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相似文献
 共查询到19条相似文献,搜索用时 234 毫秒
1.
目的:观察不同浓度的黄芩素干预宫颈癌HeLa细胞后细胞迁移及细胞周期的变化,观察细胞培养基中具有活性的金属基质蛋白酶-2(MMP -2)、金属基质蛋白酶9(MMP -9)的变化,及 MMP -2、MMP -9、金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)、细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)、B 细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl -2)相关 X 蛋白(Bax)、Bcl -2 mRNA 及蛋白水平表达的变化。方法体外黄芩素干预 Hela 细胞株24 h,分不含黄芩素的无血清DMEM 高糖培养基培养的细胞为空白对照组,无血清 DMEM 高糖细胞培养基中加入终浓度为100μmol/L 的黄芩素为100μmol/L 组,无血清 DMEM 高糖细胞培养基中加入终浓度为200μmol/L 的黄芩素为200μmol/L 组,共3组。镜下观察各组细胞形态及数量的变化、细胞迁移实验检测细胞迁移的改变、流式细胞技术法检测细胞周期发生的变化、RT -PCR 法及 Western blot 法检测 MMP -2、MMP -9、TIMP2、CyclinD1、Bax、Bcl -2 mRNA 及蛋白水平的表达变化。结果黄芩素干预24 h 后,与空白对照组比较,两干预组细胞周期 G1期受阻滞,阻滞程度与黄芩素干预浓度一致(P <0.05),细胞迁移受抑制,随着黄芩素浓度逐渐增加,迁移距离逐渐减少(P <0.05),MMP -2、MMP -9活性受到抑制,抑制程度与黄芩素浓度呈正相关(P <0.05),MMP -2、MMP -9、CyclinD1、 Bcl -2的mRNA 及蛋白表达随黄芩素干预浓度增加,呈逐渐降低的趋势(P <0.05),TIMP2、Bax 的 mRNA 及蛋白表达趋势随黄芩素浓度增加而逐渐增强(P <0.05)。结论黄芩素干预宫颈癌 HeLa 细胞,通过阻滞细胞周期 G1期,抑制 MMP -2、MMP -9活性,上调 TIMP2、Bax 的表达,下调 MMP -2、MMP -9、CyclinD1、Bcl -2的表达,促进 HeLa细胞的凋亡。  相似文献   

2.
目的探讨汉黄芩素对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及可能分子机制。方法不同浓度(20、50、100μmol/L)汉黄芩素分别作用于人胃癌SGC7901细胞24、48、72 h,空白对照不进行任何处理。采用MTT法检测细胞增殖能力;采用划痕实验观察细胞迁移能力;采用Transwell法观察细胞侵袭能力;采用流式细胞仪检测细胞周期与凋亡情况; RT-qPCR和Western blot分别对细胞基质金属蛋白酶2、9(MMP2、MMP9)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)以及金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)的mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果 MTT实验结果显示,不同浓度的汉黄芩素抑制人胃癌SGC7901细胞呈浓度和时间依赖性;作用48 h后,汉黄芩素s期比例上升,诱导细胞凋亡(P0. 05); Transwell实验结果显示,汉黄芩素呈浓度依赖性抑制人胃癌SGC7901细胞侵袭; RTq PCR和Western blot检测结果显示,汉黄芩素能够抑制SGC7901细胞中ICAM-1、MMP9、MMP2的mRNA和蛋白表达水平,但上调TIMP2 mRNA和蛋白表达(P0. 05)。结论汉黄芩素能够抑制人胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭,阻滞细胞在S周期,诱导其凋亡。  相似文献   

3.
目的:观察通过使用不同浓度黄芩素干预宫颈癌细胞后, Ras及CyclinD1 mRNA及蛋白水平表达变化。方法体外培养Hela细胞株,分为空白对照(control)组、100μmol/L干预组、200μmol/L干预组。培养24 h后,相差显微镜下观察细胞形态及数量的变化;流式细胞技术检测细胞周期的变化;RT-PCR法检测Ras及CyclinD1 mRNA水平的表达变化。Western Blot法检测Ras及CyclcinD1蛋白水平的表达变化。结果黄芩素干预24 h后,与空白对照(control)组相比较,各黄芩素干预组细胞周期G1期受到阻滞,阻滞程度随黄芩素浓度增加而增强(P〈0.05);Ras及CyclinD1的mRNA及蛋白表达与黄芩素干预浓度浓度相关,呈逐渐降低的趋势(P〈0.05)。结论黄芩素可通过抑制Ras信号通路,阻滞细胞周期G1期,影响细胞周期D1(CyclinD1)的表达,致宫颈癌Hela细胞凋亡。  相似文献   

