复熏香烟+气管内注入脂多糖法建立慢阻肺大鼠模型。ELISA法检测大鼠血清、肺组织中IL-10、TNF-α和IFN-1的表达。结果模型组血清和肺组织内TNF-α较对照组显著升高,IFN-γ、IL-10[血清(44.68±8.67)ng/L比(75.96±10.59)ng/L,肺组织(64.55±9.03)ng/L比(94.06±8.71)ng/L,P均〈0.01]表达均下降。IL-10和TNF-α水平呈负相关(血清r=-0.67,肺组织r=-0.80,P〈0.01)。IL-10和IFN-1水平呈正相关(血清r=0.64,肺组织r=0.72,P〈0.01)。结论IL-10的下调在慢阻肺大鼠气道炎症中起重要的调控作用。  相似文献   

5.
目的探讨汉防己甲素(Tet)对卵蛋白(OVA)诱导大鼠哮喘(asthma)模型的治疗效果及抗氧化机制。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组和Tet治疗组,每组10只。后两组1次/2d雾化吸入1mg/mlOVA溶液30min,共8周,构建哮喘模型;Tet治疗组予100mg/kgTet灌胃处理(另两组予等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃),1次/d,共8周;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肺组织形态改变;ELISA法检测肺组织半胱氨酰白三烯1(CysLT1)和半胱氨酸白三烯受体1(CysLTR1)含量;分光光度法检测肺组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)及谷胱甘肽(GSH)含量;qRT-PCR法检测肺组织核因子-E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)mRNA表达水平;免疫荧光染色法检测肺组织平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)和Nrf2蛋白表达情况。结果与对照组相比,模型组大鼠肺组织气道壁增厚,并且气管周围可见炎性细胞聚集,γ-GCS活性、GSSG、CysLT1和CysLTR1含量均明显增加,Nrf2、HO-1、TGF-β1、MMP-9mRNA的表达水平均明显增加,α-SMA和Nrf2蛋白表达荧光强度明显增强,GSH含量、GSH/GSSG比值及TIMP-1mRNA表达水平均明显降低(均P<0.01)。而与模型组比较,Tet治疗组的肺组织气道壁厚度减轻,炎性细胞浸润减少,γ-GCS活性、GSSG、CysLT1和CysLTR1含量等均明显降低,TGF-β1、MMP-9mRNA表达水平明显降低,α-SMA荧光强度有所减弱,GSH含量、GSH/GSSG比值与Nrf2、HO-1、TIMP-1mRNA表达水平均明显增加(均P<0.01),同时Nrf2荧光强度进一步增强。结论Tet对哮喘大鼠肺组织有保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1途径,抑制氧化应激有关。  相似文献   

6.
目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF—α)及血管内皮生长因子(VEGF)在慢性阻塞性肺病(COPD)发病中的作用。方法香烟熏吸法复制COPD大鼠模型。将20只清洁级Wister大鼠随机分为对照组和COPD模型组,每组各10只。肺组织切片行苏木精-伊红染色,测定两组大鼠血清、肺组织匀浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF—α和VEGF的含量,并用RT-PCR法测定肺组织中VEGF mRNA的表达。结果模型组大鼠血清、肺组织匀浆及BALF中TNF-α含量较对照组明显升高(P〈0.01),而VEGF的含量较对照组有明显降低(P〈0.01,P〈0.05)。模型组大鼠肺组织内VEGF的表达较对照组有明显下降(P〈0.05)。结论TNF-α和VEGF参与了COPD的发病过程且在COPD细胞凋亡过程中起重要作用。  相似文献   

7.
目的观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其下游分子在大鼠肝纤维化组织中的表达情况,分析HIF-1α及其下游分子与肝纤维化程度的关系。方法 用CCl4诱发大鼠肝纤维化模型,建模结束后(实验8周末)根据纤维化程度将模型组分为S2、S3、S4亚组,然后分别应用免疫组织化学和逆转录酶PCR方法检测HIF-1α、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白和HIF-1α、MMP-2 mRNA在大鼠肝纤维化组织中的表达变化。结果 与对照组(S0组)比较。模型组(S3、S3、S4亚组)HIF-1α、MMP-2、VEGF蛋白和HIF-1α、MMP-2 mRNA表达均明显增强(P〈0.01);HIF-1α、MMP-2、VEGF的表达与肝纤维化程度呈正相关(r值分别为0.923、0.848、0.878,均P〈0.001);MMP-2、VEGF的表达与HIF-1α也呈正相关(r值分别为0.862、0.993、0.892,均P〈0.001)。结论 HIF-1α可能通过调节MMP-2及VEGF的表达促进了肝纤维化的发展。  相似文献   

