白细胞介素12 mRNA在慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞中的表达

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞(PBMC)中IL-12 mRNA的表达水平,了解其对乙型肝炎病毒和宿主作用的影响。方法临床51例慢性乙型肝炎患者和13例正常对照者,采用RT-PCR法扩增IL-12mRNA,以β肌动蛋白(β-actin)的表达作为内参照,比较IL-12 mRNA的表达水平。结果慢性乙型肝炎感染者活动期外周血单个核细胞中IL-12 mRNA表达明显高于正常对照组(F=11.7,P<0.01)。慢性乙型肝炎患者IL-12 mRNA的表达水平与其肝组织病理的炎症程度有关,中、重度炎症者IL-12 P40表达高于轻度炎症者。结论在慢性乙型肝炎病程发展过程中诱导了一个病毒特异性的TH细胞活动,而IL-12是建立宿主免疫反应、控制乙型肝炎病毒复制的一个重要因子。     

慢性乙型肝炎患者外周血Treg/Th17检测及其意义

目的通过观察慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血Treg、Th17细胞及其相关细胞因子的变化,探讨淋巴细胞亚群Treg和Th17细胞在CHB发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测70例CHB患者(CHB组)和20例健康体检者(对照组)外周血中Treg(CD4+CD25highCD127lowT)和Th17(CD3+CD8-IL-17+T)细胞频数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-10、TGF-β1、IL-17及IL-23水平。结果 CHB组外周血中Treg、Th17细胞频数及其相关因子IL-23、IL-10、TGF-β1水平均明显高于对照组(P<0.05),但IL-17升高不明显(P>0.05)。CHB组Treg/Th17比率明显低于对照组(P<0.05),且轻中度CHB组Treg/Th17比率及TGF-β1水平明显低于重度CHB组(P<0.05)。结论 CHB患者外周血中存在Treg/Th17失衡;Treg/Th17失衡可能参与了CHB的发生发展。     

Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中的表达及意义

目的 探讨Th17细胞在乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病中的表达及相互关系.方法 收集慢性乙型肝炎(CHB)患者21例(CHB组)、HBV相关性肝硬化患者36例(LC组)及健康对照者20例(HC组).应用流式细胞术检测外周血Th17细胞频率;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆白细胞介素17(IL-17)水平;实时荧光定量PCR法检测肝组织中IL-17mRNA的表达;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达和分布.结果 LC和CHB组外周血单个核细胞(PB-MC)中Th17细胞频率、血浆IL-17水平均明显高于HC组(P＜0.01),且外周血中Th17频率与对应血浆IL-17水平呈正相关(r=0.430、0.660,P=0.009、0.001);LC组患者肝组织中IL-17 mRNA水平、α-SMA表达量均明显高于HC组(P＜0.01),且α-SMA的表达与肝脏炎症程度(r=0.602,P=0.014)和纤维化分期(r=0.506,P=0.045)呈正相关.结论 Th17细胞可能参与了HBV相关性肝硬化的发生和发展.     

Th17细胞及相关细胞因子在系统性硬化病小鼠模型中的表达及意义

目的:研究T辅助细胞17(Th17)及相关细胞因子在系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)小鼠模型外周血、皮肤、肺部的表达及意义。方法:20只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组和博莱霉素注射4周组(SSc组),观察小鼠皮肤/肺部炎症和纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的病理切片,流式细胞计数检测外周血、皮肤/肺组织CD4+IL-17+Th17细胞,荧光定量PCR检测小鼠皮肤/肺部维甲酸相关孤独受体(RORγt)、IL-17A和IL-6 mRNA的表达,酶联免疫吸附试验检测血清IL-17、IL-6水平,并分析这些指标的相关性。结果:SSc组比对照组皮肤炎症和肺纤维化评分(Ashcroft评分)明显增加(2.6±0.84 vs.0.4±0.52,2.80±1.81 vs.0.60±0.70),皮肤/肺羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)的含量明显增多[(3.17±1.74)mg/g vs.(1.45±0.40)mg/g,(0.53±0.14)mg/g vs.(0.38±0.16)mg/g],均P<0.05。SSc组外周血、皮肤和肺组织Th17细胞比例较对照组明显增加[(2.07±0.89)%vs.(1.02±0.32)%,(5.80±2.02)%vs.(1.64±0.58)%,(5.24±2.43)%vs.(1.92±0.98)%,P<0.01];与对照组相比,SSc组皮肤/肺组织IL-17A、IL-6 mRNA的表达量,皮肤RORγt mRNA的表达量增高,均P<0.05。SSc组外周血IL-17、IL-6含量明显增高(P<0.01)。外周血Th17细胞、IL-17和IL-6的含量与皮肤/肺部炎症、PF评分、皮肤HYP含量呈密切正相关,皮肤/肺组织Th17细胞分别与皮肤/肺部炎症、皮肤/肺HYP含量密切正相关。结论:Th17细胞在SSc小鼠模型外周血、皮肤及肺组织表达增高,与皮肤/肺部炎症、纤维化病变密切正相关,并通过IL-17、IL-6等细胞因子参与SSc的发病。     

