雷公藤对致敏小鼠T细胞活化及其IL-5 mRNA表达的影响

目的　探讨致敏小鼠T淋巴细胞活化与IL 5mRNA表达间的关系及雷公藤内酯醇 (TP)的影响。方法　采用卵蛋白(OVA )致敏的方法建立模型 ;运用免疫细胞化学与原位杂交双染法 (ICC ISH)观察活化的T淋巴细胞 (CD2 5 )与IL 5mRNA表达的相关性及TP、地塞米松 (DM)的影响 ;同时就TP的作用与DM相比较。结果　致敏小鼠T淋巴细胞CD2 5与IL 5mRNA表达均显著高于正常对照组 (P <0 0 1)。CD2 5 IL 5mRNA双染结果显示 :CD2 5 + IL 5mRNA+ T淋巴细胞显著高于正常对照组 (P <0 0 1) ,CD2 5 - IL 5mRNA- T淋巴细胞显著低于正常对照组 (P <0 0 1) ,CD2 5 + IL 5mRNA- 及CD2 5 - IL 5mRNA+ T淋巴细胞与正常对照组间无显著差异(P >0 0 5 )。经TP、DM处理后 ,致敏小鼠T淋巴细胞CD2 5与IL 5mRNA表达均显著低于致敏组 (P <0 0 1)。CD2 5 IL 5mRNA双染结果显示 :CD2 5 + IL 5mRNA+ T淋巴细胞显著低于致敏组 (P <0 0 1) ,CD2 5 - IL 5mRNA- T淋巴细胞显著高于致敏组 (P <0 0 1) ,而CD2 5 + IL 5mRNA- 及CD2 5 - IL 5mRNA+ T淋巴细胞与致敏组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。TP组与DM组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　IL 5mRNA表达与T淋巴细胞活化关系密切。TP、DM抑制T淋巴细胞活化可能是其抑制IL 5产生的机制之     

齿密螺旋体免疫抑制作用的实验研究

目的　了解齿密螺旋体对小鼠T淋巴细胞亚群以及T细胞中IL 2mRNA表达水平及活性的影响作用。方法　采用流式细胞仪观察齿密螺旋体对小鼠模型外周血T淋巴细胞亚群的影响 ;以RT PCR和凝胶图像吸收度分析系统检测齿密螺旋体对小鼠脾脏T细胞IL 2mRNA表达的影响。结果　注射齿密螺旋体超声破碎液的小鼠脾细胞中的CD4 + T细胞阳性百分数明显下降 (P <0 .0 5 ) ,CD8+ T细胞则明显升高 (P <0 .0 5 ) ,CD4 + /CD8+ T细胞比值显著降低 (P <0 .0 1) ;齿密螺旋体能在转录水平抑制静息T细胞IL 2mRNA的表达 ,并抑制T细胞培养上清液中IL 2样活性。结论　①激活CD8+ T细胞活性的功能 ,同时造成CD4 + T细胞百分数相对下降 ;改变CD4 + T、CD8+ T两亚群间的平衡。②齿密螺旋体具有抑制静息T细胞IL 2mRNA的表达 ,降低T细胞培养上清中IL 2分泌水平     

足月新生儿T淋巴细胞凋亡特性及影响因素的初步观察

目的　探讨足月新生儿T淋巴细胞凋亡特性及其影响因素。②方法　以健康成人为对照 ,采用凋亡细胞计数和片段DNA电泳观察足月新生儿T淋巴细胞凋亡特性 ;用免疫荧光法、ELISA法分别检测足月新生儿CD2 5,CD3 8表达率和IL 2 ,IL 6产生能力 ,并分析其与凋亡率的相关性。③结果　经PHA刺激培养 2 4,48h足月新生儿T淋巴细胞凋亡率明显高于成人组 (t=32 .2 5 8,2 1.6 80 ,P <0 .0 1) ;足月儿组培养 0 ,48h的CD3 8表达率与T淋巴细胞凋亡率呈正相关 (r=0 .894,0 .774,P <0 .0 1) ,而培养 48h的CD2 5表达率与T淋巴细胞凋亡率呈负相关 (r =- 0 .886 ,P <0 .0 1) ;足月儿组IL 6产生水平明显低于成人组 (t=6 .741,P <0 .0 1) ,而T淋巴细胞凋亡率与IL 2 ,IL 6产生水平皆无相关性。④结论　凋亡过剩是新生儿T淋巴细胞功能不成熟的重要特征之一。     

