空肠弯曲菌对离体肠上皮细胞的粘附试验

本文报导64株人源空肠弯曲菌与40株鸡源空肠弯曲菌对人胚肠上皮细胞和小鸡肠上皮细胞粘附试验结果,证明两种细胞都可做粘附试验的研究,无显著性差异(P>0.05),但人株与鸡株对人胚肠上皮细胞的粘附率,则人株显著高于鸡株,有非常显著性差异(P<0.01),提示空肠弯曲菌存在致病菌和非致病菌的差别,与上海医大卫生微生物教研室报告结果相似,这对研究空肠弯曲菌的流行病学,疾病防治有重要价值。本试验方法具有简便,快速,可靠的优点,目前国内未见报告。     

空肠弯曲菌和幽门弯曲菌感染

一、空肠弯曲菌空肠弯曲菌属弯曲菌属,近年来证实它可对人类致病,故受到重视,弯曲菌属从1984年分为三个种。即胎儿弯曲菌、唾液弯曲菌和粪弯曲菌。对人致病的主要为胎儿弯曲菌,胎儿弯曲菌又包括三个亚种,即胎儿亚种、肠道亚种、空肠亚种,空肠亚种是人类急性腹泻的主要病原菌之一,简称空肠弯曲菌。空肠弯曲菌和结肠弯曲菌均能引起肠炎,而生物学特性相似,故合称为空肠-结肠弯曲菌性肠     

空肠弯曲菌在免疫小鼠体内粘附和定居的初步研究

本文用空弯菌CJ-S_(131)抗血清和甲醛处理的菌苗分别免疫小鼠,活菌攻击后,以体内CFU法研究该菌在免疫小鼠体内的粘附和定居。用特异性抗血清、IgG之Fab段、热敏抗原抗血清(ALAS)被动免疫小鼠后,该菌在小鼠肠内的粘附和定居均受到显著的抑制;而耐热抗原的抗血清(ASAS)则无显著抑制效果。主动免疫小鼠抗该菌粘附和定居的能力和肠粘膜免疫功能强弱有关。一次免疫组肠固有膜内特异性抗体形成细胞(AFC)较加强免疫组少,故加强免疫组抗空弯菌CJ-S_(131)粘附和定居的能力较强,CFU/g显著低于对照组。本文结果表明,CFU/g能较客观地反映粘膜免疫状态,因此,体内CFU法可作为估价粘膜免疫功能的一种研究方法。     

幽门弯曲菌和空肠弯曲菌的电子显微镜对比观察

Specimens were made by preparing the ultrathin sections after negative staining and ruthenium red staining. The specimens were observed under electron microscope. Results revealed that the shapes of Campylobacter pyloridis (Cp) and C. jejuni (Cj) were similar, but distinctive differences in their structures were observed. Cp had one to five sheathed flagella at one end with bulbous tips. Cj had only one unsheathed flagellum on each end without a bulbous tip. The cell body of Cp was longer than that of Cj. A layer of thick and dense delicate filament-like substance was attached to the surface of the cell body of Cp in the ultrathin sections with ruthenium red staining, in the case of Cj only a little of such a substance could be noted.     

空肠弯曲菌体外粘附条件的探讨

采用CFU法研究空弯菌在体外对单层上皮细胞的粘附,探讨空弯菌体外粘附的影响因素及最适条件。结果表明:空弯菌浓度、细胞种类、二者共同孵育温度,作用时间、细菌悬液的pH值及细菌动力等因素,都能影响空弯菌的粘附指数(AI)。多因素回归分析显示,细菌浓度、细胞种类与AI呈高度相关。正交试验提示:以Hep-2细胞为模型,细菌浓度约1×10~7CFU/ml,细菌与细胞在37℃、pH7.2的条件下,作用4小时是CJ—S131菌株体外粘附的最适条件。     

空肠弯曲菌对HeLa细胞粘附的最佳条件和影响因素

作者利用HeLa细胞为模型,研究体外空肠弯曲菌粘附作用的最佳条件和影响因素。结果表明,细菌-细胞相互作用的最佳条件是:细菌在42℃培养24小时;细菌-细胞在37℃共同孵育4小时;细菌悬液的浓度为1×10~9CFU/ml。加热、抗血清抑制试验表明:细菌细胞外膜中某些不耐热的成分在细菌粘附中起重要作用。     

