大鼠肥大细胞组胺释放试验及方法学的探讨

从卵清蛋白免疫的SD大鼠胸腹腔中采集的肥大细胞,当以相同的变应原触发时引起肥大细胞释放组胺。用改良的荧光法测定组胺量,计算肥大细胞组胺释放率,实验结果表明,卵清蛋白免疫大鼠第3周肥大细胞组胺释放率达到高峰,在一定范围内,组胺释放率随变应原浓度增加而升高。绵羊抗大鼠IgE抗血清对正常大鼠肥大细胞亦有触发作用。这一试验可用于速发型过敏反应和抗过敏药物的研究。     

龙虾过敏小鼠模型建立的研究

目的：通过腹腔注射龙虾粗蛋白的致敏方式,建立小鼠龙虾过敏模型,探讨龙虾过敏体外鉴定与评价的方法.方法：将40只雄性Balb/c小鼠分为OVA阳性对照组、Coca＇s液阴性对照组、空白对照组和模型组,以OVA（Ovalbumin,卵清蛋白）、龙虾粗提蛋白,加氢氧化铝佐剂腹腔注射免疫Balb/c小鼠,建立食物过敏动物模型.ELISA法测定第二次致敏激发后血清中IgE与组胺水平并进行被动皮肤过敏试验确定特异性IgE抗体滴度,同时观察脾指数及激发后的过敏症状.结果：末次激发后1 h采血,龙虾粗提蛋白组血清IgE含量为（236.75±73.39） μg/L,与阳性对照OVA组无区别,与阴性对照Coca＇s液组和正常对照组相比则显著升高（P〈0.01）;龙虾粗提蛋白组的组胺含量（406.55±232.79） μg/L与正常对照组相比显著升高（P〈0.01）;被动皮肤过敏试验（PCA）中龙虾粗提蛋白组血清特异性IgE抗体滴度达到1/16;龙虾粗提蛋白组和OVA致敏组小鼠的脾指数明显大于Coca＇s液或正常对照组（P〈0.01）.结论：建立了一种龙虾过敏小鼠模型,通过ELISA测定血清IgE和组胺以及PCA确定特异性IgE抗体滴度可作为一种鉴定与评价龙虾过敏的方法.     

内脏高敏感大鼠腹腔肥大细胞活性的改变及5-羟色胺对其的作用

目的：证实内脏高敏感大鼠腹腔中肥大细胞活性增加，探讨5－羟色胺（5－HT）影响肥大细胞脱颗粒的作用。方法：用腹腔注射鸡卵清白蛋白制备内脏高敏感大鼠，并随机分为A组和B组；空白对照鼠（腹腔注射生理盐水）随机分为C组和D组。提取内脏高敏感大鼠和对照组大鼠的腹腔肥大细胞，用抗原和抗血清孵育刺激肥大细胞脱颗粒，计数肥大细胞脱颗粒率，并用荧光法检测其组胺释放率。比较经不含5－HT孵育液组（A组和D组）和富含5－HT孵育液组（B组和C组）孵育的肥大细胞脱颗粒率和组胺释放率。结果：内脏致敏组大鼠（A组和B组）的组胺释放率明显高于D组大鼠（P＜0．01），A组和B组的脱颗粒率也显著高于D组（P＜0．01）；且A组的组胺释放率显著高于B组（P＜0．05），C组和D组间组胺释放率未见明显差异。结论：内脏致敏大鼠的肥大细胞活性增强，5－HT对致敏肥大细胞的脱颗粒功能有影响。     

甘草甜素对大鼠肥大细胞释放组胺的抑制作用

目的分析甘草甜素对大鼠腹腔肥大细胞释放组胺的抑制作用。方法用卵清蛋白致敏大鼠,采集大鼠腹腔肥大细胞,以肥大细胞组胺释放试验体外观察甘草甜素抑制效应。结果甘草甜素对底、低２种致敏抗原浓度触发肥大细胞释放组胺的抑制作用无显著性差异,抑制率随甘草甜素剂量增加而上升;对非特异性触发剂抗ＩｇＥ、ＣｏｎＡ、ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０诱导肥大细胞释组胺显示不同的抑制效果。     

致敏大鼠腹腔及肺泡肥大细胞5－HT释放率

速发型超敏反应与肥大细胞释放介质有关。本文大鼠用卵清蛋白免疫致敏后，腹腔及肺肥大细胞用兔抗大鼠ＩｇＥ触发，测定［３Ｈ］５－ＨＴ释放率，结果显示，腹腔肥大细胞５－ＨＴ释放率在免疫后第２、３周达高峰，持续时间较长；肺肥大细胞在免疫后第２周有一峰值，但高度不如前者，且即消退。     

致敏大鼠腹腔及肺泡肥大细胞5—HT释放率

速发型超敏反应与肥大细胞释放介质有关。本文大鼠用卵清蛋白免疫致敏后，腹腔及肺肥大细胞用兔抗大鼠ＩｇＥ触发，测定［＾３Ｈ］５－ＨＴ释放率，结果显示，腹腔肥大细胞５－ＨＴ释放率在免疫后第２、３周达高峰，持续时间较长；肺肥大细胞在免疫后第２周有一峰值，但高度不如前者，且即消退。     

