姜黄素对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠内皮素-1水平的影响

目的探讨姜黄素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法将60只成年健康Wistar大鼠采用随机数字表法分成6组,即假手术组、缺血30 min组、再灌注1、2 h组、姜黄素+再灌注1、2 h组,每组10只。应用放射免疫方法检测血清内皮素-1(ET-1)水平;反转录-聚合酶链反应及蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织ET-1 mRNA及蛋白表达水平。结果与假手术组比较,缺血30 min组、再灌注1、2 h组、姜黄素+再灌注1、2 h组大鼠血清ET-1和心肌组织ET-1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与缺血30 min组比较,再灌注1、2 h组、姜黄素+再灌注1、2 h组大鼠血清ET-1和心肌组织ET-1 mRNA及蛋白表达水平显著升高,且再灌注2 h组显著高于再灌注1 h组(P<0.05);姜黄素+再灌注1、2 h组较再灌注2 h组大鼠血清ET-1和心肌组织ET-1 mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结论 ET-1在急性心肌缺血再灌注损伤缺血和再灌注阶段表达上调,姜黄素预处理可下调其表达。     

蕨麻正丁醇提取物对卵巢缺血再灌注损伤大鼠内皮素-1的影响

目的探讨蕨麻正丁醇(Pa)对急性卵巢缺血再灌注损伤大鼠血清及卵巢组织中内皮素-1(ET-1)的影响。方法 Wistar雌性大鼠60只,随机分为6组:假手术组(C组)、缺血24 h组(I24h)、缺血再灌注24 h组(R24h组)、缺血再灌注48 h组(R48h组)、给予Pa提取物预处理+缺血再灌注24 h组(Pa+R24h组)和Pa提取物预处理+缺血再灌注48 h组(Pa+R48h组)。酶联免疫吸附试验测定法检测各组血清ET-1水平;反转录聚合酶链反应、Western blot法检测各组大鼠卵巢组织中ET-1 mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,I24h组、R24h组和R48h组大鼠血清ET-1水平、卵巢组织中ET-1 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05);与I24h组比较,R24h组、R48h组大鼠血清ET-1水平、卵巢组织中ET-1 mRNA和蛋白表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。而Pa+R24h组和Pa+R48h组大鼠血清ET-1水平、卵巢组织中ET-1 mRNA和蛋白表达与R24h组、R48h组比较显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ET-1在大鼠卵巢缺血再灌注损伤过程中表达上调,Pa提取物进行干预可降低ET-1的表达。     

脑缺血再灌注损伤大鼠降钙素基因相关肽水平的变化及蕨麻正丁醇提取物对其保护作用

目的探讨蕨麻(Pa)正丁醇提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠60只,采用随机数字表法分为6组,即假手术组(C组)、缺血组(I组)、缺血再灌注1 h组(R1h组)、缺血再灌注2 h组(R2h组)、Pa正丁醇提取物预处理后缺血再灌注1 h组(Pa+R1h组)及Pa正丁醇提取物预处理后缺血再灌注2 h组(Pa+R2h组)。放射免疫法测量各组血清内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平;反转录-聚合酶链反应(RTPCR)、Western blot检测各组脑组织中CGRP mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,I组、R1h组、R2h组血清ET-1水平升高(P<0.05),血清CGRP、脑CGRP mRNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05)。与I组比较,R1h组、R2h组血清ET-1水平升高(P<0.05),血清CGRP水平、脑组织CGRP mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);Pa+R1h组较I组的血清ET-1水平升高、脑组织CGRP mRNA水平下降(P<0.05);Pa+R2h组较I组的血清ET-1水平升高、脑组织CGRP mRNA及蛋白水平下降(P<0.05)。与R1h组、R2h组比较,Pa+R1h组和Pa+R2h组血清ET-1水平下降,血清CGRP、脑CGRP mRNA及蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结论大鼠脑缺血再灌注损伤过程中ET-1表达上调,CGRP表达下降,Pa正丁醇提取物进行干预可降低ET-1、上调CGRP的表达。     

缺血后处理对抗肾脏缺血-再灌注大鼠的抗氧化损伤的作用

目的研究缺血后处理减轻大鼠肾脏缺血-再灌注氧化损伤的作用.方法大鼠右肾切除,左肾45min缺血再灌注24h,给予6个循环10-s/10-s再灌/停灌缺血后处理方案干预后,测定血肌酐和尿素氮水平评价肾功能;HE染色观察肾组织病理形态学变化;分光分析法测定肾组织丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;采用Real Time RT-PCR和Western blotting法分别测定SOD mRNA和蛋白表达情况.结果缺血后处理能明显减轻肾组织病理形态学损伤和降低血肌酐和尿素氮水平（P〈0.05）,并减少肾组织MDA含量（P〈0.05）,升高SOD活性、mRNA和蛋白表达（P〈0.05）.结论缺血后处理可减轻肾脏缺血-再灌注损伤,其保护作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、升高组织抗氧化物酶的活性、mRNA和蛋白表达,提高肾组织的抗氧化能力有关.     

