应用ERKO小鼠观察雌激素对痛觉的影响及ERs的作用特点

目的:探讨雌激素通过ERs对痛觉的影响?方法:WT?αERKO和βERKO小鼠随机分为去卵巢加17β-E2组(OVX+17β-E2)和去卵巢组(OVX+Oil),甩尾热痛仪和热痛刺激仪测痛,并应用福尔马林致痛模型评价雌激素对痛觉的影响?结果:将WT小鼠卵巢切除后给予外源性雌激素,发现17β-雌二醇(17β-E2)对甩尾痛阈和缩足痛阈没有影响,敲除ERα或ERβ后甩尾痛阈和缩足痛阈也没有变化;17β-E2能够降低福尔马林炎症性痛实验的Ⅱ相反应,但对Ⅰ相反应无影响?进一步应用ERKO小鼠模型观察ERα和ERβ的作用特点发现,较WT小鼠,βERKO雌性小鼠在福尔马林炎症性痛模型Ⅱ相疼痛反应行为的时间减少,而在Ⅰ相反应中没有差别;αERKO小鼠福尔马林炎症性痛实验与WT比较没有明显差异?结论:雌激素可以影响慢性炎性痛,可能与影响急性痛进程无关?ERβ亚型在雌激素调节痛觉传递和调制过程中发挥着重要作用?     

雌激素受体α在胰岛素致动脉粥样硬化中的作用

目的 探讨在胰岛素诱导动脉粥样硬化发生的过程中,雌激素受体α(estrogen receptor α,ER-α)的作用.方法 ①8周龄Apoe/Lepr基因双敲小鼠按随机数字表法分为对照组和实验组(4 IU胰岛素组),每组4只.HE染色及免疫组化观察小鼠血管动脉斑块形成及α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin-α,α-SMA)、ER-α的表达.②用胰岛素及甲基化转移酶抑制剂干预大鼠血管平滑肌细胞,采用RT-PCR及Western blot检测DNA甲基化酶、ER-α的表达,划痕实验及流式细胞仪检测ER-α对血管平滑肌细胞增殖的影响.结果 ①实验组小鼠血管出现动脉斑块,免疫组化结果显示α-SMA、ER-α表达降低(P＜0.05).②与对照组比较,胰岛素处理后血管平滑肌细胞中DNA甲基化酶的mRNA与蛋白表达升高(P＜0.01),而ER-α表达下降(P＜0.01),甲基化酶抑制剂可以消除这种差异,高表达ER-α后,划痕实验及流式细胞仪检测结果显示血管平滑肌细胞增殖减慢(P＜0.05).结论 胰岛素通过促进DNA甲基化酶的表达,诱导ER-α基因甲基化,使ER-α表达下降,最终导致动脉粥样硬化的发生.     

多巴胺D2受体缺失加剧MPTP诱导的小鼠帕金森病样改变

目的 探讨多巴胺D2受体与帕金森病的运动行为学及发病间的关系。方法 C57BL/6野生型及D2受体基因敲除小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备帕金森病模型,爬杆实验、游泳实验观察比较两组小鼠行为学的改变,免疫荧光染色法观察小鼠中脑黑质致密部TH阳性神经元数目的变化。结果 MPTP注射后,小鼠爬杆实验时间延长,游泳实验评分降低,中脑黑质致密部TH阳性神经元数目下降(P<0.05或P<0.01);且D2受体基因敲除小鼠的行为学改变及TH神经元数目的减少较野生型小鼠更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论 多巴胺D2受体在小鼠肢体运动协调方面起着重要作用,D2受体缺失加剧了MPTP诱导的小鼠帕金森病样改变。     

黑质自身抗体在MPTP致小鼠帕金森病发病中的作用

目的探讨MPTP致小鼠帕金森病PD发病中自身抗体是否存在及可能的作用。方法使用MPTP亚急性模型建立PD模型。采集建模后小鼠血清与自身黑质蛋白质相互作用,通过免疫组织化学、酶链免疫吸附测定（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blot）等方法探讨该PD模型有无自身抗体的存在,并初步推断自身抗体是否参与PD发病过程。结果 MPTP致PD模型中,血清和自身黑质的结合性增加。结论 MPTP致PD模型中,血清中可能存在针对黑质的自身抗体,参与了PD的发病过程。     

雌激素受体β基因多态性与帕金森病的相关性

目的 探讨中国汉族人群雌激素受体(ER)β基因Alu Ⅰ、Rsa Ⅰ酶切多态性与帕金森病(PD)和帕金森病痴呆(PDD)的相关性.方法 采用病例-对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性.方法,对115例PD患者(包括26例PDD)和116名健康对照进行ERl3基因多态性分析,经卡方检验,分析各基因型、等位基因频率与PD、PDD患病的相关性.结果 (1)ERl3基因Alu Ⅰ、Rsa Ⅰ的酶切多态性在PD组和对照组问差异无统计学意义(均P>0.05).(2)PDD组与对照组相比,Erβ基因的Alu Ⅰ、Rsa Ⅰ的酶切多态性差异也无统计学意义(均P>0.05).结论 Erβ基因AluⅠ、Rsa Ⅰ的酶切多态性不影响PD和PDD的患病风险.     

