人工饲养恒河猴、食蟹猴的繁殖性能初报

目的 探索北京地区人工饲养恒河猴与食蟹猴的繁殖性能,为温带地区猕猴的人工饲养和繁殖方式提供借鉴.方法 对军事医学科学院实验动物中心饲养的317只恒河猴繁殖群(30只雄猴,287只雌猴)和78只食蟹猴繁殖群(8只雄猴,70只雌猴)近两年的繁殖性状进行观察和统计分析.结果 恒河猴母猴妊娠率、繁殖率和成活率分别为60.73%、54.45%和96.89%.食蟹猴母猴妊娠率、繁殖率和成活率分别为79.86%、56.12%和75.00%.结论 食蟹猴和恒河猴可以成功的在温带地区饲养和繁殖,但人工饲养食蟹猴的妊娠率与产仔率较恒河猴高,而仔猴成活率则低于恒河猴.     

北京地区食蟹猴的室内试验性繁殖初报

目的 食蟹猴在北京地区的适应性驯养与繁殖.方法 从2004年底开始,建立了一个20只雄猴,140只雌猴的食蟹猴室内生产繁殖种群.每个室内饲养单元内包括两只雄猴,14只雌猴,采取自由交配的方式进行繁殖.同时对室内饲养食蟹猴繁殖的季节性、妊娠期、月经周期、仔猴出生体重等进行了观察、记录和统计.结果 从2005年4月到2008年3月的3年时间,母猴怀孕305例,流产59例,生产仔猴246只.平均妊娠率、产仔率分别为74.0%和59.7%.室内饲养食蟹猴的繁殖没有明显的季节性,平均月经周期为(28.5±3.3)d(n=30).平均妊娠期为(167±12)d(n=30),仔猴的平均出生体重为(350±120)g(n=30).结论 食蟹猴能够在温带地区的室内进行成功的驯养和繁殖.     

北京地区恒河猴试验性繁殖及部分生物学特性观察

本实验于1992年底开始，通过选种、选配，建立了一个11只雄猴，77只雌猴的恒河猴生产繁殖种群并对其繁殖性能进行了观察与研究。三年间，利用大笼群养的“后宫式”繁殖方法，母猴怀孕107例，流产11例，生产仔猴96只，离乳94只。平均妊娠率、产仔率、离乳率分别为51．44％、46．15％、97．92％。在“后宫式”群养方式繁殖成功后，我们又尝试了单笼饲养、定期交配的新的繁殖方法，当年投种9只母猴，怀孕7只，生产7只。怀孕率、生产率均为77．78％。在进行实验性繁殖的同时，对人工条件下饲养的恒河猴的部分生物学特性如妊娠期、月经周期、血液生理生化指标、生长特性等进行了观察、记录和统计。结果表明人工条件下饲养的恒河猴在每年11月至次年4月间交配，4月至9月分娩。恒河猴具有间情期，每年秋冬季发情，平均月经周期为28．31±2．82d（n＝70）。平均怀孕期为163．46±11.87d（n＝13）。本实验为人工繁殖恒河猴进而实现实验动物化积累了基础数据，为将来提供高等级的、遗传背景清楚的、高质量的实验猕猴奠定了工作基础。     

棉顶狨猴、鞍背狨猴和普通狨猴的繁殖及婴猴哺育的比较研究

结果表明：棉绒的妊娠期平均为166d，两胎间隔期为10～12个月，婴猴存活率为33%；鞍背绒和昝绒的妊娠期平均为150d和143d。两胎间隔期分别为9～12个月和9～11个月，婴猴存活率分别为40%和67%．这三种绒猴主要以双胞胎形式进行繁殖，且仔猴中雄性比例占80%以上．棉绒和鞍背绒主要依靠双亲哺育婴猴，婴猴的死亡率较高分别为67%和60%．而由双亲哺育的普绒要猴的死亡率最低(30%)．若采用人工喂养婴猴．其成活率可选100%．我们得到的经验是，棉绒和鞍背绒的繁殖有季节性，棉绒春季产仔，鞍背绒夏季产仔，而普绒的繁殖则无季节性。三种绒猴中以普通绒猴最易饲养和繁殖，并且婴猴的成活率高．十分利于建立实验室繁殖群全。     