蕨麻正丁醇提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤内皮素-1的影响

目的探讨蕨麻(Pa)正丁醇提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠60只随机分为6组:对照组(C组)、缺血组(I组)、缺血再灌注1 h组(R1h组)、缺血再灌注2 h组(R2h组)、蕨麻正丁醇提取物+缺血再灌注1 h组(Pa+R1h组)和蕨麻正丁醇提取物+缺血再灌注2 h组(Pa+R2h组)。放射免疫法测量各组血清内皮素-1(ET-1)水平;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western Blot)检测各组心肌组织中ET-1mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,I组的血清ET-1水平、心肌ET-1蛋白水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。R1h组、R2h组的血清ET-1水平、心肌ET-1 mRNA和蛋白表达均高于C组和I组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pa+R1h组和Pa+R2h组的血清ET-1水平、心肌ET-1 mRNA和蛋白表达与R1h组、R2h组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ET-1在大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中表达上调,蕨麻正丁醇提取物可降低ET-1的表达。     

CNP及其受体NPR-B在缺血再灌注损伤模型大鼠肾组织中的表达

[目的]观察CNP及其受体NPR-B在缺血再灌注损伤(IR)模型大鼠肾组织中的表达情况.[方法]取雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注0 h组(IR0 h)、1 h组(IR1 h)、2 h组(IR2 h)及4 h组(IR4 h).摘除各组大鼠左侧肾脏,Sham组分离右肾动静脉但不夹闭,IR各组分离右肾动静脉夹闭45 min后取下血管夹恢复肾脏血液供应,建立肾脏IR模型;各组大鼠到达各自时间段立即采集血液测定血清肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)值,取各组大鼠肾组织观察NPR-B的分布及CNP和NPR-B mRNA表达情况.[结果]与Sham组比较,IR各组Cr,BUN水平明显升高(P<0.05),且随着再灌注时间的延长升高更为明显;NPR-B分布明显增多(P<0.05),CNP mRNA,NPR-B mRNA表达均显著升高(P<0.05),随着缺血再灌注时间的延长CNP mRNA表达亦随之增加,缺血再灌注4 h时表达水平最高.[结论]肾组织中CNP及NPR-B表达上调的机制认为可能是IR的代偿性保护作用.     

胡黄连提取物对缺血再灌注肾脏黏附分子表达的影响

目的研究胡黄连提取物对缺血再灌注肾脏细胞黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)表达的影响。方法雄性SD大鼠分为假手术组、手术对照组、胡黄连提取物不同剂量给药组,采用切除右肾无创动脉夹夹闭左肾动脉60 min再灌注72 h的方法制备急性缺血再灌注(I/R)肾损伤大鼠模型,生化法测定血清肌酐、尿肌酐,并结合尿量计算内生肌酐清除率(Ccr),光镜电镜观察肾组织病理变化并肾小管计分,免疫组化观察肾脏ICAM-1,MCP-1的表达,实时定量荧光RT-PCR测定肾组织ICAM-1,MCP-1 mRNA表达。结果肾脏I/R损伤时大鼠Ccr明显降低,肾脏病理变化明显,肾脏ICAM-1,MCP-1表达明显,肾组织ICAM-1,MCP-1 mR-NA表达增加;与手术对照组相比,各胡黄连提取物组肾脏ICAM-1,MCP-1表达减弱,肾组织ICAM-1,MCP-1mRNA表达降低,肾小管计分降低,Ccr升高。结论胡黄连提取物可以抑制缺血再灌注损伤后肾脏ICAM-1,MCP-1表达,改善肾功能。     