二氢麦角毒对MPTP帕金森病模型小鼠的作用

目的：观察二氢麦角毒对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）帕金森病模型小鼠行为学、脑超氧化物歧化酶（SOD）活性及纹状体多巴胺及其代谢产物含量的影响。方法：小鼠腹腔注射MPTP30mg／kg，2次／d，连续5d致帕金森模型，用YSD-4G药理生理实验多用仪测定小鼠自发活动记数，用高效液相色谱（HPLC）法测定纹状体内多巴胺及其代谢产物含量，酶法测脑SOD活性。结果：二氢麦角毒能明显增加MPTP帕金森病模型小鼠的自发活动、脑SOD活性和纹状体内多巴胺及其代谢产物含量。结论：二氢麦角毒能改善MPTP帕金森病模型小鼠的自发活动减少的症状，其机制可能与增加脑SOD活性及纹状体内多巴胺含量有关。     

维生素D受体在四氧嘧啶诱导小鼠糖尿病发病过程中的作用

目的 研究在四氧嘧啶诱导小鼠糖尿病发病过程中维生素D受体的作用。方法 采用维生素D受体基因敲除小鼠研究维生素D受体在小鼠糖尿病发病过程中的作用。四氧嘧啶尾静脉注射诱导小鼠糖尿病，PCR法鉴定基因型，自动生化分析仪测定血钙，血糖仪法测定血糖，试纸法尿糖定性。结果 维生素D受体基因敲除小鼠和野生型小鼠血钙水平无显著差别；维生素D受体敲除小鼠血糖和糖尿病发病率高于同窝野生型（P〈0．05）。结论 维生素D受体基因敲除增加了小鼠糖尿病的发病率，但其详细机理需要进一步研究。     

雌激素受体α与β的比较

雌激素通过核受体调节女性生殖系统功能,这种核受体是通过配体结合激活的一类受体超家族,此外类固醇激素、甲状腺素、肾上腺素、前列腺素和维生素D等结合的受体也属于这一类。Jesen等在1962年发现了介导雌激素作用的雌激素受体(ER)。1980年代起分子生物学飞速发展,人们已克隆和测序ER的cDNA。几十年来人们一直以为ER是单一类型,直到1996年,多个各自独立的实验室陆续报道了大鼠、小鼠和人均存在第二种ER受体亚型,命名为ERβ[1],经典的雌激素受体则命名为ERα。本文就两种受体亚型在分子结构、组织分布、受体结合特性等方面的差异进行…     

雌激素受体β对雌激素受体α拮抗作用的研究进展

目前已经发现的雌激素核受体包括两种亚型:ERα和ERβ.二者在不同的细胞类型中,可以对不同的基因发挥不同的调控作用,进而引发多种多样的生物学效应,尤其是在许多肿瘤的发生过程中扮演着重要的角色.在二者同时表达时,往往表现ERβ对ERα转录效应的拮抗作用,研究雌激素受体之间的作用机制,对阐明相关系统肿瘤的发生机制,继而对肿瘤的早期诊断、治疗和预后有着重要意义.本文就目前对雌激素受体β对雌激素受体α拮抗作用的研究做一综述.     

