升清胶囊下调胆囊结石豚鼠胆囊上皮组织雌、孕激素受体

目的：研究雌激素受体和孕激素受体在胆固醇结石形成中的作用及升清胶囊对其表达的影响。方法：将80只雌性豚鼠随机分为正常对照组、模型组、熊去氧胆酸组和升清胶囊组,每组20只。除正常对照组外,采用高脂致石饮食法建立胆囊胆固醇结石模型。升清胶囊组和熊去氧胆酸组豚鼠分别灌胃相应药物。造模7周后观察各组豚鼠胆囊成石情况,并采用免疫组织化学法检测豚鼠胆囊上皮组织雌、孕激素受体的表达。结果：升清胶囊可降低造模豚鼠的成石率,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。按正常对照组、升清胶囊组、熊去氧胆酸组和模型组的顺序,各组豚鼠胆囊组织雌、孕激素受体阳性表达半定量分级逐级升高,升清胶囊组与模型组、熊去氧胆酸组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。各组间雌、孕激素受体阳性表达率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：疏肝利胆方药升清胶囊可下调雌、孕激素受体的表达,降低胆固醇结石形成。     

升清胶囊对胆囊胆固醇结石小鼠模型生化学指标的影响

目的：观察疏肝利胆中药升清胶囊对胆囊胆固醇结石小鼠生化学指标的影响。方法：38只C57BL/6J雌性小鼠随机分为正常对照组（n=10）、模型组（n=15）和升清胶囊组（n=13）。除正常对照组外,模型组和升清胶囊组小鼠采用高脂饮食诱发法建立胆固醇结石模型。造模过程中,升清胶囊组小鼠予升清胶囊0.22 g/（kg.d）灌胃治疗。8周后观察各组小鼠的成石率、血脂含量、血清钙离子浓度、肝脏丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性。结果：模型组成石率为73.33%,明显高于正常对照组和升清胶囊组,差异有统计学意义（P〈0.01）。升清胶囊组血清总胆固醇和低密度脂蛋白含量低于模型组（P〈0.01）,高密度脂蛋白含量高于模型组（P〈0.01）;升清胶囊组小鼠肝脏SOD活性升高和MDA含量下降,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：升清胶囊可通过降低小鼠胆固醇结石模型成石率,改善血清和肝脏的生化学相关指标,从而发挥防治胆石病的作用。     

升清胶囊对胆色素结石B-UGT mRNA表达的影响

目的:探讨疏肝利胆中药升清胶囊防治胆色素结石的作用机制。方法:以原代细胞培养方法建立胆色素结石豚鼠肝细胞模型,采用血清药理学方法制备不同浓度含升清胶囊药物血清;以RT-PCR法检测不同浓度含药血清对于尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶(B-UGT)mRNA的影响。结果:升清胶囊可增强肝细胞内B-UGT的mRNA表达,且随着用药浓度的增加肝细胞内B-UGT mRNA表达呈上升趋势。结论:升清胶囊防治胆色素结石的作用机制可能与增强肝细胞B-UGT mRNA表达,进而改善胆红素代谢、抑制致石性胆汁的形成有关。     

胆固醇7α-羟化酶基因多态性与儿童血脂水平的关系

目的:探讨胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)基因多态性与儿童血脂水平的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)对216例健康儿童CYP7A1基因的A-204C基因座进行Eco31Ⅰ酶切多态性分析,血脂测定在全自动化分析仪上进行。结果:研究人群中CYP7A1基因的三型频率分别为:AA型6.0%,AC型26.4%、CC型67.6%。AA基因型在LDL-C,TC,Lp(a)水平上均低于其他基因型,并且其差异具有显著性(P<0.05)。CC基因型在HDL-C水平上均高于其他基因型,且其差异具有显著性(P<0.05)。三型在ApoA上两两之间均存在显著性差异,而在TG中无显著性差异。结论:CC基因型在研究人群中所占的比例最高,AA基因型所占的比例最小。CYP7A1的基因多态性与儿童的血脂水平存在密切的关系。     

