中药对血管内皮形态和功能的影响及其分子机制研究进展

血管内皮细胞(VEC)形态改变和功能障碍是动脉粥样硬化的重要病理学基础,并参与冠心病的发生发展过程.中药可以通过不同途径预防内皮损伤,有效地改善或逆转其功能障碍.     

中药保护内皮细胞的分子机制研究进展

血管内皮细胞是连续被覆在全身血管内膜的一层细胞群,这一细胞群被体外细胞培养成功以来,对它已有了很深入的了解。现已证实血管内皮细胞层不仅仅是血液和组织的屏障,还具有合成多种血管活性物质的能力。内环境紊乱与内皮细胞功能受损相互影响,如缺血缺氧、高血糖、高血脂等都会导致内皮细胞的损伤;另一方面内皮细胞功能受损又会引起或加重糖尿病、高血压、动脉粥样硬化等疾病。近年来已证实多种中药能从多个方面保护血管内皮细胞免受损伤和促进内皮细胞增殖,从而为中药治疗血管内皮细胞功能受损相关性疾病提供了药理学依据。本文就近年来中药对血管内皮细胞的保护和增殖作用做一综述。     

中药抗血管内皮细胞损伤机制的研究进展

研究表明,高血压、高血脂、高血糖、缺氧、衰老、吸烟等心血管危险因素均可导致血管内皮细胞（VEC）受损。VEC的大量损伤可使血管抗血栓能力减退或丧失,造成血栓形成。因此,如何保护VEC功能,延缓心脑血管疾病发展。是亟待解决的课题。而多种中药及有效成分具有抗VEC损伤,调节VEC功能,从而发挥抗血栓作用,在临床应用中也取得良好效果。现将近年的研究进展综述如下。     

粉防己碱对血管内皮剥脱后再狭窄的预防作用及其分子机制研究

目的：研究球囊损伤后血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC)凋亡机制及粉防己碱（tetrandrine,Tet)对VSMC凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法：采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法和免疫组化技术检测球囊务内皮后VSMC凋亡及bcl-1,bax蛋白表达的变化。结果：球囊损伤后血管壁增生，血管中膜和内膜出现的细胞凋亡较少，Tet可明显促进VSMC凋亡，降低球囊损伤后内膜及中膜厚度，增加管腔面积（P＜0．05），促进bax蛋白的表达，抑制bcl-2蛋白的表达（P＜0．05），结论：bax,bcl-2参与了球囊损伤内皮后血管平滑肌细胞凋亡的调节，Tet可能通过对bax,bcl-2基因表达的调节，增加VSMC细胞凋亡，防止血管再狭窄。     

麦冬药物血清抗血管内皮细胞凋亡的分子机制

目的：探讨麦冬药物血清抗血管内皮细胞凋亡的分子机制。方法：取人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,用内毒素造成凋亡细胞模型,通过荧光显微镜,流式细胞仪观察麦冬药物血清抗其凋亡的保护作用,并探讨麦冬药物血清对HUVEC中SOD,MDA的改变。结果：麦冬药物血清可明显保护HUVEC,减少内毒素对其诱导的凋亡作用,其机理与减少自由基,增加超氧化物歧化酶有关,结论：麦冬能滋补阴液,抗HUVEC凋亡,可以有效防治血栓性疾病。     

氯沙坦对大鼠血管内皮保护作用机制研究

目的:探讨氯沙坦对于大鼠血管内皮保护作用机制。方法:选取24只残肾模型SD大鼠随机分为对照组和观察组,每组各12只。对照组大鼠给予生理盐水灌胃;观察组大鼠给予氯沙坦进行治疗。3个月后,观察两组大鼠毛细血管内皮细胞密度、肾小球纤维化程度情况,血管内皮生长因子、血小板反应蛋白表达水平情况等。结果:观察组大鼠的血肌酐、血脂水平、24 h尿蛋白量等指标均明显低于对照组。结论:氯沙坦能够有效降低残肾大鼠血管内皮细胞的损伤情况,不断改善其肾功能。     

血脂康对高密度脂蛋白及血管内皮功能的影响

脂质代谢异常已被公认是冠心病的独立危险因素，流行病学研究表明血清总胆固醇水平（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）与冠状动脉粥样硬化发生的危险性呈正相关，而高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）与之呈显著负相关。但HDL-C抗动脉粥样硬化的作用机制尚不清楚，可能除了逆转胆固醇作用以外，还有对抗脂质氧化修饰、改善血管内皮功能、防止血栓形成等。可见HDL—C在防止冠状动脉粥样硬化的发生、发展上起了重要作用。大量临床实践已证实他汀类调脂药可显著降低冠心病患者的病死率，有作者认为可能与其改善血管内皮功能有关，因为血管内皮功能障碍不仅是动脉粥样硬化的早期表现，而且可能参与冠心病的发生、发展过程。本研究旨在观察血脂康治疗前后HDL—C及血管内皮功能的变化，探讨HDL—C与血管内皮功能变化之间的关系。     

