人早孕胎盘绒毛膜滋养层细胞的培养

目的: 培养纯度较高的人绒毛膜滋养层细胞, 为胎盘绒毛在妊娠期间的作用及其机制研究提供细胞学基础.方法: 胰蛋白酶-DNase消化法培养人绒毛膜滋养层细胞,间接免疫染色进行细胞纯度检测,透射电镜观察细胞内部结构.结果: 倒置显微镜下,可见细胞为上皮样细胞形态,呈片状铺展生长.细胞角蛋白染色阳性,波型蛋白染色阴性,表明不含污染细胞.透射电镜观察示所获细胞有典型滋养层细胞结构.结论: 该法简便易行,可获得合乎试验要求的人绒毛膜滋养层细胞.     

人胎盘滋养层细胞的分离培养及IgG FcγRⅢ在滋养层细胞的表达

目的：体外分离培养人胎盘滋养层细胞，观察其生物学特性，研究IgGFcγRⅢ（CD16）在人胎盘组织中的定位及体外培养的滋养层细胞是否存在CD16，从而为HCV母婴传播机制的研究提供细胞学实验基础。方法：采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织，以35%、45%两个Percoll密度梯度进行分离纯化，用ABC免疫组化染色法对足月分娩后的胎盘组织石蜡包埋切片及体外分离培养的胎盘滋养层细胞进行染色。结果：胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性，血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性，经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者（滋养层细胞（占90%以上，胎盘组织切片的滋养层细胞及体外分离培养的滋养层细胞抗CD16染色阳性，阳性信号定位于胞质，未见胞核着色，结论：改进后的分离方法可能得到较高纯度的滋养层细胞，胎盘组织的滋养层细胞和体外分离培养的滋养层细胞均有CD16表达。     

人胎盘滋养层细胞的分离培养及HCV体外感染试验

目的：体外分离培养较高纯度的胎盘滋养层细胞，观察其生物学特性，探讨丙型肝炎病毒（HCV）经胎盘母婴传播的具体途径。方法：采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织，以35％，45％两个Percoll密度梯度进行分离纯化。并用免疫组化及透射电镜等技术对其生物学特性进行观察。HCV阳性血清感染体外分离培养的胎盘滋养层细胞，通过逆转录聚合酶链反应及扩增敏感试验对培养上清进行定性、定量检测，以观察HCV的感染及复制情况。结果：胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性，血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性，经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者（滋养层细胞）占90％以上，电镜下滋养层细胞可观察到成熟型、中间型、未成熟型三种形态。HCV感染细胞培养16d内培养上清中可间断检测出HCV RNA.结论：改进后的分离方法可以得到较高纯度的滋养层细胞，HCV感染胎盘滋养层细胞可能是HCV宫内母婴传播的途径之一。     

人胎盘滋养层细胞表达白细胞介素-3

目的:确定脐血中高含量白细胞介素3(IL-3)的主要来源,进一步了解脐血造血微环境.方法:应用抗IL-3多克隆抗体对7例人工流产的绒毛标本和10例健康产妇足月分娩的胎盘组织及脐带标本进行免疫组织化学染色.结果:足月胎盘的滋养层细胞呈现阳性表达,绒毛标本的滋养层细胞未见阳性表达,在其他细胞和脐血管内皮细胞上未见阳性表达.结论:胎盘滋养层细胞是脐血和胎盘表面的IL-3的主要来源.滋养层细胞分泌这种细胞因子的功能是随着胚胎的发育而逐渐完善的.     

人胎盘绒毛膜滋养层细胞的培养

目的 建立纯度较高的适于试验研究的人绒毛膜滋养层细胞。方法 胰蛋白酶-DNase联合消化法培养人绒毛膜滋养层细胞，间接免疫染色进行细胞鉴定。透射电镜观察细胞内部结构。结果 倒置显微镜下，可见细胞呈不规则多角形，核大卵圆形，胞质透明，呈片状铺展生长，角蛋白染色阳性率超过95%，未检测到波形蛋白阳性细胞，表明不含污染细胞。透射电镜观察示所获细胞有典型滋养层细胞结构。结论 该法简便易行，可获得合乎试验要求的人绒毛膜滋养层细胞。     

