大鼠脊髓全横断模型制作及护理措施

脊髓损伤与修复历来是神经科学领域研究的热点，其动物模型有不全和完全损伤两种，成年哺乳动物脊髓半横断后，由于对侧正常神经的代偿作用或半横切不完全以至难以保证手术的一致性，往往影响对实验结果特别是脊髓功能恢复的判定，完全性脊髓损伤常采用全横断术，即用锋利的刀片沿椎     

大鼠脊髓T3节段全横断后损伤节段神经元超微结构的观察

目的：观察大鼠脊髓T3节段全横断后损伤节段神经元超微结构的变化。方法：48只大鼠随机分为假手术组和脊髓T3完全横断损伤1d组、2d组、7d组、14d组、21d组,每组8只。各组大鼠BBB运动功能评分后取损伤节段脊髓,透射电镜观察脊髓神经元超微结构的变化。结果：脊髓损伤（SCI）各组大鼠的BBB评分明显低于假手术组（P ＜0.01）;随着损伤时间的延长,SCI各组大鼠的BBB评分逐渐升高（P ＜0.01）。电镜下观察,大鼠脊髓神经元在损伤后2d病理变化最为严重,表现为神经元明显肿胀,线粒体等细胞器严重受损,核固缩,染色质凝集;损伤后7d时,脊髓神经元的病理变化有所减轻;损伤后21d,脊髓神经元的病理变化明显减轻,甚至接近正常。结论：大鼠脊髓损伤后2d脊髓神经元的病理变化最为严重,后逐渐减轻。     

挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立

目的:建立一种简便易行的挤压性脊髓损伤动物模型。方法:将大鼠随机分为3个实验组和1个对照组,3个实验组采用改良动脉夹置于椎管壁和硬脊膜之间横行压迫脊髓,分别持续5、15及30 s,对照组只暴露脊髓后缝合。测定各组手术损伤后即刻、7、14 d脊髓运动诱发电位(MEP)并进行改良Tarlov评分。结果:3个实验组手术损伤后MEP N1波潜伏期均明显延长,主波振幅显著降低或消失;改良Tarlov评分亦显著降低,随饲养时间延长MEP和改良Tarlov评分有不同程度恢复。结论:挤压5、15、30 s可分别复制出轻、中、重度脊髓损伤大鼠模型,此造模方法无需特殊实验仪器,简便易行,可重复性强,具一定推广价值。     

脊髓损伤后大鼠水钠代谢紊乱动物模型的建立

目的建立大鼠颈脊髓损伤后水钠代谢紊乱的动物模型。方法在预实验基础上选成年雌性Wistar大鼠45只,随机分为正常饲养无手术对照组(A组)15只,肠内营养乳剂（TP）喂养并行胃造瘘和颈后路椎旁肌剥离手术对照组(B组)15只,肠内营养乳剂喂养并行颈脊髓完全横断损伤及胃造瘘术、导尿术实验组(C组)15只,其中C组3只鼠术后死亡弃用,测量血钠、尿钠浓度及尿量。结果与B组相比,C组于手术4?d后均获得明显低钠血症（P<0.05)。A组和B、C组术前血钠浓度无明显差异（P＞0.05)。 结论大鼠颈脊髓完全损伤后引起低钠血症的发生,可以作为颈脊髓损伤并发低钠血症动物模型进行深入研究。     

简易大鼠脊髓完全横断伤模型的建立

目的:建立一种简便、可靠的完全脊髓横断伤模型的制作方法.方法:成年SD大鼠21只,随机分为横断伤组、挫伤组、对照组,每组7只.显露T12脊髓,横断组用尖刀将其完全横断.挫伤组150克·厘米力(gcf)冲击致伤.对照组仅显露脊髓,不做特殊处理.在不同时间对各组大鼠行行为学(BBB)评分及组织学评价.结果:横断组大鼠后肢功能评分在损伤后3～4周趋于稳定,损伤后4周时BBB评分为(5.14±0.80)分;挫伤组后肢功能评分进行性增高,4周时BBB评分达到(11.21±2.21)分;对照组2周左右恢复正常.横断组大鼠组织学观察见损伤区无脊髓组织残留,神经丝(NF)免疫组化染色未见神经纤维通过损伤区.结论:通过完全脊髓横断可以制备出稳定性好、一致性高的脊髓损伤模型.完全脊髓横断后,损伤恢复3～4周左右趋于稳定,可作为慢性脊髓损伤修复的移植期.     