人工繁育恒河猴婴猴生长发育指标的测定分析

目的建立人工繁殖恒河猴婴猴生长发育指标的标准数据库。方法随机对90只人工饲养繁殖的恒河猴(从100 d至1周岁)进行体重、身长、尾长、前肢长、后肢长发育指标测定。结果测定后的数据,经统计学分析和绘制生长曲线图,发现人工饲养条件下的恒河猴(1周岁前),其生长发育指标基本均匀一致,只有个别出现发育迟缓或发育不良现象。随时间推移,雄性生长速度要快于雌性。结论所建立的恒河猴婴猴正常生长发育生理指标,为提高人工饲养繁育恒河猴技术和不断改善恒河猴营养与发育健康提供了科学数据。     

恒河猴与食蟹猴微卫星DNA多态性的比较分析

目的 分析恒河猴和食蟹猴群体间的遗传多样性,确立一种对恒河猴和食蟹猴种群个体的遗传鉴别方法.方法 利用聚合酶链反应 (PCR) 扩增技术采用15个多态性微卫星DNA位点对50只恒河猴和50只食蟹猴个体进行了DNA多态性的分析,对比两群体间等位基因数目差异.结果 筛选的15个具有显著多态性的微卫星DNA位点对恒河猴和食蟹猴种群可以进行DNA多态性分析,其等位基因数目均在7个以上,且两群体间有11个位点的等位基因数存在一定的差异.结论 利用这些多态性微卫星DNA位点建立一种有效鉴别恒河猴和食蟹猴种群遗传背景的方法具有一定的可行性.     

棉顶狨猴的饲养繁殖研究

本研究表明,棉狨在昆明地区实验室笼养条件下,不仅能适宜生存,并能生育繁殖,3对棉狨在两年内共产仔猴13只,存活5只,其中第一胎存活率为28.59%,第二胎为50.00%。另外,对棉狨在实验室条件下的饲养管理、生育季节的规律、婴猴的人工喂养和营养学的研究进行了探讨,为建立棉狨繁殖群提供了一定的经验。     

提高实验猴繁殖率的综合措施

实验猴繁殖率的高低直接影响实验猴养殖企业的经济效益。本文借鉴本中心多年实验猴繁育经验,总结了一套较为完备的提高实验猴繁殖率的措施,内容涵盖实验猴繁殖特性、种公猴选种、繁殖猴分群及梯度饲养、孕猴用药、母猴产后护理、仔猴补饲及断奶、繁殖猴饲料搭配等各方面。这些措施应用于实践后,实验猴繁殖率可保持在较高水平并逐年提高。我们认为这些措施可在其它实验猴养殖企业推广应用。     

恒河猴STLV-1血清抗体流行病学研究

目的调查我国恒河猴STLV-1流行病学特征.方法用免疫荧光法和蛋白印迹法对537只野捕恒河猴,365只繁殖猴和44只D型逆转录病毒抗体阳性猴作了STLV-1血清抗体检查.结果 10岁以上恒河猴的STLV-1抗体阳性率(15.5%)高于10岁以下的恒河猴(6.2%);雌猴的STLV-1抗体阳性率(17.5%)高于雄猴(5%);D型逆转录病毒抗体阳性猴群的STLV-1抗体阳性率(34.1%)高于野捕猴群(8.8%).结论在我国的野生和饲养恒河猴群中广泛存在STVL-1血清抗体阳性动物,其抗体阳性率与动物的年龄和性别有关.     

PCR检测实验恒河猴和食蟹猴群体中幽门螺杆菌和“猕猴螺杆菌”的感染

目的调查国内实验恒河猴和食蟹猴中幽门螺杆菌和"猕猴螺杆菌"的感染情况。方法参考文献中的螺杆菌属16S rRNA和幽门螺杆菌16S rRNA的引物序列,和新设计的"猕猴螺杆菌"16S rRNA特异性引物,在人工养殖的45只成年恒河猴和90只成年食蟹猴粪便样本中,通过q PCR或常规PCR检测来初步调查这两种猕猴中两种螺杆菌的感染情况。结果在恒河猴中幽门螺杆菌和"猕猴螺杆菌"的感染率均为100%,在食蟹猴中幽门螺杆菌和"猕猴螺杆菌"的感染率分别为100%和97.8%。结论证实我国人工繁育饲养的恒河猴和食蟹猴普遍存在"猕猴螺杆菌"感染。幽门螺杆菌和"猕猴螺杆菌"几乎同时存在于所有人工繁育的实验猴个体中,可能会对这两种猕猴的健康以及相关动物实验结果的准确性存在不利影响。     

