BCG感染牛肺泡巨噬细胞的转录组测序和分析

目的：通过卡介苗（BCG）感染牛肺泡巨噬细胞（BAM）的转录组测序及生物信息学分析,揭示差异表达的基因和长链非编码RNA （lncRNA）,为巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调控机制研究提供理论依据。方法：采用肺脏灌洗离心法收集并培养BAM,分为感染组和未感染组,感染组经BCG感染后12h,利用转录组测序技术（RNA-Seq）检测感染组和未感染组BAM mRNA表达谱及lncRNA表达谱,并进行生物信息学相关分析。结果：与未感染组比较,感染组BAM差异表达的lncRNAs共有119个（P<0.05）,差异表达的mRNA共有1 111个（P<0.05）。在差异表达基因的功能富集分析中,最显著富集项与免疫功能相关（GO：0006955,P<0.05）,共有125个基因,其中有63个基因表达上调,62个基因表达下调,且白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素17（IL-17）和白细胞介素23A （IL-23A）等促炎因子表达上调。lncRNA靶基因预测,差异表达的lncRNA参与转化生长因子β（TGF-β）信号通路及ABC转运体信号通路的调控（P<0.05）。结论：BCG感染BAM后,激发宿主细胞产生强烈的免疫反应,引起lncRNA和mRNA表达谱的改变。     

Ghrelin基因在多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞中的表达

目的：探讨Ghrelin基因在卵巢颗粒细胞中的表达及其与多囊卵巢综合征（polycystic ovarian syndrome,PCOS）的关系。方法：选择47例在重庆医科大学辅助生育中心接受体外受精-胚胎移植治疗的不孕妇女,其中PCOS组11例,对照（Non-PCOS）组36例,采用real-time PCR及免疫印迹法分别测定2组妇女卵巢颗粒细胞中Ghrelin mRNA和蛋白的表达水平。结果：PCOS妇女颗粒细胞中Ghrelin mRNA和蛋白的表达均低于Non-PCOS妇女（0.926±0.206 vs. 1.137±0.105,t=2.73,P=0.015;0.647±0.052 vs. 0.937±0.038,t=7.82,P=0.001）。结论：PCOS妇女卵巢颗粒细胞的Ghrelin mRNA和蛋白表达水平明显低于Non-PCOS妇女,可能与卵泡发育障碍相关。     

瘦素及其受体在多囊卵巢综合征卵巢的表达及意义

目的探讨瘦素（Leptin）及其受体（Ob gene receptor，Ob-R）系统与多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）发病机制间的关系。方法用免疫组织化学和原位杂交技术检测Leptin、具有信号传导功能的leptin长受体（Ob-Rb）在PCOS患者（15例）和月经周期规律的对照组（20例）卵巢的表达。结果①Leptin及Ob-Rb的蛋白及mRNA在PCOS患者和对照组的卵巢均有表达。②Leptin主要分布在各级卵母细胞、窦状卵泡至排卵前卵泡的颗粒细胞（granulosa cell，GC）、不同生长阶段及闭锁卵泡的卵泡膜细胞（theca cell，TC），在PCOS患者卵母细胞的表达明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。③Ob-Rb主要分布在各级卵母细胞、各级生长卵泡及闭锁卵泡的TC、次级及近成熟卵泡的GC、成熟黄体的颗粒黄体细胞。在PCOS患者的卵母细胞、窦状卵泡的TC及闭锁卵泡TC的表达显著高于对照组（P〈0．01／P〈0．05）。④Leptin及Ob-Rb在不同发育阶段卵巢的表达规律1卵母细胞强阳性表达，在初级卵泡的GC及TC表达较弱，随着卵泡发育表达逐渐增强，在排卵前卵泡或闭锁卵泡TC强阳性表达，Ob—Rb在发育期黄体的颗粒黄体细胞亦呈强阳性表达。⑤Leptin及Ob—Rb在PCOS患者小卵泡TC的表达高于GC，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论①卵巢具有分泌Leptin的功能。②Leptin及受体系统在卵母细胞、卵泡和黄体发育、受精及受精卵着床过程中可能起重要作用。③Leptin及其受体系统在PCOS的卵巢异常表达。     

