薏苡仁提取物对人肝癌细胞增殖、凋亡及p53表达的影响

目的：探讨薏苡仁提取物（康莱特注射液,KLT）抗肝癌的作用机制。方法：利用MTT法、免疫组化法及电镜观察34例肝癌患者的癌细胞在体外培养和经KLT处理后的变化,并与对照组比较,结果：（1）KLT对肝癌细胞增殖有抑制作用,可达30％以上。（2）经KTL处理后的肝癌细胞有明显的凋亡现象和p53增高,与对照组比较有显著性差异（P＜0．05）。（3）电镜下观察,肝癌细胞形态改变,出现细胞膜小泡和凋亡小体形成等调亡细胞的特征性变化。结果：KLT抗肝癌的作用是通过诱发细胞凋亡或上调p53基因表达,引起细胞坏死而达到治疗目的的。     

p53蛋白及细胞增殖指数与子宫颈鳞状细胞癌的关系

[目的]研究子宫颈鳞癌细胞增殖指数(PI)以及突变p53蛋白表达与组织病理学的关系.[方法]采用流式细胞术和免疫组化方法对44例子宫颈鳞癌组织及10例正常子宫颈上皮组织进行了研究.[结果]各临床分期及不同组织学分级的子宫颈鳞癌组织细胞增殖指数及突变p53蛋白阳性表达率均显著高于正常子宫颈上皮组织(P＜0.01),但在不同临床期别及不同组织学类型间无统计学差异(P＞0.05).[结论]子宫颈鳞状上皮癌组织的细胞增殖活性增加,突变p53蛋白表达增高,但与子宫颈鳞癌临床分期及恶性程度无关.     

p53蛋白和PCNA在肝癌及其人癌周肝组织中表达的对比研究

用免疫组织化学方法检测４０例生肝癌及其癌周肝组织中突变型Ｐ５３基因蛋白和增殖细胞核抗的的表达。结果表明，ｍｐ５３和ＰＣＮＡ的表达均定位于细胞核内，表达分布呈避灶、散在３种表现。其阳性表达率，在原发性肝癌（ＰＨＣ）中，ｍｐ５３蛋白为４５．０％（１８／４０），ＰＣＮＡ为７２．５％（２９／４０）；癌周肝组织中，ｍｐ５３蛋白为５３蛋白为２．５％（１／４０），ＰＣＮＡ为４０．０％（１６／４０）；癌周肝硬变中     

转染野生型p53基因对肝癌细胞生长的影响

目的：通过转染野生型p53基因致肝癌细胞株BEL-7404，研究其对肝癌细胞的生长及凋亡作用。方法：野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞株BEL-7404。用四甲基偶氮唑（MTT）法测定细胞生长曲线，用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果：肝癌细胞BEK-7404转染野生型p53基因后，其生长作用明显受到抑制．细胞生长抑制率在第4天可达50．8％。流式细胞仪分析细胞凋亡结果：阴性对照组为1．7％，转染pUHD10-3组为3．2％．转染pUHD10-3-p53组为40．7％。结论：野生型p53基因可诱导肝癌细胞BEL-7404的生长抑制及发生凋亡。     

p53基因敲除对细胞迁移的影响

目的 研究p53基因敲除对细胞迁移的影响.方法 观察p53 / 和p53细胞中血清诱导的板状伪足形成情况,以及利用Transwell细胞迁移系统观察p53基因敲除对血清诱导的细胞迁移的影响.结果 在血清诱导下,p53 / 细胞能形成板状伪足和进行迁移,而p53细胞中板状伪足的形成和细胞迁移都被阻断.结论 p53在血清诱导的细胞迁移中具有重要作用.     

姜黄素对人宫颈癌细胞株Hela细胞增殖的作用的研究以及p53表达的影响

目的:主要探讨姜黄素对人类宫颈癌Hela细胞中增殖作用的影响,以及细胞p53蛋白表达的影响.方法:本文通过不同浓度姜黄素干预人宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测药物对Hela细胞的增殖抑制率;RT-PCR和Western blot检测细胞凋亡相关蛋白p53表达.结果:MTT发现姜黄素对人宫颈癌Hela细胞有一定的抑制作用,并呈时间-剂量依赖性;RT-PCR结果显示p53mRNA的表达增加;western boltting显示p53蛋白的表达增加.结论:姜黄素可一直Hela细胞增殖,其机制可能是通过增加p53基因的表达而实现.     

