人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用的研究

目的　探讨人参单体皂甙Rh2对体外培养的人喉癌细胞株Hep - 2的抗增殖作用及其作用机制。方法　采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)实验、流式细胞技术及免疫组织化学S -ABC法分别检测人参单体皂甙Rh2对喉癌细胞株Hep - 2的增殖、细胞周期的影响。 结果　 (1)人参单体皂甙Rh2可明显抑制Hep - 2细胞的生长 ,并呈剂量、时间依赖性作用。 (2 )人参单体皂甙Rh2 (30 μg/ml)处理细胞 2 4h :G1期细胞由 6 0 0 9%增加至6 8 86 % (P <0 0 1) ,S期细胞由 18 89%减少至 12 30 % (P <0 0 1) ,G2 /M期细胞及凋亡细胞无明显变化 (P>0 0 5 ) ,细胞阻滞于G1期。结论　人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep - 2具有明显的生长抑制作用 ,并可导致其G1期细胞周期阻滞。G1期细胞周期阻滞可能是人参单体皂甙Rh2抗肿瘤作用的机制之一     

三氧化二砷与人参皂甙Rg3联合对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移能力的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)和人参皂甙Rg3(ginsenoside Rg3)联合运用对人肝癌SMMC-7721细胞黏附侵袭转移能力的影响以及与单独运用的差异。方法采用MTT法观察经As2O3、人参皂甙Rg3单独与联合作用后人肝癌SMMC-7721细胞对基底膜黏附能力的影响;Transwell膜侵袭系统观察As2O3与人参皂甙Rg3单独与联合作用后SMMC-7721细胞游走与穿透基底膜能力的影响。结果As2O3和人参皂甙Rg3单独与联合应用均能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞与Marigel的黏附,抑制细胞游走与穿透基底膜的能力(P<0.05),其联合抑制作用优于单独运用(P<0.05)。结论As2O3和人参皂甙Rg3均有抗肿瘤侵袭转移作用,两者联合可增强抑制效应。     

人参皂甙Rg1通过P38信号通路影响帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX-2的表达

目的 研究P38信号通路在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中对环氧合酶-2(COX-2)的表达调控作用,以探讨导致多巴胺(DA)能神经元变性失活的可能机制,以及人参皂甙Rg1对P38信号通路的影响和对多巴胺神经元的保护作用.方法 采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型.用免疫组织化学和免疫蛋白印记法,观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH),COX-2,前列腺素E2(PGE2)以及磷酸化P38(p-P38)的表达变化;并观察给予人参皂甙Rg1对上述变化的影响.结果 与对照组小鼠相比,模型组小鼠出现典型PD症状,在MPTP第3次注射后6 h,黑质区p-P38,COX-2,PGE2阳性细胞显著增加(P＜0.01).在MPTP第5次注射后24 h,黑质区TH阳性神经元显著丢失60%(P＜0.01);经人参皂甙Rg1处理后,模型小鼠PD症状减轻,与模型组比较,在MPTP第3次注射后6 h,黑质区p-P38,COX-2,PGE2阳性细胞明显减少(P＜0.01),在MPTP第5次注射后24 h,TH阳性细胞数较对照组仅下降30%.结论 P38通路在亚急性PD模型早期对黑质COX-2表达可能起重要调控作用:人参皂甙Rg1可影响P38信号通路及COX-2的表达而对小鼠多巴胺神经元起到一定保护作用.     

H_(22)肝癌小鼠择时服用人参皂甙抗氧化及免疫功能的实验研究

目的:观测择时服用人参皂甙对肝癌小鼠抗氧化能力及免疫功能方面的影响。方法:采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型,分别于卯、酉时用药,检测肿瘤内总抗氧化能力、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶(SOD)、血清IL-2、TNFα、VEGF、外周血白细胞数、脾脏及胸腺指数等指标。结果:①人参皂甙卯时用药肿瘤组织中的总抗氧化能力显著降低,SOD浓度显著升高,有显著性差异。②与模型组相比,人参皂甙可降低肝癌小鼠的血清IL-2、TNF-α和VEGF的含量,有显著性差异(P<0.05),但卯时组与酉时组之间无显著性差异(P>0.05)。③人参皂甙可使外周白细胞数升高,脾脏重量增加,有显著性差异(P<0.05),与用药时间无相关性(P>0.05),对胸腺重量无明显增重作用(P>0.05)。结论:人参皂甙可降低H22肝癌小鼠肿瘤组织的总抗氧化能力,与用药时间不同有相关趋势,并抑制机体的体液免疫功能,增强细胞免疫功能,与时间无相关性。     