乙型肝炎外周血Th1/Th2及Tc1/Tc2细胞失衡的临床意义研究

目的 探讨外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞失衡在乙型肝炎中的临床意义.方法 采用流式细胞术分析乙型肝炎患者外周血不同T淋巴细胞亚群中细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)和白介素4(IL-4)表达率的变化,分别比较急慢性乙型肝炎以及慢性轻、中、重度肝炎Th1/Th2、Tc1/Tc2的变化.结果 慢性乙型肝炎Th2、Tc2细胞均高于急性乙型肝炎(t=-3.54,P=0.001;t=-2.27,P=0.026);相对于轻度组,中度以及重度组Th1、Tc1均有升高(P＜0.01);相对于中度组,重度组Th1、Tc1亦有增高(P＜0.05).结论 乙型肝炎外周血Th2、Tc2细胞与炎症慢性化有关;随着慢性乙型肝炎活动程度的加剧,Th1、Tc1细胞逐渐增多.     

肾移植术后慢性排斥患者外周血Th17细胞的表达

【目的】探讨外周血Th17细胞及相关细胞因子与肾移植术后慢性排斥反应发生的关系。【方法】自2007年1月至2010年8月,在中山大学附属第一医院和第三医院收集尿毒症（尿毒症组）、肾移植术后6个月内未发生慢性排斥反应（非慢排组）及6个月内发生慢性排斥反应（慢排组）患者的外周血共75例,其中每组各25例。采用流式细胞术（FCM）检测外周血中CD4+T细胞中Thl7细胞的频率。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中Th17细胞相关细胞因子白介素-17 (IL-17)、白介素-22 (IL-22)和白介素-23 (IL-23)的水平。分析比较组间差异。【结果】术后慢排组Thl7细胞的频率为（3.82±1.7）%,明显低于非慢排组（22.0±11.0）%和尿毒症组（17.2±8.0）%,差异均有统计学意义（P < 0.01）。肾移植术后慢排组患者产生IL-17的量为（7.8±1.3）pg/mL,明显低于非慢排组（17.0±6.0）pg/mL（P < 0.05）和尿毒症组患者（20.4±9.0）pg/mL（P < 0.01）,差异均有统计学意义。IL-22和IL-23在三组间差异无统计学意义（P > 0.05）。【结论】外周血中Th17细胞可能通过分泌细胞因子IL-17参与了肾移植术后慢性排斥反应的发生。     

白细胞介素12mRNA在慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞中的表达

目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞（PBMC）中IL-12mRNA的表达水平,了解其对乙型肝炎病毒和宿主作用的影响。方法：临床51例慢性乙型肝炎患者和13例正常对照者,采用RT-PCR法扩增IL-12mRNA,以β肌动蛋白（β-actin)的表达作为内参照,比较IL-12mRNA的表达水平。结果：慢性乙型肝炎感染者活动期外周血单个核细胞中IL-12mRNA表达明显高于正常对照组（F=11.7,P＜0.01)。慢性乙型肝炎患者IL-12mRNA的表达水平与其肝组织病理的炎症程度有关,中、重度炎症者IL-12P40表达高于轻度炎症者。结论：在慢性乙型肝炎病程发展过程中诱导了一个病毒特异性的TH细胞活动,而IL-12是建立宿主免疫反应、控制乙型肝炎病毒复制的一个重要因子。     