4.
 目的 观察耐药逆转剂川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对人乳腺癌MCF7/Adr细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、基质金属蛋白酶诱导物(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP2)、MMP9表达的影响。方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测药物对MCF7/Adr细胞的毒性作用;荧光分光光度法测定细胞内阿霉素(adriamycin,ADM)的荧光强度;Realtime RT-PCR和Western blot检测细胞P-gp、EMMPRIN、MMP2和MMP9 mRNA和蛋白水平的变化。结果 TMP与ADM联合作用于细胞,与单用ADM相比,ADM对细胞的杀伤效应及细胞内ADM的荧光强度明显升高(P<0.05),且有浓度依赖性;与对照组相比,ADM能上调细胞P-gp、EMMPRIN和MMP2、MMP9蛋白表达;TMP能抑制ADM对细胞P-gp、EMMPRIN、MMP2和MMP9蛋白和mRNA水平的上调作用。结论 TMP在有效逆转肿瘤多药耐药的同时,还能抑制ADM对P-糖蛋白、EMMPRIN、MMP2和MMP9的上调。  相似文献   

5.
目的:基于Wnt/β?catenin途径探索苦参碱抑制人宫颈癌细胞系Caski细胞侵袭迁移的分子机制。方法:Caski细胞用不同浓度苦参碱处理后,MTT法检测细胞增殖抑制情况;Transwell小室侵袭迁移实验检测细胞侵袭迁移情况;ELISA法检测细胞基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP?9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的分泌变化;实时荧光定量PCR检测细胞糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK?3β)、Wnt2B蛋白的表达情况;免疫蛋白印迹检测细胞β连环蛋白(β?catenin)、磷酸化β连环蛋白(p?β?catenin)含量。结果:苦参碱对Caski细胞的增殖具有抑制作用(P<0.05),且呈现时间、浓度依赖性;苦参碱抑制Caski细胞的侵袭迁移率(P<0.05),对Caski细胞分泌MMP?9、VEGF的能力具有显著抑制作用(P<0.05);苦参碱可显著降低Caski细胞Wnt2B mRNA的表达及β?catenin的蛋白含量,增加Caski细胞中GSK?3β mRNA的表达和p?β?catenin的蛋白含量。结论:苦参碱通过促进Caski细胞Wnt/β?catenin通路中GSK?3β mRNA表达,提高p?β?catenin蛋白含量,降低Wnt2B mRNA表达、β?catenin蛋白含量以及Caski细胞内MMP?9、VEGF的分泌,进而抑制Caski细胞的侵袭迁移。  相似文献   

6.
目的研究Furin基因沉默对宫颈癌HeLa细胞株生长转移的影响。方法脂质体法将质粒Furin siRNA转染人宫颈癌HeLa细胞。MTT法检测细胞的增殖情况,Boyden细胞迁移和侵袭实验观察HeLa细胞的迁移和侵袭能力。Western blot检测Furin及产物MT1-MMP蛋白量的变化,ELISA法检测细胞上清中MMP2的浓度。结果细胞增殖实验中Furin siRNA处理后48h的HeLa细胞与空质粒转染组相比体外生长抑制38.6%,差异有统计学意义(P<0.01);细胞迁移和侵袭实验中,Furin siRNA处理后,HeLa细胞穿过滤膜和基质胶的细胞数量均明显少于空质粒转染(P<0.05);它可显著降低MT1-MMP蛋白表达及MMP2的分泌。结论 Furin siRNA可有效抑制人宫颈癌HeLa细胞的生长及肿瘤细胞转移,机制可能与降低Furin产物MT1-MMP的表达及MMP2合成有关。  相似文献   

7.
目的:探讨黄芩素对人子宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用及可能机制.方法:采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测黄芩素对HeLa细胞生长的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法观察黄芩素对HeLa细胞凋亡的诱导作用;比色法测定黄芩素对HeLa细胞内caspase-3活性的影响.结果:不同浓度黄芩素作用24、36、48 h后均可抑制HeLa细胞生长(P<0.05~P<0.01);黄芩素作用24 h后,HeLa细胞凋亡率增加(P<0.01),细胞内caspase-3活性增强(P<0.05~P<0.01).结论:黄芩素能抑制HeLa细胞生长,其机制可能与诱导细胞凋亡及增强caspase-3活性有关.  相似文献   