多囊卵巢综合征卵巢储备功能降低患者肥胖及糖脂代谢特征

目的 探讨中国多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）合并卵巢储备功能降低（diminished ovarian reserve,DOR）患者肥胖及糖脂代谢特征。方法 选取2015年1月至2017年1月在首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科就诊的多囊卵巢综合征患者338名（包括PCOS合并DOR功能降低患者57名及单纯PCOS患者281名）及同期就诊的正常对照组70名,记录研究对象的年龄、月经情况,测量其身高、体质量、腰围、臀围,测定基础血清卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、雌二醇（estradiol,E₂）、睾酮（testosterone,T）、抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone,AMH）、空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、空腹胰岛素（fasting insulin,FINS）、三酰甘油（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）,测量基础窦卵泡数（baseline antral follicle count,bAFC）。对多囊卵巢综合征合并卵巢储备功能低下患者、单纯多囊卵巢综合征及正常对照组的各指标进行比较,并对各组AMH与其他指标进行相关性分析。结果 （1）单纯PCOS患者、PCOS合并DOR患者及正常对照组全身型肥胖（≥ 25 kg/m²）的发生率分别为38.1%、40.4%及22.9%,腹型肥胖[腰臀比（waist hip ratio,WHR）≥ 0.85]的发生率分别为46.6%、21.1%及28.6%。PCOS合并DOR患者全身型肥胖率与单纯PCOS患者及正常对照组间的差异均无统计学意义（P>0.05）,而腹型肥胖率低于单纯PCOS患者（P<0.05）。（2）PCOS合并DOR患者FPG、FINS、自我平衡模型分析法（homeostasis model assessment,HOMA）-计算胰岛素抵抗（insulin resistivity,IR）与单纯PCOS患者的差异均无统计学意义（P>0.05）,而FPG、HOMA-IR均高于正常对照组（P<0.05）。（3）单纯PCOS患者、PCOS合并DOR患者TC、HDL-C及LDL-C均高于正常对照组（P<0.05）,PCOS合并DOR患者TC、TG、HDL-C及LDL-C与单纯PCOS患者的差异均无统计学意义（P>0.05）。（4）单纯PCOS患者,AMH与FPG、HOMA-IR呈负相关关系（P<0.05）,与HDL-C呈正相关关系（P<0.01）;PCOS合并DOR患者AMH与肥胖及糖脂代谢指标均无相关关系（P>0.05）;正常对照组AMH仅与HDL-C呈正相关关系（P<0.01）。结论 PCOS合并DOR患者腹型肥胖率低于单纯PCOS患者,其糖脂代谢特征与单纯PCOS患者相似,但AMH与糖脂代谢指标的相关性不同于单纯PCOS患者及正常对照组。     