空肠,结肠弯曲菌感染

空肠/结肠弯曲菌主要引起人类急性肠炎,它已成为世界范围内腹泻的重要病原菌。本文报道了1988年1～10月在西德汉诺威地区对9845份肠道感染患者大便标本的弯曲菌检查,共分离出271株弯曲菌(2.8％)。对其中115株用马尿酸水解试验鉴定亚种,空肠弯曲菌为73株,结肠弯曲菌为42株,检出率仅次于沙门氏菌感染。发病年龄以21～30岁为主。儿童感染症状较重,主要症状为腹痛、腹泻及含有大量白细胞的粘液血便。用微量稀释法对100株空肠/结肠弯曲菌的抗生素药敏测定,结果是多数菌株对青霉素、半合成青霉素耐药,对红霉素、四环素,氯霉素均敏感。     

空肠弯曲菌CJ-S_(131)与佐剂诱发的自身免疫动物模型的优化

目的 通过对不同浓度空肠弯曲菌CJ-S_(131)诱发自身免疫动物模型的研究,进而探求一稳定可靠的自身免疫动物模型。方法 40只健康雌性ICR小鼠被随机分为4组,每组10只,分别用CJ-S_(131)低、中、高三种浓度加弗氏完全佐剂免疫小鼠,通过抗ds-DNA抗体、T、B淋巴细胞活性、病理切片检测观察组间区别。结果 中浓度CJ-S_(131)加弗氏完全佐剂免疫小鼠所得模型抗ds-DNA抗体、T、B淋巴细胞活性明显高于正常组和低、高浓度CJ-S_(131)组,肝组织产生炎性病理损伤最明显。结论 中浓度CJ-S_(131)加弗氏完全佐剂免疫小鼠所得模型最佳。     

空肠弯曲菌肠炎季节分布的观察

本文报道对苏州地区空肠弯曲菌(CT)肠炎在不同季节发病情况的调查结果,自1983年1月～1984年12月,每月中旬收集腹泻患儿粪便标本100份,二年共采集2398份标本,共检出CT387株,总分离率为16.14％,其中郊县分离率为19.68％,市区为12.7％。调查表明苏州地区全年均有发病,冬季明显低于其它季节(10.3％),而春、夏、秋三季(19.7％,17.7％,16.8％)检出率相似。郊区各月份检出率明显高于市区,市区春季高于其它季节,但总的季节性分布不明显。     

利用环介导恒温扩增法快速检测空肠弯曲菌

目的 利用环介导恒温扩增技术,以空肠弯曲菌的VS1基因设计引物,建立快速检测空肠弯曲菌的方法,以期能应用于急性腹泻和肠炎等疾病的快速检验.方法 ①通过基因比对与引物设计,设计针对空肠弯曲菌的环介导恒温扩增检测(LAMP)方法;②用钙黄绿素、亚甲基蓝、结晶紫、溴化乙锭4种DNA染料对扩增产物进行染色,评价各染料染色效果;③检测该LAMP方法对空肠弯曲菌及其他干扰菌的扩增情况,评价其特异性;④将该LAMP方法与培养法比较,进行统计学分析.结果 ①设计出针对空肠弯曲菌的LAMP检测方法;②钙黄绿素与扩增产物结合后颜色变化明显,是该LAMP方法中较好的DNA染料物质;③本LAMP检测方法只针对空肠弯曲菌有扩增,对其他干扰菌不扩增,显示出良好的特异性;④试验共检测了60株临床和标准菌株,对于菌株的培养物,LAMP检测结果与培养鉴定法比较差异无统计学意义(x2 =0.3333,P＞0.05).结论 本试验设计出了针对空肠弯曲菌LAMP检测方法,该LAMP法较好的DNA染料物质是钙黄绿素,该方法具有良好的特异性,与培养鉴定法比较具有较高的阳性、阴性及总体符合率,能够用于空肠弯曲菌的快速检验.     

南昌地区空肠弯曲杆菌研究

从206份腹泻儿童粪便标本中分离到空肠弯曲杆菌19株,阳性率为9.2％。其中,生物1型11株;生物3型8株。证明湿热、酒精、新洁尔灭、来苏、碘酊、龙胆紫均对此菌有很强的杀灭作用;低温可延长空肠弯曲杆菌的生存时间;微需氧环境对本菌生存期无影响。检查了8名患儿对空肠弯曲杆菌感染的抗体反应,发现恢复期血清抗体滴度较急性期显著升高,证实了此菌对HeLa细胞的侵入能力。     