8.
目的:探讨顺铂对HeLa人宫颈癌细胞中Nrf2蛋白表达及核转位的影响,并观察细胞自噬和凋亡的变化。方法:使用不同浓度的顺铂(0、2.5、5、10μmol/L)干预HeLa人宫颈癌细胞,MTT法检测细胞活性,Transwell实验观察细胞迁移能力,mCherry-GFP-LC3B融合蛋白腺病毒转染HeLa细胞观察自噬水平的变化,流式细胞术检测细胞凋亡水平,免疫蛋白印迹检测Nrf2在细胞质和细胞核内的表达情况,免疫荧光法观察Nrf2的核转位情况。结果:与对照组相比,2.5、5、10μmol/L的顺铂均可抑制HeLa细胞的活性及细胞迁移能力(P<0.05),且随着药物浓度增高抑制作用增强(P<0.05)。与对照组相比,2.5、5、10μmol/L的顺铂均可促进HeLa细胞中LC3B的表达、细胞凋亡及Nrf2的核转位(P<0.05),降低细胞质中Nrf2的蛋白表达水平(P<0.05),并升高细胞核中Nrf2的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:顺铂通过增加HeLa人宫颈癌细胞中Nrf2入核促进细胞自噬和细胞凋亡,并抑制细胞的活性和迁移能力。  相似文献   

9.
薤白总皂苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的观察薤白总皂苷对宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的薤白总皂苷(25、50、100、250、500、1000μg/ml)于不同作用时间(24、48、72 h)处理宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT法检测不同浓度的薤白总皂苷在不同作用时间下对HeLa细胞增殖率的影响;用100和200μg/ml的薤白总皂苷处理宫颈癌HeLa细胞48 h后,Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,JC-1染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase试剂盒检测HeLa细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性,荧光定量PCR测定Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果薤白总皂苷对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间一剂量依赖性;薤白总皂苷(100和200μ/ml)处理能显著降低HeLa细胞线粒体膜电位,抑制HeILa细胞增殖,促进其凋亡(P<0.05,P<0.01);上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05,P<0.01)。结论薤白总皂苷有显著的抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能与其降低HeLa细胞线粒体膜电位,上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性有关。  相似文献   

10.
摆茹  杨伟 《宁夏医科大学学报》2012,34(12):1243-1245
目的通过观察氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对人肝癌细胞QGY-7703体外迁移侵袭能力和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)表达的影响,初步探讨氧化苦参碱对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响及可能的分子机制。方法体外培养人肝癌细胞QGY-7703并用OM干预后,Transwell迁移和侵袭实验检测OM对细胞迁移侵袭能力的影响;定量PCR检测细胞中MMP-9 mRNA的表达水平,Western Blot检测细胞中MMP-9蛋白的表达水平。结果与细胞对照组相比,低浓度(1mg.mL-1)OM干预组QGY-7703细胞的迁移侵袭能力未发生显著变化;中浓度(2.5mg.mL-1)和高浓度(5mg.mL-1)OM干预组细胞的迁移侵袭能力受到明显抑制(P<0.01),同时伴有MMP-9 mRNA和蛋白表达水平的下降(P<0.01)。结论 OM在体外可抑制人肝癌细胞QGY-7703的迁移侵袭能力,并能抑制MMP-9的表达,提示OM可能通过抑制MMP-9的表达参与抗肿瘤细胞迁移侵袭的作用。  相似文献   

11.
目的:研究茅台酒与乙醇影响二乙基亚硝胺(DEN)致小鼠肝脏金属基质蛋白酶2(MMP2)表达的影响。方法:将54只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、茅台酒干预组、乙醇干预组,分别给予无菌生理盐水、茅台酒和乙醇灌胃处理,茅台酒干预组和乙醇干预组用DEN腹腔注射,35周后取小鼠肝脏,采用实时荧光定量PCR(RT—PCR)、免疫组化染色及Westernblot检测肝组织内MMP2mRNA及蛋白的表达。结果:MMP2基因在乙醇干预组中的mRNA表达显著高于正常对照组、茅台酒干预组,差异有统计学意义(P〈0.05);MMP2mRNA水平在茅台酒干预组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P〉0.05);乙醇干预组MMP2蛋白表达比茅台酒干预组高,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:乙醇协同DEN致小鼠肝脏MMP2表达上调,含同样乙醇浓度的茅台酒没有这种作用。  相似文献   

