广西巴马小型猪和贵州小型香猪的DNA指纹分析

目的　应用DNA指纹分析的方法研究广西巴马小型猪和贵州小型猪的遗传背景。方法　采用ECL核酸直接标记和检测系统 ,以HRP标记JL 0 2多位点小卫星探针 ,对广西巴马小型猪和贵州小型猪基因组DNA的HinfⅠ或HaeⅢ酶切DNA片段进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图。结果　广西巴马小型猪大于 2kb的HinfⅠ和HaeⅢ酶切DNA指纹图带数为 11 7和 2 4 5 ;贵州小型猪大于 2kb的HinfⅠ和HaeⅢ酶切DNA指纹图带数则为 15 8和 17 6。另外 ,广西巴马小型猪HinfⅠ和HaeⅢ酶切产生的不同个体DNA指纹的相似系数分别为 0 5 4± 0 0 7和 0 5 5± 0 0 8;而贵州小型猪则分别为 0 5 3± 0 0 4和 0 5 3± 0 0 7。结论　该探针适用于这两种猪的DNA指纹分析 ,不同酶切产生的DNA指纹图带数不同 ,但不同个体间相似系数的分析结果一致。同时说明这两种猪具有相当程度的种质均质性 ,符合封闭群动物的要求     

广西巴马小型猪浅低温心脏不停跳体外循环模型的麻醉管理

目的 探讨建立广西巴马小型猪浅低温心脏不停跳体外循环模型的麻醉管理方法.方法 广西巴马小型猪13只,10只用于实验,3只用于取血预充.基础麻醉采用阿托品、氯胺酮和咪唑安定肌肉注射,丁卡因喷喉表面麻醉后气管插管,麻醉维持采用丙泊酚、芬太尼、维库溴胺持续静注和间断吸入异氟醚.采用分级评估方法 对基础麻醉、全麻维持的效果进行评估.鼻咽温32℃～34℃体外循环,维持心率50～80次/min,窦性节律空跳.结果 成功建立浅低温心脏不停跳体外循环模型9只,失败1只(在气管插管时误插入食道缺氧死亡).基础麻醉Ⅰ级7只(70.0%),Ⅱ级1只(10.0%),Ⅲ级1只(10.0%).全麻维持Ⅰ级8只(80.0%),Ⅱ级1只(10.0%).结论 选择合适的麻醉方法 和效果评估方法,是广西巴马小型猪浅低温心脏不停跳体外循环模型建立的关键.     

广西巴马小型猪的选育研究

广西大学王爱德等从1 987年至今历经1 7年,以广西巴马香猪作为原始材料,采用闭锁纯繁近交方式,选育出1 6世代适于实验用的、优异小型猪封闭群品系———广西巴马小型猪。1 987年底笔者从广西巴马县,将巴马香猪2头公、1 4头母作为零世代、原始基础群,引入原广西农学院牧试站内,进行“实验用小型猪的选育”的有关研究(国家自然科学基金和广西壮族自治区科委资助项目)。1 994年经项目鉴定专家组同意,将选育的实验用小型猪品系定名为“广西巴马小型猪”(GuangxiBA MAMini Pig) ,简称“巴马小型猪”。选育目标:体型尽量小;两头乌毛色整齐或白…     

广西巴马小型猪无气管插管全身麻醉模型建立的初探

目的建立广西巴马小型猪无气管插管的全身麻醉动物模型。方法选用8头健康广西巴马小型猪,先耳后肌肉注射地西泮10mg和氯胺酮0．1g行基础麻醉,建立静脉通道后使用氯胺酮和地西泮间断静脉注射全身麻醉。行泌尿系统手术时根据心率、睫毛反射和疼痛反应调整麻醉深度。结果该方法麻醉效果理想,试验动物无一头死亡且恢复良好。结论使用氯胺酮和地西泮对腹部手术的广西巴马小型猪进行问断静脉麻醉的方法效果理想,且安全、简易,值得借鉴。     

