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相似文献
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1.
p38蛋白激酶不同亚型在RAW264.7细胞中的定位   总被引:5,自引:1,他引:4  
探讨p38的亚型在细胞中分布以外界刺激的反应,方法应用激光共聚焦显微镜对RAW264.7单核细胞内的4种亚型进行定位观察。结果p38α、p38β未受刺激的静息细胞贩荧光强度呈弥散性分布,受脂多糖(LPS)刺激后,细胞核荧光强度明显增强,细胞浆提示LPS诱P38α  相似文献   

2.
目的 探讨p38蛋白激酶信号传导的过程及其在细胞中的特异性作用机制。方法 应用间接荧光标记免疫探针技术及共聚焦激光扫描技术观察单核细胞中p38蛋白激酶的分布及LPS对其分布的影响。结果p38在未受刺激的静息单核细胞及内皮生长因子(EGF)刺激的单核细胞胞浆和胞核中荧光强度均呈弥散性分布;脂多糖(LPS)刺激使细胞核区的荧光强度明显增强,而胞浆区域的荧光强度降低。激酶动力学的研究显示,p38激活先于p38移位。LPS刺激后30 min,p38激酶活性即达到高峰,随后2 h内逐步下降,p38激酶活性呈一过性增高;LPS刺激45 min后,核区荧光强度达到峰值,且在2 h内维持在高水平。结论 单核细胞由LPS激活后,其p38蛋白激酶由胞浆转位到胞核,反应具有一定的特异性;p38移位入核依赖于p38磷酸化活化及由细胞浆移位到细胞核是一系列连续发生的事件。  相似文献   

3.
脂多糖激活p38在诱导肿瘤坏死因子α基因表达中的作用   总被引:16,自引:3,他引:13  
目的探讨防治内毒素休克的新方法,研究脂多糖(LPS)诱导肿瘤坏死因子α(TNFα)表达的分子机制。方法用蛋白激酶活性测定检测LPS刺激引起的激酶活性变化;共聚焦激光扫描技术显示p38激活移位;用反转录聚合酶链反应和报告基因系统研究TNFα基因转录的分子机制。结果发现LPS刺激RAW细胞引起p38激活并由胞浆移位至胞核。LPS刺激引起TNFαmRNA表达增加,而且由LPS引起的TNFα的转录活性可被p38特异性抑制剂所抑制。结论激活的p38通过磷酸化转录因子增加TNFα基因转录活性,这是中毒性休克时TNFα生成增加的一个重要机制。p38是LPS诱导TNFα基因表达的重要调节物质。  相似文献   

4.
目的:探讨急性脑出血性疾病与血浆过氧化脂质(LPO)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的关系。方法:用改良硫代巴比妥法、黄嘌呤氧化酶法和谷胱甘肽氧化酶法对44例急性颅内出血患者血浆LPO,SOD和GSH-PX含量测定,并以26例正常对照。结果:急性脑出血患者血浆LPO显著高于正常对照(P<0.001),而SOD、GSH-PX显著低于正常人组(P<0.001、P<0.05)。LPO与SOD、GSH-PX呈负相关(r=-0.28,r=-0.38)。结论:血浆中LPO、SOD、GSH-PX含量测定对判断急性脑出血性疾病严重程度、评估预后及辅助治疗有一定参与价值。  相似文献   

5.
目的:探讨IL-12、LPS对肾小管上皮细胞中lck基因表达及活性改变的影响,明确lck/P35信号传递途径在炎症过程的作用。方法:用原位杂交、放射自显影分别检测lck基因表达及lck活性,用免疫印迹法对明小管上皮细胞在IL-12、LPS刺激下其P38磷酸化进行测定。结果:肾小管上皮细胞径IL-12,LPS刺激后lckmRNA表达水平增高,lck知性在刺激后5min时最强,加入lck抑制剂PP1  相似文献   

6.
探讨脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对大鼠血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMC)诱导型一氧化氮合酶基因表达及一氧化氮(nitricoxide,NO)合成的影响。方法细胞培养,RNS迹分布和亚硝酸盐含量。结果LPS是iNOS的强效诱导物,可在转录水平上诱导VSMCiNOSmRNA表达,促进NO的合成,其作用强度与LPS剂量呈正相关;刺激  相似文献   

7.
目的 观察L-精氨酸和尼莫地平对脂多糖(LPS)诱导的内皮细胞(EC)的单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA和蛋白表达的影响。方法 在EC培养基中分别为LPS,LPS+L-精氨酸和LPS+尼莫地平,培养8小时,用异硫氢酸胍法提了细胞的总RNA,用γ^2-32P末端标记的MCP-1寡核苷酸探针培养基(CM)中的MCP-1蛋白含量,用免疫细胞化学方法检测EC的MCP-1的蛋白的表达。结果 斑点杂  相似文献   

8.
通过支气管肺泡灌洗术(EAL)获取肺泡巨噬细胞(PAM).用大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导及胸腺细胞增殖反应法,检测28例慢性阻塞性肺病(COPD)患者PAM释放白细胞介素1(IL-1)活性,并与12例健康非吸烟者对照。结果,经LPS刺激和未经刺激COPD组的PAM产生IL-1活性均明显高于对照组,COPD组中,经LPS刺激后PAM产生IL-1活性,肺心病组>肺气肿组>慢支组。提示,IL-1在COPD的发生和发展中起重要作用。  相似文献   

9.
胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR中P-gp与PKC同工酶亚型α的表达   总被引:7,自引:3,他引:4  
韩英  曹云新  时永全  聂永战  樊代明 《医学争鸣》2000,21(12):1454-1456
目的 观察P-糖蛋白(P-gp)与蛋白激酶C同工酶亚型(PKCα)在SGC7901/VCR耐药细胞系的相关表达及其功能。方法 采用免疫细胞化学检测P-gp在SGC7901/VCR及其亲本药敏细胞SGC7901的表达;免疫荧光双标及激光共聚焦显微镜技术(LCSM)观察P-gp与PKCα的相关表达;流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(R123)的荧光强度。结果 P-gp及PKCα在细胞膜上有共同表达部位  相似文献   

10.
丝裂素活化蛋白激酶在大鼠心脏缺血预处理中的作用   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的 探讨丝裂素活化蛋白激酶家系(MAPKs)在大鼠心脏缺血预处理(IPC)保护中的作用。方法 在离体灌注的SD大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)模型上,观察ICP对于I/R后损伤的影响,并观察MAPKs中三种激酶(细胞外信号调节激酶(ERKs)、蛋白激酶P38(P38)、应激活化蛋白激酶(SAPK))活性的变化及其佤保护作用的关系。结果 IPC明显改善大鼠I/R后的心脏功能,减少I/R造成的心肌肌酸  相似文献   

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