Th17细胞的研究进展

辅助性T细胞17(T helper 17 cell,Th17)是一种新发现的与白细胞介素23(interleukin23,IL-23)相关的、能够分泌IL-17的T细胞亚群,它在分化过程和生物学功能等方面与Th1和Th2以及Treg细胞亚群均有不同之处。转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)和IL-6以及IL-23在Th17细胞的分化形成过程中起着积极的促进作用,而γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)和IL-4以及Socs3(suppressor of cytokine signaling 3)蛋白则能抑制它的分化。Th17细胞能参与前炎症反应,同时也能诱使自身免疫病的发生。     

儿童过敏性紫癜急性期Th17细胞功能和CD4~+CD25~+调节性T细胞水平变化

目的观察过敏性紫癜(HSP)病儿急性期Th17细胞功能和CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)水平变化,探讨其在HSP免疫发病机制中的作用。方法选择54例HSP急性期病儿为研究对象,根据尿检有无异常分为肾炎组(HSPN组)和非肾炎组(NHSPN组),应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血浆白细胞介素17(IL-17)水平,采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Treg、CD4+细胞、CD8+细胞、CD3+细胞、NK细胞(CD3-CD56+)、B淋巴细胞(CD19+)和CD3+HLADR+细胞水平。以30名健康儿童作为对照。结果HSP病儿血浆IL-17水平较对照组明显增高(t=14.66,P<0.01),HSPN组和NHSPN组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。HSP病儿外周血CD4+CD25+Treg比例明显低于对照组(t=7.28,P<0.01),HSPN组和NHSPN组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。HSP病儿CD4+CD25+Treg水平与CD4+细胞呈正相关(r=0.554,P<0.01),与CD19+细胞呈负相关(r=-0.305,P<0.05),而与CD8+细胞、CD3+细胞、CD3-CD56+细胞以及CD3+HLADR+细胞则无相关性(r=-0.109～0.287,P>0.05)。HSP病儿血浆IL-17水平与CD4+CD25+Treg水平呈负相关(r=-0.295,P<0.05)。结论 HSP病儿急性期Th17细胞功能增强,免疫抑制效应不足;HSP病儿存在Th17/Treg平衡紊乱,Th17/Treg失衡参与了HSP的发病过程。     