巴马小型猪染色体核型

采用外周血淋巴细胞培养技术，对巴马小型猪的染色体作了核型分析。结果表明：巴马小型猪正常的二倍体细胞染色体数２ｎ＝３８，其性染色体为ＸＹ（♂）、ＸＸ（♀）。根据染色体形态、相对长度、臂比、着丝点指数，参照第一届国际家畜分带核型标准化会议（１９７６）制定的猪的染色体核型标准，将１８对常染色体分为Ａ、Ｂ、ｃ、Ｄ四个形态组，核型呈１０ｓｍ＋４ｓｔ＋１０ｍ＋１２ｔ。Ｘ染色体为中着丝点染色体，大小介于第８对和第９对染色体之间，Ｙ染色体为最小的中着丝点染色体。     

巴马小型猪的选育

5世代选育结果，0-4世代群体有效含量6.93,13.44,11.42,7.45,10.76,2-4世代群体近交系数9.18%,22.50%,35.22%，4世代3-7月龄体重9.60,12.47,16.40,20.26,35.54kg,4世代初产仔数8.64头，初生重0.55kg，3世代二产10.60头，0.56kg。巴马小型猪近交程度较高，毛色理想并趋于整齐，矮小体型及多产等，主要特性遗传性稳定，已达选育目标。     

巴马小型猪在医学研究中的应用进展

广西巴马小型猪作为国内小型猪主要品种之一,具有遗传性稳定、多产、体重较小、体表多覆白毛等特征,组织器官及生化指标与人类相似,已越来越广泛地应用于医学研究领域：猪的心脏解剖与生理特点与人类高度相似,已被广泛应用于心血管系统研究中,在我国,巴马小型猪被用来构建心肌缺血、卵圆孔未闭等心血管疾病模型;猪具有杂食性及与人相似的脂质代谢,可用于研究内分泌疾病,巴马小型猪已用于糖尿病动物模型建立及其遗传易感性、并发症的防治研究等;巴马小型猪的消化系统与人类相似,利用此特点已建立阻塞性慢性胰腺炎、结肠穿孔、胆肠吻合等消化系统疾病模型;巴马小型猪除头、尾外,体表覆以白毛,这一特点使其成为研究皮肤创伤、烧伤修复等的理想动物;小型猪的牙齿解剖结构与人类相似,口裂大,可作为口腔医学研究中的理想动物,巴马小型猪已用来建立牙髓坏死模型及对上颌扩弓方式的研究;类似人的解剖、生理、病理使其成为较为适合的异种移植供体。在中医药研究方面,已用巴马小型猪分别建立了肝脏、脾脏、股动、静脉出血及头颈恶性肿瘤放疗后的腮腺损伤动物模型以研究中药制剂的疗效及机制。     

广西巴马小型猪2型糖尿病模型骨骼肌糖代谢及能量代谢相关基因的表达差异

目的 本实验通过比较T2DM猪、非T2DM猪的糖代谢及能量代谢等关键调控基因（PGC-1α、Glut-4、ERRα、NRF-1、TFAM和线粒体基因）,探讨这些基因在T2DM发生中所起到的作用。方法 以广西巴马小型猪T2DM模型建立的发病组和未发病组的背最长肌为实验材料,利用QRT-PCR实时荧光定量的方法对糖代谢及能量代谢相关基因mRNA和线粒体基因的表达情况进行检测。结果 在广西巴马小型猪背最长肌中,T2DM组PGC-1α、Glut-4、ERRα和NRF-1的相对表达量均显著高于非T2DM组,TFAM和线粒体基因的相对表达量则稍低于非T2DM组。结论 在T2DM巴马小型猪骨骼肌中,上调PGC-1α及其下游基因Glut-4、ERRα和NRF-1的表达水平,有利于改善葡萄糖代谢;而线粒体合成不足,致使ATP合成量不够,或引起胰岛素抵抗,进而导致2型糖尿病的发生。     