银屑病病人外周血及皮损组织T细胞亚群及IL—2R的变化

①目的　观察银屑病病人外周血与皮损组织中T淋巴细胞亚群及白细胞介素 2受体 (IL 2R)的变化 ,以探讨其与银屑病皮损形成的关系。②方法　采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法 (APAAP)和双抗体夹心ELISA法 ,检测了 5 7例银屑病病人外周血T淋巴细胞亚群和可溶性IL 2R(sIL 2R)的变化 ;采用免疫组化ABC法 ,检测37例银屑病病人皮损组织和非皮损组织及 2 0例正常皮肤组织的T细胞亚群CD+ 4,CD+ 8,CD+ 2 5的原位表达。③结果　银屑病病人外周血CD+ 4,CD+ 4/CD+ 8水平明显下降 ,sIL 2R ,CD+ 8水平上升 ,与对照组比较差异有显著性 (t =7.92～ 2 2 .16 ,P <0 .0 1) ;进行期CD+ 4,CD+ 4/CD+ 8,sIL 2R较静止期变化更明显 (t =5 .476 .95 ,P <0 .0 1)。银屑病皮损组织表皮及真皮CD+ 4,CD+ 8,CD+ 2 5细胞原位表达均显著高于正常组织及非皮损组织 (t =7.1117.36 ,P <0 .0 1) ;且进行期各指标表达较静止期明显 (t=2 .2 2 4.5 1,P <0 .0 5 )。④结论　银屑病皮损的形成可能与局部T淋巴细胞的活化有关。     

过敏性哮喘患者树突状细胞对原始T细胞活化的影响

目的　探讨过敏性哮喘病人和正常人外周血单个核细胞 (PBMC)来源树突状细胞(DC)表达表面分子 (CD1a、CD83、CD4 0、CD86 )和细胞因子 (IL -1 2 )的差异及其对Th1和Th2型细胞因子平衡的影响。方法　分别取哮喘患者和正常人外周血经Ficoll和不连续密度梯度离心法获取贴壁细胞 ,加入细胞因子 (GM CSF和IL 4)体外培养为不成熟DC(iDC) ,给予LPS刺激使其发育为成熟DC(mDC)。另取脐血同上方法获得非贴壁细胞 ,分别加CD4单抗和CD4 5RA单抗及磁珠分离得到原始T淋巴细胞 ,分别将两组mDC和原始T细胞共培养。使用流式细胞仪 (FACS)检测树突状细胞表面共刺激分子CD1a、CD83、CD4 0、CD86的表达 ,通过ELISA法检测mDC分泌的IL -1 2及T细胞分泌的IFN -γ和IL- 4的含量。结果　 (1 )哮喘组PBMC来源DC表达CD86分子比对照组显著升高(P <0 . 0 1 )。 (2 )哮喘组DC产生IL- 1 2及其亚单位p4 0均较正常对照组显著减少 (P值均 <0 . 0 1 ) ;(3)混合淋巴细胞反应中 ,哮喘组T细胞释放Th1型细胞因子IFN -γ较对照组减少 (P <0 . 0 5 ) ,Th2型细胞因子IL -4较对照组显著增多 (P <0 . 0 1 ) ;(4)哮喘组CD86表达水平与IL 4浓度呈正相关(r=0 5 4 87,P <0 . 0 5 ) ;(5 )哮喘组IL- 1 2水平与IFN -γ水平呈正相关 (r =0 . 75 81 ,P <0 . 0     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎免疫发病机制的研究

