藤梨根提取物对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及Bcl-2的影响

目的研究藤梨根提取物对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其部分作用机理。方法采用不同浓度的藤梨根提取物作用于人胃癌SGC-7901细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组织化学方法检测Bcl-2基因表达。结果藤梨根作用于SGC-7901,在(8～32)mg/mL时促进该细胞呈不同程度的凋亡;藤梨根提取物大、中、小剂量组对人胃癌SGC-7901细胞Bcl-2蛋白表达阳性灰度值分别为103.41±1.01,104.05±1.239,0.52±1.09。结论藤梨根提取物对SGC-7901有明显促凋亡作用;藤梨根提取物抑制SGC-7901 Bcl-2蛋白水平的表达有可能是促进SGC-7901凋亡的作用机制。     

E2F-1过表达对胃癌细胞生物学行为影响的分子机理初步研究

目的 利用基因表达谱芯片技术筛选过表达E2F-1的胃癌MGC-803细胞与对照组间的差异表达基因,探讨E2F-1对胃癌细胞生物学行为影响的分子机理。方法 分别抽取转染E2F-1的胃癌MGC-803细胞和未转染E2F-1的胃癌MGC-803细胞的总RNA。纯化mRNA,逆转录合成cDNA标记后,与22K人类基因表达谱芯片进行杂交,扫描后筛选出表达差异的基因。随机选取3个差异表达基因,分别设计引物,用半定量RT-PCR检测验证。 结果 在21522条基因中,两组细胞间的差异表达基因有740条,其中上调基因405条,下调基因335条。差异基因中有73条功能信息不明。随机选取的3个差异表达基因的RT-PCR结果与基因芯片扫描结果相似,具有相同的方向性。结论 胃癌的发生发展是多基因相互作用、多种信号通路相互调节的结果。生物信息学分析显示, E2F-1基因可以通过TP53信号传导途径影响胃癌MGC-803细胞生物学行为的改变,还与众多基因的差异性表达密切相关。     

CDX2基因过表达促进胃癌细胞凋亡的分子机理研究

目的:利用基因表达谱芯片技术筛选CDX2高表达的胃癌MGC803/CDX2细胞和对照组MGC803/EV细胞中差异表达的基因,探讨CDX2高表达促进胃癌细胞凋亡的分子机理.方法:Trizol一步法提取高表达CDX2的MGC803/CDX2细胞和对照组MGC803/EV细胞的总RNA,并纯化mRNA,反转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)标记的cDNA探针,与22 k基因表达谱芯片进行杂交;采用LuxScan 3.0图像分析软件对芯片图像进行分析,把图像信号转化为数字信号,最后以差异为>2倍或<0.5倍的标准来确定差异表达基因.结果:在23 238个基因中筛选出与细胞凋亡有关的差异性表达基因15条,其中8条基因表达上调和7条基因表达下调.结论:CDX2基因过表达促进胃癌细胞凋亡可能与这15条差异表达基因关系密切.     

新型去甲万古霉素-纤维蛋白胶磷酸钙人工骨研究

目的 利用基因表达谱芯片技术筛选过表达Cdx2的胃癌MGC-803细胞与对照组间差异表达的免疫相关基因,探讨Cdx2对胃癌细胞免疫相关基因表达的影响。 方法 分别抽取Cdx2转染组和对照组的细胞总RNA,分离纯化mRNA并逆转录合成荧光分子(Cy3/ Cy5)标记cDNA 探针,与含有21522条人类22k基因表达谱芯片进行杂交。采用LuxScan 10K/A双通道激光扫描仪扫描芯片上两种信号,应用LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行处理和分析。 结果 在21522条基因中,胃癌细胞间差异性表达基因为有551条,其中302条上调,249条下调。其中与免疫相关的基因共有7个,分别为HLA-E、RRAS、ULBP2、HLA-G、HLA-C、CTSB、CTSL,均表达上调。结论 Cdx2过表达上调了胃癌MGC803细胞免疫相关基因的表达,这可能与胃癌细胞生物学行为的改变有关。 【关键词】 胃癌;Cdx2;免疫相关基因;差异表达基因     

