靶向清除肿瘤干细胞功能性检测试验及其评价的研究进展

肿瘤干细胞(CSCs)在肿瘤的生长、转移、复发和治疗抵抗中起决定性作用,靶向清除CSCs已成为肿瘤治疗的重要策略。靶向清除CSCs的效果必须通过CSCs功能性检测来验证和评估。本文总结了近年清除CSCs功能性检测中肿瘤球形成试验、小鼠异种移植试验和有限稀释试验等技术,对这些技术的意义和应用中可能出现的问题进行探讨,为提高靶向清除CSCs措施的质量提供参考。     

人卵巢癌3AO裸鼠移植瘤模型的研究

目的 建立符合人上皮性卵巢癌的临床特征,又便于实验观察和分析的人卵巢癌裸鼠(athymic mice)腹腔移植瘤及皮下移植瘤异种移植模型;比较两种模型的成瘤情况并观察其生物学特性.方法 将一定数量的体外培养的人上皮性卵巢癌细胞株3AO分别接种于裸鼠的右后肢皮下和腹腔内,制备人卵巢癌裸鼠皮下及腹腔异种移植瘤模型;并待肿瘤生长至一定程度,切取移植瘤组织,进行病理组织学检查、电镜观察和流式细胞分析.结果 人上皮性卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤及皮下移植瘤模型建立的成功率均较高;两者在肿瘤细胞接种数量、肿瘤形成时间、肿瘤形态等方面不同.皮下移植瘤成瘤率93.3%,腹腔移植瘤成瘤率为86.7%.结论 人卵巢癌裸鼠异种移植模型的建立成功率高,并能直接再现肿瘤,可很好地反映肿瘤的生物学行为,便于观察和分析实验结果,为上皮性卵巢癌的实验研究提供了较客观的模型.     

裸小鼠肺癌模型的建立

目的：建立皮下异种肿瘤移植的裸小鼠肺癌模型。方法：采用培养细胞移植法,将人肺腺癌细胞系Ａ５４９ 接种于ＢａｌＢ／ＣＡｎｕ 品系裸小鼠背部皮下,观察肿瘤移植成功率,测量瘤体大小,并进行病理形态学检查。结果：裸小鼠皮下异种肺癌移植成功率为６０％ ～８５％ 。结论：利用人肺腺癌细胞系Ａ５４９ 可以建立皮下异种种瘤移植的裸小鼠肺癌模型。     

昆明小鼠肺癌模型建立的初步研究

建立皮下异种肿瘤移植的昆明小鼠肺癌模型,为临床和基础研究提供理想的动物模型。方法采用培养细胞移植法,将人肺腺癌细胞系A549接种于昆明小鼠皮下,观察肿瘤移植成功率,并测瘤重,固定标本作石蜡切片、HE染色、组织学观察。结果昆明小鼠小腿皮下异种肺癌移植成功率为37.5%。结论利用人肺腺癌细胞系A549可以建立皮下异种肿瘤移植的昆明小鼠肺癌模型,但其成功率较低,仍需进一步完善。     

裸小鼠肺癌模型的建立

目的：建立皮下异种肿瘤移植的裸小鼠肺癌模型。方法：采用培养细胞移植法,将人肺腺癌细胞系Ａ５４９ 接种于ＢａｌＢ／ＣＡ ｎｕ 品系裸小鼠背部皮下,观察肿瘤移植成功率,测量瘤体大小,并进行病理形态学检查。结果：裸小鼠皮下异种肺癌移植成功率为６０％ ～８５％ 。结论     

肝内肿瘤干细胞与肝癌的相关研究进展

肝癌是一种恶性程度高的肿瘤,临床上缺乏有效的治疗方法。有确切的证据表明肿瘤干细胞(CSCs)不仅与肿瘤的启动有关,且与肿瘤的远处转移和术后复发相关。最近,肝内CSCs的研究引起了人们的广泛关注,作为一种肿瘤起始细胞,其广泛存在于肝癌患者肿瘤组织和外周循环中。肝脏CSCs的特性(如自我更新、无限增生和分化)与肝癌的复发和药物抵抗高度相关,这些都是肝癌治疗效果不佳的根本原因。现就CSCs的概念、特征、肝内CSCs的来源、自我更新能力的调控及基于CSCs靶向治疗肝癌的重要策略等进行综述。     

