液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中利培酮的浓度

目的建立测定人血浆中利培酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法。方法以迪马C18反相柱(4.6 mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol.L-1甲酸铵(体积比90∶10),流速为1 mL.min-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(体积比4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测对利培酮(m/z411→191)和内标拉莫三嗪(m/z256→145)进行测定。结果利培酮的高(50μg.L-1)、中(25μg.L-1)、低(1μg.L-1)3个浓度的方法回收率均大于96%,提取回收率均大于85%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于10%;最低检测浓度为0.5μg.L-1;线性范围为:0.5~100μg.L-1,回归方程为F=55.9562ρ-0.3423,r=0.999(n=8)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

液相色谱-质谱技术测定大鼠血浆中L-NNA浓度

目的建立检测大鼠血浆中L-NNA浓度的液相色谱-质谱联用方法。方法采用Phenomenex Kromosil C18分析柱(4.6mm×250mm,5.0μm),以甲醇∶水溶液(10∶90)为流动相,电喷雾电离源,选择性离子监测质荷比(m/z)分别为:149.3(L-NNA)、218.2(D-苯甘氨酰胺),以D-苯甘氨酰胺为内标物,测定大鼠血浆中L-NNA的浓度。结果 L-NNA浓度在0.10～6.44mg/L范围内线性关系良好;最低检测限为24μg/L,最低定量限为80μg/L;血浆中L-NNA的回收率在85%以上,日内和日间的相对偏差(RSD)均10%。结论本方法快速、准确、灵敏,可用于大鼠血浆中L-NNA浓度的测定。     

HPLC-MS/MS法分离孟鲁司特顺式异构体及人血浆中孟鲁司特浓度的测定

目的建立高效液相色谱-质谱联用方法实现孟鲁司特原形药物与其顺式异构体的快速分离,并测定人血浆中孟鲁司特原形药物的浓度。方法采用菲罗门Luna Phenyl-Hexyl(5μm,4.6×250mm)色谱柱;柱温25℃;流动相为乙腈-甲醇-水-甲酸(58∶20∶22∶0.2);流速为1.4mL/min-1;通过液相色谱串联质谱,电喷雾离子源(ESI+),以选择反应监测(SRM)方式进行检测;检测离子为孟鲁司特m/z 585.9[M+H]+→421.9[M+H]+,那格列奈(内标)m/z 318.1[M+H]+→166.0[M+H]+。结果孟鲁司特的最低定量限为1.846ng/mL,线性范围为1.846～1107.6ng/mL。结论该方法简便、灵敏度高,可以用来进行孟鲁司特人体药动学和生物等效性的研究。     

正相HPLC-MS/MS测定人血浆中多奈哌齐对映体浓度

目的建立正相高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中多奈哌齐(DN)对映体的方法,并进行方法学验证。方法采用正己烷∶异丙醇(98∶2,V/V)作为萃取剂进行样品浓集,选用CHIRALCEL OJ-H手性柱(250mm×4.6mm,5μm)作分析柱,流动相为正己烷∶正丙醇∶二乙胺=60∶40∶0.1(V∶V∶V),流速为0.5mL/min,柱温为38℃。以多反应监测(MRM)方式进行定量检测,利多卡因为内标,按内标法定量。结果左旋DN(S-DN)、右旋DN(R-DN)对映体的保留时间分别为15.56和18.41min。S-DN的线性范围为0.051～7.596ng/mL,R-DN的线性范围为0.049～7.404ng/mL,线性良好(r>0.99)。S-DN和R-DN的方法回收率分别为95.10%～103.70%、93.58%～98.00%;预处理回收率分别为58.42%～61.08%、53.24%～61.87%;日内精密度(RSD)分别为8.35%～11.28%、6.78%～11.58%;日间RSD分别为5.82%～9.02%、6.87%～9.19%。结论建立的正相HPLC-MS/MS测定人血浆多奈哌齐对映体血药浓度具有快速、简便、灵敏、准确等优点,适用于多奈哌齐对映体的人体药动学研究。     

高效液相色谱/质谱/质谱法测定血浆中3种常用药物的浓度

目的:建立测定血浆中卡马西平、苯妥英钠、茶碱浓度的高效液相色谱/质谱/质谱分析方法。方法:①液相色谱流动相为甲醇-0.01 mmol/L乙酸铵水溶液(60∶40),流速0.2 mL/min;色谱柱为SYMMETRY C18(2.1 mm×50 mm,3.5μm),柱温30℃。②质谱电喷雾电离源,采用多反应监测方式进行检测,卡马西平质荷比237→194,苯妥英钠253→182,茶碱181→124。血浆样本经固相萃取小柱萃取处理后进样分析。结果:卡马西平在(1~20)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率100.9%~107.0%。日内误差(RSD)小于2.0%;苯妥英钠在(2~40)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率96.5%~102.4%。RSD小于1.9%;茶碱在(2~40)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率95.8%~106.0%,RSD小于3.0%。结论:本方法具有特异性高,灵敏度好,测定快速等优点。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中氨溴索浓度