控制性卵巢刺激对多囊卵巢综合征患者和正常排卵妇女卵源性因子表达的差异

【目的】 研究控制性卵巢刺激对多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）患者和正常排卵妇女卵母细胞和颗粒细胞中卵源性因子（生长分化因子ＧＤＦ９和骨形成蛋白ＢＭＰ１５）表达的影响及两组妇女之间的表达差异。【方法】 收集ＰＣＯＳ患者和正常排卵的不孕妇女共９７例,分为４组：２２例未经历卵巢刺激（未刺激－ＰＣＯＳ组）和１８例经历卵巢刺激（刺激－ＰＣＯＳ组）的ＰＣＯＳ患者,２８例未经历卵巢刺激（未刺激－对照组）和２９例经历卵巢刺激（刺激－对照组）的正常排卵妇女。收集４组患者的卵母细胞和颗粒细胞,采用巢式实时定量ＰＣＲ的方法检测两种细胞中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平。【结果】 在正常排卵妇女的卵母细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为２４．７９ （２．９６－１０９．７３）和０．９３ （０．０５－３．６５）,在卵巢刺激组分别为１４９．９４ （５５．３８－３８７．９３）和４１．６５ （６．５０－９６．１１）,两种因子在卵巢刺激组的表达水平均显著高于未刺激组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。在正常排卵妇女的颗粒细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为０．０２ （０．００９－０．２１）和０．００８（０．００１－０．１６）,在卵巢刺激组分别为０．１０ （０．０６, ０．１８）和０．０２（０．０１－０．０３）,两种因子在卵巢刺激组的表达水平均显著高于未刺激组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。在ＰＣＯＳ患者的卵母细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为２３．８３ （２．２９－６５．７２）和０．０９ （０．０５－２９．３２）,在卵巢刺激组分别为４４．８１ （５．９３－４８９．１９）和０．１０ （０．０５－１１．４４）,两种因子的表达在未刺激组和卵巢刺激组均没有差异（Ｐ ＞ ０．０５）。在ＰＣＯＳ患者的颗粒细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为０．１１ （０．０６, ０．１６）和０．０００ ００５（０．０００ ００４ ８－０．０００ ００９）,在卵巢刺激组分别为０．０５ （０．０３, ０．０９）和０．０２（０．００７－０．０３）, ＧＤＦ９ ｍＲＮＡ的表达在卵巢刺激组显著低于未刺激组,而ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达在卵巢刺激组显著高于未刺激组,差异均有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 控制性卵巢刺激可以促进正常排卵妇女卵母细胞和颗粒细胞中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５的表达,但是对ＰＣＯＳ患者卵母细胞中两种因子的表达没有促进作用,提示ＰＣＯＳ患者卵母细胞中卵源性因子的表达对卵巢刺激的反应性受到抑制,可能影响卵泡发育和卵母细胞成熟,从而导致卵母细胞质量低下。     

人口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞过表达WWOX基因的基因表达谱分析及WWOX基因的抑癌作用机制

目的：分析人口腔鳞状细胞癌（OSCC） Tca8113细胞过表达包含WW域的氧化还原酶（WWOX）基因的基因表达谱变化,探讨WWOX基因的抑癌作用机制。方法：Tca8113细胞分为WWOX基因过表达组和对照组。采用携带WWOX基因的pGV287-LV-WWOX慢病毒颗粒和携带空载体的pGV287-LV慢病毒颗粒分别感染2组Tca8113细胞。采用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和Western blotting法检测2组Tca8113细胞中WWOXmRNA和蛋白表达情况。采用基因芯片技术筛选差异表达基因并进行生物学分析。采用定量PCR法检测丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的差异表达基因的mRNA相对表达水平。结果：慢病毒感染后,WWOX基因过表达组Tca8113细胞中WWOXmRNA相对表达水平较对照组明显升高（P<0.05）,WWOX基因过表达组Tca8113细胞中WWOX蛋白表达水平升高。基因芯片筛选出差异倍数（FC）1.5倍以上的基因共347个,其中表达上调171个,表达下调176个。生物信息学分析显示这些基因分布于癌症、p53信号、MAPK信号和白细胞介素2（IL-2）等多条信号传导通路。WWOX基因过表达组MAPK信号通路中的丝裂原活化蛋白激酶2（MAP2K）、孤核受体4A1（NR4A1）、双特异性磷酸酶5（DUSP5）和双特异性磷酸酶6（DUSP6） mRNA相对表达水平较对照组明显升高（P<0.05）,而成纤维生长因子受体2（FGFR2） mRNA相对表达水平较对照组明显降低（P<0.05）。结论：WWOX基因过表达导致Tca8113细胞的基因表达谱发生变化,WWOX基因的抑癌作用机制与调节MAPK信号途径的多个基因表达有关联。     