肿瘤干细胞生物学特性相关研究进展

肿瘤干细胞学说是目前肿瘤研究中最主要的学说之一,认为其与肿瘤的发生发展密切相关.肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)与干细胞的特点极为相似.虽然数量稀少但对于肿瘤的起源、复发和转移有决定性作用.本文将对肿瘤干细胞的起源、增殖、转移及其产生免疫耐受等生物学特性的研究进行相关概述,旨在为肿瘤干细胞在临床治疗中的应用提供理论依据.     

肿瘤干细胞耐药机制及对策

肿瘤治疗的障碍之一是出现多药耐药(multidrug resistance,MDR),多数化疗方案可以消灭大部分肿瘤细胞但始终缺乏从根本上铲除肿瘤的方法.对肿瘤多药耐药发生机制的研究和寻找开发逆转耐药的药物是当前肿瘤化疗研究的重要课题.近年来,科学家陆续从实验中找到并分离出肿瘤干细胞而提出"肿瘤干细胞假说",这一假说为肿瘤治疗开拓了新思路.随着对肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)研究的深入,发现CSCs和正常干细胞有很多相似之处,如同样具有自我更新和分裂增殖能力、耐药、DNA修复活性和抗凋亡等.其耐药性帮助CSCs抵抗化疗药物的毒性作用,从而为肿瘤增殖和复发留下"种子".本文就CSCs及其耐药机制相关研究进行综述.     

肿瘤干细胞在甲状腺癌中的研究进展

肿瘤干细胞（cancer stem cells, CSCs) 是一类具有自我更新、多向分化和高致瘤能力的细胞亚群。CSCs与肿瘤的发生、发展以及治疗抵抗密切相关。CSCs在甲状腺癌发生发展中的作用及机制尚不完全清楚。本文对甲状腺癌肿瘤干细胞（thyroid cancer stem cells, TCSCs)的研究进行综述,探讨TCSCs在甲状腺癌研究中的前景,以期更好地诊治甲状腺癌。     

人源性肿瘤组织原位异种移植模型的特征及研究策略

人源性肿瘤组织原位异种移植模型(PDOX模型)能够更好地保持原发肿瘤的基因特征,在组织学、转录组、多态性和拷贝数变异中具有高的保真度,保留了原发瘤的微血管、基质成分和相互作用,以及肿瘤转移的特点,从而更加准确地预测临床患者的疾病预后,可以筛选出最合适的个体化治疗方案,在临床转化应用研究中显示出良好的前景。但由于小鼠和人体微环境仍有差别,原位移植瘤的形态结构与原发瘤仍存在一定差别,且原位移植并不能确保肿瘤发生转移。因此,构建个体化PDOX模型就需要分析移植瘤的组织形态和相关基因的表达,建立异种移植模型的数据库,共享异种移植模型的信息与研究结果,促进PDOX模型的转化应用。本文总结了PDOX模型的主要特征,概述了其优势以及局限性,并对应用进行了展望。     

肿瘤干细胞与血管生成拟态的研究进展

血管生成拟态是近年来发现的存在于高度恶性肿瘤的血液供应模式,其形成机制尚未完全阐明。肿瘤干细胞具有成瘤性、多向分化潜能和便于分离纯化的分子标记。日前已在多种实体肿瘤中柃测到肿瘤干细胞,如胶质瘤、黑色素瘤、乳腺癌和卵巢癌等。最近研究表明肿瘤干细胞参与了血管生成拟态的形成,尤其是CD133＋的肿瘤干细胞。本研究就肿瘤干细胞与血管生成拟态研究进展进行综述。     

