前列腺素E1对重症肺炎大鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞的调控作用及意义

目的 探讨脂质体前列腺素E1(Lipo-PGE1)对重症肺炎大鼠CD4+CD25+ 调节性T细胞(CD4+CD25+ Treg 细胞)干预作用及意义。方法 54只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、PGE1组。模型组及PGE1组经气管注入肺炎克雷伯菌,第6天成功建立重症肺炎模型。自第6天开始PGE1组尾静脉注射Lipo-PGE1(1μg/kg)。对照组、模型组给予等量的生理盐水,各组于接种后第7、9、11天分批处死动物。采用流式细胞仪检测Lipo-PGE1对重症肺炎大鼠肺泡灌洗液(BALF)、外周血中CD4+CD25+ Treg细胞表达的影响。同时动态观察动物外周血和BALF中白细胞(WBC)、中性粒细胞(PMN)计数、血气分析、肺组织湿干比重及肺组织病理改变。结果 第7、9、11天,PGE1组外周血Treg/CD4+ T细胞比值[(27.32±1.26)%、(24.53±1.32)%、(19.24±2.63)%]与模型组[(23.19±2.18)%、(19.80±1.39)%、(15.11±1.73)%]、对照组[(5.35±0.77)%、(5.21±0.61)%、(5.46±0.80)%]比较差异均有统计学意义(P<0.01)。PGE1组BALF中Treg/CD4+ T细胞比值[(61.88±2.83)%、(55.75±4.19)%、(45.61±2.92)%]与模型组[(53.77±4.32)%、(45.69±3.52)%、(39.54±3.99)%]对照组[(20.13±2.47)%、（20.47±2.49%、(22.11±4.60)%]比较差异均有统计学意义(P<0.05、0.01)。结论 重症肺炎大鼠外周血和气道CD4+CD25+ Treg细胞增多,Lipo-PGE1能减轻重症肺炎炎症反应,其机制可能与促进CD4+CD25+ Treg的产生有关。     

长链脂肪乳对反复种植失败患者外周血Treg细胞比例失衡的调节作用

目的：探讨长链脂肪乳对反复种植失败（repeated implantation failure,RIF）患者外周血调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）比例失衡的调节作用。方法：选择2016年5—12月在南京鼓楼医院生殖中心行辅助助孕RIF患者75例,静脉长链脂肪乳治疗后分别用流式细胞技术检测外周血Treg细胞亚群比例。结果：75例RIF患者经静脉脂肪乳治疗后,外周血中Treg细胞亚群比例为（2.46±1.23）%,较治疗前的（2.30±0.83）%虽有所上升,但差异无统计学意义。进一步分析治疗前外周血Treg细胞比例异常降低的35例RIF患者,结果显示,静脉脂肪乳治疗后,该组RIF患者外周血中Treg细胞亚群比例为（2.18±0.64）%,较治疗前的（1.63±0.29）% 显著上升,差异有统计学意义（P < 0.001）。结论：长链脂肪乳对于RIF患者外周血Treg细胞比例失衡具有调节作用,可能在诱导免疫耐受,促进胚胎植入,降低流产率中发挥作用。     

哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群和CD4+ T细胞亚群的变化情况

目的 小儿哮喘的发生发展受免疫系统的影响,本文探讨哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群和CD4+T细胞亚群的变化情况,探讨其临床意义。 方法 选择2013年1月-2015年12月哮喘患儿80例作为哮喘组,健康体检儿童80例作为对照组。测定外周血淋巴细胞亚群和CD4+T细胞亚群含量。 结果 哮喘组CD3+、CD4+、CD19+、CD4+/CD8+[(62.13±11.24)%、(32.97±6.57)%、(24.35±11.21)%、(1.66±0.31)%]高于对照组[(71.16±12.64)%、(37.68±7.12)%、(13.87±8.46)%、(1.43±0.28)%,P<0.05],哮喘组CD8+[(19.87±4.21)%]低于对照组[(26.37±4.65)%。P<0.05]。哮喘组Th2、Th17、Treg、Th17/Treg[(4.42±2.14)%、(1.71±0.97)%、(7.65±1.35)%、(0.22±0.05)%]均高于对照组[(1.96±1.25)%、(0.89±0.42)%、(5.91±1.28)%、(0.15±0.03)%,P<0.05],哮喘组Th1/Th2[(1.31±1.32)]低于对照组[(2.70±1.47),P<0.05],2组Th1比较差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘组淋巴细胞[(36.57±13.24)%]低于对照组[(59.64±15.47)%,P<0.05],哮喘组单核细胞[(12.17±4.21)%]高于对照组[(3.68±1.74)%,P<0.05],2组白细胞和中性粒细胞比较差异无统计学意义(P>0.05)。淋巴细胞与Th1、Th2、Th17呈负相关(P<0.05),单核细胞与CD3+、CD4+、CD19+呈负相关(P<0.05),与CD8+呈正相关(P<0.05)。 结论 哮喘患儿存在淋巴细胞亚群和CD4+T细胞亚群异常,外周血淋巴细胞亚群和CD4+T细胞亚群含量可用于哮喘患儿免疫功能判断。      