目的　研究呼吸道合胞病毒毛细支气管炎 (简称RSV毛支 )免疫发病机制。方法　对 12例确诊为呼吸道合胞病毒毛细支气管炎急性期患儿 (毛支组 )和 10例年龄匹配的健康婴幼儿 (对照组 )外周血T细胞亚群和单核细胞 (PBMC)分泌的细胞因子IFN -γ和IL - 4进行检测。结果　毛支组CD8+T淋巴细胞和NK细胞明显低于对照组 (P <0 0 2 ,0 0 1) ,CD3+T、CD4 +T、CD4 +T/CD8+T与对照组比较无显著差异 (P >0 0 5 )。毛支组IFN -γ水平明显低于对照组 (P <0 0 1) ,IL - 4,IL - 4/IFN -γ较对照组明显增高 (P <0 0 1,0 0 1) ,且IFN -γ与IL - 4呈负相关 (r =- 0 81,P <0 0 5 ) ;毛支组中特应征 +患儿与特应征 -比较 ,前者IFN -γ明显降低 (P <0 0 1) ,IL - 4和IL - 4/IFN -γ明显增高 (P <0 0 1,0 0 5 )。结论　RSV毛支急性期存在Th1/Th2 平衡紊乱 ,表现Th2 优势应答 ,与遗传特应征与细胞因子分泌异常有一定关系 ,同时NK和CD8+T细胞在RSV毛支免疫发病机制中也起重要作用。     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿T细胞亚群和相关细胞因子的变化及其临床意义

对 5 8例呼吸道合胞病毒 (RSV)毛细支气管炎患儿 (RSV组 )及 2 0名正常儿童 (对照组 ) ,采用间接免疫荧光检测外周血T细胞亚群CD4、CD8的比例 ,ELISA方法及多标记免疫分析系统检测血清IL 4和INF γ的表达水平。结果显示 ,RSV组与对照组外周血T细胞亚群CD4和CD8无明显差异 (P >0 .1) ,CD4 /CD8比值RSV组显著高于对照组 (P <0 .0 2 ) ;血清IFN γ两组无明显差异 (P >0 .1) ;IL 4和IL 4 /IFN γRSV组均显著高于对照组(分别P <0 .0 5和P <0 .0 2 )。表明RSV毛细支气管炎患儿存在T细胞亚群变化 (CD4 /CD8比值增高 ) ;以IL 4为代表的Th2类细胞因子表达和释放增多 ,导致Th1/Th2免疫反应失衡。这与支气管哮喘有相似变化 ,提示两者的发病机制存在一定的联系     

人脐血T/NK细胞KIR分子表达的初步探讨

【目的】探讨脐血中T淋巴细胞和自然杀伤 (NK)细胞上杀伤性抑制性受体 (KIR)的表达特性。【方法】采用流式细胞仪检测 2 6份正常分娩新生儿脐血的T/NK细胞表面KIR分子表达 (CD15 8a,CD15 8b和CD94) ,并与正常外周血比较。【结果】脐血中T淋巴细胞和NK细胞均存在KIR分子表达 ;脐血和外周血中T淋巴细胞CD15 8分子表达低于NK细胞 (P<0 0 5 ) ,脐血T淋巴细胞亚群中CD15 8分子表达低于正常外周血 ;CD15 8几乎不表达于CD4 T细胞 ,主要表达于CD8 T细胞 ,且以CD15 8a 为主 ;脐血中NK细胞CD15 8分子表达高于T淋巴细胞 (P <0 0 5 ) ,但明显低于外周血NK细胞KIR表达 (P <0 0 1) ;脐血和外周血CD4 T细胞上CD94 表达无差异 (P >0 0 5 ) ,但脐血CD8 T细胞和NK细胞CD94 表达则明显低于外周血 (P <0 0 1)。【结论】脐血中T淋巴细胞和NK细胞上KIR表达与正常外周血存在明显差异     