高浓度葡萄糖对培养血管内皮细胞活力和黏附分子表达的影响

目的探讨高浓度葡萄糖作用于脐静脉内皮细胞后,对脐静脉血管内皮细胞系的活力和白细胞黏附分子〔血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)〕表达的影响,为阐明高血糖在糖尿病血管病变的早期发病中作用与机制提供依据。方法采用胎盘蓝染色法及流式细胞仪检测细胞活力和黏附分子表达。结果高浓度葡萄糖可使内皮细胞的死亡率增加,ICAM-1表达显著上调,但VCAM-1表达无明显变化。结论减少高糖诱导的ICAM-1、VCAM-1表达增加,对减少糖尿病患者慢性并发症的发生概率是一条有益的途径。     

肿瘤血管生成的分子机制

目的:综述肿瘤血管生成的分子机制。方法:查阅文献。结果:肿瘤血管生成是一个复杂的过程,有多种生长因子、胞外基质(ECM)组分、蛋白水解酶、细胞黏附分子以及癌基因和抑癌基因等参与反应。结论:肿瘤血管生成的分子机制还需要真正全面了解,而肿瘤血管生成抑制剂的研制为肿瘤治疗提供了新的更为广阔的前景。     

心肌缺血再灌注对大鼠心肌和血管内皮细胞超微结构的影响

目的:观察心肌缺血再灌注对心肌和血管内皮细胞超微结构的影响.方法:电镜下观察心肌缺血再灌注模型大鼠心肌缺血部位超微结构改变.结果:心肌细胞明显肿胀;肌膜破坏;染色质凝聚、边集;肌原纤维松弛,形成异常收缩带,肌丝断裂、溶解,形成大量肌溶灶;线粒体肿胀,嵴断裂、缺失、空泡化;三联体松解;糖原明显减少.血管内皮细胞肿胀,染色质边集,线粒体增大,吞饮小泡明显减少,应力纤维分散,梗死灶内血管内皮细胞变性、断裂和分离.结论:缺血再灌注后对心肌和血管内皮细胞超微结构造成明显的损伤,但血管内皮细胞较心肌纤维损伤轻.     

LDL和HDL对培养的人血管内皮细胞的影响

本文以不同胆固醇浓度的低密度脂蛋白和高密度脂蛋白或将其混合,施加于培养呈融合状态的人脐带静脉血管内皮细胞。通过相差显微镜、扫描电镜和透射电镜观察,发现LDL对内皮细胞有损伤作用,并随所含胆固醇浓度的增高,其损伤程度加重,损伤机制可能与脂质过氧化物的增加有关。HDL对内皮细胞有保护作用,可使其免遭LDL的损伤,可能与HDL可阻止LDL所引起内皮细胞膜中胆固醇的过多或毒性堆积等有关。     

番茄红素对动脉粥样硬化斑块中P选择素和VEGF表达的影响

目的：观察动脉粥样硬化家兔斑块内P选择素和VEGF的表达情况并分析其机制。方法：雄性新西兰兔36只,随机分为3组：正常对照组（12只）,高胆固醇模型组（12只）和番茄红素治疗组（12只）。正常组每天给予正常饮食,模型组每天除正常饮食外,给予1．5％的胆固醇和3％的猪油,治疗组在模型组饮食的基础上给予60mg／kg的6％的番茄红素粉荆。实验周期为12周,待12周后确定模型组成功后麻醉处死家兔,取主动脉标本观察大体形态,进行HE染色观察病理变化,免疫组织化学方法观察斑块内P选择素和VEGF的表达情况。结果：与高胆固醇模型组相比,番茄红素治疗组相对于模型组的主动脉斑块面积减少,斑块内P选择素和VEGF表达也明显减少。结论：番茄红素能减少动脉粥样硬化斑块的P选择素和VEGF的表达,这可能是番茄红素减少动脉粥样斑块的机制之一。     

血管内皮生长因子在肾癌中的表达及其作用

目的　 探讨血管内皮生长因子 (VEGF)的表达与肾癌侵袭、转移等生物学行为的关系。方法　 采用免疫组织化学技术对 4 2例肾癌和 9例正常肾组织中VEGF及微血管密度 (MVD)进行检测。结果　4 2例肾癌组织中VEGF阳性表达 2 7例 (6 4.3% ) ,MVD均值为 (6 4.38± 2 5 .17) ,显著高于正常肾组织 (P <0 .0 1)。肾癌组织中VEGF表达和MVD与其组织类型、分级、淋巴转移及 5年生存期都明显相关 (P <0 .0 1)。结论　肾癌组织中VEGF、MVD可作为判定肾癌预后的重要生物学指标     

血管内皮细胞生长因子的制备和生物活性测定

报道从牛脑制血内皮细胞生工因子的方法，鲜牛脑经匀浆，硫酸铵盐析，透析后，上Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＣ－５０离子交换柱，并用氯化钠梯度洗脱。利用ＥＣＧＦ对人脐静脉内细胞地增殖刺激效应测定其活性。当所得ＥＣＧＦ制品在含１０％新生牛血清或胎牛血清的培养液中含量为２５ｍｌ／Ｌ时，其最大刺激活性比对照组增加５５０％。     