雌激素受体及胆汁酸代谢相关基因在胆汁淤积孕鼠胎鼠肝脏中的表达

目的探讨雌激素受体(estrogen receptor,ERα)与胆汁酸代谢相关基因胆固醇7α羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)、胆固醇27α羟化酶(cholesterol 27-hydroxylase,CYP27A1)、胆固醇12α羟化酶(cholesterol 12α-hydroxylase,CYP8B1)mRNA在妊娠期肝内胆汁淤积孕鼠胎鼠肝脏中的表达及其意义。方法将60只清洁级SD孕鼠自孕第13天均分为2组:对照组孕鼠皮下注射精制植物油2.0 mL.kg-1.d-1;研究组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇1.25 mg.kg-1.d-1。2组孕鼠分别于妊娠第13、17、21天断尾采母鼠血2 mL检测血清生物化学指标,于妊娠第21天处死。抽取母鼠、胎鼠血并提取母鼠、胎鼠肝脏组织。应用酶联免疫吸附试验检测2组孕鼠以及胎鼠血清中胆酸浓度;应用实时定量PCR技术检测各组胎鼠肝脏ERα、CYP7A1、CYP27A1、CYP8B1的mRNA表达量。结果①胆酸指标比较:在妊娠第17天时对照组、研究组母鼠胆汁酸浓度分别为(24.6±1.3)μmol/L、(58.7±3.2)μmol/L,研究组母鼠胆汁酸浓度明显高于对照组(t=2.462,P<0.05);在妊娠第21天时对照组、研究组母鼠胆汁酸浓度分别为(26.5±3.1)μmol/L、(66.4±2.7)μmol/L,研究组母鼠胆汁酸浓度与妊娠第17天时研究组以及对照组相比(F=5.43,P<0.05),差异有统计学意义。②胎鼠肝脏CYP7A1 mRNA、CYP27A1 mRNA、CYP8B1 mRNA表达:研究组中CYP7A1 mRNA(1.25±0.01)、CYP27A1 mRNA(2.05±0.03)、CYP8B1 mRNA明显高于对照组(0.35±0.02、0.75±0.03、0.85±0.02),P值均<0.05,差异有统计学意义。③胎鼠肝脏雌激素受体的表达:研究组中ERαmRNA(0.75±0.02)明显高于对照组ERαmRNA(0.45±0.01)。结论妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕鼠胎鼠肝细胞ER、CYP7A1、CYP27A1、CYP8B1的表达升高,胆汁酸的合成与代谢调节机制存在障碍,可能是导致ICP胎儿围生期死亡发生的原因之一。     

大黄灵仙胶囊对胆结石防治作用机制的实验研究

目的 运用现代医学实验方法,从生物化学、分子生物学水平研究和探讨大黄灵仙胶囊对胆结石的防治作用机制.方法 选健康新西兰大白兔共80只,分为模型组、大黄灵仙组、消炎利胆组和正常对照组4组,每组20只.模型组、大黄灵仙组、消炎利胆组进行慢性肝损伤造模,完成后大黄灵仙组和消炎利胆组分别予大黄灵仙胶囊（制作成悬液）、消炎利胆片（制作成悬液）灌胃;模型组和对照组以等量生理盐水灌胃.6周后取材,观察、比较胆囊成石情况;检测各组兔血清相关指标;检测兔肝组织总RNA和肝组织中CYP7A1mRNA和acbc11mRNA基因表达相对量.结果 大黄灵仙组在降低胆固醇含量、增加胆汁酸含量方面结果 优于消炎利胆组;模型组兔肝组织中CYP7A1和acbc11基因表达显著下调,分别只有正常组的54.0%和49.9%;大黄灵仙组、消炎利胆组兔肝组织CYP7A1mRNA和胆汁酸盐输出泵acbc11mRNA表达量亦比正常组下降,但却比模型组有明显上升趋势,同时比较二者治疗结果,大黄灵仙组优于消炎利胆组（P〈0.05）,特别是在改善acbc11基因表达方面更具优势.结论 大黄灵仙胶囊能够修复受损肝细胞,稳定肝细胞CYP7A1、胆汁酸盐输出泵acbc11的基因表达,改善肝脏胆固醇代谢和胆汁酸代谢等,有效地保护了肝脏功能,起到了减少和预防结石形成的作用.     