目的建立测定人血浆中盐酸氨溴索浓度的液相色谱-质谱-质谱联用法(HPLC-MS-MS)。方法血浆中加入内标曲马多,经液-液萃取后离心,取上清液吹干,再用甲醇复溶。色谱系统:SYMMETRYTM C18柱(150 mm×3.9 mm,5μm),流动相由20 mmo.ll-1乙酸铵水溶液∶甲醇(10∶90)组成,流速为0.6 ml.min-1。质谱检测方式:多重反应监测(MRM)。用于定量分析的离子对分别为质荷比(m/z)379.0→m/z 263.9(氨溴索)和m/z 264.2→m/z 58.1(内标曲马多)。结果盐酸氨溴索线性范围为0.1~400.0 ng.ml-1,最低检测浓度为0.1 ng.ml-1;标准曲线相关系数r≥0.99。结论HPLC-MS/MS法具有专属、灵敏、准确、操作简单及快速的优点,可以用于测定人血浆氨溴索浓度。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中槲皮素的含量

目的 建立测定大鼠血浆中槲皮素含量的高效液相色谱方法(high performance liquid chyomatography,HPLC).方法 采用依利特 Hypersil BDS C18柱,SD大鼠血浆,以甲醇:乙腈∶磷酸∶水(20∶25∶5∶50)为流动相,检测波长:255 nm.结果 在0.1～22.0μg/mL范围内,槲皮素的峰面积与浓度呈良好线性关系,r=0.997;方法平均回收率为96.4%～103.7%;方法重现性较好,日内RSD≤7.3,日间RSD≤7.5.结论 该法简单,快速,稳定,灵敏度高,重现性好,可用于槲皮素在大鼠血浆中的含量测定.     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中阿戈美拉汀的浓度

目的采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中阿戈美拉汀血药浓度,并将该方法应用于药动学研究中。方法血浆样品经碱化后,采用乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比4∶1)萃取,以托莫西汀为内标,采用HPLC-MS/MS法测定。色谱柱为Agilent Eclipse plus C18(4.6 mm×150 mm,3.5μm),流动相为甲醇-水(体积比95∶5,含0.005 mol.L-1甲酸铵和质量分数0.1%甲酸),流速为0.5 mL.min-1,柱温为40℃;质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,选择性离子检测(MRM),阿戈美拉汀m/z为244.2→185.2,托莫西汀m/z为256.1→44.1。结果阿戈美拉汀质量浓度在0.025～10μg.L-1范围内线性关系良好,提取回收率在84.45%～86.94%之间,批内、批间精密度分别小于3.76%、12.23%。结论本文建立的用于测定人血浆中阿戈美拉汀的HPLC-MS/MS方法快速、准确、灵敏,可用于药动学研究及治疗药物监测。     

用高效液相色谱-质谱-质谱法测定小鼠血浆和大脑中的石杉碱甲及药动学

目的建立小鼠血浆和大脑中石杉碱甲的液质联用测定法,测定灌胃给药后小鼠血浆和大脑中石杉碱甲浓度的动态变化以及药动学参数。方法小鼠血浆及大脑样品经液液萃取,用高效液相色谱-质谱-质谱(LC-MS-MS)联用法检测。色谱柱:PHENOMENEX C18柱,100mm×2mm,5micron;流动相为甲醇∶水(1%甲酸溶液)=60∶40;用于定量的离子为m/z243→154(石杉碱甲)和m/z278→203(内标:克仑特罗)。结果所建立的血浆的方法线性范围为1~1 000ng/mL,脑的方法线性范围为1~1 000ng/mL,它们最低检测限为1ng/mL,(r=0.999 0),RSD<7%,可以检测小鼠灌胃后石杉碱甲在血和脑中的浓度;血浆石杉碱甲浓度-时间变化可用一室模型拟合,主要药动学参数分别为Tmax=6min,Cmax=281ng/mL,AUC(0→tn)=35 266ng.L-1.min-1,AUC(0→∞)=38 056ng.L-1.min-1,t1/2=99min;在大脑中的药物浓度-时间变化用非房室模型拟合,主要药动学参数分别为Tmax=60min,Cmax=224ng/mL,AUC(0→tn)=44 344ng.L-1.min-1,AUC(0→∞)=58 571ng.L-1.min-1。结论该方法灵敏度高,简便快速,可用于药代动力学及相关研究;石杉碱甲在小鼠大脑中的消除速度比血浆缓慢。     