单核细胞趋化蛋白-1在大鼠肾缺血再灌注中的表达及干预

目的：探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在大鼠肾脏缺血再灌注中的表达及其药物干预。方法：雄性Wistar大鼠60只,随机分为6组。夹闭肾动脉建立大鼠肾缺血再灌注模型,在再灌注不同时点检测肾组织MCP-1的含量、血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平;光镜下观察肾脏的病理改变并进行肾小管评分;同时,观察药物洛伐他汀对上述指标变化的影响。结果：正常情况下,肾脏中MCP-1少量表达,缺血再灌注0h（单纯缺血）即可观察到肾组织中MCP-1表达升高,至4 h达到峰值,随后其水平逐渐下降。应用洛伐他汀干预后,肾组织MCP-1蛋白表达减少（P〈0.01）;血Cr、BUN比单纯缺血再灌注4 h组降低（均P〈0.05）;病理组织学肾小管评分降低（P〈0.01）。结论：缺血再灌注后肾组织中MCP-1表达升高,提示MCP-1参与肾损伤的发生;洛伐他汀可能通过减少MCP-1的表达抑制炎症反应过程,减轻肾组织损伤。     

大蒜素对大鼠肾缺血再灌注氧化应激损伤保护作用的研究

目的 研究大蒜素对大鼠肾缺血再灌注后氧化应激损伤的保护作用。方法 通过夹闭双侧肾蒂血管45min的方法建立肾缺血再灌注损伤大鼠模型,造模前7天分别给予不同剂量大蒜素（5、10、20mg/kg）和银杏叶提取物（100mg/kg）进行预处理,同时设假手术组和模型组;再灌注6h后计算肾脏指数,生化分析法测定肾功能指标（BUN、SCr、UA）,苏木精-伊红（HE）染色法观察肾脏组织形态结构改变,TUNEL染色法观察细胞凋亡状况;RT-PCR法测定Bax mRNA、bcl-2 mRNA表达;测定肾脏组织中抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性和丙二醛（MDA）含量;Western blot法检测NF-κB蛋白表达。结果 经大蒜素预处理能够显降低肾缺血再灌注损伤大鼠肾脏指数,降低血清中BUN、SCr、UA含量,改善肾脏组织病变和细胞凋亡状况,下调肾脏组织中Bax mRNA表达且上调bcl-2mRNA表达、显著降低Bax/bcl-2比值,提高抗氧化酶（SOD、GSH-Px、CAT）活性并显著降低MDA含量,显著下调NF-κB蛋白表达,上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论 大蒜素可能通过抑制氧化应激损伤而对大鼠肾缺血再灌注大鼠具有一定的保护作用。     

他克莫司改善肾缺血再灌注损伤时对Bcl-2蛋白、TNF-a表达的影响

目的通过建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,研究他克莫司改善肾缺血再灌注损伤的作用以及对Bcl-2蛋白、TNF-a表达的影响。方法随机选健康Wistar雄性大鼠60只,分为三组：假手术组、对照组、实验组,每组20只。在到达设定的不同再灌注时间点取血及肾脏标本,全自动生化分析仪测定血清肌酐（scr）、血清尿素氮（BUN）;酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子（TNF-a）含量;免疫组化检测肾组织B细胞淋巴瘤（Bcl-2）;采用HE染色分析肾组织病理损伤程度。结果 （1）实验组和对照组的血清scr、BUN在相应再灌注各时间点的值均高于假手术组;缺血45 min,再灌注2、6 h和24 h时,实验组血清scr、BUN的水平显著低于对照组（P〈0.05）。（2）对照组,缺血45 min,再灌注0.5、2、6 h及24 h随着再灌注时间的延长血清TNF-a含量明显升高;在再灌注的各时间点,实验组的血清TNF-a含量水平均显著低于对照组（P〈0.05）。（3）各组大鼠肾组织中均有Bcl-2表达,主要在肾的远曲小管、近曲小管表达,但免疫反应强度不同。实验组在再灌注的各时间点均高于对照组,并在再灌注的2、6、24 h的Bcl-2免疫反应强度显著高于对照组（P〈0.05）。（4）肾组织的病理变化：在光镜下,实验组再灌注的各时间点肾小管及肾小管上皮细胞病变程度较对照组明显减轻,仅出现肾小管扩张、肾小管上皮细胞肿胀、肾间质血管扩张充血;假手术组肾小管上皮细胞未见明显改变。结论他克莫司具有改善大鼠肾缺血再灌注损伤的作用。他克莫司可能是通过降低血清TNF-α表达水平达到改善大鼠肾缺血再灌注损伤,通过对肾脏Bcl-2蛋白表达增加,抑制肾细胞的凋亡,达到改善大鼠肾缺血再灌注损伤。     