CD4~+ D25~+调节性T细胞在晚期食管癌中的表达及临床意义

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)在食管癌中的表达及其临床意义。方法:应用流式细胞术分析60例食管癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达水平,与20例健康对照组比较。结果:食管癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞数量增加(15.9±4.1)%,表达高于正常人(5.91±3.7)%(P<0.001)。食管癌患者外周血中Treg细胞数量与患者的病理类型无关(P>0.05),但与淋巴结转移和组织学分化程度有关(P<0.01)。结论:Treg细胞在食管癌患者中比率明显升高,是患者免疫功能紊乱的一个证据。     

DC-CIK调节弥漫大B细胞淋巴瘤患者细胞免疫功能的临床研究

目的 探讨以树突状细胞和细胞因子诱导的杀伤细胞为效应细胞的过继免疫治疗对弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)患者细胞免疫功能调节的影响。 方法 选择南阳市第一人民医院2012年4月—2015年4月期间收治的初诊DLBCL患者23例，经过化疗或化疗联合放疗至少达部分缓解。采用Cobe Spectra血细胞分离机采集患者外周血单个核细胞，制备DC-CIK细胞，每例患者至少输注4个疗程。血液细胞分析仪检测外周血淋巴细胞绝对计数，流式细胞术检测总T、Th、Ts、Treg、NK细胞水平，ELISA方法检测INF-γ、IL-2水平，观察治疗的不良反应发生情况。 结果 4个疗程DC-CIK细胞治疗后外周血淋巴细胞绝对计数[absolute lymphocyte count，ALC,(2.17±1.58)×109/L]明显高于治疗前水平[(0.83±0.79)×109/L]，差异有统计学意义(P<0.05)；Treg细胞水平[(4.92±2.38)%]明显低于治疗前水平[(6.01±2.07)%]，差异有统计学意义(P<0.05)；外周血总T、Th、Ts、CD3+ T、CD3+CD4+ T、CD3+CD8+ T、NK细胞、IL-2和INF-γ平均水平在治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 自体DC-CIK细胞治疗可以通过提高ALC、降低Treg细胞水平改善初治DLBCL患者的细胞免疫功能。      

肝癌切除术对肝癌患者外周血CD4+CD25+T调节细胞的影响

目的:探讨肝癌切除术对肝癌患者外周血CD4+CD25+T调节细胞(Treg)的影响及临床意义?方法:42例原发性肝癌患者均行肝癌切除术,采用流式细胞术检测患者手术前及术后1个月外周血中Treg占单个核细胞(PBM)的比例,同样的方法检测肝癌组织和正常肝组织中Treg占单个核细胞的比例;采用ELISA检测肝癌组织和正常肝组织中转化生长因子-β(TGF-β),白介素-10(IL-10)的水平?结果:肝癌患者外周血及肝癌组织中Treg比例明显高于对照组 (13.98±3.03)% vs (8.23±2.15)%,(17.74±4.12)% vs (6.98±2.36)%,P均 < 0.05,且Ⅲ~Ⅳ期患者外周血中Treg比例显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者?肝癌切除术后1个月外周血Treg较术前明显减少(13.98±3.03)% vs (9.87±2.78)%,P < 0.05?肿瘤组织中TGF-β?IL-10的水平明显高于正常肝组织(P < 0.05)?结论:肝癌患者外周血Treg水平明显升高,且与TNM分期呈正相关?肝癌切除术能明显降低外周血Treg比例,这可能与手术切除肿瘤微环境中高水平Treg?TGF-β?IL-10有关?     