恒河猴P21基因在COS-7细胞中沉默位点的验证

【摘要】 目的 在细胞水平筛选恒河猴 p21基因的有效沉默靶点。方法 检测 COS-7 中 p21基因的表达水平;设计shRNA并构建p21-RNA干扰慢病毒载体FUGW-TDT-p21shRNA转染 COS-7 细胞,通过real-time PCR检测沉默效率,并以 Western Blot 在蛋白水平进行验证。结果 筛选到四个有效的靶位,分别位于p21 mRNA 的541-561bp,542-562bp,215-239bp,624-648bp。四个靶位点在mRNA水平的沉默效率分别为 (91.82?.21)%, (82.47?.48)%, (81.31?.69)%和(87.35?.59)%。相应的蛋白表达量为(11.97?.70)%, (20.22?.65)%, (23.21?.63)%和(14.42?.86)%。结论 在细胞水平筛选得到四个有效的 p21基因沉默靶点,可用于恒河猴基因沉默研究。     

恒河猴p53基因沉默靶点在细胞水平的验证

目的：为建立恒河猴 p53基因沉默模型,首先在细胞水平筛选和测定恒河猴 p53基因有效沉默靶点。方法测定非洲绿猴肾来源成纤维细胞 COS-7中 p53基因的表达水平;对恒河猴 p53基因做生物信息学分析,优选靶序列设计 shRNA,克隆入慢病毒载体 FUGW-TDT,转染 COS-7细胞,以 real-time PCR 检测 p53 mRNA 抑制水平,以 Western blot 检测 p53蛋白水平表达变化。结果在 COS-7细胞检测到 p53基因的表达;生物信息学筛选到3个靶片段,分别位于 p53 mRNA 的238～258 bp,681～701 bp,169～189bp,均在开放阅读框内; p53三个靶位点的沉默效率在 mRNA 水平分别为（87.17±4.03）％,（72.62±14.11）％,（76.22±0.98）％;在蛋白水平的沉默效率分别为（84.44±2.18）％,（71.0±1.18）％,（74.17±0.95）％。结论在细胞水平筛选得到3个有效的 p53基因沉默靶点,可用于后续的恒河猴基因沉默研究。     

食蟹猴SPF种群建立过程中病毒抗体的动态监测

目的 调查研究从老挝引种的食蟹猴BV、SRV、SIV和STLV-1四项病毒抗体阳性、可疑的比例,并对SPF种群建立过程中四项病毒的动态变化进行了监测,进而比较普通种群和SPF种群幼猴病毒抗体的阳性率。 方法 采用专用试剂盒对四项病毒进行连续监测并进行比较分析。 结果 引种的1998只食蟹猴,BV抗体阳性比例高达52.35%,可疑比例为8.31%,抗体阴性的比例仅为39.34%;SRV和STLV-1抗体阳性率分别为7.45%和8.56%;未检测出SIV抗体阳性或可疑的食蟹猴。经过筛选后组建的SPF种群,2010年监测的BV、SRV和STLV-1三项病毒抗体阳性率分别为5.24%、1.01%和0.4%,经过连续5年的不断筛选和淘汰,截至2014年年底三种病毒抗体阳性率分别下降至0.82%、0.27%和0.27%,未监测出SIV抗体阳性或可疑的食蟹猴。普通群繁殖幼猴B病毒抗体阳性的比例为9.71%,可疑率为1.85%;而SPF繁殖种群B病毒抗体阳性率仅为0.22%。 结论 连续监测病毒抗体并不断淘汰抗体阳性和可疑的动物对组建SPF食蟹猴种群具有重要的生产意义。     

季节性变化对雌性恒河猴生殖功能的影响

目的　研究季节性变化对雌性恒河猴生殖功能的影响。方法　采用随机抽样法和放射免疫测定法 ,分析了不同时期雌性恒河猴性皮肤变化、月经周期和生殖激素变化的特点。结果　 ( 1)性征的季节性变化 :在生殖季节雌性恒河猴几乎都出现性皮肤反应 ,出现比较规则月经周期 ,在非生殖季节只有部分雌性恒河猴出现性皮肤反应 ,月经周期不规则 ,行经频率低 ,有的出现长时间的闭经 ;( 2 )生殖激素的季节性变化 :在生殖季节促性腺激素和性类固醇激素的分泌水平都出现周期性的变化 ,而非生殖季节促性腺激素和性类固醇激素的分泌水平没有显著的差异。结论　雌性恒河猴性皮肤变化、月经周期和生殖激素存在明显的季节性差异 ,这种差异导致了雌性恒河猴生殖功能的季节性变化     