ERα基因敲除小鼠的繁育及子代小鼠基因型的鉴定

目的 探讨雌激素受体α(ERα)基因敲除小鼠的优化繁育方法及ERα基因敲除小鼠子代鼠的鉴定方法,建立ERα基因敲除小鼠模型,为进一步研究ERα蛋白的功能奠定基础.方法 用4种不同的交配方式观察子代鼠的各表型比率及雌、雄性ERα基因突变纯合子小鼠的繁殖能力;从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,用PCR方法扩增ERα基因片段,琼脂糖凝胶电泳后观察结果.HE染色观察雌、雄性ERα<''-/->小鼠生殖系统表型变化.结果 WT、ERα<''+/->、ERα<''-/->各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌、雄性ERα<''-/->小鼠无繁殖能力.与WT比较,雄性ERα<''-/->小鼠睾丸脏器系数降低,睾丸病理变化表现为生精小管管腔膨胀,生精细胞层变薄,且排列不规则;雌性ERα<''-/->小鼠子宫脏器系数降低,子宫和卵巢病变明显,表现为:子宫浆膜、肌层、内膜层细胞排列不规则,卵巢有囊性病变、充血,无黄体.结论 雌、雄性ERα<''+/->小鼠交配是繁育ERα<''-/->小鼠的较好方法;实验所用PCR方法能够精确鉴定ERα<''-/->小鼠,ERα<''-/->小鼠的获得为ERα蛋白功能的实验研究提供了较理想的动物模型.     

烟碱对帕金森病模型小鼠多巴胺释放的影响及机制探讨

目的：研究烟碱对帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型小鼠不同脑区多巴胺（dopamine,DA）的影响及其机制。方法:应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP）制备PD小鼠模型,应用爬杆实验检测小鼠运动功能,应用酪氨酸羟化酶免疫组化观察小鼠中脑黑质致密部（substantia nigra pars compacta, SNpc）多巴胺能神经元数目,应用高效液相色谱法检测小鼠不同脑区（纹状体、海马、皮质）DA的含量,应用蛋白质免疫印迹检测小鼠纹状体多巴胺转运体（dopamine transporter,DAT）的变化。结果：①烟碱可显著改善MPTP导致的野生型小鼠运动功能障碍;②烟碱可显著改善MPTP诱导的野生型小鼠中脑SNpc多巴胺能神经元的丢失;③烟碱可显著减轻MPTP所致的野生型小鼠纹状体DA含量的减少,烟碱对α7-烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs）敲除型（knockout,KO）小鼠MPTP模型中纹状体DA含量的减少无明显恢复作用,烟碱对野生型小鼠或α7-nAChRs KO小鼠MPTP模型中海马和皮质中的DA含量无明显影响。④烟碱可显著增加野生型小鼠MPTP模型中纹状体DAT的含量,烟碱对α7-nAChRs KO小鼠MPTP模型中的纹状体DAT的减少无逆转作用。结论：烟碱可以激活α7-nAChRs抑制PD模型小鼠SNpc区多巴胺能神经元的死亡,提高纹状体DAT水平;促进纹状体DA含量增加,从而在PD模型小鼠中发挥神经保护作用。     

多氯联苯对小鼠雌激素受体mRNA表达的影响

目的 观察不同剂量多氯联苯(PCBs)(Aroclor1254)对小鼠体内雌激素受体α、β(ERα、β)mRNA表达的影响.方法 分别用20、100、500 μg·kg-1·d-13种不同浓度的PCBs对小鼠进行腹腔注射,连续注射30 d后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠子宫中ERα、β mRNA的表达情况.结果 PCBs对小鼠ERα、β mRNA的表达均有抑制作用,且呈剂量依赖性.结论 ER基因表达的改变可能是PCBs实现内分泌干扰作用的机制之一.     

卵巢切除对小鼠基底前脑内雌激素β受体表达的影响

目的 研究卵巢雌激素对小鼠基底前脑内雌激素β受体（ER－β）表达的影响，探讨雌激素作用于基底前脑的机制。方法 以切除卵巢的小鼠为模型，采用硫酸镍铵增强显色的免疫组化SP法检测基底前脑内ER－β表达的变化。结果 卵巢切除使小鼠基底前脑内ER－β表达降低，第3天到最低水平，然后逐渐恢复，第20天后基本上达到这水平。结论 卵巢雌激素使小鼠基底前脑内ER－β表达表达呈时间依赖性改变，并可能通过ER－β这一新的受体途径发挥对该部位神经结构与功能的调控。     

雌激素受体、雌激素受体mRNA在胃癌组织中的表达及其意义

目的：研究雌激素受体（ER）、雌激素受体mRNA在胃癌中的表达，以探讨其与胃癌生物学特性的相关性。方法：采用免疫组化和原位杂交技术，观察ER、ERmRNA在胃癌组织的表达。结果：①ER阳性率男性为33.33%，女性为46.67%；ERmRNA阳性率男性为73.33%，女性为86.67%；②ER阳性以低分化腺癌、印戒细胞癌多见；ERmRNA阳性在管状腺癌、低分化腺癌、印戒细胞癌均可见；③ER阳性与局部淋巴结转移、生长方式有关；④ERmRNA较ER有更高的阳性表达。结论：ERmRNA表达与胃癌生物学特性密切相关，可用于胃癌颈后判定，为胃癌内分泌治疗提供有力的证据。     