雄激素对卵母细胞生长分化因子

通过观察雄激素对小鼠卵母细胞生长分化因子 9（growth differentiation factor 9,GDF 9）表达的影响，研究GDF 9参与卵泡生长发育及其表达调控机制，探讨GDF 9与多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的关系。方法：以性成熟昆明小鼠为研究模型，体内实验分为实验组（注射丙酸睾丸酮）和对照组（注射等体积的生理盐水），每组各20只小鼠，采用原位杂交法检测卵巢组织GDF 9 mRNA的表达水平。体外实验：胶原酶消化加机械法分离性成熟昆明小鼠卵泡进行体外培养，实验组培养液中加睾丸酮,对照组不加睾丸酮,72?h后收集卵泡，免疫组化检测卵母细胞GDF 9的表达水平。结果：体内实验：实验组较对照组卵巢组织GDF 9 mRNA表达水平降低, 差异有统计学意义（P＜0.05）；体外实验：实验组卵母细胞GDF 9蛋白表达较对照组降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：雄激素减弱卵母细胞GDF 9 mRNA和蛋白的表达强度；表达强度降低的GDF 9可能与PCOS卵泡发育停滞有关     

形觉剥夺性近视模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：构建形觉剥夺性近视（FDM）大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达及其与Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的关系。方法：40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型。测定大鼠眼轴长度;取大鼠眼球分离巩膜组织,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定大鼠巩膜组织中TGF-β1蛋白和mNRA表达水平。分离培养对照组和FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞,对照组大鼠巩膜成纤维细胞作为对照组,FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞分为FDM组和FDM+Dickkopf相关蛋白1（DDK1）组（加入DDK1培养）,采用Western blotting法和RT-PCR法测定各组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、3型核糖核酸酶（DCL3）、结肠腺瘤样息肉蛋白（APC）、糖原合成酶激酶3β（GSK3β）、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平。结果：与对照组比较,FDM组大鼠眼轴长度均明显增加（P<0.05）,巩膜组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。对照组、FDM组和FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中GSK3β蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）,TGF-β1、DCL3、APC、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平比较差异有统计学意义（P<0.01）;与对照组比较,FDM组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）;与FDM组比较,FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）。结论：FDM模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达水平降低,其水平受Wnt/β-catenin信号通路调控。     

综合干预治疗对多囊卵巢综合征患者雄激素浓度的影响

目的 评估多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）患者经综合干预治疗后雄激素浓度的变化。方法 选取2019年3月至2020年2月就诊于首都医科大学附属北京妇产医院接受综合干预治疗的PCOS患者88例为PCOS组,按2：1的比例匹配同期就诊的健康女性44例为对照组,比较PCOS组治疗前后、PCOS组治疗后与对照组观察指标间的差异,包括：体质量指数（body mass index,BMI）、腰围、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、LH/FSH、总睾酮（total testosterone,TT）、游离睾酮（free testosterone,FT）、性激素结合球蛋白（sex hormone binding globulin,SHBG）、抗苗勒管激素（anti Müllerian hormone,AMH）。结果 治疗前两组患者年龄、身高差异无统计学意义（P>0.05）,PCOS组患者的体质量、BMI、腰围、AMH、LH、LH/FSH、TT、FT均显著高于对照组（P<0.05）,FSH、SHBG显著低于对照组（P<0.05）;PCOS组综合干预治疗前后比较,体质量、BMI、腰围、AMH、TT、FT、LH、LH/FSH均显著下降（P<0.05）,SHBG显著升高（P<0.05）;治疗后PCOS组与同期对照组的AMH、LH/FSH、TT比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 综合干预治疗3个月后能显著降低PCOS患者的雄激素浓度,尤其总睾酮浓度达到健康女性浓度。     

