重组人内皮抑素对小鼠肺腺癌LA795的抑制作用

目的观察重组人内皮抑素(rhES)对小鼠肺腺癌LA795生长和转移的抑制作用。方法对ThES高效表达克隆pCX的表达产物进行纯化,得到ThES。将LA795肺腺癌细胞接种于T739小鼠背部皮下,随机分成2组,接种后第10天起分别给予rhES20mg/kg·b.w.或等体积PBS缓冲液皮下注射,1次/d,共14d。观察2组肿瘤生长情况、肺湿重、肺表面转移结节数、动物生存时间,分别进行t检验。结果治疗前后rhES组肿瘤体积分别为(650±201)mm3、(1642±211)mm3;而PBS组肿瘤体积由治疗前的(623±248)mm3增至(9194±952)mm3。rhES组肺湿重、肺表面转移结节数明显少于PBS组,动物生存时间明显延长(P<0.01)。结论rhES可明显抑制LA795所致的小鼠实验性肿瘤的生长与转移,延长动物的生存时间。     

重组人内皮抑素对小鼠肺腺癌肿瘤血管生成及肺转移的抑制作用

目的：观察酵母表达重组人内皮抑素（recombinant human endostatin,rhES)对小鼠肺腺癌LA795原位肿瘤微血管生成及肺转移的抑制作用。方法：对含有人内皮抑素基因的重组酵母菌株进行诱导表达及纯化rhES;将接种LA795小鼠肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成两组，每组各10只，于接种后第6日起始予rhES和磷酸缓冲盐液（PBS）皮下注射，每日1次，连续14d；观察两组小鼠原位肿瘤微血管生成情况及肺部肿瘤转移情况。结果：经甲醇诱导酵母转化子表达rhES，并用肝素亲和层析的方法获得纯化的rhES；治疗结束后用免疫组化方法观察两组小鼠原位肿瘤微血管密度发现rhES治疗组肿瘤微血管密度明显小于PBS对照组（P＜0．01）；观察两组小鼠肺部发现rhES治疗组小鼠肺部未见有明显肿瘤转移病灶，而PBS对照组小鼠肺部可见大量散在肿瘤转移病灶；两组小鼠肺湿重比较具有显著性差异（P＜0．01）。结论：rhES具有良好的生物学活性，显著抑制了小鼠肺腺癌LA795肿瘤血管生成，并能有效抑制肿瘤的肺部转移。     

重组人白介素-2抑制小鼠LA795肺腺癌高转移株肺转移的研究

目的探讨不同剂量的重组人白介素-2抑制LA795肺腺癌高转移株皮下肿瘤生长及肺转移的作用.方法皮下接种LA795肺腺癌高转移株于T739同系小鼠,腹腔注射不同剂量的重组人白介素-2,观察抑制肿瘤生长及肺转移的作用.结果rhIL-2 1.5×105U/d能明显地抑制肿瘤生长.肿瘤体积,瘤体湿重以及肺转移结节数较对照组小和少,抑制率分别达66.03%、76.03%、97.54%(P＜0.01).小剂量rhIL-2 2.6×103U/d,抑制肿瘤生长的抑制率仅为5.13%(P＞0.05),而对肺转移有68.75%的抑制率(P＜0.01).结论大剂量的rhIL-2仅能有效地抑制LA795肺腺癌的肺转移,且能较好地抑制肿瘤生长.小剂量的rhIL-2仅对LA795肺腺癌转移有一定的抑制作用.因此rhIL-2治疗肿瘤应使用大剂量.     