拉莫三嗪在有效血药浓度时对脑电波的影响

目的:研究拉莫三嗪在有效治疗血药浓度范围内,对癫痫发作间歇期痫样放电及α节律的影响。方法:92例病人分别在服拉莫三嗪前及服药后第3个月,第6个月检查脑电图,检测拉莫三嗪血药浓度。发作间期痫样放电定量采用Marciani定量标准,HPLC技术测定拉莫三嗪血药浓度,浓度对比采用自身对照t检验。结果:脑电图有痫样放电者66例,服药后3个月痫样放电减少者52例(77.79％),拉莫三嗪血药浓度(3.9±2.9)μg/mL,α节律差异无显著性。结论:拉莫三嗪在有效治疗血药浓度范围(1～8μg/mL)之内时,拉莫三嗪可使发作间期痫样放电减少,不影响脑电的背景活动。     

液相色谱-质谱联用法测定人血浆中法莫替丁胶囊含量及其生物等效性评价

 目的  建立快速灵敏的液相色谱-质谱联用(LC/MS/MS)法测定人血浆中法莫替丁的含量,并比较两种法莫替丁胶囊在健康人体内的药动学及生物等效性。  方法  血浆样品中的蛋白经甲醇白沉淀处理后,采用LC/MS/MS系统分析,色谱柱为Venusil XBP苯基桩(100 mm×2.1 mm,5 μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇(体积分数为60∶40)为流动相,通过电喷雾离子化四级杆串联质谱,以多反应监测(multiple-reaction monitoring,MRM)方式进行检测;采用DAS 2.1.1软件进行药动学参数的数据处理。  结果  此法在标准曲线范围2.5~250.0 ng/mL(r=0.999 9)内线性良好,最低定量限为2.5 ng/mL;定量限、低、中、高浓度的方法回收率为97.23%~99.64%,批内和批间精密度RSD值为2.30%~4.32%,且提取回收率稳定并均大于80%;基质效应为89.01%~95.73%。两种胶囊的血药浓度-时间曲线基本一致,主要药动学参数c_max、AUC_0-t、AUC_0-∞差异均无统计学意义,tmax经非参数法检验差异无统计学意义。  结论  采用此方法测定血浆药物浓度时,灵敏度高、准确度和精密度好,样品处理简单,分析测试速度快;试验胶囊的相对生物利用度为91.5%±24.5%(n=23,AUC_0~t)或90.7%±24.5%(n=23,AUC_0~∞),统计分析表明两种胶囊生物等效。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中乌苯美司浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中乌苯美司浓度。方法采用API3000型HPLC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(50mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-甲酸(70∶30∶0.05,V/V/V),流速为0.2mL/min,格拉司琼作为内标。样品经过固相萃取后浓缩进样,多反应离子检测模式,正离子扫描,离子源为ESI源。结果检测乌苯美司的线性范围为0.4～4000ng/mL,最低定量限为0.4ng/mL。批内精密度和批间精密度均小于6%。结论本法具有快速简便、灵敏准确的特点,可满足乌苯美司临床药物浓度测定的需要。     

柱前衍生化HPLC-MS/MS法测定人血浆中5-HT、AD和NA方法的建立

目的建立衍生化高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中5-羟色胺（5-HT）、肾上腺素（AD）和去甲肾上腺素（NA）质量浓度。方法采用Ultimate C18 (50 mm×4.6 mm, 5 μm)色谱柱,流动相为乙腈∶水∶甲酸为95∶5∶0.05（V∶V∶V）,流速为0.2 mL/min,柱温为室温。检测方式为多反应离子监测,正离子模式,电喷雾离子源。血浆样品经沉淀蛋白后,在pH 10.5条件下与丹酰氯发生衍生化反应,产物经乙酸乙酯萃取浓集后进样。结果标准曲线线性范围为2.5~200 ng/mL;日内精密度相对标准偏差（RSD）为1.33%~8.13%,日间RSD 2.86%~7.73%,均小于9%;方法回收率95.44%~109.71%,基质效应4.86%~12.81%。结论本法简单、快速,可用于人血浆中5-HT、AD和NA质量浓度测定和研究。     

RP-HPLC法测定人血浆中替考拉宁的浓度

目的 建立测定人血浆替考拉宁的HPLC法,供血药浓度监测用,指导临床安全合理用药.方法 色谱柱为Wondasil C18柱(4.6 mm ×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05 mol/L KH2 PO4溶液(体积比28∶72,pH=3.2),检测波长为240 nm,流速为1.0 mL/min;柱温为25℃....     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中美罗培南的浓度及其在ICU脓毒症患者治疗药物监测中的应用