8.
Xie Y  Zhu J  Zhou XJ  Chen J  Lu NH  Wang CW 《中华医学杂志》2006,86(38):2683-2689
目的研究幽门螺杆菌(Hp)感染及其相关性疾病中过氧化酶体增殖因子活化受体1(PPAR-γ)、环氧化酶2(COX-2)的表达及其相互关系以探讨Hp的致病机理。方法采用二步法免疫组化方法检测了209例内镜活检的胃黏膜内COX-2、PPAR-1的表达。209例包括:浅表性胃炎(CSG)75例(其中Hp阳性50例、Hp阴性25例),萎缩性胃炎(CAG)24例(其中Hp阳性13例、Hp阴性11例),肠化与异型增生(IM+DYS)90例(其中Hp阳性45例、Hp阴性45例)以及20例Hp阴性组织学大致正常的胃黏膜。同时还检测了36例Hp持续感染10年以上的CSG患者10年前后胃黏膜内COX-2、PPAR-1的表达。结果(1)从对照组→CSG→CAG→IM+DYS,腺细胞内的COX-2表达逐渐较强,阳性率分别为20%、42.7%、25.8%和61.1%(P〈0.01或P〈0.05);炎症细胞中COX-2阳性率分别为0、32%、29.2%和36.7%,各疾病组均高于对照组(均P〈0.05)。(2)CSG组及IM+DYS组Hp阳性者腺细胞和炎细胞中COX-2的表达均显著高于Hp阴性者(P〈0.01或P〈0.05)。(3)从对照组→CSD→CAG→IM+DYS,腺细胞内PPAR-1阳性率分别为0、18.7%、29.2%和45.6%(P〈0.01或P〈0.05);炎细胞内PPAR-γ阳性率分别为0、22.5%、20.8%和22.2%(各疾病组问比较,P〉0.05)。(4)炎症细胞中PPAR-γ表达在CSG组、IM+DYS组Hp阳性者均显著高于Hp阴性者(P〈0.01);腺细胞中PPAR-γ的表达在CSG组、IM+DYS组Hp阳性者均显著高于Hp阴性者(P〈0.05)。(5)Hp持续感染的CSG患者,炎症细胞内COX-2的表达10年后显著低于10年前(P〈0.05),而炎症细胞内PPAR-γ的表达10年前后差异无统计学意义(P〉0.05)。(6)Hp持续感染的CSG患者,10年后腺细胞内COX-2、PPAR-γ的表达均显著高于10年前(P〈0.01)。(7)Hp阴性的各疾病组,炎细胞内COX-2和PPAR-γ的表达相互间均无相关性(r=0.006和0.149,均P〉0.05);在腺细胞内它们的表达在IM+DYS组呈显著正相关(r=0.336,P〈0.05),其余各疾病组COX-2和PPAR-γ的表达均无相关性(r=0.035和0.126,均P〉0.05)。(8)Hp阳性的各疾病组,炎细胞和腺细胞内COX-2、PPAR-γ的表达相互间呈显著正相关性(r=0.348和0.645,P〈0.05或P〈0.01)。结论(1)Hp感染可诱导胃黏膜炎细胞和腺细胞内COX-2和PPAR-γ的过度表达,Hp可能通过上调COX-2和PPAR-γ的表达参与胃癌发生的早期进程。(2)Hp感染诱导的COX-2的表达与Hp感染所致的急性炎症有关;随着感染时间延长,COX-2、PPAR-γ的表达变化可能比病理形态学检查更早的反映Hp感染引起的CSG→CAD→IM→DYS→胃癌这一病变过程。  相似文献   

9.
  目的  探讨过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)激活剂对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的改善作用及相关机制。   方法  将36只BALB/c小鼠采用随机数字表法分成对照组、模型组和PPARγ激活组,每组12只。除对照组外,其余2组小鼠气管内注射博莱霉素5 mg/kg诱导肺纤维化模型。24 h后,PPARγ激活组小鼠口服灌胃100 mg/kg剂量的罗格列酮溶液。计算肺系数;ELISA法测定肺组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、羟脯氨酸(HYP)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量;HE和Masson染色观察小鼠肺组织病理变化;Western blotting法检测肺组织PPARγ、PPARγ共激活因子α(PGC-1α)、核因子类胡萝卜素2相关因子(Nrf2)蛋白含量。   结果  模型组小鼠肺系数、肺组织Ashcroft评分及HYP、TGF-β1、MDA水平均显著高于对照组和PPARγ激活组(均P < 0.05)。模型组肺组织中SOD、GPx水平显著低于对照组和PPARγ激活组(均P < 0.05)。与模型组相比,PPARγ激活组小鼠肺组织PPARγ、PGC-1α、Nrf2蛋白表达量显著升高(均P < 0.05)。   结论  PPARγ激活剂可抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化过程,可能与减轻炎症反应和氧化应激有关。   相似文献   

10.
人β-防御素-2在慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰中的表达   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的测定慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者诱导痰中人β-防御素-2(hBD-2)的表达水平,来探讨hBD-2在COPD中的可能作用。方法收集COPD急性加重期、稳定期患者及正常人的诱导痰各10例,处理后分别进行痰细胞的计数和分类,Western blotting analysis法检测诱导痰中hBD-2的表达水平,并以图文分析系统进行灰度的半定量对比,同时用ELISA法测定诱导痰中白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平,并与hBD-2的表达进行相关分析。结果与正常组比较,COPD急性加重期组和稳定期组的中性粒细胞比例明显增多(P〈0.01),而COPD急性加重期组和稳定期组的hBD-2蛋白表达灰度值明显降低,差异有显著性(P〈0.001);与稳定期组比较,COPD急性加重期组hBD-2蛋白表达灰度值也明显降低,差异有显著性(P〈0.01)。COPD稳定期组的IL-1β表达与正常组比较升高,差异有显著性(P〈0.001);与COPD稳定期组比较。COPD急性加重期组IL-1β表达明显升高,差异有显著性(P〈0.01)。hBD-2的蛋白印迹的灰度值与IL-1β的浓度呈显著负相关(r=-0.689,P〈0.01)。结论COPD患者诱导痰中hBD-2表达增高,并与IL-1β有相关性,提示hBD-2可能参与了COPD的炎性过程。  相似文献   

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