12.
目的探讨三氧化二砷(As:O,)对结肠癌淋巴管形成与MMP-9表达的影响。方法建立结肠癌小鼠移植瘤模型,分为1mg/(kg·d)As2O3,组、2mg/(kg·d)As:0,组和生理盐水组(注射等体积生理盐水)。应用免疫组织化学方法检测肾小球足突细胞黏蛋白(podoplanin)、血管内皮生长因子C(VEGF—C)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达并计数微淋巴管密度(MLD)。结果As2O3处理组VEGF—C和MMP-9的表达均较生理盐水组明显减弱,2mg/(kg·d)As2O3组VEGF—C和MMP-9的表达明显弱于1mg/(kg·d)As2O3组;As2O3处理组MLD较生理盐水组明显减少,2ms/(kg·d)As2O3组MLD明显少于1mg/(kg·d)As2O3组;以上差异均具有统计学意义。结论As2O3对小鼠结肠癌移植瘤的淋巴管形成与MMP-9表达均有抑制作用。  相似文献   

13.
杨国东 《中原医刊》2009,(22):11-12
目的研究急性脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的变化及临床价值。方法选取临床确诊的80例急性脑梗死病例及同期同年龄纽体检健康者60例。用酶联免疫吸附法(ELISA)测定发病后1、2、5、7、14d血清MMP-9的浓度,与健康组比较。结果患者组MMP-9血清浓度发病后1、2、5、7、14d分别是(272±128)μg/L、(395±157)μg/L、(378±140)μg/L、(307±127)μg/L、(236±112)μg/L,与对照纽(149±110)μg/L相比差异有统计学意义(P〈0.01),以发病后2d水平升高明显,后持续5d左右;并且大梗死组血清MMP-9水平明显高于中和小梗死组,血清MMP-9水平与脑梗死体积和预后之间存在相关性(P〈0.01)。结论急性脑梗死患者发病早期血清MMP-9水平明显增高,且其增高程度能够为中枢神经系统受损程度提供定量信息,为病情的严重程度和预后有预示作用。  相似文献   

14.
目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在形觉剥夺性近视豚鼠眼后极部的表达。方法对2周龄豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼9周制备形觉剥夺性近视(FDM)动物模型,左眼作为对照。遮盖3、6、9周后随机抽取15只豚鼠,检影验光检测双眼屈光度,A型超声测量双眼眼轴长度,免疫组织化学检测眼后极部iNOS和MMP-2的表达变化。结果形觉剥夺使豚鼠眼轴延长,近视屈光度增加,遮盖眼与对照眼屈光度和眼轴长差异均有统计学意义(P〈0.05)。遮盖眼iNOS和MMP-2免疫活性逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05),两者的表达量在形觉剥夺过程中呈强相关性(r=0.769,P〈0.05)。结论iNOS和MMP-2可能参与形觉剥夺性近视的形成,NO信号通路可通过调节巩膜MMP-2的活性造成巩膜重塑。  相似文献   

15.
目的:研究人参二苓汤对H22荷瘤小鼠恶性腹水的抑制作用及相关机制.方法:建立H22荷瘤小鼠恶性腹水模型,随机分为模型对照组,阳性对照组,人参二苓汤有效部位低、中、高剂量组,观察各组小鼠毛色、食欲、活动状况和精神状态等一般的生活状况;测定小鼠体重和腹围的变化;观察腹腔内情况,计数腹膜瘤结节数量,称重计算抑瘤率;利用Elisa法检测腹水中VEGF、MMP-2、MMP-9的表达量.结果:人参二苓汤有效部位能够延缓H22荷瘤小鼠体重和腹围的增长,对H22荷瘤小鼠腹水的生长有一定的抑制作用,且存在剂量依耐性.与模型组比较,人参二苓汤有效部位高剂量组小鼠腹水中VEGF的含量显著降低(P <0.01),MMP-2和MMP-9的含量有差异(P<0.05);中剂量组小鼠腹水中VEGF的含量有差异(P<0.05),MMP-2和MMP-9的含量无差异(P>0.05);低剂量组小鼠腹水中VEGF、MMP-2和MMP-9的含量均无差异(P>0.05).人参二苓汤有效部位各剂量组与模型对照组比较均无差异.结论:人参二苓汤能够提高H22腹水型小鼠的生活质量,抑制恶性腹水的生长,抑制腹水中VEGF、MMP-2和MMP-9的表达,而对H22荷瘤小鼠恶性腹水的发展起抑制作用.  相似文献   