用电解损毁方法制备大鼠的脊髓损伤模型

目的：建立一种简便实用、稳定可靠的脊髓损伤动物模型。方法：采用电解损毁法,主要损伤大鼠第１０胸椎节段脊髓双侧皮质脊髓束纤维,在术后不同时间观察受损脊髓组织学变化及大鼠运动功能改变,并用ＨＲＰ逆行标记技术,以大脑运动皮层标记神经元计数来反映皮质脊髓束受损情况。结果：１ｍＡ,２１０ｓ的损伤电流,可在脊髓后索造成神经组织坏死,形成空腔,使双侧皮质脊髓束纤维受损;术后１周、２周、３周观察,电损毁组大鼠运动功能显著低于假手术组,表现为后肢运动评分下降,Ａｓｈｗｏｒｔｈ肌张力评分增大,斜板实验角度下降;电损毁组运动皮质标记神经元计数也显著低于假手术组。结论：电解损毁在适宜参数下能损伤双侧脊髓皮质脊髓束,引起双后肢的不完全性截瘫,结果稳定可靠,操作简便,为脊髓损伤的实验研究奠定了基础。     

大鼠皮质脊髓束选择性横断损伤模型的建立

目的 建立一种稳定可靠且简便实用的皮质脊髓束选择性横断损伤动物模型.方法 选择在延髓锥体切断左侧锥体束,制作大鼠皮质脊髓柬选择性横断损伤模型.采用Rivlin斜板实验评价模型的运动功能,运用Luxolfast blue(LFB)染色法、生物素化葡聚糖胺(BDA)神经示踪法和蛋白激酶Cγ(PKCγ)免疫组织化学染色法观察皮质脊髓束的形态学变化.结果 皮质脊髓束损伤组大鼠术后右侧前后肢瘫痪,运动功能受限,Rivlin试验显示倾斜平面临界角度明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);损伤区未见LFB阳性神经纤维束通过;在延髓锥体交叉平面,仅见一束BDA或PKCγ阳性纤维束经右侧锥体交叉至脊髓后索,在左侧脊髓后索最深层,紧邻脊髓灰质后连合背侧下行至骶段,而在损伤平面以下,未见有BDA或PKC γ阳性纤维束经左侧锥体交叉至右侧,在整个脊髓后索的右侧半未见有BDA或PKC γ阳性纤维束.结论 选择在延髓切断一侧锥体束,建立皮质脊髓束选择性横断损伤模型,方法 简便实用,结果 稳定可靠,是研究皮质脊髓束的可塑性和神经轴突再生的理想动物模型.     

建立大鼠钳夹伤脊髓损伤模型的学习曲线分析

目的分析大鼠脊髓钳夹伤模型建立的学习曲线。方法将制作大鼠钳夹伤脊髓损伤模型最初的30例资料分为3个阶段(各10例),对手术时间、出血量、假手术组脊髓损伤情况、术后感染、脊髓损伤的BBB运动功能评分、运动诱发电位N1峰(MEP-N1峰)潜伏期时间进行分析,并行病理学HE染色。结果第三阶段操作在手术时间、出血量、假手术脊髓损伤情况、术后感染、BBB评分较第一阶段明显减少,MEP-N1峰潜伏期时间较第一阶段明显增加(P均<0.05)。HE染色观察到第一阶段有部分模型脊髓没有完全横断性损伤,第三阶段全部脊髓呈现完全横断性损伤。结论初学者经过耐心反复的训练,可通过学习曲线,于第三阶段,熟练掌握钳夹伤制作脊髓损伤模型。     