广西巴马小型猪PGC-1α基因克隆与组织表达分析

目的 克隆广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区（CDS）序列，利用RT-PCR和QRT-PCR方法分析PGC-1α mRNA组织表达情况。方法 本实验以广西巴马小型猪背最长肌cDNA为模版，PCR扩增PGC-1α基因CDS序列，将其连接至pEASY-T5载体，转染细菌、验证和序列测定；通过RT-PCR半定量和QRT-PCR实时荧光定量检测PGC-1α基因在小型猪多个组织中的表达情况。 结果 克隆获得广西巴马小型猪PGC-1α基因CDS序列，全长2391bp，编码796个氨基酸，与参考序列的同源性为99.9%，两处碱基发生同义突变，分别C-A1105和G-A1524；PGC-1α基因在广西巴马小型猪心脏和肾脏中的表达丰度最高，其次是肝脏、皮下脂肪和背最长肌，而在胰腺中未检测到其表达。 结论 成功克隆了广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区序列并进行了多种组织表达分析，为后续研究PGC-1α在小型猪2型糖尿病发生过程中作用途径打下基础。     

洛伐他汀在巴马香猪体内的分布和排泄

目的研究洛伐他汀在巴马香猪体内的分布和排泄特点。方法以抗动脉粥样硬化药物洛伐他汀为模型药,选择健康6月龄雄性巴马香猪为实验对象,经灌胃途径给药(45 mg/kg或2.4 mg/kg),采用RP-HPLC方法测定各组织及体液中的药物浓度,并对其分布和排泄过程进行研究。血浆蛋白结合率通过透析法测定。结果给药后,洛伐他汀快速分布到贲门、胃、小肠、肝、大肠、胰、前列腺、肺、肾、心、肌肉、睾丸、肾上腺、膀胱、脑和脾。以胃、肠、肝组织中药物浓度较高。单次给药4h后,贲门、胃、小肠、肝、心、肾上腺、膀胱药物浓度同给药后1h相比略有下降,其余组织均高于1 h。血浆蛋白结合率为95%以上,同正常人血浆非常一致。96 h尿中累积排泄量为给药量的7.4%,原形药经胆汁及粪排泄量达到80%以上。结论洛伐他汀在巴马香猪体内同人的分布排泄和血浆蛋白结合率相似,均在组织中广泛分布,血浆结合率达到95%以上,主要经胆汁和粪排泄。     

制备广西巴马小型猪无气管插管模型麻醉用药的比较

目的 比较地西泮或咪达唑仑联合氯胺酮对广西巴马小型猪无气管插管模型麻醉效果及安全性.方法 将20头广西巴马小型猪随机分为地西泮组和咪达唑仑组各10头.地西泮组采用地西泮10 mg和氯胺酮0.1 g诱导麻醉,地西泮0.45 mg·kg-1·h-1、氯胺酮4.5 mg·kg-1·h-1静脉输入维持麻醉.咪达唑仑组采用咪达唑...     

小型猪腹壁拉链模型的建立

目的建立小型猪腹壁拉链模型并对其生物学特性进行研究,为教学和科研工作的开展提供便利的研究工具。方法通过外科手术的方法将定制的生物拉链固定于小型猪体表,建立小型猪腹壁拉链模型,观察小型猪的体征和精神状态,利用全自动血液分析仪及尿液分析仪对其血液和尿液生化指标进行动态检测。结果模型建立后7～49 d小型猪的活动、精神状态良好,其生理生化指标表现稳定,与对照相比无显著变化。结论本课题组建立的小型猪腹壁拉链模型建立后7～49 d体征、精神状况良好,生理生化指标稳定,可以推广应用于相关的科研、教学试验。     