p53蛋白乳酸化促进结肠癌细胞增殖和转移

目的:探讨p53蛋白乳酸化修饰对结肠癌细胞增殖、转移的影响及其机制。方法:收集人结肠癌组织和相应癌旁组织,经HE染色确认病理形态后,通过乳酸测定试剂盒检测组织与结肠癌细胞HCT116乳酸浓度,免疫组织化学染色法检测组织乳酸化水平和p53表达水平。免疫荧光染色法观察结肠癌组织中的乳酸化和p53蛋白定位,免疫共沉淀检测组织与HCT116细胞中p53蛋白的乳酸化水平。蛋白印迹法检测HCT116细胞中p53蛋白的亚细胞定位。在内源性乳酸介导HCT116细胞的p53蛋白乳酸化修饰以及乳酸抑制剂草氨酸钠抑制p53蛋白乳酸化修饰后,采用CCK-8法检测HCT116细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell法检测HCT116细胞的迁移和侵袭能力。结果:人结肠癌组织中乳酸化水平和p53表达水平均高于癌旁组织,并且存在明显的p53蛋白乳酸化修饰。内源性乳酸介导HCT116细胞中p53蛋白乳酸化修饰后,在抑制p53入核的同时促进细胞的增殖、侵袭和迁移。结论:乳酸化p53蛋白通过抑制p53的入核促进结肠癌细胞的增殖和转移。     

胃癌中Hsp90α和p53的表达及意义

目的：研究Hsp90α及p53在人胃癌组织中的表达,分析胃癌中Hsp90α和p53表达的关系。方法：应用免疫组化S-P法检测胃癌、慢性萎缩性胃炎及慢性浅表性胃炎中Hsp90α及p53的表达。结果：Hsp90α在胃癌、慢性萎缩性胃炎及慢性浅表性胃炎中的阳性率分别为70.0%（21/30）、60.0%（12/20）、30.0%（6/20）。p53在胃癌、慢性萎缩性胃炎及慢性浅表性胃炎中的阳性率分别为63.3%（19/30）、10.0%（2/20）、5.0%（1/20）。胃癌中Hsp90α及p53的表达明显高于慢性浅表性胃炎（P〈0.05）; 胃癌中Hsp90α及p53表达的关系：56.7%（17/30）的胃癌Hsp90α、p53均为阳性,23.3%（7/30）的胃癌Hsp90α、p53均为阴性,13.3%（4/30）的胃癌Hsp90α阳性但p53阴性,6.7%（2/30）的胃癌p53阳性但Hsp90α阴性,Hsp90α及p53表达呈正相关（P〈0.05）。结论：Hsp90α及p53的表达与胃癌的发生及发展有关; 胃癌组织中Hsp90α及p53表达呈正相关。     

宫颈癌p53蛋白表达和细胞增殖活性

目的 研究Ｐ５３蛋白,ＰＣＮＡ,ＤＮＡ含量在宫颈癌及癌前病变组织的表达及其意义。方法 用免疫组化ＡＢＣ法和图像分析法,检测Ｐ５３蛋白,ＰＣＮＡ和ＤＮＡ含量,对５６例正常宫颈粘膜,宫颈上皮内瘤变,宫颈浸润性鳞癌进行研究。结果：Ｐ５３表达阳性率,ＰＣＮＡ细胞增殖指数和ＤＮＡ含量随癌组织分级依次增高,Ｐ５３蛋白在正常粘膜不表达,在宫颈上皮瘤变和原位癌少量表达,在宫颈浸润癌表达明显增高,结果,Ｐ５３含量和     

携带p53基因增殖性腺病毒影响肝癌细胞对化疗药物的敏感性

目的:研究携带p53基因增殖性腺病毒CNHK600-p53载体能否增加肝癌细胞株对化疗药物的敏感性.方法:构建携带p53基因增殖性腺病毒CNHK600-p53载体,采用四甲基偶氮唑盐法(methylthiazolyl tetrazolium assay,MTT),观察并比较单用化疗药物[5-氟尿嘧啶(fluorouracil,5-Fu)、丝裂霉素(mitomycin,MMC)和表柔比星(epirubicin,EPI)]、单用CNHK600-p53和CNHK600-p53联合上述化疗药物对肝癌细胞株BEL-7404的杀伤效应.结果:肝癌细胞株BEL-7404在5-Fu浓度为100μg/ml时细胞抑制率为(47±3)%,MMC浓度为1μg/ml时细胞抑制率为(20±4)%,EPI浓度为2.5 μg/ml时细胞抑制率为(73±2)%,联合CNHK600-p53(MOI=10)后上述浓度的化疗药物细胞抑制率分别增高为(59±4)%、(44±4)%和(86±2)%(率的U检验,P＜0.01).结论:携带p53基因的CNHK600-p53能提高肝癌细胞株BEL-7404对化疗药物的敏感性,CNHK600-p53联合化疗药物治疗可望开辟克服肝癌耐药的新途径.     