肝癌干细胞的研究进展

肿瘤干细胞(CSC)假说是近年来提出的关于肿瘤发生的新理论,该学说认为不是所有的细胞都能突变发育成肿瘤,只有一部分特殊的细胞能够发育成肿瘤,并维持肿瘤的生物学特性。过去几年内研究者已经证明包括肝癌在内的许多CSCs的存在,并分别针对肝癌干细胞与肝癌的关系、肝癌干细胞的生物学特性和鉴定标志等问题展开讨论,总结了一些治疗措施。现对CSCs及肝癌干细胞的研究进展予以综述。     

手术切除的结直肠癌组织中的肿瘤干细胞的培养及鉴定

目的获得结直肠癌患者手术切除癌组织的肿瘤干细胞（CSC）,培养并鉴定其干细胞特性。方法通过原代培养手术切除 结直肠癌组织获得结直肠癌细胞,再通过有限稀释法和无血清培养法筛选结直肠癌CSC,软琼脂集落实验检测CSC和对照组人 结直肠癌细胞株SW480 的增殖能力;用低数量级细胞裸鼠皮下成瘤实验,检测结直肠癌CSC和SW480 的成瘤能力;并运用 Western blot及免疫荧光方法,检测CSC和SW480的免疫表型。结果临床结直肠癌标本原代培养的CSC,加入血清培养可使 CSC分化。软琼脂集落形成实验结果显示,原代培养的CSC克隆形成率为56.64%和54.45%,对照组人结直肠癌细胞株SW480 的克隆形成率为4.41%,CSC与SW480集落形成率的差异具有统计学意义（P<0.01）。裸鼠皮下成瘤实验中,原代培养的CSC 皮下注射500 个细胞可形成皮下瘤,而SW480 皮下注射500 个细胞不形成皮下瘤。CSC 表达CD133、CD44,不表达CK7; SW480细胞不表达CD133、CD44,表达CK7。结论原代培养的手术切除结直肠癌组织标本获得的肿瘤细胞,再行无血清培养 可形成CSC,鉴定具有CSC的自我更新及分化能力。     

Isolation and identification of cancer stem-like cells from side population of human prostate cancer cells

It has been widely verified by various sorting methods that cancer stem cells (CSCs) exist in different types of tumor cells or tissues.However,due to lack of specific stem cell surface markers,CSCs are very difficult to be separated from some cancer cells,which becomes the key barrier of functional studies of CSCs.The sorting method by side population cells (SP) lays a solid foundation for in-depth and comprehensive study of CSCs.To identify the existence of SP in prostate cancer cell lines,we applied flow cytometry sorting by SP to cultures of prostate cancer cell lines (TSU,LnCap,and PC-3),and the cancer stem-like characteristics of SP were verified through experiments in vitro and in vivo.The proportion of SP in TSU cells was calculated to be 1.60%±0.40% (±s),and that in PC-3 and LnCap cells was calculated to be 0.80%±0.05% and 0.60%±0.20%,respectively.The colony formation assay demonstrated that the colony formation rate of SP to non-SP sorted from TSU via flow cytometry was 0.495±0.038 to 0.177±0.029 in 500 cells,0.505±0.026 to 0.169±0.024 in 250 cells,and 0.088±0.016 to 0.043±0.012 in 125 cells respectively.In the in vivo experiments,tumors were observed in all the mice on the 10th day after injecting 50 000 cells subcutaneously in SP group,whereas when 5×106 cells were injected in non-SP group,tumors were developed in only 4 out of 8 mice until the 3rd week before the end of the experiment.Our results revealed that prostate cancer cells contain a small subset of cells,called SP,possessing much greater capacity of colony formation and tumorigenic potential than non-SP.These suggest that SP in prostate cancer cells may play a key role in the self-renewal and proliferation,and have the characteristics of cancer stem-like cells.Dissecting these features will provide a new understanding of the function of prostate CSCs in tumorigenicity and transformation.     