款冬酮对过敏性鼻炎模型小鼠肥大细胞活性的抑制作用

目的 探究款冬酮(tussilagone, TUS)对过敏性鼻炎模型(allergic rhinitis, AR)小鼠肥大细胞的抑制作用及其分子机制。方法 将BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、TUS组和Ly294002组，每组10只。AR小鼠模型采用腹腔注射卵清蛋白(OVA)联合鼻腔滴注OVA方法构建。造模完成后第1～7天，TUS组小鼠按照5 ml/kg的剂量每天腹腔注射8×10^-2 mol/L款冬酮药剂；Ly294002组小鼠每天腹腔注射6.0 mg/kg的PI3K/AKT信号通路抑制剂Ly294002溶液。采用HE染色检测小鼠鼻黏膜组织病理情况，Giemsa染色检测鼻黏膜组织嗜酸性粒细胞和肥大细胞浸润；采用ELISA法检测致敏因子IgE、组胺、白三烯、IL-4、IL-5和IFN-γ水平；流式细胞术检测小鼠脾脏组织CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg/CD4⁺ T细胞水平。Western blot分析PI3K、p-PI3K、PKB和p-PKB蛋白表达水平。将RBL-...     

钾通道开放剂对抗原诱发大鼠肥大细胞释放组胺的抑制作用

本文报道钾通道开放剂米诺地尔，二氮嗪和钙拮抗剂硝苯啶对抗原诱发大鼠腹腔肥大细胞释放组胺的影响。以卵清蛋白免疫大鼠并触发ＰＭＣ释放组胺。给大鼠Ｍｉｎ２００ｍｇ／ｋｇ灌胃；用含有Ｄｉａ的孵化液预处理；或用Ｎｉｆｑ１２５ｍｇ／ｋｇ灌胃后，触发剂诱发ＰＭＣ的组胺释放率与对照组比较均有显著差异。     

钾通道开放剂对抗原诱发大鼠肥大细胞释放组胺的抑制作用

本文报道钾通道开放剂米诺地尔（Min）、二氮嗪（Dia）和钙拮抗剂硝苯啶（Nif）对抗原诱发大鼠腹腔肥大细胞（PMC）释放组胺的影响。以卵清蛋白免疫大鼠并触发PMC释放组胺。给大鼠Min200mg／kg灌胃；用含有Dia的孵化液预处理；或用Nif125mg／kg灌胃后，触发剂诱发PMC的组胺释放率与对照组比较均有显著差异（P＜0.01）。结果提示，肥大细胞可能存在钾通道，钾通道开放剂可能具有治疗过敏性疾病的前景。     

河虾中主要过敏原组分鉴定及分离纯化

目的鉴定并分离纯化河虾中引起过敏反应的主要蛋白组分。方法河虾蛋白浸液皮下注射建立小鼠过敏模型，获得高效价特异性IgE血清用于免疫印迹分析。用饱和硫酸铵分段盐析和DEAE离子交换层析纯化目的蛋白。dot-ELISA及竞争ELISA检测纯化目的蛋白的过敏原活性。结果河虾蛋白浸液皮下注射成功建立了虾过敏小鼠模型。免疫印迹分析显示虾中有一分子量36kD的蛋白组分为主要过敏原。用硫酸铵分级沉淀和DEAE离子交换层析的方法成功分离到目的蛋白。dot-ELISA证明目的蛋白能与特异性IgE反应。竞争ELISA检测纯化目的蛋白与河虾蛋白浸液竞争结合特异性IgE的活性，最大竞争抑制率可达60％。结论本实验成功鉴定并分离到河虾中一分子量为36kD的主要过敏原组分，为过敏原的分析研究提供了一套比较完整的方法。     

在规范中改革 从改革中创新——教案设计与管理刍议

写教案是备课的中心环节。教案设计是否规范、科学、实用,直接影响着课堂教学的质量。对教案的管理是教学管理的重要组成部分。在规范中改革,从改革中创新,是我校对备课这一教学环节的一贯倡导和要求。笔者现将几年来自己在教案设计与管理中探索的一些认识、方法和体会提出与同行交流切磋。1正确认识教案在课堂教学中的作用教学过程是一种创造性的活动。教案则是体现教师创造性劳动的一种设计方案和主要记录,也是课堂教学所遵循的章法。教学大纲是“一项工程的总设计”,教案则是“工程施工的具体方案”。要完成一份高质量的教案,教师必须认…     

从“经水出诸肾”论治人流术后月经过少

《傅青主女科》有云:"经水出诸肾",为临床辨治人流术后月经过少提供了理论依据,且人工流产多为金刃损伤肾精肾气,以致冲任损伤,气血不足,血海空虚,离经之血瘀阻冲任胞宫,阻碍新血生成。中医学多从肾论治,根据其肾虚、血虚、血瘀、肝郁的病因病机辨证论治,以补肾为根本,大致从补肾养血、补肾活血、补肾疏肝等方面论治。     

榼藤藤茎醋酸乙酯部位化学成分的研究

目的 对榼藤Entada phaseoloide藤茎醋酸乙酯部位的化学成分进行研究。方法 综合运用硅胶、反相硅胶RP C18、Sephadex LH-20等色谱法进行分离,NMR、MS等波谱学方法进行结构鉴定。结果 从榼藤藤茎甲醇提取物的醋酸乙酯萃取部位中分离得到了11个化合物,通过波谱分析鉴定为表没食子儿茶素没食子酸酯（1）、表儿茶素没食子酸酯（2）、落新妇苷（3）、木犀草素（4）、（?）-表儿茶素（5）、甘草苷（6）、β-香树脂醇（7）和日耳曼醇（8）的混合物、没食子酸（9）、β-谷甾醇（10）、胡萝卜苷（11）。结论 所有化合物均为首次从榼藤中分离得到,其中化合物1～9在榼藤子属植物首次报道。