胆固醇7α-羟化酶基因多态性与小儿血脂的关系

目的:探讨胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)基因多态性与湖北儿童血脂水平的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)对216例健康儿童CYP7A1基因的A-204C基因座进行Eco31I酶切多态性分析,血脂测定在全自动化分析仪上进行。结果:研究人群中CYP7A1基因的3型频率分别为:AA型6.0%,AC型26.4%、CC型67.6%。AA基因型在LDL-C,TC,Lp(a)水平上均低于其他基因型,并且其差异具有显著性。CC基因型在HDL-C水平上均高于其他基因型,并且其差异具有显著性。3型在ApoA上两两之间均存在显著性差异,而在TG中无显著性差异。结论:CC基因型在研究人群中所占的比例最高,AA基因型所占的比例最小。CYP7A1的基因多态性与儿童的血脂水平存在密切的关系。     

豚鼠高脂血症模型的建立及机制探讨

目的 建立豚鼠高脂血症模型,探讨模型形成机制并与大鼠模型进行比较.方法 豚鼠模型和大鼠模型1组用低胆固醇(0.1%)饲料诱导,大鼠模型2组用高胆固醇(1%)饲料诱导,连续诱导4周.第3、4周分别取血测定血清脂质水平及CETP表达,4周末剖取肝脏检测肝脏FC、TG、ACAT、CYP7A1等指标.动态观察两种动物形成高脂血症状况.结果 与对照组比较,豚鼠模型组于第3周血清TC、LDL-C、TG分别升高3.92倍、3.75倍和1.24倍,4周末血清CETP表达、肝脏ACAT活性明显增加,但肝CYP7A1水平变化不大.大鼠模型1组经低胆固醇饲料诱导4周,血脂水平变化不明显,模型2组经高胆固醇饲料诱导于第3周血清TC、LDL-C分别升高1.24倍和1.54倍,明显低于同期豚鼠模型组,4周末大鼠两个模型组肝CYP7A1活性显著增强,血清TG、CETP水平、肝ACAT活性均未见明显变化.结论 豚鼠对高脂饲料较大鼠敏感,是一种比大鼠更理想的高血脂模型动物,模型形成机制与血清CETP表达、肝ACAT及 CYP7A1活性变化密切相关.     

胆汁酸合成和代谢调节的研究

胆汁酸的生物合成受多种因素的调节 ,其核心是对胆汁酸合成关键酶的调控。最主要的酶是胆固醇 7α 羟化酶。该酶是细胞色素Ｐ 4 5 0酶 ,易受胆汁酸和胆固醇 ,可能还有激素的调节 ,它的活性涉及细胞色素Ｐ 4 5 0 ,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (还原型辅酶Ⅱ ) (ＮＡＤＰＨ)细胞色素Ｐ 4 5 0还原酶 ,ＮＡＤＰＨ和卵磷脂。该酶不被苯巴比妥诱导 ,半衰期为2～ 3ｈ。1　胆固醇 7α 羟化酶的反馈调节许多研究表明 ,胆汁酸合成具有负反馈机制 ,即门脉血中胆汁酸抑制胆固醇 7α 羟化酶活性。在完全解除胆管胆汁的作用后 ,胆汁酸合成增高 7倍 ,重…     

升清胶囊对胆色素结石豚鼠肝细胞核因子-κB蛋白表达的影响

目的:探讨疏肝利胆中药升清胶囊防治胆色素结石的作用机制。方法:用原代细胞培养方法建立胆色素结石豚鼠肝细胞模型;采用血清药理学方法制备不同浓度含升清胶囊药物血清;建立脂多糖刺激下体外培养原代肝细胞高核转录因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)蛋白表达的实验模型,用Western-blotting检测不同浓度含药血清对于NF-κB蛋白表达的影响。结果:升清胶囊能降低脂多糖刺激引起的NF-κB蛋白的表达;随着用药浓度的增加,升清胶囊对脂多糖刺激引起的NF-κB蛋白表达的抑制作用也越强。结论:疏肝利胆中药升清胶囊能降低脂多糖刺激引起的NF-κB蛋白的表达,可能是其防治胆色素结石成石及胆道炎症反应的作用机制之一。     