Cdx2基因过表达对胃癌细胞免疫相关基因表达的影响

目的 利用基因表达谱芯片技术筛选过表达Cdx2的胃癌MGC-803细胞与对照组间差异表达的免疫相关基因. 探讨Cdx2对胃癌细胞免疫相关基因表达的影响。 方法 分别抽取Cdx2转染组和对照组的细胞总RNA,分离纯化mRNA并逆转录合成荧光分子(Cy3/ Cy5)标记cDNA 探针,与含有21522条人类22k基因表达谱芯片进行杂交。采用LuxScan 10K/A双通道激光扫描仪扫描芯片上两种信号,应用LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行处理和分析。 结果 在21522条基因中,胃癌细胞间差异性表达基因为有551条,其中302条上调,249条下调。其中与免疫相关的基因共有7个,分别为HLA-E、RRAS、ULBP2、HLA-G、HLA-C、CTSB、CTSL,均表达上调。结论 Cdx2过表达上调了胃癌MGC803细胞免疫相关基因的表达,这可能与胃癌细胞生物学行为的改变有关。     

应用DNA微阵列技术研究三氧化二砷对RPMI 8226细胞的作用

目的:应用cDNA芯片技术研究三氧化二砷对多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226的作用。方法:采用包含4096个人类基因的cDNA表达谱芯片,检测三氧化二砷作用于RPMI8226细胞24h前后其基因表达的变化。结果:在mRNA水平上,273个基因的表达发生了明显改变,其中121个基因表达上调,152个基因表达下调。结论:三氧化二砷可引起RPMI8226细胞株一系列基因表达的改变。ZFYVE16、TXNIP及ALK1基因可能与RPMI8226细胞的分化与凋亡密切相关。     

藤梨根有效组分抑制胃癌BGC-823细胞增殖与迁移作用的研究

目的研究藤梨根有效组分对胃癌BGC-823细胞的体外增殖、迁移能力的影响,并初步探讨其相关机制。方法利用不同浓度的藤梨根粗多糖与总三萜组合(熊果酸、齐墩果酸)处理细胞,MTT法检测细胞增殖活性,确定藤梨根有效组分最佳配比,划痕实验观察藤梨根有效组分对细胞运动能力的影响,Transwell小室模型研究其对细胞迁移能力的影响,基因芯片分析抑制BGC-823细胞增殖与迁移相关基因表达,qPCR检测miR-630基因的表达水平。结果与空白对照组相比,当藤梨根粗多糖的浓度为0.5g/L,熊果酸与齐墩果酸的浓度比为8∶1,各成分之间具有强协同作用,确定为藤梨根有效组分,其可显著抑制BGC-823细胞增殖与迁移,基因芯片分析和qPCR结果表明与其增加miR-630表达相关。结论藤梨根有效组分能显著抑制胃癌BGC-823细胞的体外增殖和迁移能力,其机制可能与miR-630的表达水平增加有关。     

雄黄对多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226细胞基因表达谱的作用

目的：应用cDNA芯片研究雄黄作用多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞后对其基因表达的影响。方法：应用包含4096条人类基因的cDNA表达谱芯片，检测雄黄作用于RPMI8226细胞前及48h后基因的表达。结果：在mRNA水平上，164条基因显著改变，53条基因上调，111条基因下调。结论：雄黄作用RPMI8226细胞株后可引起一系列基因改变，许多基因涉及了多发性骨髓瘤的发病机制，其中BTG1，TXNIP及ALK1基因可能与RPMI8226细胞的分化和凋亡有密切关系。     

E2F-1过表达对胃癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨E2F-1对胃癌细胞生物学行为影响的分子机制.方法 分别抽取转染E2F-1的胃癌MGC-803细胞和未转染E2F-1的胃癌MGC-803细胞的总RNA.纯化mRNA,逆转录合成cDNA标记后,与22K人类基因表达谱芯片进行杂交,扫描后筛选出表达差异的基因.随机选取3个差异表达基因,分别设计引物,用半定量RT-PCR检测验证.结果 在21 522条基因中,两组细胞间的差异表达基因有740条,其中上调基因405条,下调基因335条.差异基因中有73条功能信息不明.随机选取的3个差异表达基因的RT-PCR结果与基因芯片扫描结果相似,具有相同的方向性.结论 胃癌的发生发展是多基因相互作用、多种信号通路相互调节的结果.生物信息学分析显示,E2F-1基因可以通过TP53信号传导途径影响胃癌MGC-803细胞生物学行为的改变,还与众多基因的差异性表达密切相关.     