大鼠脊髓全横断后相关部位的BDNF表达

目的 探讨大鼠脊髓全横断损伤后相关部位（大脑皮质、横断脊髓上端、下端和比目鱼肌）脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的表达变化．方法 首先建立正常对照组和实验组模型，其中实验组又依照大鼠全横断脊髓损伤术后1、3、7、14d不同观察时间点分为4个亚组，分别抽提横断脊髓上端及其相连的大脑皮质、横断脊髓下端和比目鱼肌组织中总RNA，用RT-PCR技术检测BDNFmRNA的表达，以β-actin为参照确定各时相BDNFmRNA的相对水平．结果（1）大鼠脊髓全横断损伤后，BDNFmRNA在大脑皮质、脊髓横断上、下端和肌肉中均有表达，且在正常对照组中大脑皮质的BDNFmRNA表达少于脊髓横断上、下端（P〈0．05）；（2）手术后14d时肌肉组织中BDNFmRNA的表达较手术后1d和3d组均有明显增加（P〈0．05）。说明大鼠脊髓全横断损伤14d时，脊髓下端相连的骨骼肌组织中的BDNFmRNA表达上调．结论BDNF在骨骼肌表达增加，提示BDNF可能参与维持骨骼肌的功能，或者转运入脊髓下端对下位运动神经元发挥营养作用．     

大鼠脊髓全横断损伤后不同时间的组织改变

目的 观察大鼠脊髓全横断损伤后不同时间的神经元、神经胶质及髓鞘结构的改变.方法 将60只大鼠随机分为假手术组(sham组)和脊髓损伤组(SCI组),SCI组又分为术后l d、3 d、7 d、14 d、21 d组,每组10只. SCI组行脊髓T9段全横断损伤,sham组仅行椎板切除术,分别在各时间点灌注固定后取材、制片,...     

急性脊髓挫伤性模型的制备及观察

目的:制备急性挫伤型脊髓损伤动物模型.通过观察其行为学变化和脊髓组织的病理改变,为临床治疗脊髓损伤提供理论依据.方法:成年雌性SD大鼠,咬除T10棘突及相应椎板,用改良的Allen法制成脊髓背侧挫伤型模型,对照组仅咬除椎板,分不同的时间行为学评分和病理检测.结果:对照组麻醉恢复后能站立行走,脊髓结构正常;实验组行为学评分较低,脊髓损伤区域出现明显的病理改变,但随着时间的推移,可以部分的恢复.结论:实验组和对照组相比具有显著差异,此模型的建立为进一步了解挫伤型脊髓损伤的发病机制,研究此损伤的病理生理改变及筛选有效的预防治疗提供了良好的基础.     

大鼠脊髓髓内胶质瘤模型的构建及评价

目的 优化大鼠脊髓髓内胶质瘤模型的构建方法,并对模型进行评估。方法 Fischer大鼠髓内注射9L胶质瘤细胞悬液,对肿瘤细胞的植入量、植入部位、植入深度等进行筛选优化,根据筛选好的指标构建大鼠脊髓髓内胶质瘤模型,采用BBB(Basso, Beattie, and Bresnahan)评分量表评估大鼠下肢神经功能,采用高分辨率MRI检查及病理免疫组化方法检查模型大鼠肿瘤形成情况,评估模型构建效果。结果 大鼠脊髓内植入9L胶质瘤细胞悬液构建大鼠髓内胶质瘤模型的优化指标为:植入平面在脊柱T₁₀水平,植入量为6 μL(1.0×10⁵ /mL)细胞悬液,植入位置在硬脊膜平面下3 mm。植入9L胶质瘤细胞后2周左右大鼠出现明显的下肢神经功能障碍。影像学和病理学检查证实髓内有肿瘤细胞生长。结论 成功构建大鼠髓内胶质瘤模型,为后续研究奠定了基础。     