人参皂甙对中分子物质骨髓红系细胞毒性作用的影响

目的 探讨人参皂甙对中分子物质（Middle Molecular Substance,MMS)抑制骨髓红系细胞增殖，破坏红系细胞结构作用的影响。方法 在正常骨髓红细胞体外培养体系中加入MMSⅢ，建立病理模型，分别加入人参皂甙、红细胞生成系（Epo)、Epo 人参皂甙，观察不同处理方式对处理DNA合成及细胞形态的影响。结果 无Epo存在的情况下，人参皂甙对受MMSⅢ抑制的骨髓红系细胞^H-TdR掺入量无明显增加；有Epo存在的条件下，人参皂甙可显著增加受MMSⅢ抑制的骨髓红系细胞^H-TdR掺入量（P＜0．01）；人参皂甙对MMSⅢ导致的骨髓红系细胞肿胀和溶解有明显缓解作用。结论 人参皂甙有协同Epo拮抗MMSⅢ抑制骨髓红系细胞增殖和破坏红系细胞结构的作用。     

核因子NF-κB对帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX-2表达的影响

目的:研究核因子(NF-κB)在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中的影响和对环氧合酶-2(COX-2)的表达调控作用以及人参皂甙Rgl对其的影响,探讨导致多巴胺(DA)能神经元变性失活的可能机制.方法:采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,用免疫组织化学法和免疫蛋白印迹法观察小鼠黑质区酪氨酸羟化酶(TH),COX-2,前列腺素E2(prostaglandine2,PGE2)以及NF-κB的表达变化;并观察给予人参皂甙Rgl对上述变化的影响.结果:与对照组小鼠相比,模型组小鼠出现典型PD症状,在MPTP第5次注射后24 h,黑质区NF-κB(34.6±5.6),COX-2(28.2±5.1),PGE2(36.1±4.2)阳性细胞较对照组NF-κB(2.5±0.8),COX-2(1.0±0.3),PC-E2(3.2±0.4)阳性细胞显著增加(P<0.01),TH阳性神经元显著丢失60%(P<0.01);经人参皂甙Rgl处理后,模型组小鼠PD症状减轻,与模型组比较,黑质区NF-κB(4.9±2.1),COX-2(1.9±0.7),PGE2(4.6±0.3)阳性细胞明显减少(P<0.01),TH阳性细胞数较对照组仅下降32%.结论:核因子NF-κB在亚急性PD模型早期对黑质COX-2表达中可能起莺要调控作用;人参皂甙Rg1可能影响NF-κB及COX-2表达而对小鼠多巴胺神经元起一定保护作用.     

人参皂甙Rg3联合5-氟尿嘧啶对肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的 观察人参皂甙Rg3联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及对肿瘤血管生成的影响.方法 采用人肝癌HepG2细胞接种于40只雌性裸鼠,随机分为4组,分别以人参皂甙Rg3、5-Fu、人参皂甙Rg3联合5-Fu及生理盐水处置28 d,记录各组小鼠治疗期间体重及移植瘤的体积并计算抑制率,并计数肿瘤内微血管密度(MVD).结果 人参皂甙Rg3组、5-Fu组及联合组对原位种植肿瘤的生长有明显的抑制作用,联合治疗组抑制肿瘤生长的作用明显优于各单独治疗组;且Rg3及联合治疗组MVD也明显低于5-Fu组及对照组.结论 人参皂甙Rg3与5-Fu联合应用能抑制人移植性肝癌的生长,降低肿瘤内的MVD,抑制肝癌肿瘤血管生成.     

人参皂甙Rb1抑制副溶血弧菌诱导的Caco2细胞的MAPKs通路

目的探讨人参皂甙对副溶血性弧菌引起的肠炎的治疗作用。方法分别用副溶血性弧菌、副溶血性弧菌加人参皂甙Rb1刺激人结肠癌细胞(Caco2)4 h后,提取细胞总蛋白,Western blotting检测其MAPKs信号通路活化情况,另用PBS作用于Caco2细胞作为阴性对照。结果经副溶血性弧菌刺激后,Caco2细胞内ERK1/2磷酸化作用明显加强,并随副溶血性弧菌剂量增加而增强,p38在该菌作用下也有明显的磷酸化;而人参皂甙Rb1能抑制该菌诱导的ERK1/2和p38信号通路的活化作用。结论人参皂甙Rb1抑制副溶血性弧菌诱导的Caco2细胞MAPKs中ERK1/2和p38信号通路的活化作用,从而可能缓解其下游细胞因子引起的炎症作用。     