腹腔镜下卵巢打孔治疗多囊卵巢综合症临床疗效分析

目的分析腹腔镜卵巢打孔治疗多囊卵巢综合征（PCOS）的临床效果。方法选取我院2010年6月-2013年3月接收的50例经药物治疗失败的PCOS患者,行腹腔镜卵巢打孔术治疗,术前和术后分别检测促黄体激素（LH）、促卵泡激素（FSH）、催乳素（PRL）、雌二醇（E2）等指标;观察患者卵巢内卵泡数量的变化、月经恢复和排卵受孕情况。结果 50例中34（68%）例患者术后1个月恢复排卵,13（26%）例第2个月恢复排卵,1（2%）例术后3个月排卵正常,术后3个月正常排卵率为96%。2例经HCG治疗后排卵。结论腹腔镜卵巢打孔术治疗PCOS效果更显著,且手术安全性高,长远疗效良好。     

人脐带间充质干细胞外泌体miR-100对多囊卵巢综合征患者颗粒细胞炎症的影响

目的 探究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源的外泌体miR-100对多囊卵巢综合征(PCOS)患者颗粒细胞炎症的影响。 方法 选取2021年3月至2021年12月于石家庄市第四医院生殖医学中心就诊的70例PCOS患者为研究对象(PCOS组),同期70例因输卵管因素助孕治疗的非PCOS患者为对照(对照组),比较两组患者的临床基线资料及IVF妊娠结局相关参数。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测患者颗粒细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达。采用二元Logistic回归分析影响PCOS的危险因素。RT-qPCR验证hUC-MSCs外泌体中miR-100的表达水平。合成miR-100模拟物及其对照转染至人卵巢颗粒细胞KGN中,RT-qPCR检测miR-100的表达水平。在脂多糖(LPS)诱导的KGN炎症细胞模型中转染miR-100模拟物及其对照,RT-qPCR检测TNF-α、IFN-γ的mRNA表达水平。采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-100对靶基因的调控作用。miR-100过表达后,Western blotting检测KGN炎症模型中Toll样受体4(TLR4)、 p-IκBa、IκBa、p-p65、 p65蛋白水平。 结果 与对照组比较,PCOS组患者体质量指数(BMI)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、睾酮(T)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、窦卵泡数(AFC)、获卵数升高(P值分别为<0.001、<0.001、0.020、<0.001、<0.001、<0.001、<0.001);但MII卵率和2PN受精率降低,差异有统计学意义(P均<0.001)。与对照组患者比较,PCOS组患者TNF-α、IFN-γ的mRNA水平升高,差异有统计学意义(P均<0.001)。二元Logistic回归分析结果显示,LH、HOMA-IR、TNF-α、IFN-γ是影响PCOS的危险因素(P值分别为0.031、0.001、0.030、0.005)。RT-qPCR结果显示,miR-100在hUC-MSCs-exos中富集,miR-100过表达可抑制LPS诱导的颗粒细胞炎症因子TNF-α、IFN-γ的mRNA表达水平(P值分别为0.041、<0.001)。双荧光素酶报告基因结果显示,miR-100能结合TLR4 mRNA 3’UTR并有效抑制其表达(P<0.001)。Western blotting结果显示,与miR-NC组比较,过表达miR-100后KGN炎症模型中TLR4、 p-IκBa和p-p65蛋白表达降低(P值分别为<0.001、<0.001、0.049),IκBa蛋白水平升高(P<0.001)。 结论 PCOS患者颗粒细胞TNF-α、IFN-γ表达升高,是影响PCOS的危险因素。hUC-MSCs来源的外泌体miR-100可通过靶向TLR4/NF-κB信号通路抑制PCOS颗粒细胞的炎症反应。     