人滋养层细胞内丙型肝炎病毒样颗粒的免疫电镜形态学研究

目的：应用免疫电镜技术观察体外培养的人胎盘滋养层细胞感染丙型肝炎病毒（HCV）情况。方法：采用胰蛋白酶消化法及Percoll密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞，以HCV RNA阳性血清对滋养层细胞进行体外感染实验，胶体金免疫电镜检测滋养层细胞内的HCV病毒颗粒，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）定性检测滋养层细胞内HCV RNA。结果：体外培养的人胎盘滋养层细胞内可观察到胶体金颗粒吸附的病毒样颗粒，形态及直径符合HCV特点。RT—PCR定性检测结果阳性，进一步证文所观察到的病毒样颗粒为HCV。结论：HCV可感染体外培养的人胎盘滋养层细胞。     

人胎盘绒毛滋养层细胞PTEN基因和PCNA的表达

目的研究人胎盘绒毛滋养层细胞中的10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensinhomology deleted on chromosome 10,PTEN)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达与意义。方法PCR检测胎盘PTEN的外显子以证明PTEN基因的存在,原位杂交检测胎盘绒毛滋养层中PTEN mRNA的表达,免疫组化染色方法检测胎盘滋养层细胞中PTEN与PCNA的表达。结果在所分析的28例胎盘中,PCR均检测到PTEN基因的3,4,5外显子,93%(26/28)胎盘绒毛滋养层表达PTEN mRNA较强,同样地,86%(24/28)胎盘滋养层细胞中PTEN蛋白表达强,而胎盘绒毛内小的间质细胞不表达或弱表达PTEN mRNA和PTEN蛋白。PCNA主要在细胞滋养层细胞中表达强,在合体滋养层细胞中呈阴性。结论PTEN的表达与人胎盘绒毛滋养层细胞形成有密切的关系,细胞滋养层是胎盘绒毛中可增殖的细胞。     

人早孕绒毛滋养层细胞的分离纯化及马鞭草对其分泌绒毛膜促性腺激素的影响

从正常妊娠６～８周早期胎盘Ｐｅｒｃｏｌ梯度离心分离出滋养层细胞进行体外培养，观察马鞭草对培养的滋养层细胞形态及绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）分泌功能的影响，探讨了马鞭草抗早孕的细胞学作用机理。结果表明２５，５０ｍｇ／ｍｌ马鞭草乙醇提取液对滋养层细胞ＨＣＧ分泌有明显的抑制作用，给药后２４ｈ即见部分细胞变圆，４８ｈ大多固缩死亡。一定浓度的马鞭草可直接杀伤滋养层细胞，抑制ＨＣＧ的分泌而中止早孕。     

肿瘤坏死因子α在人早期胎盘中的产生及其对hCG分泌的调节作用

用酶免疫分析法检测了人胎盘组织和分离的滋养层细胞产生的肿瘤坏死因子α(TNFα)。在组织切片上用抗TNFα单克隆抗体显示出胎盘产生TNFα的部位在滋养层。重组TNFα刺激分离的滋养层细胞,并测出其产生绒毛膜促性腺激素的值,该值依赖于所用重组TNFα的浓度。     

人早孕绒毛滋养层细胞的体外分离与培养

目的 建立人早孕绒毛滋养层细胞有效的分离、培养方法.方法 利用成纤维细胞较滋养细胞贴壁早的特性,将滋养细胞与前者分离、纯化、培养.倒置显微镜观察滋养细胞的形态学特征;免疫细胞化学鉴定细胞来源及纯度.结果 倒置显微镜下可见细胞为上皮样细胞形态,呈片状铺展生长.细胞角蛋白染色阳性,波形蛋白染色阴性细胞达80%～85%,台盼蓝排斥试验示活细胞率超过90%.结论 采用差异贴壁法及体外培养条件,可简单、快捷地获得较高纯度的人早孕绒毛滋养细胞.     

冷冻(断裂)复型电镜技术的应用

本文简单介绍冷冻断裂复型电镜技术在国内、外的概况,並阐明了该项新技术的独特作用和具体的操作步骤;在制作生物样品时所需的仪器设备和试剂的配制等内容。     

人乳头瘤病毒感染超微结构观察

本文对5例典型尖锐湿疣标本及10例可疑人乳头瘤病毒感染标本进行透射电子显微镜观察。结果典型尖锐湿疣标本中仅1例于细胞核内见到人乳头瘤病毒,排列规则呈结晶状。其余14例标本的细胞内均见不同程度的由病毒感染所引起的非特异性病理变化。本文对人孔头瘤病毒及受感染细胞的超微结构进行了初步探讨。     