超滤法在心肺转流中的应用

作者在20例心肺转流心内直视手术中应用了超滤法,并另用10例作为对照。超滤组超滤时间为24.7±9.6mm(12～49min),滤出液量为1433.5±482.6ml(650～2 350ml)。结果:超滤组与对照组的投入液量无明显差别,超滤组的排除液量明显大于对照组(P<0.01);血液超滤后,血球压积、血浆白蛋白、总蛋白分别提高了33.8％、34.7％和26.0％(P<0.01)。同时,超滤法未引起血液粘度的异常增高,也无其他副作用发现。     

AFLP技术用于巴马小型猪遗传多样性的研究

目的 评价巴马小型猪的遗传多样性。方法 用与接头对应的10条AFLP引物，扩增经PstⅠ酶切且与接头连接的17头巴马小型猪的基因组DNA，用从Internet网上下载的软件RAPD istance package version 1．04对结果进行分析。结果 共获得104个AFLP标记，单引物得到的标记数在3～20个之间，巴马小型猪群体内的相似系数为0．903(0．791～0．982)。其多态性位点的比率为29．8％；总的等位基因数为136个，平均每个位点的等位基因数为1．31个，基因型数为119，平均每个位点的基因型数为1．41。结论 该实验为评价巴马小型猪遗传多样性的多寡提供了相关的参数，准确评价尚待和普通猪对比研究后确定。     

小型猪剖腹产人工哺乳净化

实验选用怀孕中国1号小型猪6头,采用隔离器剖腹产微生物净化方法,生产仔猪51头,因体重过轻、死胎等淘汰7头,成活44头,手术成活率86．3％;30d断乳成活36头,离乳率81．8％。在隔离器内饲喂10周,术后21d、42d、63d分别用硫乙醇酸盐培养基(USP),营养肉汤(NB),萨布罗氏肉汤(sB)检测粪便、饲料、饮水、进排风口、除粪口部厌氧菌、需氧菌、霉菌,结果皆为阴性。对剖腹产前母猪、45d仔猪进行猪巴氏杆菌、丹毒、口蹄疫、猪瘟、猪细小病毒、弓形体6种致病病原体检测,结果阴性,仔猪达到SPF标准。     

体外循环手术血液综合再利用的回顾性研究

目的研究体外循环手术血液综合再利用是否可以减少库血的使用量以及是否造成肝、肾功能损害。方法回顾研究了150例血液综合再利用患者和150例对照患者的输血量、医疗费用以及血常规和肝、肾功能变化。结果血液综合再利用患者输血量比对照组几乎少50%(P<0.01),特别是术前放血的患者;而两组的肾功能均正常,胆红素均较高,但两组间无显著性差异(P>0.05),而血液综合再利用组放血患者的血小板数量较高,具有显著性差异(P<0.05)。结论对于不同患者,采用不同的血液再利用方法,能够大大减少库血的用量,且不造成肝、肾功能的损害,同时可改善患者手术后的凝血状态,减轻患者的医疗负担。     

中国实验用小型猪的培育、开发与应用

本项研究以中国广西、贵州引进的香猪为原始素材,通过扩群繁育,全同胞交配,连续闭锁性继代选育过程,培育了遗传背景清楚、生产性能稳定、生长发育一致的中国实验用小型猪。在此基础上,研究了该猪的生长发育规律、解剖组织学结构、生理生化常值、饲养管理特点、疾病监测、净化与控制以及在比较医学中的应用。研究结果表明:中国实验用小型猪具有体积小、繁殖力强、遗传性能稳定、适应范围广泛、饲养管理方便等特点,其某些组织解剖学结构及生理生化常值与人相似,可自发性或高脂膳食诱发产生动脉粥样硬化症(AS)。其AS病变在分布与性质上与人类高度近似,而且在药物防治实验性AS模型方面反应良好;该猪并易于进行口腔医学实验研究。其牙齿用羟基磷酸钙碘仿合剂盖髓后与人牙病理变化一致。牙齿人工龋病损与牙齿自然龋损、人牙人工龋病理表现亦很一致。该猪还适宜做微粒植皮,麻醉试验等研究;是理想的生物学、比较医学、兽医学研究的实验动物。