蔓荆子黄素对p53突变型人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 了解蔓荆子黄素(vitexicarpin)对p53突变型人乳腺癌细胞Hs578T增殖和凋亡的影响,并观察vitexicarpin对Hs578T和p53野生型人乳腺癌细胞MCF-7中c-Myc、p2l、Bcl-2蛋白表达的影响及c-Myc蛋白高表达对vitexicarpin作用的影响.方法 在不同时间点(24、48和72 h)用MTT方法来检测不同浓度vitexicarpin(0、0.1、0.2、0.5、1.0 μmol/L)对细胞增殖的影响.用TUNEL方法在24 h时间点检测不同浓度vitexicarpin对细胞凋亡的影响.在vitexicarpin不同浓度作用下,检测Hs578T细胞中c-Myc、Bcl-2和p21三种蛋白的表达情况.在Hs578T和MCF-7细胞中瞬时转染c-Myc基因,用MTT方法检测c-Myc蛋白高表达对vitexicarpin抑制细胞增殖作用的影响.结果 在vitexicarpin浓度>0.2μmol/L情况下,Hs578T及MCF-7细胞的增殖能力均受到明显抑制(IC50为0.25μmoVL和0.53μmol/L,72 h).TUNEL 实验显示vitexicarpin在0.1、0.2、0.5μmol/L作用浓度下TUNEL阳性细胞率分别为10.15%,27.33%和35.34%,而对照组为4.65%.Hs578T细胞中c-Myc和Bcl-2的表达与vitexicarpin的浓度呈反比,p21的表达与vitexicarpin的浓度呈正比.转染c-Myc基因及c-Myc蛋白高表达后,在Hs578T细胞中vitexicarpin对Bcl-2和p21的影响减弱.在vitexicarpin 0.5 μmol/L组72 h时比0 h时的吸光度(A)值增加了1.53倍,抑制细胞增殖的能力下降;相反地,但在MCF-7/c-Myc细胞中,同样条件下A值减少了48%.结论 vitexicarpin抑制p53突变型Hs578T细胞增殖的机制可能是通过c-Myc蛋白,而对于MCF-7细胞则是通过其他机制.vitexicarpin对恶性肿瘤细胞的作用机制在不同细胞中是不同的.     

肝癌细胞转染野生型p53基因稳定表达后肝癌细胞出现自发凋亡

肝癌细胞转染野生型ｐ５３基因稳定表达后肝癌细胞出现自发凋亡＊张晓东１王文亮１穆峰２（１第四军医大学病理学教研室西安７１００３３２第四军医大学唐都医院胸外科）关键词肝肿瘤细胞凋亡ｐ５３基因转染中图号Ｒ７３－３１目的进一步探讨ｐ５３基因与细胞凋亡（ａｐｏ...     

肉桂酸联合α干扰素对A549细胞p53蛋白表达和端粒酶活性的影响

目的 :探讨肉桂酸 (CINN)及其联合α干扰素 (α IFN)对人肺腺癌A5 49细胞p5 3蛋白表达和端粒酶活性的影响。方法 :本文以A5 49细胞为实验材料 ,以肉桂酸和α干扰素为诱导分化剂 ,分别用① 2mmol/LCINN(A组 ) ,② 2mmol/LCINN +2 5 μg/Lα IFN(B组 ) ,③ 2mmol/LCINN +75 μg/Lα IFN(C组 )三组加入到A5 49细胞培养体系中 ,另设阴性对照。用TRAP -银染法检测端粒酶活性 ,用免疫荧光标记法测定p5 3蛋白的表达。结果 :CINN单独或联合α IFN作用后的A5 49细胞 ,端粒酶活性明显降低 ,且p5 3蛋白的表达减少 ,联合作用比单独作用效果更明显。结论 :肉桂酸及其联合α干扰素均可降低人肺腺癌A5 49细胞p5 3蛋白表达和端粒酶活性 ,二者具有协同效应。     

肺癌细胞凋亡和PCNA p53关系的研究

目的　通过肺癌组织中凋亡细胞的原位观察和对核增殖抗原 (PCNA)、p53蛋白表达的研究 ,探讨不同类型肺癌、不同增殖情况、不同p53表达的细胞凋亡情况。方法　 97例术前未经任何治疗的肺癌。Sclc35例 ,Nsclc62例 ,分别进行凋亡细胞检测 (TUNEL法 )、PCNAp53蛋白的免疫组化染色。结果　不同类型肺癌、不同增殖能力肺癌细胞凋亡的程度有差异 ,p53阴性和阳性细胞凋亡无差异。结论　小细胞肺癌细胞凋亡数高于非小细胞肺癌 ,细胞增殖活跃自发凋亡也相应增多。     