人内皮抑素在毕赤酵母中的表达、纯化及其对小鼠肺腺癌LA795细胞生长的抑制

目的通过基因重组技术获得能高效分泌表达人内皮抑素的毕赤酵母菌株;观察纯化的重组人内皮抑素(rhES)对小鼠肺腺癌LA795生长的抑制作用。方法 利用氯化锂转化法将人内皮抑素基因整合入毕赤酵母基因组,获得可分泌表达人内皮抑素(endostatin)的菌株。用肝素亲和层析的方法纯化目的蛋白。观察人内皮抑素对碱性纤维生长因子(bFGF)刺激的人血管内皮细胞系ECV－304细胞增殖的作用。将接种LA795肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成2组,分别给予rhES和磷酸缓冲盐液(PBS)皮下注射,每日1次,连续14d。观察2组小鼠肿瘤生长情况。结果经筛选获得表达量较高的转化菌株,其表达的rhES能明显抑制bFGF刺激的人血符内皮细胞系ECV－304细胞的增殖,与对照组比较具有显苫差异(P＜0．001),动物实验表明其有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长(P＜0．001)。结论用毕亦酵母作为宿主分泌表达的rhES具有良好的生物学活性,能有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长。     

人内皮抑素在毕赤酵母中的表达、纯化及其对小鼠肺腺癌LA795细胞生长的抑制

目的：通过基因重组技术获得能高效分泌表达人内皮抑素的为酵母菌株；观察纯化的重组人内皮抑素（rhES)对小鼠肺腺癌LA795生长的抑制作用，方法：利用氯化锂转化法将人内皮抑素基因整合入毕赤酵母基因组，获得可分泌表达人内皮抑素（endostatin)的菌株，用肝素亲和层析的方法纯化目的蛋白。观察人内皮抑素对碱性纤维生长因子（bFGF)刺激的人血管内皮细胞系ECV－304细胞增殖的作用。将接种LA795肺腺癌细胞的T739小鼠随机分成2组，分别给予rhES和磷酸缓冲盐液（PBS）皮下注射，每日1次，连续14d，观察2组小鼠肿瘤生长情况，结果：经筛选获得表达量较高的转化菌株，其表达的rhES能明显抑制bFGF刺激的人血管内皮细胞系ECV－304细胞的增殖，与对照组比较具有显著差异（P＜0．001），动物实验表明其有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长（P＜0．001），结论：用毕赤酵母作为宿主分泌表达的rhES具有良好的生长学活性，能有效抑制小鼠肺腺癌LA795的生长。     

重组人内皮抑素在酵母中的表达及对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长的抑制

目的在一种高效外源基因表达系统———毕赤酵母系统表达重组人内皮抑素,评价纯化的内皮抑素对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长抑制的作用,为临床研究做进一步的探讨。方法和结果在酵母系统成功表达了重组人内皮抑素(re-combinant human endostatin),经肝素亲和层析得到了较高纯度的内皮抑素,经过筛选的人内皮抑素能够有效抑制ECV-304细胞的增殖,并与对照组有非常显著性差异(P<0.01);动物实验表明其能够有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1细胞的生长,统计学分析有非常显著性差异(P<0.01)。结论酵母系统内能够大量表达具有生物学活性的重组人内皮抑素,能在人体外有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1的生长,对其应用于临床具有重要意义。     

重组人内皮抑素在酵母中的表达及对人肺腺癌Astc－a－1细胞生长的抑制

OBJECTIVE: To achieve expression of recombinant human endostatin (rhES) in a highly efficient foreign gene expression system, the yeast strain Pichia pastoris, and to evaluate the inhibitory effect of rhES on the growth of nude mouse pulmonary adenocarcinoma cells. METHODS AND RESULTS: The rhES gene was efficiently expressed in the yeast strain, and heparin affinity chromatography yielded highly purified endostatin identified by Western blotting, which proved to significantly inhibit the growth of the ECV-304 cells in vitro and also the growth of the lung adenocarcinoma Astc-a-1 in nude mice. CONCLUSIONS: The rhES gene can be expressed in Pichia pastoris, and has the ability to restrain the growth of ECV-304 cells and lung adenocarcinoma Astc-a-1 in nude mice, showing important potentials for future clinical applications.     

