微生物法检测实验动物血清中抗生素残留的研究

目的 建立实验动物血清中抗生素残留检测方法,保证微生物质量检测结果的准确。方法 采用微生物抑制法,用嗜热脂肪芽孢杆菌作为指示菌,对1640份实验动物血清进行抗生素残留检测。并与Premi@Test抗生素检测试剂盒进行比对。结果 在受试样品中,检测出小鼠、大鼠、豚鼠、兔和犬的血清中存在抗生素残留,阳性率分别为27.2%、16.4%、39.9%、23.7%和47.6%。抽取82份血清和18份阴阳对照品,与Premi@Test检测的结果相比较差异不显著（X2=16.680,P>0.05）。血清中抗生素的残留与DHL琼脂平皿的菌落生长有一定相关性（X2=9.939,P<0.05）。结论 本研究采用嗜热脂肪芽孢杆菌作为指示菌的微生物抑制法,能够对动物血清中的抗生素进行检测,具有良好的敏感性和重复性,成本低,操作简便。为实验动物体内抗生素残留检测和微生物学检测结果的准确性提供依据。     

微生物法测定血清硫酸依替米星影响因素研究

目的 建立一种检测血清中硫酸依替米星的微生物检测方法.方法 以枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌作为检定菌,采用微生物法中的管碟法,对方法中检定菌取量筛选等多种影响因素进行观察.结果 确定了用枯草芽孢杆菌作检定菌,配制含菌悬液0.4%的工作菌液,在60～65℃时制备底层和菌层,加样量为200 μl,在经过1% NaOH调节pH值的抗生素微生物检定培养基Ⅰ号中,检测硫酸依替米星的线性浓度范围为0.25～32.0 μg/ml,线性方程：logC=0.1281D-1.5726,r=0.9983.结论 方法稳定可靠,可用于硫酸依替米星血药浓度的检测.     

9%过氧化氢在生物安全三级实验室终末消毒中的应用

目的 观察9%过氧化氢及相应的过氧化氢发生器对生物安全三级实验室的空间表面消毒灭菌效果,同时探讨生物安全柜,房间排风高效过滤器原位消毒的最佳灭菌方案。方法 同时采用枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢杆菌作为生物指示剂（1×10⁶ CFU/片）,使用9%浓度的过氧化氢对生物安全三级实验室的空间表面和实验室的关键防护设备（生物安全柜和高效过滤器）进行不同时间（1.5、3.5、5 h）的消毒效果验证,确定最有效的消毒方法。结果 保持室温20~25 ℃,相对湿度小于55％,使用9%过氧化氢,1.5 h消毒方法可以将房间空间表面的枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢载体完全杀灭,但是无法将生物安全柜高效过滤器和房间的排风高效过滤器的枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢载体完全杀灭;使用9%过氧化氢,3.5、5 h消毒方法可以将房间空间表面,生物安全柜和房间的排风高效过滤器的芽孢杆菌载体完全杀灭。结论 9%过氧化氢和配套的CLEANCube过氧化氢发生器可用于生物安全三级实验室的终末消毒,经过多次消毒验证,最佳条件为：9%过氧化氢,3.5 h。     

IVF-20培养液用于大鼠体外受精的实验研究

目的调查分析小鼠嗜肺巴氏杆菌感染情况。方法对某实验动物设施的空气、排风口、门把手、小鼠咽、饮水、饲料、垫料、粪便采样,进行嗜肺巴氏杆菌检测。结果所采集的201份样品,经细菌分离培养和菌落形态、革兰氏染色、生化试验、血清玻片凝集试验的进一步鉴定,从小鼠咽、饮水、饲料中检出了嗜肺巴氏杆菌。结论该设施饲养的小鼠携带嗜肺巴氏杆菌,饮水和饲料也有嗜肺巴氏杆菌污染,该污染可能与动物饲养密度过高有关。     

血站质量控制系统中细菌学检验初探

探讨血站质量控制系统中细菌学检验的操作方法和质量标准。方法建立了采血室外及成分分离敢培养、储血冰箱空气培养、嗜热脂肪杆菌芽孢检验,一次性注射器及输血器细菌培养、工作人员手指细菌培养,血袋,血液制品细菌培养的方法。结果：采血室空气细菌总数≤于５００;储血冰箱中平均细菌数≤２;压力蒸气灭菌消毒后,无嗜热脂肪杆菌芽孢一次性注射用品夫细菌生长;工作人员手指培养细胞总数≤３００;献血员臂部无细菌生长,血袋及     