中介素1-47对大鼠缺血心脏心功能的影响

目的:研究中介素1-47对大鼠急性心肌缺血和离体缺血再灌注损伤的保护作用。方法:利用皮下注射异丙基肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌缺血损伤和离体心脏缺血再灌注损伤大鼠模型,观察中介素1-47对缺血损伤心脏心功能的影响。结果:与正常对照组比较,ISO组大鼠LVESP、MAP、+LVdp/dtm ax和-LVdp/dtm ax分别低41.1%、19.7%、20%和25.2%(均P<0.01),左室舒张末压(LVEDP)增加了517%(P<0.01)。与单纯ISO组比较,低剂量中介素1-47组大鼠的LVESP、MAP、+LVdp/dtm ax和-LVdp/dtm ax分别高8.9%、19%、8.7%和24%,LV-EDP降低52.8%(均P<0.01);高剂量中介素1-47(20 nmol.kg-1.d-1)治疗组,大鼠的±LVdp/dtm ax分别高26.6%和47.4%,LVEDP降低67%(均P<0.01)。心脏缺血损伤后各浓度的中介素1-47再灌注均可显著改善心脏功能。结论:中介素1-47对心肌缺血损伤具有明显的保护作用。     

Apocynin对缺血再灌注后急性肾损伤的保护作用

目的 观察Apocynin对急性缺血再灌注肾损伤（I/R）大鼠模型的保护作用并探讨其机制.方法 采用雄性SD大鼠制备急性缺血再灌注肾损伤模型,用不同浓度（5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg） Apocynin干预,同时设定假手术组、手术对照组,生化法测定血肌酐值,光镜下观察肾组织形态学变化并进行肾小管病变计分,免疫组织化学检测肾组织单核巨噬细胞计数,硫代巴比妥酸比色法测定肾组织匀浆丙二醛（MDA）,改良DTNB显色法测定血清谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）,ELISA法测定血清白介素1（IL-1）.结果 与假手术组相比,手术对照组血肌酐明显升高（P＜0.05）,肾小管计分明显升高（P＜0.05）,肾组织巨噬细胞数目增加（P＜0.05）,血清MDA、IL-1升高（P＜0.05）,GPx下降（P＜0.05）;与手术对照组相比,各Apocynin干预组血肌酐下降（P＜0.05）,肾小管计分降低（P＜0.05）,肾组织巨噬细胞数目减少（P＜0.05）,血清MDA降低（P＜0.05）,IL-1降低（P＜0.05）,GPx含量升高（P＜0.05）.结论 Apocynin可以降低急性缺血再灌注肾组织氧化应激水平,抑制炎症反应,减轻肾功能损伤程度.     

L-瓜氨酸预处理对大鼠缺血／再灌注损伤肾的功能及蛋白表达影响

目的研究L-瓜氨酸对大鼠缺血／再灌注（ischemia—reperfusion,I／R）损伤肾组织的保护作用机制。方法18只雄性SD大鼠分为假手术组（Sham组）、模型组（I／R组）和L-瓜氨酸组（L—Cit组）,每组6只。采用夹闭双肾动脉45min后再灌注制备肾L／R损伤模型。L—Cit组于造模前连续7天灌胃给予L-瓜氨酸600mg／kg。于再灌注3h活体摘取双肾,并行腹主动脉穿刺抽血2ml。检测各组大鼠血清肌酐、尿素氮,Western blot检测肾组织ERK1／2、p38MAPK和Akt的磷酸化表达。结果与Sham组相比,I／R组大鼠血清肌酐、尿素氮水平升高,肾组织ERK1／2和Akt的磷酸化表达明显降低,p38MAPK的磷酸化表达明显增高;L—Cit组与I／R组相比,ERK1／2和Akt的磷酸化表达明显增高,而p38MAPK的磷酸化表达明显降低,血清尿素氮、肌酐水平明显降低。结论L-瓜氨酸可能通过激活ERK1／2和Akt信号通路、抑制p38MAPK信号来保护大鼠肾缺血／再灌注损伤。     