LPS联合MPTP诱导的小鼠慢性帕金森病模型的评价

[摘要] 目的：建立脂多糖(LPS)联合MPTP诱导的慢性小鼠帕金森病模型,探讨其行为学和黒质多巴胺能神经元细胞的变化情况。方法：将20只C57BL/6小鼠随机分为模型组和对照组,模型组腹腔注射LPS (0.25mg/kg) 一次,连续三天,最后一次注射LPS 4小时后,腹腔注射MPTP (25 mg/kg)一次,连续两天,对照组腹腔注射相同量的生理盐水。8周后用步态分析和转棒实验评价小鼠的行为学能力,免疫组化法观察黑质酪氨酸羟化酶 (TH) 阳性细胞变化情况。结果：模型组小鼠行为学变化较对照组有显著性差异(P<0.05),模型组小鼠中脑黒质区显示出严重的神经元细胞损伤。结论：LPS联合MPTP腹腔注射可成功诱导出慢性小鼠帕金森病模型,提示该模型可用于帕金森病的发病机制及药物治疗效果等相关研究。     

脂多糖联合MPTP诱导的小鼠慢性帕金森病模型的评价

目的 建立脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)联合1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, MPTP)诱导的慢性小鼠帕金森病模型,探讨其行为学和黒质多巴胺能神经元细胞的变化情况。方法 将20只C57BL/6小鼠随机分为模型组和对照组,模型组每日腹腔注射LPS(0.25 mg/kg) 一次,连续3 d,最后一次注射LPS 4 h后,每日腹腔注射MPTP(25 mg/kg)一次,连续2 d,对照组腹腔注射相同量的生理盐水。8周后用步态分析和转棒实验评价小鼠的行为学能力,免疫组化法观察黑质酪氨酸羟化酶(TH) 阳性细胞变化情况。结果 模型组小鼠行为学变化较对照组差异有显著性(P<0.05),模型组小鼠中脑黒质区显示出严重的神经元细胞损伤。结论 LPS联合MPTP腹腔注射可成功诱导出慢性小鼠帕金森病模型,提示该模型可用于帕金森病的发病机制及药物治疗效果等相关研究。     

雌激素受体相关受体α与雌激素受体在子宫内膜癌组织中的表达

目的雌激素受体（estrogen receptor,ER）α、β在子宫内膜癌的发生发展中起着非常重要的作用。有研究提示,雌激素受体相关受体α（estrogen receptor—related receptor α,ERRα）与ER竞争配体也参与子宫内膜癌的发生,但详细的机制尚不明了。文中研究的目的是检测ERRα和ERα、ERβ在子宫内膜癌中mRNA的表达水平,并探讨其关系。方法采用realtime TaqMan PCR定量的方法,检测37例子宫内膜癌组织（内膜癌组）、25例癌旁组织（癌旁组）以及20例正常子宫内膜（对照组）中ERRα和ER亚型mRNA的表达量。结果3组患者中所有受体均有表达,在内膜癌组中,ERα和ERβ表达水平较对照组明显下降（P〈0．05）,ERRα的表达水平明显升高（P〈0．05）。癌旁组患者的所有指标与癌组织和正常内膜组织相比均显著升高（P〈0．05）。结论子宫内膜癌组织中ERα、ERβ低表达,而ERRα相对高表达,癌旁组织中3种受体均为高表达,说明癌组织中部分ERα、ERβ失活,ERRa在内膜细胞向癌细胞进展过程中起着非常重要的调节作用。     

雌激素及其受体在中枢神经系统的作用

近年来,随着雌激素(E)受体(ER)亚型(ERα和ERβ)的发现、作用机制的研究、E及其ER阻断剂的临床应用,E及其ER对中枢神经系统的作用愈来愈受到人们的重视.现就此进行简要综述.     

雌激素受体β基因敲除小鼠子宫内膜异位症模型的建立

目的 建立雌激素受体β基因敲除小鼠子宫内膜异位症模型,为进一步研究雌激素受体β基因在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用提供平台.方法 用外科手术方法对16只β基因敲除小鼠进行自体子宫移植,术后14 d、21 d取病灶组织进行光镜观察分析.结果 建模成功率达95.8%,可形成明显囊肿,内含囊液,囊肿内壁有子宫内膜上皮细胞生长.结论 应用本方法可建立稳定的子宫内膜异位症转基因小鼠模型,便于研究雌激素受体β亚型及其相关基因、蛋白在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用机制.