胰岛素样生长因子II在84例多囊卵巢综合征患者颗粒细胞中的表达和促排卵结局的相关性

目的 检测胰岛素样生长因子II(IGF-II)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞中的表达水平及与促排卵结局的相关性。 方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测42例 PCOS正常反应患者(PCOS正常反应组)、42例PCOS高反应患者(PCOS高反应组)及90例对照组(因输卵管或男方因素助孕者)颗粒细胞中IGF-II的表达,对比分析各组IGF-II的表达及促排卵相关参数的差异,并进行关联性分析。 结果 IGF-II在对照组、PCOS正常反应组和PCOS高反应组相对表达量的中位数分别为1.3(0.5~1.8)、1.7(1.4~2.2)及3.2(2.5~4.3),3组间比较差异有统计学意义(F=88.7, P<0.001),其中PCOS正常反应组和PCOS高反应组均高于对照组(P均<0.001),PCOS高反应组高于PCOS正常反应组(P<0.001)。在PCOS高反应组,注射人绒毛膜促性腺素(HCG)日雌二醇(E₂)、直径≥14 mm的卵泡数、获卵数、2原核受精卵(2PN)数、优质胚胎数、卵裂数及可移植胚胎数均高于对照组及PCOS正常反应组,差异有统计学意义(P均<0.05),HCG日黄体生成素(LH)、获卵率、受精率及可利用卵子率均低于对照组和PCOS正常反应组(P均<0.05);在PCOS正常反应组,促性腺激素(Gn)总量(P=0.02)及E₂值(P<0.001)均低于对照组。相关性分析结果显示,颗粒细胞上IGF-II的相对表达量与HCG日E₂值(r=0.163, P=0.032)、HCG日≥14 mm的卵泡数(r=0.286, P<0.001)、2PN数(r=0.246, P<0.001)、卵裂数(r=0.296, P<0.001)、优质胚胎数(r=0.286, P<0.001)、获卵数(r=0.386, P<0.001)、可移植胚胎数(r=0.252, P<0.001)及优质胚胎率(r=0.155, P=0.041)呈正相关;多重线性回归分析结果显示,PCOS患者颗粒细胞上IGF-II的相对表达量与获卵数(β=0.921, P<0.001)及优质胚胎率(β=0.285, P<0.001)呈正相关,与卵裂数(β=-0.283, P<0.001)呈负相关。 结论 IGF-II在接受辅助生殖技术治疗的PCOS患者颗粒细胞中高表达,与获卵数及优质胚胎率密切相关,有促进卵泡和早期胚胎发育的潜能。     

丙二醛、视黄醇与多囊卵巢综合征发病机制关系的探索

目的 研究氧化应激指标丙二醛（malondialdehyde,MDA）、视黄醇（retinol,RET）与多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）发病机制的关系。方法 选取2017年7月至10月就诊于首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科的PCOS患者65例作为研究组,同时选取因女方输卵管因素或男方因素而不孕或正常体检的健康育龄女性24例作为对照组。测量所有参与者的人体测量学指标、内分泌代谢指标及各氧化应激指标,比较PCOS患者与对照组各氧化应激指标特点。结果 PCOS组MDA、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）均显著高于对照组（P<0.05）,血清RET浓度低于对照组（P<0.05）。PCOS组氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione,Glut oxyd,）、总抗氧化活性（total antioxidant activity,TAA）、维生素C（vitamin C,VC）、维生素E（vitamin E,VE）与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。MDA与抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone,AMH）呈明显正相关（r=0.208,P=0.05）,与睾酮（testosterone,TT）、空腹胰岛素（fasting insulin,FINS）、稳态胰岛素指数（homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR）无明显相关性（P>0.05）;RET与AMH呈明显负相关（r=-0.232,P<0.05）,与TT、FINS、HOMA-IR无明显相关性（P>0.05）。结论 多个氧化应激指标显示PCOS患者体内MDA代表的氧化应激水平增高,RET代表的抗氧化水平降低,深入研究氧化应激与PCOS的关系可能有助于阐明PCOS的发病机制。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对卵巢癌SKOV3细胞的化疗增敏作用