人参皂甙对肝癌Bel-7402细胞侵袭和转移能力的影响

[目的]探讨人参皂甙Rh2对肝癌Bel-7402细胞侵袭和迁移的影响及其机制.[方法]采用MTT法检测人参皂甙Rh2对肝癌Bel-7402细胞活力的影响;Transwell小室测定侵袭和迁移能力;应用Western blot方法检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白水平的变化.[结果]给予人参皂甙Rh2处理后肝癌Bel-7402细胞生长受到抑制,细胞侵袭和迁移能力明显降低;肝癌Bel-7402细胞MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平均明显减弱.[结论]人参皂甙Rh2可抑制肝癌Bel-7402细胞的侵袭和转移能力,其机制可能与降低MMP-2和MMP-9蛋白表达水平有关.     

人参皂甙对中分子物质抑制红细胞ATP酶活性作用的影响

目的探讨人参皂甙对中分子物质(MiddleMolecularSubstance,MMS)抑制红细胞ATP酶活性作用的影响.方法采用健康SD大鼠红细胞体外孵育,在孵育体系中分别加入MMSⅢ和不同浓度的人参皂甙,观察人参皂甙对受MMSⅢ影响的红细胞Na+、K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的作用.结果人参皂甙可增强受MMSⅢ抑制的红细胞Ca2+-ATP酶活性(P<0.01),但对Na+、K+-ATP酶活性未发现有明显作用(P>0.05).结论人参皂甙可通过改善Ca2+-ATP酶活性抑制MMSⅢ对红系细胞的损伤作用.     

细胞癌基因在人脑胚胎发育过程中的表达

作者用分子杂交技术观察了正常4～7月龄胎儿脑的各个部位和正常人脑胚胎发育过程中癌基因的表达。结果显示:多数细胞癌基因的表达水平在小脑和枕叶较高,在颞叶的表达水平较低;人脑组织胚胎发育过程中,c-myc、L-myc、N-myc基因的表达情况类似;erbB基因在胚胎期脑中均有较强的表达,而在正常成人脑中未见其表达;Ha-ras、c-fos基因在人脑胚胎发育的中后期表达水平较高;mos基因在新生儿脑中表达最强。研究结果提示:这7种癌基因可能在人脑的正常胚胎发育过程中起重要作用。     

The expression of oncogenes in the development of human brain]

Seven oncogenes (c-myc, L-myc, N-myc, v-erbB, c-fos, Ha-ras and mos) were used as the probe to detect the total RNA of every part (cerebellum, temporal folium, frontal folium and occipital folium) in human brain from 2 cases of 6 mon fetus and the total RNA in fetal development (4 mon, 5 mon, 6 mon, 7 mon, and newborn) of human brain tissue by RNA dot hybridization analysis. The results showed that most oncogenes were expressed at high level in cerebellum and occipital folium of 6 mon fetus and at low level in temporal folium; there was similar expression of c-myc, L-myc and N-myc in fetal development of human brain tissue, and the highest level was in the 5 mon fetal brain. There was no expression of erbB gene in normal human brain. The high level expression of Ha-ras and c-fos genes was in the middle and later stages of fetal development. These results suggested that c-myc, L-myc, N-myc, erbB, Ha-ras, c-fos and mos genes might play an important role in the fetal development of human brain.     

癌基因c-myc、Ha-ras在人肺鳞状细胞癌中的增强表达

本文初步研究了人肺鳞癌中c-myc及Ha-ras癌基因的表达。斑点杂交自显影密度分析的结果表明,人肺鳞癌总RNA中Ha-ras及c-myc基因的mRNA分别是正常人肺组织的32倍及10倍。这两种基因表达的增加在人肺恶性变中的作用,尚有待深入研究。     

胰岛素对CWE纯系小鼠脑组织细胞癌基因表达的影响

作者给正常GWE小鼠皮下注射胰岛素后,利用斑点杂交法观察小鼠脑组织中c-myc、c-fos、Ha-ras、erb B基因的表达情况。结果表明:注射胰岛素后小鼠脑中c-myc、c-fos基因的表达量增加,于注射后2小时达最高峰,以后其表达逐渐下降,直至注射后24小时降至最低;注射胰岛素后小鼠脑中Ha-ras基因的表达似有下降,而erb B基因表达量下降。以上结果提示:c-myc、c-fos、Ha-ras、erb B等细胞癌基因与脑细胞生长调控有一定的关系,其产物可能具有外源性生长刺激信号的细胞内传递作用。     