16.
目的:探讨芍药苷对四氯化碳诱发肝纤维化大鼠血清TGFβ1、TMP1、MMP2及MMP9的影响。方法:清洁级Sprague-Dawley大鼠60只,随机分成6组,A组(正常对照组)、B组(模型组)、C1组(芍药苷小剂量组)、C2组(芍药苷中剂量组)、C3组(芍药苷大剂量组)、D组(水飞蓟素对照组)。除正常对照组外,均经皮下注射400mL/L四氯化碳8周,后各治疗组给予不同剂量芍药苷干预8周,阳性对照组给予水飞蓟素干预8周,ELISA法检测大鼠血清TGFβ1、MMP2、MMP9及TMP1。结果:TGFβ1:与B组比较,A组P〈0.01,C1组、C2组、C3组、D组P〈0.05;TMP1:与B组比较,A组P〈0.01,C1组、C2组、C3组、D组P〈0.05;MMP2:与B组比较,A组P〈0.01,C1组、C2组、C3组、D组P〈0.05;MMP9:与B组比较,A组P〈0.01,C1组、C2组、C3组、D组P〈0.05;结论:芍药苷能够通过降低大鼠血清TGFβ1、TMP1、提高大鼠血清MMP2、MMP9而发挥抗肝纤维化作用,并且量效关系明显。  相似文献   

17.
目的 探讨基质金属蛋白酶MMP9在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术检测MMP9在11例正常胰腺组织和88例胰腺癌组织中的表达.结果 免疫组织化学结果显示胰腺癌组织中MMP9的表达显著高于正常组织(P<0.01).MMP9的表达和胰腺癌的临床TNM分期、淋巴结转移均成正相关(均P<0.01),与生存时间成负相关(P<0.01),而与肿瘤部位和病理分级均无关(均P>0.05).经COX回归分析显示MMP9表达与胰腺癌预后成负相关(P<0.01).结论 MMP9在胰腺癌的发生、发展和转移中扮演着重要角色,在治疗过程中对其进行检测有助于对胰腺癌患者的预后进行评估.  相似文献   

18.
异位子宫内膜间质细胞的分离培养及MMP2 9的表达和调节   总被引:1,自引:0,他引:1  
王丽  郭雪霏 《河北医学》2011,17(3):288-290
目的:建立异位子宫内膜间质细胞分离培养方法,探讨异位子宫内膜间质细胞MMP2、MMP9的表达及调节。方法:收集16例子宫内膜异位症患者的异位内膜进行体外细胞分离及培养,用含肿瘤坏死因子α(TNF-α)的培养液诱导培养24小时,设立对照组,应用免疫组化及明胶酶谱法检测各组细胞中MMP2、MMP9蛋白的表达变化及其培养上清液中MMP2、MMP9的含量。结果:异位子宫内膜细胞中持续表达MMP2、MMP9,与对照组相比,异位内膜间质细胞经TNF-α作用后MMP9表达增高,培养上清液中MMP9的含量也显著增加。结论:成功分离培养了16例异位内膜间质细胞;异位内膜间质细胞持续分泌MMP2、MMP9;TNF-α可诱导MMP9的表达升高,这可能与异位子宫内膜间质细胞的侵袭转移密切相关。  相似文献   

19.
目的研究转染反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人胆管癌细胞株QBC939细胞凋亡抑制蛋白基因(X-linked inhibitor of apoptosisprotein,XIAP)表达的抑制作用及对细胞周期凋亡的影响.方法脂质体介导ASODN瞬时转染QBC939细胞,荧光显微镜观察ASODN转染入细胞的情况,并计算转染率;RT—PCR检测转染前后XIAPmRNA表达的变化;流式细胞仪检测转染后细胞周期的变化和凋亡率.结果转染后24h可达到最佳的转染效果;ASODN组的XIAP基因水平明显低于对照组(P〈0.05),流式结果显示转染后QBC939G0/G1期细胞高于阴性对照组,凋亡率高于对照组(P〈0.05).结论脂质体介导转染ASODN能特异性地抑制QBC939细胞中的XIAP基因表达,使其发生G0/G1期阻滞,并诱导胆管癌细胞凋亡,有望成为胆管癌基因治疗新的靶点.  相似文献   

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