Augiostatin对小鼠肺腺癌LA795的生长抑制作用

为探讨ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ（血管抑制因子）对小鼠肺腺癌ＬＡ７９５的治疗作用,将４×１０５ＬＡ７９５细胞接种于Ｔ７３９小鼠皮下,细胞接种后第１４ｄ,治疗组给予ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ腹腔注射,对照组注射等量ＰＢＳ液,共１４ｄ,观察肿瘤大小及动物生存期。结果：治疗组肿瘤直径由２．３５±０．１６ｃｍ缩小至０．９７±０．３４ｃｍ,而对照组瘤体直径由２．２６±０．１２ｃｍ增至４．０２±０．３６ｃｍ,两者之间差异显著（Ｐ＜０．０１）。治疗组平均生存期７６．６ｄ,对照组为３８．４ｄ,统计学分析差异显著（Ｐ＜０．０１）。结论：ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ可以抑制ＬＡ７９５细胞所致小鼠实验性肿瘤的生长,显著延长动物生存期,可能是治疗恶性肿瘤的一种全新的有效物质。     

重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌抑制作用的实验研究

[目的]研究重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌的抑制作用。[方法]采用MTT法检测不同剂量不同时间重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌细胞增殖的影响;建立Lewis肺癌自发转移模型,将40只荷瘤小鼠随机分为重组人血管内皮抑素小、中、大剂量组(5、15、30 mg.kg-1.d-1)及对照组各10只,连续给药14 d,停药1周后处死小鼠,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤抑瘤率;利用光镜和透射电镜技术,观察重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌细胞以及对荷瘤小鼠血管内皮细胞和肿瘤细胞的形态学改变。[结果]重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用与浓度和作用时间呈正相关,400 ng处理72 h后的抑制率为(68.4±1.5)%,与处理24 h后的抑制率(21.9±2.1)%比较,差异有显著性意义(P<0.05)。各给药组肿瘤生长均较对照组缓慢,小、中、大剂量组的抑瘤率分别为28.2%、49.7%、52.8%。各给药组小鼠瘤组织内均有大面积坏死,血管内皮细胞和肿瘤细胞均发生早期凋亡的改变,且具有剂量依赖性。[结论]重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌的抑制作用可能表现为对肿瘤细胞和毛细血管内皮细胞的双重抑制作用。     

重组人血管内皮抑素注射液恩度抑制裸鼠非小细胞肺癌淋巴转移

目的 探讨重组人血管内皮抑素注射液恩度（endostar）对非小细胞肺癌淋巴转移的抑制作用。 方法 于裸鼠右侧腋窝经皮下注射A549肺癌细胞（1×10⁷/mL,0.2 mL）建立裸鼠荷瘤模型,选择建模成功的56只裸鼠随机分为8组（n=7）：对照组（生理盐水0.2 mL,1次/d）,顺铂组（顺铂20 μg,隔日1次）,3种浓度恩度组（恩度2、4、6 mg/kg,1次/d）,3种浓度恩度+顺铂（恩度2、4、6 mg/kg,1次/d;顺铂20 μg,隔日1次）。所有实验用药均经尾静脉注射,连续给药14 d。给药结束后观察7 d,测量并记录肿瘤直径,统计各组肿瘤大小的变化。处死裸鼠,对肿瘤组织及可疑转移淋巴结采用H-E染色和免疫组织化学染色,并计算各组淋巴转移阳性率、转移淋巴结数目及微淋巴管密度。 结果 各用药组给药后与给药前肿瘤直径差值均小于对照组（P<0.05）,且3种浓度恩度+顺铂组的肿瘤直径差值均小于3种浓度恩度组和顺铂组（P<0.05）。3种浓度恩度组和3种浓度恩度+顺铂组的淋巴转移阳性率、转移淋巴结数目及微淋巴管密度均低于对照组和顺铂组（P<0.05）;6 mg/kg恩度组和6 mg/kg恩度+顺铂组淋巴转移阳性率、转移淋巴结数目及微淋巴管密度均低于2、4 mg/kg 恩度组和2、4 mg/kg恩度+顺铂组（P<0.05）。 结论 恩度和顺铂均能抑制非小细胞肺癌肿瘤生长,恩度与顺铂联合使用对肿瘤生长的抑制作用强于两者单独使用;恩度能够抑制肿瘤微淋巴管生成及肿瘤淋巴转移,且作用强度与浓度有关,顺铂未发现类似作用。     