FOXP3在儿童I型糖尿病患者中的表达及临床意义

目的:通过研究儿童Ⅰ型糖尿病患者中转录因子FOXP3的表达,探讨其在儿童Ⅰ型糖尿病发病的临床意义?方法:选择患儿与正常人各30例,用电化学发光法检测血清中C肽的含量;全自动生化分析仪检测空腹血糖;流式细胞仪检测外周血CD4+ CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的数量;实时定量PCR(RT-PCR)检测FOXP3的mRNA表达?结果:Ⅰ型糖尿病患儿组中血清C肽含量(0.71 ± 0.06)ng/ml明显低于正常对照组(2.45 ± 0.28)ng/ml;血糖含量(7.51 ± 5.06)mmol/L明显高于正常对照组(4.85 ± 0.68)mmol/L;外周血中CD4+ CD25+ Treg约占CD4+ T细胞(1.57 ± 0.15)%,低于正常对照组(3.13 ± 0.29)%(P < 0.05);Ⅰ型糖尿病患儿组外周血CD4+ CD25+ Treg细胞低表达FOXP3?结论:儿童Ⅰ型糖尿病患者外周血FOXP3表达降低,导致机体不能抑制效应性CD4+ T细胞的增殖对胰岛的破坏,从而参与了Ⅰ型糖尿病的发生?     

CD4~+C25~+Treg细胞与喉鳞状细胞癌的相关性研究

目的:研究CD4+CD25+Treg细胞与喉鳞状细胞癌的相关关系。方法:收集2005年7月至2005年12月山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科手术治疗的30例喉鳞状细胞癌患者和同期13例健康献血者的外周血,应用流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+Treg细胞的百分比,用ELISA法检测外周血中TGF-β,IL-10,IFN-γ的含量。结果:喉鳞状细胞癌患者与正常对照组外周血中CD4+CD25+Treg细胞的百分比分别为(8.72±1.54)%和(4.64±0.93)%,喉鳞状细胞癌组高于正常对照组(P<0.05),但与性别、年龄、临床分期、淋巴结转移无关。喉鳞状细胞癌患者外周血中TGF-β,IL-10含量分别为(10.96±1.19)pg/ml和(15.87±2.17)pg/ml,高于正常对照组的(6.77±0.72)pg/ml,(1.8±2.5)pg/ml(P<0.05);但IFN-γ的含量为(16.67±8.39)pg/ml,低于正常对照组的(21.98±9.64)pg/ml(P<0.05)。结论:CD4+CD25+Treg细胞在喉癌患者外周血中大量增加,下调T细胞介导的肿瘤免疫。     

食管癌患者外周血中调节性B细胞检测的临床意义

目的:检测食管癌患者和健康对照者外周血中调节性B细胞CD5+CD19+IL-10(B10)表达量的差异,探讨B10在食管癌发生?发展中的作用?方法:收集60例食管癌患者和60例健康体检者外周血,用流式细胞仪检测调节性B细胞的表达情况?结果:食管癌患者外周血中B10的数量明显高于健康对照者(P < 0.05),且Ⅲ~Ⅳ期[(3.3 ± 0.6)%]高于Ⅰ~Ⅱ期[(2.1 ± 0.3)%],均高于健康对照者[(1.4 ± 0.4)%]?结论:食管癌临床分期越晚B10升高越明显,提示B10细胞与食管癌的发生发展可能存在着一定的关系?     

CD4+CD25+调节性T细胞对直肠癌过继免疫治疗效应细胞的影响和作用

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）在直肠癌过继免疫治疗中对免疫杀伤细胞的负性调节作用。方法 利用流式细胞仪分别检测15例直肠癌患者和健康志愿者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量；分离提取直肠癌患者外周血CD4+T细胞，免疫磁珠法去除 CD4+CD25+调节性T细胞，同灭活的LOVO直肠癌细胞珠共培养并扩增为肿瘤抗原特异性CTL，以LOVO细胞为靶细胞行肿瘤杀伤实验，观察各实验组CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果 直肠癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞总数的（11.12±0.57）%，显著高于健康对照组（8.77±0.66）%（t=2.687，P＝0.012）；去除Treg细胞后诱导产生的抗原特异性CTL对靶细胞的杀伤效率为（33.74±4.42）%，显著高于未去除Treg细胞的对照组CTL的杀伤效率[(17.39±2.54)%; t=3.206, P=0.0034]。结论　直肠癌患者外周血中调节性T细胞含量明显增高，并且对肿瘤抗原诱导的CTL的免疫杀伤功能具有明显抑制作用。