亚硝酸盐测定和染色镜检对尿路感染的临床意义

目的：探讨亚硝酸盐测定和染色镜检两者在尿路感染的诊断应用。方法：对中段尿作细菌定量培养，同时行尿常规亚硝酸盐测定和尿染色镜检细菌。结果：亚硝酸盐测定对尿路感染的诊断灵敏度为62．8％，特异度为96．3％，阳性预测值为75．9％，阴性预测值为93．3％。染色镜检细菌对尿璐感染的诊断灵敏度为85．7％，特异度为94．1％，阳性预测值为73．2％。阴性预测值为9r7．3％。两法相结合的诊断灵敏度为57．1％，特异度为99．7％，阳性预测值为97．6％，阴性预测值为92．6％。结论：亚硝酸盐检测和染色镜检相结合能够帮助临床较快地诊断尿路感染。     

冷冻断裂人胎心肌细胞的扫描电镜观察

应用冷冻断裂技术结合扫描电镜的方法来观察5～10个月人胎心肌细胞的三维立体构象表明:胎儿心肌细胞较成人小。肌丝随月份逐渐增多。线粒体多为圆形、卵圆形,嵴发育好;后继月份有核周区聚集现象;偶见巨大线粒体。横管于6个月后遍及肌丝区,见有核膜攀附现象。肌质网发达,与线粒休、核膜广泛联系。根据以上结果对人胎心肌的发育进行了讨论。     

28例原发性肝癌超微结构研究与分析

本文对28例原发性肝癌细胞超微结构进行观察（26例肝细胞癌，1例混合型肝癌，1例胆道细胞癌）。发现肝癌细胞核明显增大，核外型极不规则，往往凹陷，多数核呈伪足状突起，大多数分化好的癌细胞质内出现较多的粗面内质网，常成层状排列；线粒体也较为丰富，并可见脂滴和少量的溶酶体。     

阴茎头表皮细胞凋亡特征

目的 探讨阴茎头表皮细胞凋亡特征。方法 利用活检的方法取患者的阴茎头表皮，进行透射电镜样品的制备和观察。结果 阴茎头表皮细胞出现染色质凝集、固缩、细胞收缩变扁，细胞连接解体等细胞形态和结构的改变。结论 阴茎头表皮细胞存在着细胞凋亡的一些形态学特征。     

37例脑胶质瘤超微结构研究

我们对３７例经光镜和免疫组化证实的人脑胶瘤标本进行了透射电镜观察。结果显示不同类型、不同级别的胶质瘤在超微结构上各具一定的特点。星形细胞肿瘤瘤细胞内均含有多少不等的胶质细丝；Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ纤维由嗜锇性中心及其周围的ＧＦｓ束构成；偶见环孔板层小体、核内细丝等少见结构；间质表现亦有特点。光镜下所见的典型少突胶质细胞瘤于电镜下亦可发现或多或少的含有ＧＦｓ的星形细胞突起。结果表明，超微结构观察在胶质瘤     

大鼠附睾的超微结构观察

应用常规电镜技术对10只大鼠的附睾进行了超微结构观察。附睾上皮各型细胞的超微结构除主细胞外均无明显的节段性区别。各段主细胞均具有分泌细胞和吸收细胞的超微结构特征。但近段附睾的主细胞偏重呈现吸收细胞的特点,而远段主细胞则偏重显示分泌细胞的特征。此外,发现在有的晕细胞外面包绕一个具长突的细胞。于附睾尾段少数亮细胞的基部见到类结晶体结构。管周组织内发现存在有窗孔毛细血管。本文对上述有关结构的意义作了简单的讨论。     

体外连续培养FCC-1/HN株恶性疟原虫红内期超微结构改变的透射电镜观察

将1979年正式定名建株到现在,其间经历了9年反复冻存、复苏、培养的FCC-1/HN株恶性疟原虫,用培养效果明显优于成人血清的10%脐带血清进行体外培养。60天后取培养物用透射电镜观察了疟原虫和其宿主细胞——红细胞近期的超微结构情况。观察结果表明与以往已报道的同株疟原虫相比,除见到了仍有相似之处外;还发现有某些不同的特征性改变:①疟原虫寄生的红细胞,其表面结节完全消失;也未见到典型的茂氏裂隙。②疟原虫虫体胞质内空泡结构和胞质裂隙增多。提示:疟原虫和被寄生的红细胞的超微结构在外界环境条件改变时,也会随之发生一些变化。这些变化,应引起我们今后在以体外培养研究疟原虫的生物学、生理生化和药物筛选中的重视,尤其是免疫学的重视。     

慢性苯中毒病人外周血白细胞电镜观察

本文报道6例慢性轻度苯中毒病人和3例观察对象外周血白细胞形态的电镜观察。并以正常成人作对照。结果表明慢性轻度苯中毒病人白细胞超微结构出现一系列形态学改变。此种改变也存在于部分观察对象的白细胞中。