内皮细胞在定向造血干细胞归巢中的作用

血管内皮细胞因其特殊的解剖学定位,成为构成髓血屏障的主要结构,是造血细胞出髓与归巢的“门户”。内皮细胞通过分泌多种造血调控因子,将定向造血干细胞定居于“壁龛”中,从而调控其增殖和分化。本文就近年来内皮细胞与定向造血干细胞归巢的关系作一综述。     

己酮可可碱对脂多糖诱导的内皮细胞单层通透性的保护作用

目的：探讨己酮可可碱（PTX）对脂多糖（LPS）诱导的内皮细胞单层通透性的保护作用。方法：建立内皮细胞单层损伤模型,随机分为LPS组、PTX组、LPS＋PTX组、对照组,测定内皮单层滤过系数、蛋白质渗透压反射系数及进行内皮细胞单层形态学检查。结果：LPS组内皮单层滤过系数显著升高、蛋白质渗透压反射系数显著降低;与正常对照组比较,PTX组的滤过系数和蛋白质渗透压反射系数无明显变化;与LPS组比较,LPS＋PTX组两系数及内皮细胞单层形态学检查无明显变化,近似于正常对照组。结论：PTX无降低正常内皮细胞单层通透性的作用;PTX对LPS诱导的内皮细胞单层通透性有保护作用,其机制可能与PTX拮抗LPS导致内皮细胞单层通透性增加的某些环节有关。     

EFFECT OF PLATELET HEPARIN AFFINITY MATERIALS ON ENDOTHELIAL CELL FIBRINOLYTIC ACTIVITY AND SECRETION OF PROSTACYCLIN

Platelets and endothelial cells play an important role in initiation anddevelopment of atherosclerosis. Much attention has been paid to investigate effect ofplatelet release products on endothelial cells, it is unknown whether platelet products canaffect endothelial cell fibrinolytic activity. We extracted platelet heparin affinity materials(PHAM) from platelet lysate using Heparin-Sepharose CL 6B column, and treated cul-tured human umbilical endothelial cells with PHAM to imitate conditions in vivo. As a re-suit, PHAM could increase endothelial cell PAI activity without change of t-PAantigen. No free t-PA activity was detected in conditioned medium from either stimulatedor nonstimulated endothelial cell cultures. Addition of 10μg/ml PHAM to endothelialcells induced nearly one fold increase of PAI activity (P<0.001). Such increase was timeand dose dependent. Moreover, treatment with PHAM resulted in a dose dependent in-crease of the secretion of prostacyclin (measured by 6-keto-PGF_(1α)), 10μg/ml PHAMcaused six fold increase of prostacyclin (P<0.001). The above results showed thatPHAM could inhibit endothelial cell fibrinolytic activity but increase secretion ofprostacyclin. It is assumed that this could be the negative feedback for protecting thehuman body from thrombus formation. Break of this feedback mechanism may beresponsible for thrombotic diseases.     

黄芪注射液对内皮细胞损伤的保护效应

目的 了解黄芪注射液对内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法 人脐静脉内皮细胞原代培养,传至3代后,分为3组。对照组：常规培养;低氧复氧组：先低氧处理1h,再复氧1h;药物干预组：在培养液中加入终浓度分别为5、10、20、40、60mg／L的黄芪注射液,12h后进行低氧复氧处理。测定各组细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量,检测内皮细胞台盼蓝摄取率。结果低氧复氧组与对照组比较．细胞培养液中LDH活性、MDA含量及内皮细胞台盼蓝摄取率升高,SOD活性减低,差异均有显著性（F=34．97～129．98,q=14．43～27．11,P〈0．01）。药物干预组与低氧复氧组比较,细胞培养液中LDH活性、MDA含量及内皮细胞台盼蓝摄取率降低,SOD活性升高,差异均有显著性（q=2．91～26．61,P〈0．05、0．01）。黄芪注射液预处理浓度为40mg／L时LDH活性、SOD活性、MDA含量与对照组比较差异无显著性（q=0．49～0．94,P〉0．05）;黄芪注射液预处理浓度60mg／L与40mg／L相比,LDH活性、SOD活性、MDA含量变化均不明显。结论 低氧复氧过程造成内皮细胞脂质过氧化损伤,细胞死亡率增加。黄芪注射液可能通过抗脂质过氧化,对低氧复氧内皮细胞产生保护作用。     

NO在外源性自由基损伤内皮细胞中的作用

目的：探讨ＮＯ在外源性自由基损伤内皮细胞（ＥＣ）中的作用。方法：培养的家兔主动脉ＥＣ随机分为四组：１．对照组（Ｃ,ｎ＝６）：２ｍｌＰＢＳ;２．自由基损伤组（Ｘ／ＸＯ,ｎ＝６）：２ｍｌＰＢＳ中加入终浓度为１μｍｏｌ／ｍｌＸ,０．１ＩＵ／ｍｌ的ＸＯ;３．Ｌ－Ａｒｇ组：含终浓度为１０＾－３Ｍ的Ｌ－Ａｒｇ,余同２;４．ＳＮＰ组：含终浓度为１０＾－５Ｍ的ＳＮＰ,余同２。在观察Ｌ－ＮＡＭＥ对自由基损伤的作用时