鼻咽癌患者脾区低剂量照射对外周血T-淋巴细胞亚群的影响

目的 :探讨鼻咽癌 (NPC)患者脾区接受低剂量照射后外周血T 淋巴细胞亚群的变化。方法 :比较 5 8例常规放疗(NPC 1)前后和 5 0例放疗加脾区低剂量照射 (NPC 2 )前后淋巴细胞亚群的变化。T 淋巴细胞亚群用抗人T 淋巴细胞单克隆抗体致敏红细胞直接法检测。结果 :①NPC患者外周血T 淋巴细胞各亚群均低于正常人。常规放疗后的T 淋巴细胞较放疗前进一步下降 ,CD3 为 (48 31± 3 75 ) % ,CD4 为 (2 0 76± 4 70 ) % ,CD4 /CD8比值 0 95± 0 2 9,低于放疗前 ,(P <0 0 0 1)。但CD8无变化。② 5 0例NPC患者在放疗同时每周 1次脾区低剂量照射 ,放疗后的CD3 为 (5 2 6 2± 4 2 6 ) % ,CD4 为 (2 7 6 2±3 0 6 ) % ,高于放疗前 (P <0 0 0 1) ,CD8(19 14± 3 10 ) %低于放疗前 ;CD4 /CD8比值 1 48± 0 2 7,高于放疗前 (P <0 0 0 1)。结论 :NPC患者放疗期间接受低剂量的脾区放射 ,可刺激外周血T 淋巴细胞的CD3 和CD4 升高 ,抑制CD8。     

黄芪注射液对严重创伤患者的免疫调节

目的　探讨黄芪注射液对严重创伤患者的免疫调节作用。方法　选择 5 0例严重创伤患者 (ISS ,创伤严重度评分≥16 ) ,检测应用黄芪注射液 ( 4 0ml)前后T淋巴细胞亚群血清IL 2及可溶性白介素 2受体 (SIL 2R)。结果　严重创伤患者伤后IL 2、CD4 +和CD4 +/CD8+减低 ,而SIL 2R和CD8+升高 ,黄芪治疗组在伤后 14d血中IL 2、T淋巴细胞CD4 +亚群、CD4 +/CD8+降低及SIL 2R、CD8+升高程度均低于治疗前 ,P <0 .0 5。结论　严重创伤患者伤后细胞免疫功能明显抑制 ,应用黄芪注射液可以增加机体免疫功能     

清开灵注射液对小鼠TB细胞增殖与功能的影响

目的：研究清开灵注射液在体内对正常小鼠胸腺及脾脏指数,迟发型过敏反应（DTH）及T、B细胞活化增殖的影响,探讨其免疫调节作用及机制。方法：将小鼠随机分为正常对照组、DTH对照组、清开灵注射液低、中、高三个剂量组及阳性药物组。各组小鼠给予不同浓度的清开灵注射液,阳性药物或生理盐水腹腔注射后,对各组小鼠胸腺及脾脏指数,DTH反应强度以及T、B细胞增殖活化能力进行比较。结果：清开灵注射液大、中两个剂量组的小鼠胸腺指数明显低于正常对照组,存在极显著性差异（P〈0.01）,而清开灵注射液对小鼠脾脏指数无明显影响（P〉0.05）;三个剂量的清开灵注射液均能明显抑制DTH反应,与DTH组相比,差异显著（P〈0.05）;清开灵注射液三个剂量组均可明显降低正常小鼠由ConA刺激的T细胞非特异性增殖反应,其中以大剂量组作用最为明显,和正常组相比,差异极显著（P〈0.001）。而对由LPS刺激的B细胞非特异性增殖反应,则无显著性影响（P〉0.05）。结论：清开灵注射液体内可有效抑制T细胞的活化增殖及功能从而调节机体的免疫反应。 更多还原     

新生儿窒息细胞及体液免疫功能的探讨

为探讨新生儿窒息与免疫的关系。我们于１９９５年５月－１９９６年７月，对２５例窒息新生儿测定了外周血Ｔ淋巴亚群，１５例测定了血浆免疫球蛋白及补体（Ｃ３）的变化。结果新生儿窒息后ＣＤ４细胞减少、ＣＤ８细胞增加，ＣＤ４／ＣＤ８７比值降低，而且重度窒息，患儿ＣＤ３细胞亦明显减少；血浆ＩｇＭ和Ｃ３则明显。提示窒息缺氧可导致新生儿免疫功能下降。复苏后上述指标可恢复正常。并地其发生机理及临床意义进行了讨论。     

腹泻型肠易激综合征患者血中CD3+,CD4+,CD8+T淋巴细胞变化的观察

目的探讨免疫因素与腹泻型肠易激综合征(IBS)的关系.方法用APAAP法检测32例IBS患者和30例健康对照者的外周血T淋巴细胞亚群,并对二者进行比较观察.结果IBS患者外周血CD3值与健康对照组无差别(P＞0.05),CD4值明显低于对照组(P＜0.05),CD8值明显高于对照组(P＜0.05),CD4/CD8比值下降(P＜0.05).结论IBS的腹泻型可能与免疫改变有关.     