Th17细胞及相关细胞因子在系统性硬化病小鼠模型中的表达及意义

目的： 研究T辅助细胞17(Th17)及相关细胞因子在系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)小鼠模型外周血、皮肤、肺部的表达及意义。方法： 20只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组和博莱霉素注射4周组（SSc组）,观察小鼠皮肤/肺部炎症和纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的病理切片,流式细胞计数检测外周血、皮肤/肺组织CD4⁺IL-17⁺Th17细胞,荧光定量PCR检测小鼠皮肤/肺部维甲酸相关孤独受体（RORγt）、IL-17A和IL-6 mRNA的表达,酶联免疫吸附试验检测血清IL-17、IL-6水平,并分析这些指标的相关性。结果： SSc组比对照组皮肤炎症和肺纤维化评分(Ashcroft评分)明显增加（2.6±0.84 vs. 0.4±0.52, 2.80±1.81 vs. 0.60±0.70）,皮肤/肺羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）的含量明显增多［(3.17±1.74) mg/g vs. (1.45±0.40) mg/g,(0.53±0.14) mg/g vs. (0.38±0.16) mg/g］,均P <0.05。SSc组外周血、皮肤和肺组织Th17细胞比例较对照组明显增加［(2.07±0.89)% vs. (1.02±0.32)%,(5.80±2.02)% vs. (1.64±0.58)%,(5.24±2.43)% vs. (1.92±0.98)%,P<0.01］;与对照组相比,SSc组皮肤/肺组织IL-17A、IL-6 mRNA的表达量,皮肤RORγt mRNA的表达量增高,均P<0.05。SSc组外周血IL-17、IL-6含量明显增高（P<0.01）。外周血Th17细胞、IL-17和IL-6的含量与皮肤/肺部炎症、PF评分、皮肤HYP含量呈密切正相关,皮肤/肺组织Th17细胞分别与皮肤/肺部炎症、皮肤/肺HYP含量密切正相关。结论：Th17细胞在SSc小鼠模型外周血、皮肤及肺组织表达增高,与皮肤/肺部炎症、纤维化病变密切正相关,并通过IL-17、IL-6等细胞因子参与SSc的发病。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的 观察不同类型乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者外周血T淋巴细胞亚群变化特点.方法 对我院2013年6-11月门诊及住院的200例乙肝患者和50例健康对照者采用流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测外周血淋巴细胞（CD45＋）、T淋巴细胞（CD45＋CD3＋、CD45＋CD3＋CD4＋、CD45＋CD3＋CD8＋）、B淋巴细胞（CD45＋CD3-CD19＋）、NK淋巴细胞（CD45＋CD3-CD16＋56＋）百分比和细胞绝对计数.结果 急性乙型肝炎组T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数较健康对照组显著升高（P＜0.01）.慢性乙型肝炎组、肝硬化组和肝衰竭组：T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数、CD4＋/CD8＋比值均较健康对照组降低,其中肝衰竭组＜肝硬化组＜慢性乙型肝炎组.慢性乙型肝炎组CD4＋淋巴细胞百分比较健康对照组显著降低（P＜0.01）.肝硬化组CD4＋淋巴细胞百分比较慢性乙型肝炎组显著降低（P＜0.01）,CD8＋T淋巴细胞百分比显著升高（P＜0.01）.肝衰竭组T淋巴细胞和CD4＋T淋巴细胞百分比较肝硬化组显著降低（P＜0.01）.结论 乙型肝炎患者CD4＋T淋巴细胞持续降低,与疾病病程发展密切相关.     

不同植被恢复措施下剖面根系与SOC的分布特征

根系是影响水土流失和土壤有机碳（SOC）变化的重要因素。在水土流失区,研究不同植被恢复措施下,根系生物量和土壤有机碳的分布特征对了解区域土壤碳循环具有重要意义。在水土流失严重的黄土丘陵沟壑区的燕沟小流域,选择地形条件类似的梁峁坡,采集了10种不同植被治理恢复措施下的剖面（0—100cm）根系和土壤样品,研究了根系生物量和SOC在剖面的分布特征。结果显示：不同治理措施下的SOC呈现出灌木〉乔木〉灌草〉草本的趋势,而根系生物量呈现出乔木〉灌木〉灌草〉草本的趋势;SOC和细根生物量都随土层深度的增加呈对数递减趋势,但同一土层SOC和细根生物量的分布不一致,且根系比SOC的分布浅。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17/Treg和Th1免疫失衡研究

目的：探讨Th17、Treg和Th1细胞免疫失衡在慢性乙型肝炎（CHB）发病中的作用。方法：采用荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Th17、Treg和Th1细胞的特异性转录因子RORC、Foxp3和T-bet的mRNA表达,ELISA分析CHB患者PBMCs培养上清液中白细胞介素（IL）-17、IL-21和血清IL-6、IL-1β的水平,PCR检测外周血HBV DNA;生化分析仪检测谷丙转氨酶（ALT）。结果：与正常对照组相比,CHB患者PBMCs中RORC mRNA、IL-17、IL-21水平明显升高（P〈0.01）;RORC mRNA与ALT呈正相关,与T-bet mRNA呈负相关;T-betmRNA与ALT呈负相关,外周血中IL-6、IL-1β水平也明显增高（P〈0.01）;Foxp3 mRNA与HBV DNA正相关。结论：Th17和Treg、Th1细胞免疫功能失衡与CHB病情密切相关。     