肝外胆管癌中p73蛋白的表达及与p53蛋白的相关性

目的　探讨基因 p73和 p5 3在肝外胆管癌 (ECHC)中的表达情况、相互关系及其临床病理意义 .方法　采用免疫组织化学 (SABC法 )对 4 1例肝外胆管癌及 10例胆总管囊肿病例 p73和 p5 3表达进行研究 .结果　 p73基因阳性表达率为 4 1% (17/ 4 1) ,p5 3基因阳性表达率为 34% (14 / 4 1) ,14例中 10例 p73表达亦为阳性 ,其余 2 7例中未发现 p5 3基因突变 ,但其中 7例表达 p73.胆总管囊肿均为阴性 .经统计学分析 p73的表达与 ECHC的临床病理分级、分期无关 (P>0 .0 5 ) ;而 p73和 p5 3表达显著相关 (r=0 .5 2 ,P<0 .0 5 ) .结论　 p73,p5 3基因在肝外胆管癌的发生发展过程中起重要作用 ,二者的表达有一定的相关性     

低氧预处理对缺血脑组织p53表达的影响

目的:研究低氧预处理对缺血脑组织p53蛋白表达的影响,探讨低氧预处理的脑保护机制.方法:30只SD大鼠,体重在200～230g,随机分为三组:假手术组(n=10),脑缺血组(n=10),低氧预处理组(n=10).分别观察三组动物的神经功能评分,按Bederson 6级5分制方法进行,用免疫组化法检测大鼠脑组织凋亡细胞、p53蛋白表达.结果:低氧预处理组与缺血组神经功能评分有统计学差异(P＜0.05);预处理组的病变侧海马凋亡细胞数明显少于缺血组、p53蛋白表达明显低于脑缺血组,两组相比较统计学差异有显著性 (P＜0.05).结论:低氧预处理能减轻缺血后的细胞凋亡,对脑缺血具有保护作用,其机制可能是抑制p53蛋白的表达.     

肝癌组织survivin的表达与凋亡,增殖和p53的关系

目的：研究肝癌survivin的表达与细胞增殖、凋亡以及053表达的关系．方法：应用免疫组化法检测原发性肝癌组织42例、癌旁肝硬化组织34例、正常肝组织10例中survivin,p53,增殖细胞核抗原（PCNA）的表达．应用TUNEL法检测细胞凋亡．结果：在42例肝癌组织中survivin阳性30例（71．4％）,显著高于癌旁肝硬化组织（11．8％）和正常肝组织（0％,P〈0．001）．肝癌中survivin蛋白的高表达与病理分级（P=0．003）,p53蛋白水平（P=0．008）、细胞增殖凋亡比（P=0．001）及患者生存时间（P=0．002）存在显著相关性,而与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、门脉癌栓（局部转移）无显著相关（P〉0．05）．结论：肝癌组织survivin高表达在打破肝癌细胞的增生和凋亡之间的平衡中起着重要作用．Survivin可能抑制p53阴性肝癌细胞的凋亡,在肿瘤细胞的进一步恶性转化中发挥作用．     

p53水平对端粒酶逆转录酶表达的调节作用

目的研究野生型P53表达水平对端粒酶逆转录酶(HTERT)表达的调节作用。方法采用针对P53的反义核酸转染HEPG2细胞和稳定表达PPUR/U6/HTERT的HEPG2细胞,野生型P53表达质粒转染HEPG2细胞,以WESTERN-BLOT验证其对靶基因的抑制或增强作用,然后再用WESTERN-BLOT检测HTERT的表达水平。结果P53反义核酸和野生型P53表达质粒能明显降低或增强P53的表达,降低P53的表达对HTERT的表达无明显影响;而P53表达增加则可抑制HTERT的表达。结论P53与HTERT之间存在相互作用,野生型P53对HTERT的表达起负调节作用。     

p53蛋白和PCNA在肝癌及其癌周肝组织中表达的对比研究

用免疫组织化学方法检测40例原发性肝癌及其癌周肝组织中突变型p53基因蛋白(mp53)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果表明:mp53和PCNA的表达均定位于细胞核内,表达分布是弥漫、局灶、散在3种表现.其阳性表达率:在原发性肝癌(PHC)中,mp53蛋白为45.0%(18/40),PCNA为72.5%(29/40);癌周肝组织中,mp53蛋白为2.5%(1/40),PCNA为40.0%(16/40);癌周肝硬变中mp53蛋白为11.1%(1/9),PCNA为33.3%(3/9).结果提示:mp53蛋白主要是在肿瘤细胞中表达的标志物,并能反映癌周肝细胞中存在少量癌细胞的转移;PCNA可能是各种不同细胞异常增殖处于不同细胞周期阶段很有价值的标记物.mp53基因蛋白和PCNA对原发性肝癌的发生和发展可能有重要的影响.mp53蛋白可能与正常肝细胞的恶性转化有较密切的关系,涉及一些包括PCNA以及有关细胞增殖和分化的基因调控在内的其它多种因素有关.     

p53蛋白对食管癌患者预后的影响

大量研究表明在晚期食管癌组织中,有突变型P53蛋白过度表达,而很少出现于早期食管癌和正常食管组织中,提示P53蛋白