应用免疫组化法研究甲醛化空肠弯曲菌菌苗诱导的小鼠肠粘膜免疫

以0.5%甲醛化空肠弯曲菌(简称空弯菌)菌苗经口免疫昆明小鼠,共两次。于第二次免疫后不同时间段分别处死各组小鼠,取空肠、回肠和结肠中段行冰冻切片,以间接免疫荧光技术检测肠固有膜内的特异性抗体形成细胞,用直接法检测三类(IgA、IgM、IgG)抗体形成细胞。结果提示:甲醛化空弯菌菌苗确能引起较强的肠粘膜免疫应答,固有膜内可产生大量的特异性抗体形成细胞,尤以第12天～15天为甚,且以IgA类抗体形成细胞的升高为主,IgG及IgM类抗体形成细胞亦有相应的增加。     

不同培养基上空肠弯曲菌生长特性及外膜蛋白表达差异的初步研究

目的 探讨不同培养基对空肠弯曲菌(CJ)的生物学特性和外膜蛋白表达的影响.方法 采用改良布氏、改良布氏血、改良卵黄等3种培养基培养CJ,48 h后进行菌落观察、菌体观察、动力学试验、生物化学检验、间接荧光检测等初步确定生物学特性,比较3种培养基上CJ生长特性的差别.采用0.2 mol/L、pH 2.2甘氨酸-HCl缓冲液抽提CJ外膜蛋白,SDS-PAGE电泳后,灰度扫描观察比较不同培养基上CJ的28 000～31000外膜蛋白表达差异.结果 改良卵黄培养基上CJ的生长特性典型,并且其菌体形态较另外两种培养基粗壮,繁殖速度更为快速,改良卵黄培养基来源的CJ的28000～31 000外膜蛋白的表达较改良布氏血培养基丰富.结论 改良卵黄培养基培养CJ是一种生长特性典型、28000-31000外膜蛋白表达丰富的培养基,该培养基的选择和使用将为该类蛋白的CJ亚单位疫苗大规模制备、CJ的流行病学检验、食品安全卫生检验检疫奠定重要基础.

Abstract：

Objective To evaluate the biological characteristics of Campylobacter Jejuni (CJ) cultured on different culture media and their expression abundance of outer membrane proteins (OMPs). Methods CJ was cultured on the improved Bull's medium yolk agar, improved Bull's blood agar or improved Bull's agar for 48 h. The biological characteristics of the bacteria, including the colony feature, morphology, motility, biochemistry, and results of indirect fluorescence test were observed and compared. OMP of the cultured CJ was extracted using 0.2 mol/L and glycine-hydrochloride buffered solution (pH 2.2) and identified by SDS-PAGE to compare the expression abundance of the OMPs with molecular weight of 28-31 kD. Results CJ exhibited typical biological characteristics with larger cell body and more rapid growth on improved Bull's medium yolk agar than those on improved Bull's blood agar and improved Bull's agar. The bacteria grown on improved Bull's medium yolk agar showed also greater expression abundance of the OMPs with molecule mass between 28 kD and 31 kD. Conclusion Improved Bull's medium yolk agar allows rapid growth of CJ with typical biological characteristics and enhanced expression of the OMPs with molecular weight of 28 -31 kD, and can be widely used in CJ subunit vaccine development, CJ epidemiological survey, CJ food safety examination, and CJ quarantine.     

弯曲菌属DNA的G+Cmol%测定的初步研究

用热变性温度法测定14株弯曲菌DNA的碱基组成,结果表明,该菌属的DNA在0.1ssc缓冲液中的热变性温度为63.4～64.8℃,G+C mol%在27.9～30.8之间。空肠弯曲菌和结肠弯曲菌DNA的G+C mol%无明显差别。     

中草药制剂的回收乙醇中杂质的去除方法探讨

目的：探讨中草药制剂的回收乙醇中杂质的去除方法。方法：将回收乙醇进行初步的除杂质实验，选择较好的除杂质方法，再以正交法对其进行优选，并对优选方法加以验证。结果：每1000ml回收乙醇中加入5％高锰酸钾溶液6ml，静置30min，然后加入活性炭6g，再静置30min，滤过，蒸馏，收集蒸馏液作相应的检验，各项指标均能达到规定要求。结论：该方法可有效除去中草药制剂回收乙醇中的杂质，提高其质量。     

动物和禽蛋的空肠弯曲菌带菌情况调查

本文检测10种动物的202份新鲜粪便标本,从中分离出空肠弯曲菌102株,阳性率为50.5％。其中,鸡、猪、家兔三种动物的带菌率各为81.6％、61.1％、44.1％,分别居所查家禽、家畜及实验动物的首位。对两种禽蛋表面带菌情况的调查,新鲜鸡、鸭蛋的带菌率分别为6.7％与10.0％。调查结果表明,10种动物皆是空肠弯曲菌的储存宿主。