慢性阻塞性肺疾病稳定期患者和肺功能正常吸烟者外周血中Th17细胞的表达及意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者和肺功能正常吸烟者外周血中Th17细胞的表达及意义。方法选取不吸烟肺功能正常者(A组)、吸烟肺功能正常者(B组)、轻中度(C组)及重度(D组)COPD稳定期患者为研究对象。流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞的百分比,ELISA检测血浆及PBMC刺激培养液中白介素(IL)-17的水平。结果 B、C和D组外周血Th17细胞、IL-17及均PBMC刺激培养液中IL-17水平高于A组(P<0.01);C组和D组外周血Th17细胞和IL-17均高于B组(P<0.01);D组外周血及PBMC刺激培养液中IL-17水平均高于C组(P<0.01);D组PBMC刺激培养液中IL-17水平高于B组(P<0.01)。C、D组血浆及PBMC刺激培养液中IL-17水平与第一秒钟用力呼气容积(FEV1)/预计值之间呈负相关;各研究组外周血和PBMC刺激培养液中IL-17水平均与外周血Th17细胞水平呈正相关;所有吸烟者外周血Th17细胞水平与吸烟年数呈正相关,C、D组外周血Th17细胞水平与吸烟年数无相关性。结论 Th17细胞及IL-17在COPD稳定期患者和肺功能正常吸烟者外周血中表达增加。肺功能正常吸烟者外周血Th17细胞水平与吸烟年数相关;COPD稳定期患者外周血IL-17与FEV1/预计值呈负相关,Th17细胞与FEV1/预计值及吸烟年数无相关性。     

慢性乙型肝炎患者血清病毒标志和丙氨酸转氨酶与肝组织病理的相关性

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者血清病毒标志和丙氨酸转氨酶（ALT）与肝组织病理的关系。方法 检测133例CHB患者血清病毒标记物和肝功能,同时全部患者接受彩色B超引导下快速经皮肝穿刺,将患者按HBeAg、HBV-DNA阳性与否各分为4个组．对各组的肝组织炎症和纤维化程度进行比较。结果 所有患者肝组织学显示肝内均有炎症、坏死及不同程度的纤维化存在。血清ALT正常的患者,作肝脏活组织病理检查．仍有一部分肝内有不同程度的炎症及纤维化改变,有的甚至存在肝硬化;ALT异常、HBeAg阴性的CHB患者肝脏炎症和纤维化程度更严重。血清病毒复制的活跃程度与肝组织病理损害的程度不成正比。结论 单凭血清ALT升高、血清病毒复制活跃与否判断肝病活动性是不全面的,应将肝组织病理作为判断肝炎活动性和是否抗病毒治疗的主要依据。     

丙氨酸氨基转移酶持续正常的慢性乙肝感染者肝脏病理与临床相关性研究

目的分析丙氨酸氨基转移酶持续正常的慢性乙肝患者组织学改变情况。方法纳入201例丙氨酸氨基转移酶酶持续正常的慢性乙型肝炎患者,对肝组织学改变是否同HBeAg状态、HBV-DNA复制水平以及年龄存在相关性进行回顾性分析。结果在纳入的201例患者中,51.4%的患者炎症活动度≥G2,50.5%患者纤维化分期≥S2,HBeAg阴性患者较HBeAg阳性患者更易于发生显著的肝脏纤维化改变,HBV-DNA水平与肝组织炎症和纤维化程度无关,年龄与肝纤维化程度相关。结论 ALT持续正常慢性HBV感染者存在不同程度肝脏组织学改变,特别是年龄>40岁、HBeAg阴性且病毒复制活跃的感染者,更需密切观察肝脏病变改变情况。     

急性哮喘患者外周血中Th17细胞的变化及其意义

目的:探讨哮喘急性发作期患者外周血中Th17细胞的变化及其与哮喘严重程度的关系.方法:选取轻度急性哮喘患者、重度急性哮喘患者和健康对照者各10名.从血清单个核细胞中分离T淋巴细胞,流式细胞仪检测阳性Th17细胞率,分析其与哮喘严重程度的关系.结果:轻度急性哮喘组和重度急性哮喘组外周血阳性Th17细胞均较健康对照组增高(P＜0.05),而重度哮喘组高于轻度哮喘组(P＜0.05).重度哮喘组外周血IL-17水平明显高于轻度哮喘组和健康对照组(P＜0.05).外周血中Th17阳性细胞数与急性哮喘严重程度呈正相关(r=0.869,P＜0.05).结论:急性哮喘患者外周血Th17细胞表达增加,且与其病情的严重程度呈正相关.