原代心肌细胞的培养

<正> 体外心肌细胞培养是近年来国外开展的一种实验方法。1960年Harary报道用Waster大白鼠的乳鼠心肌细胞体外培养获得成功。国内个别单位于七十年代后期始建立原代心肌细胞培养方法并有记录装置。心肌细胞培养广泛用于细胞药理学和分子生物学的研究中,它具有准确、可靠、简便、经济、快速及重复性好、可比性强等优点。且     

细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤

本文就近年来 ,缺血再灌注时的心肌细胞凋亡现象、心肌细胞凋亡的机制及心肌细胞保护的研究等 ,综述如下。1　心肌细胞凋亡现象对急性缺血和缺血再灌注时的心肌细胞凋亡曾有过争论 ,Ｇｏｔｔｌｉｅｂ等[1 ] 于 1 994年采用电镜结合ＤＮＡ凝胶电泳方法 ,率先报道了缺血再灌注时的心肌细胞凋亡现象 ,发现细胞凋亡可以作为心肌细胞缺血再灌注损伤的特征 ,并区别于缺血性损伤 ,单纯缺血心肌无细胞凋亡。同年Ｔａｎａｋａ等[2 ] 报道 ,在乳鼠心肌细胞培养时 ,以 95 %Ｎ2 、5 %ＣＯ2 造成缺血条件 ,在 1 2ｈ内就观察到心肌细胞凋亡 ,证实细胞凋亡…     

体外培养乳鼠心肌细胞的电生理学特性及与乳鼠成年鼠在位心脏的比较

作者使用常规的细胞内微电极技术,初步观察了由我院组胚教研室提供的培养乳鼠心室肌细胞的电生理特性,并与乳鼠、成年大鼠在位心脏相比较。本文结果与Schanne 0.F~3的报道相近似。用贴壁分离处理的心肌细胞静息电位较高,Vmax快。这一结果与Jourdon结果相似。可能是培养细胞中成纤维细胞的存在,某种原因降低了培养心肌细胞的电活动所致。作者在对比了培养心肌细胞、乳鼠、成年大鼠三者的电生理特性之后,对培养心肌细胞在电生理学研究中的应用,表明了粗浅的看法。     

成年小鼠心肌细胞的分离培养及鉴定

目的探讨成年小鼠心肌细胞分离培养的方法,评价心肌细胞的存活状况。方法应用改良Langendorff方法进行成年小鼠心脏灌流,分离并培养心肌细胞,评价杆状心肌细胞的比例变化。台盼蓝染色判定心肌细胞活力,应用毒胡萝卜素(thapsigargin)治疗心肌细胞24 h后,WST方法测定细胞生存率。结果在每个成年小鼠心脏分离了40~60万的心肌细胞,台盼蓝染色结果68%为存活心肌细胞。心肌细胞培养1 h2、4 h及48 h后,杆状心肌细胞的比例分别为70%、50%及30%。心肌细胞生存率随着毒胡萝卜素浓度的增加逐渐减低,其中1、5及10μmol/L毒胡萝卜素的生存率明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论应用改良Langendorff方法及严格控制心脏灌流培养的条件,可以成功地分离培养成年小鼠心肌细胞,有助于进行细胞分子水平的研究。     

乳小鼠心肌细胞体外培养方法的优化

目的探讨乳小鼠心肌细胞分离和体外培养的方法,并结合实际情况建立一种优化的体外培养乳小鼠心肌细胞的方法。方法胰酶-Ⅱ型胶原酶混合液分次消化乳小鼠心肌组织后行差速贴壁法达到心肌细胞纯化目的,并利用心肌细胞特意表达a-肌动蛋白的特性运用细胞免疫组织化学方法鉴定心肌细胞。结果差速贴壁48h后心肌细胞贴壁完全,并见大部分贴壁细胞出现搏动,但未观察到同簇搏动,经a-肌动蛋白细胞免疫组织化学鉴定,心肌细胞纯度达96.7%。结论本研究优化了原代乳小鼠心肌细胞分离和体外培养方法,为后续细胞实验打下了基础。     

心肌细胞二维培养的纯化和鉴定

目的探讨新生大鼠心肌细胞二维培养过程中心肌细胞的纯化及心肌细胞与成纤维细胞的鉴别,为改进心肌细胞二维培养及心肌细胞三维培养提供依据。方法用不同差速贴壁次数、含Brdu培养心肌细胞,免疫荧光标记后用激光共聚焦显微镜分别对24h的细胞进行分析鉴定。结果不同培养方法对心肌细胞的纯化有影响。结论差速贴壁次数的不同得到的心肌细胞纯度不一样,加入适当浓度的Brdu可抑制成纤维细胞的生长,获得纯度更高的心肌细胞。     

新生大鼠心肌细胞培养及方法的改进

新生大鼠心肌细胞培养及方法的改进吴国群基础医学研究所微生物研究室（０５００１７）关键词心肌细胞；培养方法；改进我们在大鼠心肌细胞培养的试验中，改进了以往心肌细胞制备的方法，获得了更为满意的效果．现报告如下．１材料与方法选择新生Ｗｉｓｔａｒ大鼠，常规消...     

乳鼠原代心肌细胞培养的镜下观察

本文从乳鼠原代心肌细胞培养方法、细胞形态、功能活动等方面做了细致的观察与描述,在 pH、温度、胰蛋白酶等对培养心肌细胞的影响方面进行了探讨。证明了培养心肌细胞的肾上腺素能受体未因培养而被破坏。还证明了葛根提取物 PuRWO_3有阻滞异丙肾上腺素所致培养心肌细胞搏动频率上升的药效。     

大鼠成体心肌细胞的分离和培养

目的: 探索稳定的大鼠成体心肌细胞的分离和培养方法. 方法: 应用主动脉逆行生物酶(5 g/L胰蛋白酶及1 g/L胶原酶)灌流法分离大鼠成体心肌细胞,免疫荧光染色法鉴定分离的心肌细胞,比较有无血清培养对心肌细胞的影响. 结果: 心肌细胞的存活率为95%以上;存活细胞呈杆状,形态完整,长宽比约为4～6∶ 1;无血清培养心肌细胞只能存活1 wk,形态不发生改变;而加血清培养心肌细胞可存活2 wk以上,但超微结构发生了改变,且不同血清浓度对成纤维细胞生长具有不同的作用. 结论: 主动脉逆行生物酶(胶原酶和蛋白酶)灌流法是比较理想的心肌细胞分离方法;血清对成体心肌细胞的培养起着重要作用.     

《改进悬浮微电极在位法及用于心肌电生理研究》通过技术鉴定

我院心肌电生理研究室通过改进悬浮式微电极及其实验方法,对十七种动物心肌细胞动作电位进行了测定,全面报道了其正常值,其中十五种动物应用微机进行实时处理。在此基础上,进行了室颤时单个在位心肌细胞电变化研究。从比较生理学角度对培养心肌细胞,幼年和成年动物心肌细胞的电生理特性进行了研究,提供了有价值的资料。四川省高教局于1986年6月6日—7日在我院主持召开了成果鉴定会。北京大学、南开大学、华西医科大学、第三军医大学等院校专家教授参加了会议。同济医科大学、山西医学院、哈尔滨医科大学、西安医科大学的专