Establishment of intramedullary spinal cord glioma model in rats

Background Treating intramedullary spinal cord gliomas is a big challenge because of limited options, high recurrence rate and poor prognosis. An intramedullary glioma model is prerequisite for testing new treatments. This paper describes the establishment of a rodent intramedullary glioma model and presents functional progression, neuroimaging and histopathological characterization of the tumour model. Methods Fischer344 rats （n=24） were randomized into two groups. Group 1 （n=16） received a 5 pl intramedullary implantation of 9L gliosarcomal （105） cells. Group 2 （n=8） received a 5 pl intramedullary injection of Dulbecco＇s modified Eagle medium. The rats were anesthetized, the spinous process of the T10 vertebra and the ligamentum flavum were removed to expose the T10-11 intervertebral space and an intramedullary injection was conducted into the spinal cord. The rats were evaluated preoperatively and daily postoperatively for neurological deficits using the Basso, Beattie and Bresnahan scale. High resolution magnetic resonance images were acquired preoperatively and weekly postoperatively. When score equal to 0, rats were sacrificed for histopathological examination. Results Rats implanted with 9L gliosarcoma cells had a statistically significant median onset of hind limb paraplegia at （16.0±0.4） days, compared with rats in the control group in which neurological deficits were absent. Imaging and pathological cross sections confirmed intramedullary 9L gliosarcoma invading the spinal cord. Rats in the control group showed no significant functional, radiological or histopathological findings of tumour. Conclusions Rats implanted with 9L cells regularly develop paraplegia in a reliable and reproducible manner. The progression of neurological deficits, neuroimaging and histopathological characteristics of intramedullary spinal cord gliomas in rats is comparable with the behaviour of infiltrative intramedullary spinal cord gliomas in patients.     

强啡肽A及其受体拮抗剂对大鼠脊髓损伤后脊髓血流量的影响

目的；探讨强啡肽Ａ在脊髓损伤（ＳＣＩ）中的作用。方法，采用Ａｌｉｅｎ打击法复制大鼠ＳＣＩ模型，应用强啡肽Ａ放免检测技术和氢清除法分别测定伤段脊髓组织２４ｈ内主Ａ含量和脊髓血流量（ＳＣＢＦ）的变化，并观察脊髓蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ及其受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ对ＳＣＢＦ的影响。结果；ＳＣＢＦ在伤后１０ｍｉｎ即有明显下降，２ｈ较１ｈ略有回升，４－８ｈ又进一步下降，两次下降相差显著；ＳＣＩ后脊髓蛛网膜下腔     

外泌体源性microRNA-124对急性创伤性脊髓损伤大鼠脊髓小胶质细胞活化及炎症反应的影响

目的 观察外泌体（Exos）源性microRNA-124(miR-124)对急性创伤性脊髓损伤（ASCI）大鼠脊髓小胶质细胞（MG）活化及炎症反应的影响。方法 取对数期HEK239细胞,分为空白组、转染组。空白组不处理,转染组转染miR-124-mimics质粒。从35只大鼠中随机选取10只仅咬除椎板显露脊髓,不进行损伤处理,设为假手术组;其余25只复制ASCI模型,模型复制成功20只,随机分为ASCI组、实验组,每组10只。分离含有miR-124的Exos,鉴定后用于后续实验。模型复制成功后24 h,实验组经尾静脉注射Exos 3×109个微粒,假手术组及ASCI组注射等量PBS溶液。实时荧光定量聚合酶链反应检测脊髓组织miR-124的表达;流式细胞术检测脊髓组织MG占比;酶联免疫吸附试验检测脊髓组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平;Western bloting检测脊髓组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、P2X7蛋白的表达。结果 转染组miR-124相对表达量高...     

纳络酮和CPP对大鼠急性脊髓损伤的保护作用

目的：评价阿片受体拮抗剂纳络酮（ＮＬＸ）和兴奋性氨基酸受体拮抗剂３－（２－羧基哌嗪－４－基）丙基－１－磷酸（ＣＰＰ）在脊髓损伤后的治疗效果。方法：以７．５ｇ重物从１０ｃｍ高处落下致伤大鼠Ｔ１０脊髓，伤后６０ｍｉｎ开始治疗，从鞘内给予ＮＬＸ１０ｍｇ／ｋｇ、ＣＰＰ１００ｍｇ／ｋｇ、甲基强的松龙（ＭＰ）３０ｍｇ／ｋｇ。结果：ＮＬＸ、ＣＰＰ、ＭＰ均显著促进了脊髓损伤后的神经功能恢复，减少组织损害，ＮＬＸ、ＣＰＰ和ＭＰ之间无显著差别，但较三者合用的效果为差。结论：脊髓损伤后的继发性损伤是多水平、多因素的综合作用，ＮＬＸ、ＣＰＰ与ＭＰ联合应用治疗急性脊髓损伤较之单一用药更有效。     