口服云芝多糖对小鼠免疫器官及血液CD4~+和CD8~+ T细胞的影响

目的探讨口服云芝多糖(CVPS)对小鼠免疫功能的影响。方法将48只小鼠随机分为T1、T2、T3组和对照组,每组12只。T1、T2、T3组分别口服不同剂量CVPS(125、250、500mg·kg-1·d-1),每日1次,连续28d;对照组给予等体积双蒸馏水。分别于7、14、21、28天取各组小鼠胸腺、脾脏测质量及采用流式细胞术测血液中CD4+、CD8+T细胞。结果 T1、T2和T3组胸腺指数高于对照组(P<0.05,P<0.05,P<0.01),T3组胸腺指数高于T1和T2组(P<0.05,P<0.01);T2组脾脏指数高于对照组(P<0.05);T2和T3组CD4+、CD8+T细胞均高于对照组(P<0.05)。T1组21d胸腺指数高于对照组及7d(P<0.05);T2组21d胸腺指数和脾脏指数高于7d(P<0.05);T2和T3组21d胸腺指数和脾脏指数高于对照组(P<0.05);T3组21d胸腺指数和脾脏指数高于14d(P<0.05)。T2和T3组21dCD4+T细胞高于对照组(P<0.05),T2组21dCD4+T细胞高于7d(P<0.05);T2和T3组21d血液CD8+T细胞高于对照组及7d(P<0.05)。结论口服CVPS可增强小鼠免疫功能,为临床用药提供参考及理论依据。     

肾炎3号方对离体肾小球培养系膜细胞增殖及IL-1水平的影响

用不同药物喂家兔后取血清加入系膜细胞培养液中观察其增殖及产生IL 1的水平。结果 :肾炎 3号方可显著抑制正常及病理状态下肾小球系膜细胞增殖及其产生IL 1的水平 ,且抑制IL 1分泌活性强于雷公藤 (P <0 0 5)。提示肾炎 3号方可抑制肾小球系膜细胞增殖及其产生IL 1水平 ,打破以系膜细胞为中心的调节网络 ,对以系膜增生为主的慢性肾炎有很好的治疗作用     

系统性红斑狼疮外周血淋巴细胞上bcl-2抗原的表达及与疾病活动的相关性

目的　研究系统性红斑狼疮 (SLE)外周血淋巴细胞上bcl-2抗原的表达及与疾病活动的相关性。方法　通过流式细胞仪 ,采用微量全血直接双标记免疫荧光染色方法 ,对 60例活动期SLE、3 0例类风湿性关节炎 (RA)及 3 0例正常人外周血CD3 + ,CD4+ ,CD8+ 淋巴细胞亚群上bcl-2抗原进行检测。结果　活动期SLE患者外周血CD3 + ,CD4+ ,CD8+ 淋巴细胞亚群上bcl-2抗原的表达较RA组和正常人降低 (P <0 0 0 1) ,bcl-2抗原的表达与SLE的活动性呈负相关 (r =-0 73 2 ,P <0 0 0 1) ;SLE患者中有 3 6例抗dsDNA抗体阳性 ,抗dsDNA抗体 ( +)患者组T淋巴细胞上bcl -2抗原的表达较抗dsDNA抗体 ( -)组更低 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论　SLE患者T淋巴细胞表面bcl -2抗原表达降低 ,导致淋巴细胞凋亡异常 ,刺激机体产生抗dsDNA等多种自身抗体 ,是SLE免疫功能紊乱的原因之一。     