目的 建立测定人血浆中美罗培南血药浓度的液相色谱-串联质谱（liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）方法,并将该方法应用于重症加强护理病房（intensive care unit,ICU）脓毒症患者治疗药物监测。 方法 以Kinetex-C18 100A（2.6 μm,4 mm×50 mm）为色谱柱,流动相为甲醇-1‰甲酸水溶液（60〖DK〗∶40,v/v）,流速：0.4 mL/min,柱温40 ℃,进样量3 μL。以卡马西平为内标,采用串联质谱检测器电喷雾离子源（electron spray ionization,ESI）,以正离子多离子反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）扫描方式进行监测,定量分析离子对分别为m/z 384→141（美罗培南）、m/z 237→194（卡马西平）,并将该方法应用于197例次ICU脓毒症患者治疗药物的监测。 结果 人血浆中美罗培南浓度在0.02~30 mg/L围内线性关系良好,标准曲线方程为y=4.934×10-5x+2.083×10-2(r=0.999 9)。批间和批内精密度RSD<3%,回收率为91.96%~100.97%。197例次ICU脓毒症患者血药浓度范围为0~16.33 mg/L。 结论 本方法简便、快速,敏感度高、专属性强、结果准确,可用于美罗培南在脓毒症患者治疗药物中的监测。     

HPLC法测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量

目的采用HPLC法测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量。方法采用Diamonsil C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-0．05mol／L磷酸氢二钠溶液（用磷酸调pH至3．9）（55：45）,柱温为30℃,流速为0．8mL／min,检测波长233am,以外标法峰面积定量。结果水杨酸、苯甲酸分别在0．0359-0．2993mg／mL（r=0．9998）,0．0358～0．2980mg／mL（r=0．9993）范围内有良好的线性关系,平均回收率分别为100．14％（RSD=0．77％）和99．95％（RSD=0．95％）（n=9）。结论本方法简便、准确,可快速测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量,可为质量控制提供依据。     

LC-MS/MS法同时检测人血浆中厄洛替尼及其代谢物去甲厄洛替尼的浓度

目的 建立LC-MS/MS法测定人血浆中厄洛替尼及其代谢产物去甲厄洛替尼的浓度.方法 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇-水（含40 mmol/L NH4Ac）=70∶30（体积比）为流动相,采用ultimate XB-C18（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱进行分离,流速为0.9 mL/min,通过电喷雾离子化串联质谱,以多反应监测（MRM）方式进行检测.结果 厄洛替尼线性范围为0.5～2 000 ng/mL（r=0.999 0）,去甲厄洛替尼线性范围为0.5～2 000 ng/mL（r=0.999 7）,最低定量下限均为0.5 ng/mL,厄洛替尼平均方法回收率为106.1％～ 108.7％,去甲厄洛替尼平均方法回收率为103.5％～ 105.5％,日内和日间变异均小于15％.结论 该方法具有快速简便、灵敏准确等特点,可满足厄洛替尼及其代谢物临床药物浓度测定的需要.     

LC-MS/MS法测定人血浆中8′-羟基二氢麦角隐亭浓度及其在生物等效性研究中的应用

建立一种快速测定人血浆中8′-羟基二氢麦角隐亭 (8′-OH-DHEC)浓度的LC-MS/MS 法,以曲马多为内标,采用C₁₈反相柱(150 mm×2.0 mm,5 μm),柱温35 ℃。流动相为甲醇-水(含0.1%甲酸),流速0.2 mL/min;电喷雾离子化(ESI),正离子扫描,选择性反应监测(SRM）8′-OH-DHEC m/z 594.3→270.0;曲马多m/z 264.1→58.3。本方法专属性强,8′-OH-DHEC在50~4 000 pg/mL 呈良好的线性关系,r =0.999 3,最低检测浓度为50 pg/mL,低、中、高浓度下的日内及日间精密度、准确度、稳定性等均符合生物样品测定要求。本方法应用于22名健康受试者口服4 mg 麦角隐亭的生物等效性研究,结果表明此方法专属性强,快速灵敏,适用于临床剂量下麦角隐亭药代动力学及生物等效性研究。     

HPLC法测定石榴皮提取物中鞣花酸的含量

目的 建立石榴皮提取物中鞣花酸含量的HPLC测定方法.方法 色谱条件:色谱柱为Agilent TC-C18(2)(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙酸乙酯∶磷酸(0.01 mol/L)∶磷酸二氢钾(0.01 mol/L)∶甲醇(0.05∶20∶20∶60);流速1 mL/min;检测波长为254 nm;柱温25 ℃.结果鞣花酸在5.36～171.40 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为97.82%,RSD为1.41% (n=9).结论 HPLC法简便,准确,重复性好,可用于石榴皮提取物中鞣花酸的含量测定.