猕猴眼屈光生物学参数的检测

目的：观察人工繁育猕猴眼球的屈光生物学参数,为眼动物实验提供可靠的参考数据。方法采用电脑验光仪、IOL-Master、角膜超声测厚仪,对47只猕猴93眼的屈光度数、角膜曲率半径、眼轴长度、中央角膜厚度等屈光生物学参数进行测量。结果各年龄组猕猴眼中央角膜厚度比较无统计学差异（P>0.05）;眼轴长度在2.5岁以前随年龄的增长不断变长,2.5岁以后眼轴长度可能不再变化;0.5岁组角膜曲率半径最小,随年龄增长有变长趋势,1.5岁以后趋于稳定;等效球镜屈光度数越小,轴率比就越大,2.5岁~4.5岁期间轴率比维持在一个较稳定的范围。结论与人类相比,人工繁育猕猴眼中央角膜厚度更薄,眼轴长度更短,角膜曲率半径也更小,角膜曲率半径和眼轴长度的变化规律和人类接近,可作为理想的动物眼实验模型。     

6种常用SPF级大小鼠繁殖性能测定与分析

目的测定、分析本中心保存的6种常用SPF级大小鼠(SD大鼠、C57BL/6小鼠、BALB/c小鼠、NIH小鼠、KM小鼠、ICR小鼠)的主要繁殖性状。方法近交系小鼠采用全同胞同居交配,封闭群大鼠和小鼠采用循环交配。测定这6种品系大小鼠第1~4胎所生仔鼠的平均产仔数、平均带仔数和平均离乳数,并计算离乳率。同时测定初配日龄、初产日龄、初产间隔和各胎胎间隔。结果近交系小鼠的平均产仔数均为6~7只,前3胎繁殖数据基本保持稳定,第4胎各项数据相比第3胎明显下降(P0.05)。BALB/c小鼠的离乳率在98%~99%,C57BL/6小鼠为96%~98%。封闭群实验动物的平均产仔数可达12~14只,第2~3胎平均产仔数均较第1胎明显升高(P0.05),但第4胎又比第3胎显著下降(P0.05)。NIH、KM和ICR小鼠的离乳率都维持在98%~99%;SD大鼠的离乳率则略低(95%~97%)。小鼠的初配日龄在70 d~80 d之间,大鼠在109 d;封闭群小鼠的初产日龄和初产间隔低于近交系小鼠,大鼠的初产日龄和初产间隔分别为136.3 d和27.7 d;近交系小鼠的胎间隔在34 d~40 d之间,封闭群小鼠在25.5 d~28.7 d之间,大鼠在32.8 d~33.8 d之间。结论本中心保存的6种常用大小鼠繁殖性能较高,获得的繁殖性能参数为华南地区实验大小鼠商业化生产和啮齿类实验动物资源库的建立提供依据和基础数据。     

食蟹猴自发性高血压及患病危险性的相关性研究

目的建立各年龄段食蟹猴血压参考值。方法采用美国Beckman-CX4全自动生化分析仪和北京松下电工有限公司的腕式电子血压计,检测521只食蟹猴血压及血脂指标,对测定结果进行统计检验。结果经统计分析,不同年龄段的食蟹猴血压值差异显著,老年组食蟹猴血压值高于其它年龄组;老年组食蟹猴高血压的发病率高于其他年龄组,高血压组食蟹猴身体质量指数(body mass index,BMI)高于同年龄组血压正常的食蟹猴;老年组高脂血症食蟹猴高血压发病率高于其他年龄组。Logistic回归分析显示,年龄、BMI及高脂血症在预测高血压组的患病危险性的预测能力分别为血压正常组的1.435、1.218、2.337倍。结论初步建立不同年龄段食蟹猴的血压参考值。年龄、BMI、高脂血症为食蟹猴自发性高血压的危险因素,基础血压值测量为食蟹猴自发性高血压模型筛选及其相关研究提供了依据。     

恒河猴感染华支睾吸虫的初步观察

用恒河猴感染华支睾吸虫获得成功。两只恒河猴获虫率分别为9.9％及31.59％。所得虫体都已发育成熟。感染后30天所得虫体平均长5.15mm,宽1.005mm。感染后48天所得虫体平均长8.0625mm,宽1.34mm。两猴粪便中都发现成熟虫卵。说明恒河猴可作为华支睾吸虫的终宿主。‘ 猴华支睾吸虫病早期表现主要特点有三:嗜酸性粒细胞增多症(感染后30天);慢性炎症时(感染后48天)病灶区内浆细胞显著增多;肝内胆管上皮细胞腺瘤样增生,其分泌功能亢进,经奥辛蓝染色,上皮细胞核上区呈深蓝色,提示富含酸性粘多糖。