体温过低对豚鼠耳蜗电图的影响

目的　探讨体温过低对耳蜗电图(ECochG)的影响及其波的起源。方法　体表物理降温法逐步降低豚鼠体温(36～2 5℃) ,观察系列体温过低时豚鼠脑干听觉诱发电位(BAEP)和ECochG波峰潜伏期(PL)和波峰间潜伏期(IPL)及波幅的动态变化。结果　随体温逐步降低(36～2 5℃) ,BAEP的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ波PL和Ⅰ～Ⅳ波IPL与ECochG的N1,N2 ,N3 波PL及N1～N3 波IPL随体温降低而逐渐延长,体温越低,延长越显著;代表脑干中枢传递时间的BAEP的Ⅰ～Ⅳ波IPL的延长总值明显大于代表外周传导时间的Ⅰ波PL的延长总值,且源自脑干中枢的Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ波的PL的延长总值明显大于源自听神经的Ⅰ波的PL延长总值,ECochG的N1～N3 波IPL的延长总值也明显大于代表外周传导时间的N1波的PL的延长总值,N2 及N3 波PL的延长总值也明显大于源自听神经的N1波的PL的延长总值;BAEP的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ波和ECochG的N1,N2 波波幅在体温降低至34～2 8℃后出现显著降低。结论　体温过低对ECochG的显著影响与BAEP相似,ECochG的N2 及N3 波较源自听神经的N1波有更高位的神经起源。     

芦荟凝胶对豚鼠哮喘的作用研究

目的:探讨芦荟凝胶对豚鼠过敏性哮喘的影响。方法:将豚鼠随机分为哮喘组、芦荟组和正常组3组,用10%卵清蛋白(OVA)生理盐水200mg/kg合并等体积1mg/ml氢氧化铝致敏豚鼠,两周后抗原OVA第2次攻击,复制豚鼠哮喘模型;芦荟组隔天芦荟灌胃两周,其余两组生理盐水灌胃。对比观察其行为学差异和血中嗜酸性粒细胞(EOS)数目的差异。结果:芦荟组嗜酸性粒细胞数目较哮喘组明显降低(P<0.05),且其哮喘症状有明显差异(P<0.05)。结论:芦荟凝胶可有效减轻豚鼠的哮喘症状。     

卡波金对豚鼠缺血耳蜗的作用

目的：探讨卡波金对豚鼠缺血耳蜗的作用。方法：动物分为4组：正常对照组（Ⅰ组）；假手术组（Ⅱ组）；暴露双侧椎动脉和一侧颈总动脉；缺血组（Ⅲ组）：结扎双侧椎动脉和一侧颈总动脉建立内耳缺血模型，卡波金组（Ⅳ组）：建立内耳缺血模型的同时吸入卡波金。每组20只，10只采用微球法测血流量，10只作ABR测试及扫描电镜观察耳鼻毛细胞形态。结果：耳蜗血流量缺血组较正常对照组降低54.83%，卡波金组较缺血组增加31.46%；ABR各波潜伏期及Ⅰ-Ⅲ波间期缺血组较正常对照组延长，卡波金组较缺血组缩短；听觉阈值缺血组较正常组升高13.7dBSPL，卡波金组较缺血组降低5.5dBSPL(P均＜0.01）。缺血组耳蜗底周毛细胞纤毛出现明显的倒伏、排列率乱，人内排到外排逐渐加重，并可见少数细胞缺失，卡波金组毛细胞纤毛倒伏减轻。结论：结扎豚鼠两侧椎动脉和一侧颈总动脉使耳蜗血流量减少，吸入卡波金使缺血耳蜗的血流量增加。豚鼠耳蜗缺血后，耳蜗毛细胞及功能形态受损，吸入卡波金可损伤减轻。     