目的：探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACIs）辛二酰苯胺异羟肟酸（SAHA）联合长春新碱（VCR）对卵巢癌SKOV3细胞的生物学作用,并阐明其作用机制。方法：选择人卵巢癌SKOV3细胞,分为对照组、SAHA组、VCR组和SAHA+VCR组。CCK-8法检测各组SKOV3细胞生存率,流式细胞术（FCM）检测各组细胞凋亡率、自噬率和细胞周期分布情况。结果：CCK-8检测,与对照组比较,SAHA组和VCR组SKOV3细胞生存率明显降低;与SAHA或VCR组比较,SAHA+VCR组SKOV3细胞生存率明显降低（P<0.05）。FCM检测,与对照组比较,SAHA和VCR组SKOV3细胞凋亡率、自噬率及G₂/M期细胞百分率升高（P<0.05）;与SAHA或VCR组比较,SAHA+VCR组SKOV3细胞凋亡率、自噬率及G₂/M期百分率升高（P<0.05）。结论：SAHA可增强卵巢癌SKOV3细胞对VCR的敏感性,能够诱导SKOV3细胞凋亡与自噬,并促进G₂/M期阻滞;SAHA和化疗药物联合应用可能是治疗卵巢癌的新策略。     

多囊卵巢综合征患者中胰岛素抵抗与子宫内膜局部炎症因子及葡萄糖转运蛋白-4表达的相关性

目的 探讨子宫内膜局部炎症因子及葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者子宫内膜上的表达,分析PCOS患者胰岛素抵抗与子宫内膜炎症因子及GLUT-4表达的相关性。 方法 选取2018年6月至2020年7月就诊的60例PCOS患者,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为PCOS胰岛素抵抗组(A组,n=30)和PCOS非胰岛素抵抗组(B组,n=30);选取同期的60例非PCOS患者作为对照,分为胰岛素抵抗组(C组,n=30)和正常对照组(D组,n=30)。检测血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)、抗苗勒氏管激素(AMH)、空腹血糖及胰岛素水平。采用免疫组化法检测4组患者子宫内膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)p65、GLUT-4的表达。 结果 (1)4组患者间BMI、AMH、LH、T比较,差异有统计学意义(F值分别为57.35、29.54、16.77、21.20, P<0.001))。其中,与B组相比,A组患者BMI升高;与D组相比,C组患者BMI升高。与C、D组相比,A、B两组患者血清中AMH、LH升高。A组患者血清中T高于B组;(2)4组患者间子宫内膜中NF-κB p65、TNF-α及GLUT-4的表达差异均有统计学意义(F值分别为76.90、 45.13、47.75, P<0.001)。其中,与B组相比,A组患者子宫内膜中NF-κBp65、TNF-α表达升高,而GLUT-4的表达降低。与D组相比,C组患者子宫内膜中NF-κBp65、TNF-α表达升高,而GLUT-4表达降低;(3)Logistic回归分析结果显示,在PCOS及非PCOS患者中, HOMA-IR与NF-κBp65呈正相关(P<0.05),与GLUT-4呈负相关(P<0.05)。在非PCOS患者中,HOMA-IR与BMI呈正相关(P<0.05)。 结论 PCOS患者胰岛素抵抗与NF-κBp65及GLUT-4相关,可能会导致子宫内膜局部炎症因子表达增加,GLUT-4表达降低。     