参附注射液对肾缺血再灌注损伤大鼠P38MAPK、TNF-α表达的影响

目的:探讨参附注射液(SF)对肾缺血再灌注损伤大鼠P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响。方法:采用切除右肾,无创动脉夹夹闭左肾肾蒂45 min,再灌注2 h制作在体肾缺血再灌注损伤模型。动物随机分为3组:预处理组、缺血再灌注组和对照组。免疫组织化学检测肾组织P38 MAPK蛋白含量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肾组织TNF-α的表达。结果:预处理组与缺血再灌注组相比,肾脏病理损伤明显减轻,P38 MAPK、TNF-α蛋白含量显著降低(均为P<0.05)。结论:SF可能通过抑制P38 MAPK的表达,从而下调TNF-α的表达,发挥其肾脏保护作用。     

The effect of quercetin, a bioflavonoid on ischemia/reperfusion induced renal injury in rats

There is increasing evidence to suggest that toxic oxygen radicals play a role in the pathogenesis of ischemia/reperfusion (I/R) injury in the kidney. This study was designed to investigate the effects of quercetin (Qr), a bioflavonoid in ischemia-reperfusion induced renal failure in rats. The effect of quercetin against the damage inflicted by reactive oxygen species (ROS) during renal I/R was investigated in Sprague-Dawley rats using histopathological and biochemical parameters. In one set of experiments, animals were unilaterally nephrectomized and subjected to 45 min of left renal pedicle occlusion, and in another set both renal pedicles were occluded for 45 min followed by 24 h of reperfusion. Quercetin (2 mg/kg, 30 mg/kg, i.p. and 100 mg/kg, p.o.) was administered 2 h prior to ischemia. At the end of the reperfusion period, rats were sacrificed. Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), reduced glutathione (GSH) levels, glutathione reductase (GR), catalase (CAT), and superoxide dismutase (SOD) activities were determined in renal tissue. Serum creatinine and blood urea nitrogen (BUN) concentrations were measured for the evaluation of renal function. Ischemic control animals demonstrated severe deterioration of renal function, renal morphology and a significant renal oxidative stress. Pretreatment of animals with quercetin (2 mg/kg and 30 mg/kg, i.p.) markedly attenuated renal dysfunction, morphological alterations, reduced elevated TBARS levels and restored the depleted renal antioxidant enzymes, whereas the (100 mg/kg, p.o.) dose of quercetin failed to revert the renal I/R induced changes. The findings imply that ROS play a causal role in I/R induced renal injury and quercetin exerts protective and deleterious effects in the kidney, depending upon the dose.     

依达拉奉对犬肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨依达拉奉对犬急性肾缺血再灌注损伤的影响及相关机制。方法:24只成年雄性杂种犬,分为3组(n=8):假手术组(S组);缺血再灌注组(I/R组);治疗组(Edaravone组)。在肾缺血60 min后完全恢复灌流。术后犬存活3 d,术前及术后1,2,3 d检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)浓度;检测肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)及髓过氧化物酶(MPO)含量;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测肾组织中凋亡细胞,计算细胞凋亡指数(AI);光镜下观察肾组织病理学改变。结果:Edaravone组与I/R组术后3天连续比较,血清Cr、BUN浓度有显著降低。Edaravone组与I/R组比较,SOD活性升高,MDA浓度降低,MPO下降,AI降低(P<0.05),病理损伤明显减轻。结论:依达拉奉能减轻肾缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻肾脂质过氧化反应和抑制细胞凋亡,减少炎症有关。     

新生大鼠肾脏缺血损伤对β1-整合素分布和表达的影响

目的探讨缺血损伤时β1-整合素在新生大鼠肾脏肾小管上皮细胞中表达的变化及其在组织中的定位.方法将24只新生SD大鼠随机分为缺血10 min组、缺血30 min组和对照组,每组各8只.钳夹缺血组大鼠左侧肾蒂,建立肾脏缺血动物模型.对照组不予钳夹.采用免疫荧光法观察新生大鼠肾小管上皮细胞β1-整合素的分布和表达.结果对照组β1-整合素主要分布在新生大鼠肾小管上皮细胞的基底侧,在肾小球也可见其染色.缺血10 min即可出现β1-整合素的断裂,并随缺血时间的延长,损伤更加明显.不同视野下计数出现断裂的肾小管数目,缺血10 min、30 min分别有23%、65%的肾小管有断裂现象,与对照组相比差异有显著性(P<0.05).不同缺血时段组间未观察到β1-整合素整合光密度值的变化(P>0.05).结论新生大鼠肾脏广泛分布着β1-整合素.缺血损伤可使β1-整合素出现断裂.它的这种病理改变可能是导致缺血损伤时肾小管上皮细胞极性消失和脱落的原因之一.