乙酰唑胺对豚鼠内耳超微结构影响的研究

目的：探讨乙酰唑胺对血管纹和内淋巴瘤上皮细胞超微结构的影响。方法：静脉注射乙酰胺唑胺后，观察不同时相（０，１５，３０ｍｉｎ，１，２ｈ及７ｄ）血管纹，内淋巴囊超微结构的变化，结果：（１）血管纹内淋巴腔面游离缘空泡在注射乙酰唑胺后３０ｍｉｎ和１ｈ明显减少，１周后空泡消失，边缘细胞和中间细胞各种细胞器减少，线粒体变性；（２）内淋巴囊上皮细胞超微结构在注射乙酰唑胺３０ｍｉｎ后出现改变，１ｄ时最为明显，主要     

维生素E烟酸酯对豚鼠非乙醇性脂肪性肝炎的影响

目的:建立豚鼠非乙醇性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)模型及观察维生素E(Vit.E)烟酸酯对该模型的影响.方法:将20只豚鼠随机分为对照组、模型1组(4 wk)、模型2组(8 wk)、治疗组,分别给予高脂高糖饮食及Vit.E烟酸酯(20 mg/d),处死后测定其体质量、肝指数、血清ALT,AST,TC和TG含量,并观察豚鼠肝组织病理变化.结果:肝指数在对照组、模型1组、模型2组依次增高,治疗组与模型2组无显著差异.血清ALT在各组无显著差异,AST在模型组有显著增高,TC,TG在模型1组大幅度升高(P＜0.05,P＞0.05),TC在模型2组有所下降,但仍高于对照组(P＜0.05),TG在模型2组与对照组无差异,模型2组与治疗组在ALT,AST,TC和TG上均无显著差异.病理显示肝脏脂肪变性及炎症活动、坏死及纤维化在对照组、模型1组、模型2组依次加剧,但治疗组与模型2组间无显著差异.结论:本实验成功地复制了NASH的豚鼠模型,Vit.E烟酸酯对豚鼠NASH的影响在本实验中不明显.     

雷公藤甲素对哮喘动物模型气道反应性的作用及机理

用卵白蛋白致敏和激发豚鼠，形成哮喘动物模型（哮喘组）。用雷公藤甲素（简称“雷公藤组”）处理哮喘模型后，测定以上二组和正常对照组豚鼠对组织胺的气道反应性、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）绝对计数、低密度Ｅｏｓ（ＨＥｏｓ）百分比以及ＥＡＬＦ中的嗜酸性粒细胞活力增强活性（ＥＶＥＡ）。发现哮喘组气道反应性非常显著高于正常组（Ｐ＜０．００１）、雷公藤组（Ｐ＜０．０１），雷公藤组显著高于正常组（Ｐ＜０．０５）。而且，哮喘组Ｅｏｓ绝对计数和ＨＥｏｓ％均与气道反应值（ＰＣ２０值）显著相关（ｒ＝－０．７６和－０．８８，Ｐ＜０．０５和０．０１）。雷公藤甲素处理不能抑制哮喘模型肺内的Ｅｏｓ聚集，但却降低ＨＥｏｓ％至正常组水平。哮喘组ＢＡＬＦＥＶＥＡ显著高于对照组、雷公藤组。哮喘组ＢＡＬＦＥＶＥＡ与ＨＥｏｓ％呈显著的正相关（ｒ＝０．７５，Ｐ＜０．０５）。以上结果表明，雷公藤甲索具有降低哮喘动物模型气道反应性的作用，其机理可能与减少“活化”的ＨＥｏｓ有关。雷公藤甲素可能有潜在的临床应用价值。     

Effects of tripholide on airway responsiveness in asthma in guinea pigs

TripholideextractedfromaChineseherbhasbeenwidelyusedasanimmuneinhibitortotreatsystemiclupuserythematosus,rheumatoidarthritisandnephriticsyndromeinChina.Inpatientswithasthma,thereareimmunefunctionaldisordersincludingtheincreaseoftheratioofCD4/CDSTcells,activationofThZ--likecellsandexcessiveproductionofThZ--likecytokinessuchasIL--5,IL3andgranulocyte--macrophageclony--stimulatingfactor(GM--CSF).Thesecytokinescaninduceeosinophiliaandactivationofeosinophilsintheairwayandplayanimportantrolei…