综合干预后多囊卵巢综合征不孕患者应用来曲唑促排卵的临床效果

目的 探讨综合干预后采用来曲唑促排治疗多囊卵巢综合征不孕患者的临床效果。方法 选取2019年3月至2019年9月就诊于首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科的144例多囊卵巢综合征不孕患者作为研究对象,按照组间匹配的原则分为两组,观察组96例患者在接受综合干预治疗3个月后采用来曲唑治疗,对照组48例患者直接采用来曲唑治疗。观察综合干预组患者治疗前后激素浓度变化,包括黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、LH/FSH、总睾酮（total testosterone,TT）、游离睾酮（free testosterone,FT）、抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone,AMH）及腰围,比较两组患者的排卵率。结果 两组患者治疗前不孕年限、身高、体质量、体质量指数（body mass index,BMI）、腰围、臀围、LH、FSH、AMH浓度比较差异均无统计学意义（P>0.05）;观察组患者综合干预后LH、FSH、LH/FSH、TT、FT、AMH浓度较治疗前显著降低（P<0.05）,腰围较治疗前减低,但差异无统计学意义（P>0.05）;与对照组相比,观察组的排卵率明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。分层分析显示促排卵前BMI<24 kg/m²的患者中,观察组的排卵率高于对照组（P<0.05）;而BMI ≥ 24 kg/m²的患者中,两组的排卵率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 综合干预后采用来曲唑治疗多囊卵巢综合征不孕患者的临床效果显著,能够改善患者的激素浓度,提高排卵率,尤其是体质量指数控制在正常或偏低的患者效果更佳。     

促甲状腺激素通过抗炎蛋白CTRP3促进软骨细胞分化

目的 探讨促甲状腺激素(TSH)对软骨细胞(PMCs)分化的作用及相关机制。 方法 利用qRT-PCR、Western blotting、免疫荧光检测PMCs细胞外基质Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)、Ⅹ型胶原(Col Ⅹ)以及基质金属蛋白酶3和13(MMP3,MMP13)的表达变化。采用qRT-PCR、ELISA检测TSH刺激PMCs后炎症因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNFα)的表达水平。应用高通量RNA-seq技术筛选TSH调控PMCs分化的差异表达基因,通过在原代PMCs中过表达CTRP3,探索TSH调控PMCs分化的机制。 结果 qRT-PCR、Western blotting结果显示,TSH刺激下PMCs中MMP3(P=0.016,P<0.001)和MMP13(P均<0.001)的表达显著增加。qRT-PCR、ELISA结果显示,IL-1β(P=0.007,P=0.002)、IL-6(P均<0.001)、TNFα(P=0.006,P<0.001)的表达上调。通过RNA-seq筛选出差异表达基因CTRP3。CTRP3过表达后PMCs中Col Ⅱ表达增高(F=76.062,F=77.085,F=190.115)、Col Ⅹ表达降低(F=33.494,F=38.424,F=43.351);同时与单纯TSH刺激相比,MMP3(F=88.607,F=214.145,F=135.60)、MMP13(F=116.561,F=138.674,F=86.865)表达均显著降低(P均<0.001),IL-1β、IL-6、TNFα的表达则均降低(P均<0.001)。 结论 CTRP3对TSH诱导的PMCs分化具有保护作用,有望成为亚临床甲状腺功能减退症(SCH)患者关节损伤的潜在治疗靶点。     

基于数据库分析CCR基因对肾透明细胞癌预后的预测价值

目的 利用信息库资料探讨趋化因子受体家族对肾透明细胞癌(ccRCC)预后的预测价值。 方法 下载并分析癌症基因组图谱(TCGA)的基因表达数据,筛选CC趋化因子受体(CCR)亚基因家族在正常组织与ccRCC组织中的差异表达基因。采用COX回归分析构建预后模型并进行相关功能学分析。 结果 从 TCGA 数据库下载包括539例ccRCC组织和72例正常组织的基因转录组数据,筛选出11个差异表达的CCR家族基因。通过多因素Cox回归分析得到 2个(CCR3与CCR10)与ccRCC预后相关的CCR基因,并以此构建预后模型。根据模型风险评分的中位值将训练集样本分为高风险组(n=184)与低风险组(n=197)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,低风险组总生存率高于高风险组,差异有统计学意义(P<0.001)。 结论 本研究构建的CCR基因预后模型可较好地评估ccRCC患者的预后并指导其个体化治疗。