重组人血管内皮抑制素对人脑胶质瘤细胞生长的抑制作用

目的探讨重组人血管内皮抑制素对人脑胶质瘤细胞生长的抑制作用。方法体外培养人脑胶质瘤细胞,设立对照组与重组人血管内皮抑制素实验组（终浓度分别为50、100、150 ng/ml）,采用MTT法来判定该抑制因子对人脑胶质瘤细胞有无抑制作用。结果对照组OD值为0.302±0.012,实验组的OD值分别为0.284±0.006,0.218±0.014,0.175±0.012,P值均〈0.05。结论重组人血管内皮抑制素能够抑制人脑胶质瘤细胞的增殖且呈剂量依赖性。     

重组人血管内皮抑制素注射液治疗2例ALK融合肺腺癌并心包转移体会并文献复习

目的 提高重组人血管内皮抑制素注射液治疗间变性淋巴瘤激酶(ALK)融合肺腺癌并心包转移的认识。方法 分析遵义医科大学附属医院2017—2018年收治的2例肺腺癌并心包转移的患者,以“肺腺癌、重组人血管内皮抑制素注射液、心包转移”为检索词检索中国生物医学文献服务系统(SINOMED)、万方医学数据库及维普信息资源系统,以“Adenocarcinoma、Pericardial metastasis、Recombinant human endostatin injection”为检索词检索Pubmed检索系统,并结合检索文献进行分析。结果 2例患者均为中青年,第1例为化疗后2+年病情进展,使用抗血管生成药物恩度心包腔内注射后心包积液吸收,效果明显;第2例为诊断肺腺癌后服用克唑替尼治疗,出现心包积液,考虑疾病进展,予心包腔内注射药物恩度,心包积液有所吸收,但病情反复,效果差,现已去世。检索国内外相关文献,国内文献40余篇,外文文献70余篇。总结国内外文献,对腔内注射药物治疗相关报道较多,双药联合治疗较单药治疗疗效更好,但双药联合治疗副作用较单药多,因此临床上对于腔内注射药物的选择根据患者病情制订个体化的方案。结论 肺腺癌并心包积液治疗主要以治疗原发病为主,恩度腔内治疗效果不一,仍需进一步研究探讨其可能机制。     

重组endostatin抑制小鼠膀胱癌生长及血管形成研究

目的　观察内源性血管形成抑制剂 (endostatin)对膀胱癌生长的抑制作用。方法　用大肠杆菌表达重组小鼠endostatin ,Ni NTA亲和层析纯化。予endostatin 2 0mg·kg-1 ·d-1 皮下注射T73 9膀胱癌荷瘤小鼠 ,观察肿瘤生长情况及对肿瘤血管形成的影响。结果　重组endostatin治疗后小鼠肿瘤生长缓慢 ,抑瘤率达 81 4%;肿瘤微血管密度 (MVD)明显低于对照组 (P <0 0 1)。结论　重组endostatm对膀胱癌的血管形成及生长有明显的抑制作用。     

血管生成抑制剂在中晚期非小细胞肺癌治疗中的临床疗效

目的 探讨重组人血管内皮抑制素在中晚期非小细胞肺癌治疗中的临床疗效. 方法 将我院收治的87例中晚期非小细胞肺癌患者,按照收治时间段分为观察组(n=51)和对照组(n=36).对照组给予PC化疗方案,观察组给予重组人血管内皮抑制素+ PC化疗,观察两组患者的临床疗效及预后. 结果 观察组临床控制率为94.1％(48/51),临床有效率为76.5％(39/51),严重不良反应发生率为17.6％ (9/51),肺癌患者生命质量中文版量表(QLQ-LC43)评分为(79.67±1.94)分,1年生存率为96.1％ (49/51);对照组临床控制率为72.2％(26/36),有效率为50.0％ (18/36),严重不良反应发生率为30.6％(11/36),QLQ-LC43生活质量评分为(67.09±1.54)分,1年生存率为83.3％(30/36).两组间临床疗效和预后差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 重组人血管内皮抑制素能显著提高化疗效果,对于提高患者生存率及生活质量具有积极意义.