应用基因芯片研究E2F-1过表达对胃癌细胞免疫相关基因表达的影响

目的利用基因表达谱芯片技术筛选过表达E2F-1的胃癌MGC-803细胞与对照组间差异表达的免疫相关基因,初步探讨E2F-1对胃癌细胞免疫功能影响的机制。方法分别抽取转染E2F-1的胃癌MGC-803细胞和未转染E2F-1的胃癌MGC-803细胞的总RNA．纯化mRNA,逆转录合成cDNA标记后,与22K人类基因表达谱芯片进行杂交,扫描后筛选出与免疫相关的差异表达基因,半定量RT-PCR方法验证差异表达基因。结果在21522条基因中,两组细胞间差异表达的免疫相关基因有10条,其中上调基因2条,下调基因8条。上调基因中有1条功能信息不明。其中myc的RT-PCR结果与基因芯片扫描结果相似,具有相同的方向性。结论利用基因芯片技术筛选出E2F-1过表达影响胃癌细胞免疫功能的相关基因,为今后更深入的研究E2F-1对胃癌免疫功能的影响奠定了基础。     

胃癌组织p53、c-erbB-2、p21和nm23基因表达及其与预后的关系

目的：探讨胃癌组织p53、c-erbB-2、p21和nm23联合基因产物表达检测对胃癌诊断、治疗及预后判断的价值。 方法：应用免疫组化技术对123例手术切除胃癌组织标本中p53、c-erbB-2、p21和nm23基因产物表达进行测定。 结果：高分化胃癌组p53表达阳性率38.0%(27/71)，c-erbB-2为59.2%(42/71)，p21为39.4%(28/711)，nm23为71.8%(51/71)，低分化胃癌组4种基因表达阳性率分别为46.2%(24/52)、36.5%(19/52)、69.2%(24/52)和34.6%(18/52)；在非胃癌组织（胃、十二指肠溃疡、胃息肉、重度不典型增生胃炎胃镜标本）未见c-erbB-2、p21、nm23基因表达。p53、c-erbB-2、p21的表达与胃癌的分化程度、肿瘤浸润深度、肿瘤转移程度呈正相关(r=0.53,r=0.67, r=0.48, P<0.05); nm23的表达与胃癌的分化程度、肿瘤浸润深度 、肿瘤转移程度呈负相关(r=-0.36, P<0.05)。 结论：胃癌组织p53、c-erbB-2、p21、nm23基因表达检测在胃良恶性肿瘤鉴别、非手术临床分期的判断及指导临床治疗等方面具有一定价值，多基因表达检测对胃癌预后判断明显优于单基因表达检测。 ［关键词］ ［中图分类号］     

MicroRNA与胃癌

microRNAs作为一类长22～28个核苷酸的非编码小分子单链RNA,主要通过碱基互补方式特异性与靶mRNA的3′UTR结合,抑制靶基因的翻译或促进靶基因降解,进而调控靶基因的表达,在细胞的增殖、分化、调亡等方面发挥着重要作用。目前研究证明,microRNAs可通过不同信号通路直接参与人类多种肿瘤(胃癌、乳腺癌、肺癌等)的形成与发展。本文就microRNAs的发现、形成、作用机制及其与肿瘤的关系等方面予以综述,并着重介绍了microRNAs在胃癌的形成、侵袭、转移和多药耐药等方面的潜在作用。     

大蒜匀浆对裸鼠荷人胃癌细胞移植瘤的影响

目的研究大蒜匀浆液(garlicjuice,GJ)诱导人胃癌MGC803细胞分化的作用。方法采用裸鼠成瘤抑制实验、生长曲线绘制、光镜、AgNOR染色及电镜,分别观察GJ对裸鼠荷人胃癌MGC-803细胞移植瘤生物学和病理形态学的影响。结果MGC803细胞移植裸鼠皮下后,对照组、灌注组与处理组分别有3只、2只和1只成瘤,灌注组与处理组较对照组,肿瘤生长速度明显减慢,肿块无明显坏死、出血和溃疡形成,瘤体重量减轻(P<0.05)。未处理组瘤细胞为卵圆形、胞浆少、核大、核浆比例大、核膜凹陷有切迹、核仁大而明显、核分裂多、线粒体减少、核蛋白体丰富,GJ处理后瘤细胞为多边形或梭形、核浆丰富、核小、核浆比例较小、核膜较光滑、核仁小或欠明显、核分裂减少、线粒体增加。对照组瘤细胞AgNOR颗粒多而细小,处理组瘤细胞AgNOR颗粒少而粗大(P<0.05)。结论GJ具有诱导人胃癌MGC803细胞向正常细胞分化的作用。     