丹参在体外对血小板活化功能和PLT、MPV的影响

目的　探讨丹参在体外对血小板活化功能和血小板数 (plateletcount,PLT)、血小板平均体积 (meanplateletvolume ,MPV)的影响。方法　用流式细胞仪三色分析测定血小板表面激活标记物纤维蛋白原受体 (FIB R)和P 选择素(CD62 P)的表达 ;用CD170 0型血细胞分析仪测定PLT和MPV。结果　测定组的FIB R和CD62 P表达水平与PLT和MPV的值同对照组比较P >0 0 5 ,没有显著性差异。激活组的FIB R和CD62 P表达水平与PLT和MPV的值同对照组比较 ,P <0 0 5 ,有显著性差异。结论　丹参有保护血小板FIB R和CD62 P被活化 ,阻止血小板聚集 ,在血栓性疾病的防治中有积极作用。     

肉苁蓉总苷对~(60)Coγ射线损伤小鼠免疫功能的防护作用

目的　研究肉苁蓉总苷 (GCs)对 6 0 Co损伤小鼠免疫功能及 30 d存活率的影响。方法　小鼠在不同剂量6 0 Coγ射线照射前后 ,均服以 GCs,观察辐射及 GCs对其免疫功能的改变。结果　 6 0 Co照射剂量为 2 ,4及 7Gy时 ,可造成小鼠体液免疫、细胞免疫功能和非特异性免疫功能及 30 d存活率下降 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;GCs(31.2 5 ,6 2 .5 ,12 5 m g/ kg)组可促进上述各指标的恢复 ,对 6 0 Co损伤小鼠的抗体产生、外周血 T淋巴细胞数目、迟发型超敏反应、腹腔巨噬细胞的吞噬功能均有明显保护作用 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;且能提高受照小鼠的脾指数、胸腺指数及 30 d存活率 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论　 GCs对辐射损伤小鼠的免疫功能具有较强防护作用     

玉津药酒治疗类风湿性关节炎的临床观察

笔者应用复方玉津药酒对120例类风湿性关节炎(RA)患者进行了临床治疗效果观察.结果表明,近期控制为54.2%,显效为29.2%,有效为13.3%,无效为3.3%;经免疫学检查,玉津药酒可促使CD_8细胞增高,改善CD_4/CD_8比值,抑制T淋巴细胞增殖,降低白细胞介素-2(IL-2)活性,从而抑制机体免疫活性细胞对关节、关节软骨的破坏作用.     

小鼠骨髓干细胞体外诱导成熟的树突状细胞对T细胞增殖的影响

目的：研究小鼠骨髓干细胞体外诱导分化的树突状细胞对T细胞增殖的影响,为进一步研究树突状细胞的功能及临床肿瘤的治疗提供有效的实验方法。 方法：应用IL-4和GM-CSF培养小鼠骨髓细胞5~7 d,光镜下观察细胞形态学变化;培养至第5~6天,加入黑色素瘤（B16）冻融抗原继续培养1~2 d,流式细胞仪检测细胞表面分子CD83、CD86,并与同种异体T细胞混合培养72 h,终止培养前16 h加入³H-TdR（18.5 kBq/孔）,γ-液体闪烁仪测定cpm值。 结果：用IL-4和GM-CSF培养3 d可见细胞形态发生改变,细胞形状不规则,培养5~6 d时,有刺状突起、拉长,为典型树突状细胞形态学特征;抗原装载后流式细胞仪检测CD83、CD86表达,IL-4+GM-CSF+TNF-α组（61.68%、71.25%）及IL-4+GM-CSF+冻融抗原组（63.11%、76.88%）明显高于对照组（2.41%、3.88%）及单纯IL-4+GM-CSF培养组（21.86%、28.69%）（P<0.001）,IL-4+GM-CSF+TNF-α组与IL-4+GM-CSF+冻融抗原组比较,CD83和CD86表达差异无显著性;液闪仪检测结果显示,IL-4+GM-CSF+冻融抗原组刺激T细胞增殖的能力明显强于其他组,且差异具有显著性（P<0.001, P<0.05）。 结论：小鼠骨髓细胞体外培养成功地诱导扩增出足量树突状细胞,经肿瘤抗原刺激后绝大部分成熟,并能够刺激同种异体T细胞大量增殖,参与免疫应答。