2018—2020年宝鸡市食品中蜡样芽孢杆菌污染状况的调查研究

目的了解宝鸡市食品样品中蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus,BC)的污染状况,为食品监管提供有效的科学依据。方法按照GB/T 4789.14—2003《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽孢杆菌检验》中的方法采集宝鸡市2018年1月—2020年12月辖区内的187份食品样品进行检测分析。结果 6类187份食品样品检出33株蜡样芽孢杆菌,阳性检出率为17.65%。各类食品样品中均检出蜡样芽孢杆菌,且不同类型食品样品中蜡样芽孢杆菌检出率差异有统计学意义(χ~2=13.099,P=0.021),其中麦片等冲调谷物阳性检出率最高(32.56%),中式凉拌菜检出率最低(6.67%);一年四季均检出蜡样芽孢杆菌,第二、第三季度阳性率最高,但不同季度蜡样芽孢杆菌的阳性检出率差异无统计学意义(χ~2=1.460,P=0.707);蜡样芽孢杆菌阳性样品含菌数在6类食品样品中的总体分布差异有统计学意义(H=17.248,P=0.004),其中含菌数10~2 CFU/g的16份,占阳性菌株的48.48%,含菌数10~4 CFU/g检出数占阳性菌株的6.06%。结论宝鸡市各类食品样品中均有蜡样芽孢杆菌的污染,特别关注麦片等冲调谷物食品的污染,相关部门应加大监管力度,以预防食源性疾病的发生。     

柯萨奇病毒A16粘膜疫苗的制备及其免疫效果研究

目的利用同源重组技术将柯萨奇病毒A16型(Coxsachievirus A16,CA16)VP1基因重组入枯草芽孢杆菌基因组,进而将VP1蛋白展示在芽孢表面制备CA16粘膜疫苗。将疫苗滴鼻方式免疫小鼠,检测小鼠血清中VP1特异性抗体滴度,体外中和实验检测抗体的保护作用。方法将枯草芽孢杆菌CotB基因与VP1基因连接后插入整合质粒pDG1662得到重组质粒pDG1662-CotB-VP1,电转化法将线性化重组质粒转化枯草芽孢杆菌1A771,抗生素抗性筛选,PCR、Western-Blot、免疫荧光鉴定VP1基因重组及蛋白表达情况。将该疫苗滴鼻免疫小鼠,ELISA法检测血清抗体滴度,体外中和实验分析该抗血清的中和活性。结果 VP1基因成功重组入枯草芽孢杆菌基因组中并将蛋白展示在芽孢表面。该疫苗免疫小鼠后有效的诱导了小鼠体液免疫反应,并且该抗血清在体外中和实验中表现了较好的中和活性。结论 CA16 VP1蛋白展示在枯草芽孢杆菌芽孢表面制备的疫苗能刺激小鼠产生具有保护作用的中和抗体,为研制CA16粘膜疫苗奠定了基础。     

生物安全实验室过氧化氢熏蒸消毒灭菌效果的监测

目的观察过氧化氢蒸汽熏蒸消毒对生物安全实验室内空间及物体表面灭菌效果,同时探索敞开性设备内部表面达到最佳灭菌效果的方案。方法采用载体定性杀菌试验法,检测不同过氧化氢蒸汽发生剂量对生物安全实验室内空间及敞开性设备表面熏蒸消毒效果。结果保持室内常温,相对湿度40%~50%,用Bioquell Z-2过氧化氢蒸汽发生器,进行汽化熏蒸消毒,密闭作用60 min,空间分布过氧化氢浓度含量为9 g/m3可以对室内空间不同位置表面放置的染菌嗜热脂肪芽胞杆菌完全杀灭;对室内敞开性设备内部不同位置表面放置的染菌嗜热脂肪芽胞杆菌,过氧化氢浓度含量15 g/m3可完全杀灭。结论用Bioquell Z-2过氧化氢蒸汽发生器产生的蒸汽对生物安全实验室空间和敞开性设备内部表面熏蒸可以将污染在载体上的细菌芽孢达到完全杀灭,消毒效果符合要求。     

影响压力蒸汽杀灭芽胞的因素研究

影响压力蒸汽杀灭芽胞的因素研究钟权昌汪保国伍碧雯（广东药学院流行病学教研室，广州５１０２２４）关键词压力蒸汽灭菌；枯草杆菌；芽胞；杀灭率中图号Ｒ１８７压力蒸汽灭菌是目前灭菌的常用手段之一，检测压力蒸汽灭菌的灭菌效果常用嗜热脂肪杆菌芽胞作为指示菌，而用...     

嗜肺巴斯德杆菌选择性培养基研制及应用

目的　研制一种对嗜肺巴斯德杆菌表现出强选择作用的选择性培养基,用于该菌的常规检测。方法　药敏试验及抗生素最小抑菌浓度测定。结果　研制了嗜肺巴氏杆菌选择性培养基(PPSM培养基)及嗜肺巴斯德杆菌增菌液(PP肉汤)。嗜肺巴斯德杆菌在PPSM培养基上,37℃48h培养,形成1mm左右,凸起、湿润、灰黑色并有金属光泽的特殊菌落;对表皮葡萄球菌和大肠埃氏菌的抑制率为100%,对变形杆菌的抑制率为76%,并能抑制其迁徙生长;通过PP肉汤增菌培养,PPSM培养基使SPF小鼠粪便中嗜肺巴斯德杆菌检出率从0增至67.2%;用小鼠咽拭子接种该培养基,其初代培养物几乎为纯培养物。结论　该培养基对嗜肺巴氏杆菌具有较强的选择作用,使用该培养基对嗜肺巴氏杆菌进行检测可以简化检测程序、防止漏检、在不处死动物的情况下对嗜肺巴斯德杆菌进行常规监测。