人胃癌细胞MKN-28母亚两系转移相关基因的筛选

目的采用基因芯片技术比较筛选前后的人胃癌细胞母系MKN-28和亚系MKN-28S之间的基因表达谱,利用生物信息学方法筛选出与胃癌侵袭和转移相关的差异基因。方法用肿瘤转移基因芯片筛选出人胃癌细胞MKN-28母亚两系的转移相关基因,对部分有差异表达的基因用RT-PCR和Western blot进行分析鉴定。结果用肿瘤转移基因芯片筛选出两系的差异表达基因共20个,其中上调基因13个,下调基因7个。选择其中有代表意义的2个基因利用RT-PCR和Western blot进行验证,证实所选基因在筛选前后瘤细胞中均有差异表达,与基因芯片的表达情况一致,说明基因芯片结果可信度较高。结论基因芯片技术是筛选胃癌转移相关基因的有效方法;多基因参与了胃癌的侵袭和转移的过程,包括一些基因如Flt-4、SRC等基因和其它相关基因的改变。     

苯异羟肟酸衍生物抑制胃癌细胞活力的体外实验

目的:探讨苯异羟肟酸衍生物对胃癌细胞生长的抑制作用及其机制. 方法:以胃癌细胞株7901为靶细胞,采用体外细胞培养技术评价苯异羟肟酸衍生物E(E药物)对肿瘤细胞活性的影响,通过光学和电子显微镜对E药物作用后细胞形态学进行观察,用免疫组化和RT-PCR方法检测细胞凋亡. 结果:E药物对胃癌细胞活性有抑制作用,作用1～4 d后7901活细胞数分别下降54.55%, 82.05%, 94.85%和94.97%;作用5和6 d时没有细胞存活,各时间点的E药物组与空白对照组比较活细胞数明显下降(1 d:t=4.24, P=0.005; 2 d:t=8.99, P=0.000; 3 d:t=13.36, P=0.000; 4 d:t=17.59, P=0.000; 5 d:t=31.00, P=0.000; 6 d:t=22.52, P=0.000). 光镜及电镜观察:E药物作用后肿瘤细胞变圆,有的出现裂解和皱缩,主要以凋亡为主. E药物作用肿瘤细胞后能抑制Survivin基因表达. 结论:E药物对胃癌7901细胞有抑制增殖作用;其抑制作用与5-氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂(DDP)作用相同或近似. 苯异羟肟酸衍生物E主要通过抑制Survivin基因的表达引起肿瘤细胞的凋亡,从而抑制肿瘤细胞的生长.     

黄连素抑制胃癌细胞分子机制的初步探讨

目的 初步探讨黄连素(Berberine)抑制胃癌细胞的分子机制.方法 利用Real-time PCR检测黄连素对胃癌细胞BGC-823和SGC-7901增殖、凋亡、坏死、自噬及细胞连接相关基因表达水平的影响.结果 黄连素处理胃癌细胞后,增殖相关基因IGFBP5、E2F6及MDM2表达水平降低,Notch2和JAG2表达水平升高,而PAK3表达水平无明显变化;凋亡相关基因Bcl-2表达水平降低,Caspase-1及Caspase-8表达水平升高;坏死相关基因RIPK1与RIPK3表达水平降低,自噬相关基因ATG7表达水平升高;细胞连接相关基因EpCAM表达水平明显降低,E-Cadherin表达水平无明显变化.结论 黄连素通过调控增殖、凋亡等相关基因的表达水平发挥抑制胃癌细胞的作用.     

Survivin及P15基因在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨Survivin及P15基因的表达及与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化两步法检测40例胃癌组织标本及相应癌旁正常组织、20例慢性萎缩性胃炎病变组织中Survivin及P15基因的表达。结果(1)胃癌组织中Survivin基因的阳性表达率明显高于癌旁正常组织及慢性萎缩性胃炎病变组织。Survivin在胃癌组织中的表达与临床分期及淋巴结转移情况关系密切;(2)胃癌组织中P15基因的阳性表达率明显低于癌旁正常组织及慢性萎缩性胃炎组织;P15表达与临床分期、分化程度有关。结论(1)Survivin基因的异常表达而引起的细胞凋亡抑制在胃癌的发生中起一定作用。(2)P15在胃癌的发生中起抑癌作用。     

ILK/PI3K/PKB转导通路与肿瘤

整合素连接激酶(ILK)以依赖于磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)方式激活,通过磷酸化下游底物蛋白激酶B(PKB)等使细胞外信号向下游传递,对细胞的生长、分化及细胞凋亡、细胞周期、细胞黏附等进行调控,在肿瘤的发生、发展中发挥着重要的作用。本文综述ILK/PI3K/PKB传导通路中一些酶类或基因在肿瘤中的表达及其与肿瘤发生、发展及治疗的研究进展。