肿瘤干细胞与前列腺癌相关研究进展

肿瘤干细胞学说是近些年来新发展起来的一个学说,该学说认为肿瘤起源于肿瘤干细胞,是一种干细胞疾病,肿瘤组织中存在的一小部分具有干细胞性质的肿瘤干细胞,它们具有无限的自我更新和多向分化潜能和高度增殖能力,是肿瘤形成和发展的关键。有越来越多的证据表明CSC与多种实体肿瘤,如乳腺癌、脑肿瘤以及前列腺癌等密切相关。CSC学说在向传统观点提出挑战的同时,也为肿瘤的治疗带来了新的希望。     

干细胞在实体肿瘤转移中的作用与地位

 肿瘤干细胞 (cancer stem cell,CSC)被认为是治疗失败、药物耐受和转移复发的原因所在。CSC具有自我更新 (self-renewal)和高侵袭潜能的特性,并最终组成肿瘤的异质性 (heterogeneity)。无论是在原发瘤、循环肿瘤细胞 (circulating tumor cell),还是在转移灶的形成中,CSC都发挥着重要作用,且与患者预后密切相关。因此,更好地认识CSC在转移过程中的重要作用,研发有效的靶向CSC及其微环境 (microenvironment)的治疗药物,将有望使之成为抗转移的理想途径。     

1，25二羟维生素D3在甲状腺未分化癌肿瘤干细胞增殖和上皮细胞间质转化中的作用

目的: 研究1,25二羟维生素D3在甲状腺未分化癌肿瘤干细胞（cancer stem cells, CSCs）的增殖及上皮细胞间质转化(epithelial mesenchymal transition, EMT)中的作用。方法: 以甲状腺未分化癌细胞株HTh74为研究对象,采用体外细胞增殖实验观察1,25二羟维生素D3对野生型HTh74及其多柔比星耐药株的作用。采用细胞球形成实验观察1,25二羟维生素D3对甲状腺CSCs增殖能力的作用。实时荧光定量PCR检测HTh74野生型细胞、HTh74类CSCs以及1,25二羟维生素D3干预后的HTh74类CSCs中EMT相关基因的表达。结果： 1,25二羟维生素D3抑制HTh74野生型和多柔比星耐药株细胞的增殖,并且对耐药株具有更明显的生长抑制作用。1,25二羟维生素D3抑制HTh74类CSCs的增殖,并显著下调HTh74类CSCs中EMT相关基因N 钙黏蛋白和Slug的表达（P<0.05）。E 钙黏蛋白在HTh74类CSCs中未检出。结论： 1,25二羟维生素D3抑制甲状腺CSCs的增殖,并抑制甲状腺CSCs的EMT过程。     

乳腺癌干细胞与临床及其靶向治疗前景

肿瘤干细胞理论认为肿瘤起源于小部分具有干细胞特性的肿瘤细胞。肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCs）具有自我更新、不对称分裂、放化疗耐受及致瘤性和转移潜能。因此,癌症的治疗必然要包含针对CSCs的靶向治疗。本文综述了乳腺癌干细胞与其临床转移及放、化疗耐受的关系和潜在的靶向治疗研究。     

Leukemia stem cells in drug resistance and metastasis

Objective To review the central role of leukemia stem cells （LSCs） in drug resistance and metastasis, aiming to provide key insights into leukemogenic pathology and developing novel therapeutic strategies against the relapse of leukemia.Data sources The data used in this review were obtained mainly from the studies reported in PubMed using the key terms ＂tumor-initiating cells＂, ＂leukemia stem cells＂, ＂drug resistance＂ and ＂metastasis＂.Study selection Relevant articles on studies of leukemia stem cells were selected.Results Increasing numbers of studies have suggested the importance of cancer stem cells （CSCs） in the initiation and maintenance of cancer, especially in leukemia. This review has summarized the origin, characteristics, isolation and identification of LSCs. It highlights the crucial role of LSCs in drug resistance and metastasis of leukemia by illustrating possible mechanisms and aims to provide novel therapeutic strategies for LSCs-targeted treatment.Conclusion LSCs play a crucial role in drug resistance and metastasis of leukemia and new promising LSCs-targeted therapies warrant investigation in both experimental models and clinical practice.