白藜芦醇对大鼠脊髓损伤的保护作用

目的：建立Allens脊髓模型,探讨白藜芦醇（Res）对大鼠脊髓损伤（SCI）的保护效果.方法：将24只SD大鼠随机分为假手术组（A组）,脊髓打击损伤组（B组）,Res组（C组）,每组8只.A,B组根据自制改良的Allens装置制备脊髓急性打击损伤动物模型.脊髓打击损伤后即刻腹腔注射Res100mg/kg,观察并检测3组大鼠SCI后24,48,72h3个不同时间点后肢运动功能评分变化及脊髓组织病理学、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量改变.结果：术后A组大鼠功能完全恢复.B组和C组大鼠后肢运动功能24,48,72h3个时间点均有所改善.但24h时差异明显（P〈0.05）;48,72h时差异更为显著（P〈0.01）.A组神经组织结构完好,神经元轮廓清楚,核仁清晰可见,胞质均匀深染.脊髓打击损伤后72hB组神经组织多灶性出血并出现广泛的神经元坏死,尼氏体溶解消失,核固缩变小.C组神经组织结构损伤轻微,细胞轻度肿胀,胞质均匀.术后A组脊髓组织SOD活性升高,而MDA含量则处于较低水平.B组SOD活性明显降低,MDA含量明显升高,与A组相比较差异显著（P〈0.01）.C组与B组相比较,SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,差异具有统计学意义（P〈0.01）.结论：Res能明显促使SCI后的功能恢复,对SCI具有一定的保护作用.     

大鼠马尾神经急性压迫性损伤模型的建立

目的:建立一种大鼠马尾神经急性受压性损伤的动物模型.方法:将36只SD大鼠随机分为对照组(A组),1 d实验组(B组),7 d实验组(C组)及21 d实验组(D组),每组动物9只.将平头金属螺钉自L6椎板紧贴棘突拧入各实验组大鼠椎管,取术后1,7,21 d不同时间的动物采用联合行为评分(CBS)、测定脊髓诱发电位(SCEP)潜伏期值进行综合评判,并取骶髓进行H-E染色,观察脊髓神经元形态学改变.结果:在螺钉拧入椎管后,H-E染色显示大鼠骶髓前角细胞发生明显的形态改变,术后的CBS评分1 d:(17.89±1.27)分,7 d:(9.78±1.30)分,21 d:(9.33±1.41)分;脊髓诱发电位(SCEP)潜伏期值1 d:(4.29±0.51)ms,7 d:(4.35±0.54)ms,21 d:(4.91±0.53)ms,与对照组相比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:建立的马尾急性压迫性损伤模型,操作简便,重复性好,为进一步研究马尾急性压迫损伤奠定了基础.     

大鼠急性脊髓损伤动物模型的建立及影像学分析*

目的 建立一种大鼠急性脊髓损伤的动物模型,分析模型影像特征及诊断价值.方法 32只小鼠随机分为对照组(5只)和实验组(27只),对照组只暴露T9～11脊髓,实验组显露T9～11脊髓后采用钳夹法致伤.伤后行运动功能BMS评分,术后对模型均行脊柱X线片、CT、MRI检查.结果 实验组后肢运动功能损伤均明显,BMS评分与对照组差异有显著性 (P＜0.01); X线片可见胸椎T9～11局部骨质缺失;CT可见损伤脊髓周围组织有异常信号,但边界不清;MRI可见实验组损伤的脊髓组织T2异常强化,范围清楚,局部渗出液积聚.结论 钳夹损伤建立了可靠的脊髓损伤动物模型,MRI检查对大鼠的急性脊髓损伤具有很高的敏感性和准确性.