RNA干扰抑制c-myc基因表达对D341细胞增殖的影响

目的探讨应用小干扰RNA（siRNA）技术抑制髓母细胞瘤D341细胞株的c-myc基因对D341细胞的生长、细胞周期及凋亡的变化。方法制备特异性针对c-myc基因的siRNA,转染D341细胞,实时定量RT-PCR、Western blot检测c-myc基因表达情况,流式细胞仪进行细胞周期及凋亡检测。结果siRNA转染D341细胞后,c-myc基因表达在转染后24h抑制效率最高,c-myc蛋白在48h抑制效率最高,并随siRNA浓度的增大,沉默c-myc基因效率增高。RNA干扰抑制D341细胞c-myc基因后,细胞生长停滞于G1期。结论针对c-myc基因的siRNA对D341细胞c-mycmRNA及蛋白有明显抑制作用,细胞生长受到抑制,有望成为髓母细胞瘤的新的治疗途径。     

大鼠肝癌变过程中细胞癌基因的表达

利用RNA-DNA杂交技术观察到:(1)在二乙基亚硝胺(DENA)诱发大鼠肝癌过程中,含有增生结节肝和肝细胞癌肝中c-Ha-ras、c-Ki-ras、N-ras和c-fos癌基因的表达都较正常肝高,而c-myc的表达无明显改变。(2)在两种不同诱发肝癌起始/促癌模型的起始阶段,c-myc的表达显著增高。在2-乙酰氨基芴作用下,N-ras表达的增高非常显著。c-myc和N-ras的表达似有协同作用。在促癌阶段,c-myc和N-ras的表达接近正常。(3)在起始和促癌过程中,c-fos的表达都显著降低,c-Ha-ras和c-Ki-ras表达变化不显著。对这些结果的意义作了初步讨论。     

Inhibitory effects of jian pi li qi Chinese medicinal herbs on diethylnitrosamine (DEN)-induced hepatocarcinogenesis in rats

Chinese medicinal herbs with Jian Pi Li Qi action were tested for their effects in inhibiting the precancerous lesions, gamma-GT positive hepatocellular foci and the expression of oncogenes (N-ras, Ha-ras) in male SD rats. The rats were given one i.p. dose of initiator DEN within 24 hours after 2/3 partial hepatectomy. The livers of sacrificed rats were processed to gamma-GT histochemical staining and measuring of oncogenic expression. The results of these two parameters showed that Chinese medicinal herbs with Jian Pi Li Qi action are effective in inhibiting the precursory lesions of liver cancer in rats.     

七种癌基因在HL-60-AR细胞中的表达及药物诱导分化后的变化

用Northern杂交和斑点杂交方法分别探测HL-60-AR细胞中七种癌基因的表达及其在诱导分化后的变化。结果表明,在HL-60-AR细胞中c-myc基因高度活跃表达,H-ras基因次之,fos、sis、abl和erb-B基因表达微弱,而K-ras基因表达极微弱或检测不出。当HL-60-AR细胞被药物诱导成熟分化后,c-myc基因表达大为下降,H-ras、fos、sis、abl和erb-B基因表达亦相应降低,而K-ras的表达则无变化。对诱导分化前后c-myc基因拷贝数的比较分析表明,c-myc基因表达下降可能主要发生在基因的转录或/和转录后调节水平。     

BEL7402人肝癌细胞中癌基因的表达及丁酸钠对癌基因表达的影响

With dot blot and cytoplasmic hybridization techniques we found that the c-Ha-ras, c-Ki-ras, c-N-ras, c-myc and c-fos oncogenes were over-expressed in human hepatocellular carcinoma cell line BEL 7402 cells. The mRNA expression of c-Ha-ras, c-Ki-ras, c-N-ras and c-myc oncogenes could be inhibited by 2 mmol/L sodium butyrate treatment, but this had no effect on the expression of c-fos. However, the mRNA expression of c-Ha-ras, c-N-Ras and c-myc oncogenes was enhanced by 4 mmol/L sodium butyrate treatment, while the expression of c-Ki-ras and c-fos remained unchanged. No significant effect on the expression of carbamyl phosphate synthetase I, a tissue-specific enzyme associated with the differentiation of liver cells, was observed by 2 mmol/L or 4 mmol/L sodium butyrate treatment of the hepatoma cells.