电针对神经病理性疼痛大鼠痛阈及脊髓NR2B亚基表达的影响

目的 观察电针刺激对坐骨神经慢性压榨性损伤(CCI)引起的神经病理性疼痛模型大鼠的痛阈变化及脊髓NR2B 亚基表达的影响,探讨其镇痛机理.方法 健康SD雄性大鼠体质量200-280g,共40只,随机分为4组:COI假手术组、COI模型对照组、COI电针组、COI假电针组.各组大鼠于术前和术后7,13d测定热痛阈和机械痛阈.采用Western blot方法测定脊髓NR2B亚基的蛋白表达.结果 CCI模型对照组、CCI电针组和CO假电针组大鼠痛阈术后较术前明显降低(P<0.05),电针刺激显著减轻COI大鼠痛敏状态(P<0.05),明显抑制CCI大鼠脊髓NR2B的表达(P<0.05).假电针组大鼠痛敏状态、脊髓NR2B的表达与模型对照组比较无统计学差异(P>0.05).结论 本研究观察到电针治疗能够提高CCI模型神经病理性疼痛大鼠的机械痛阈和热痛阈,其机制与干预大鼠脊髓背角NR2B亚基表达可能有关.     

脊髓小胶质细胞激活对SNI模型大鼠神经病理性疼痛的影响

目的观察小胶质细胞对大鼠坐骨神经分支选择性损伤(SNI)所致神经病理性疼痛的影响。方法选择雄性SD大鼠64只,随机分为4组(n=16):假手术组(Sh组);模型组(SNI组);模型 米诺环素40mg/kg组(Mb组);模型 米诺环素10mg/kg组(Ms组)。其中Mb和Ms组从造模前1d起连续7d每日2次腹腔注射相应剂量的米诺环素。分别记录全组动物在术前1d及术后1,3,5,7,14d的机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射持续时间(TWD)作为大鼠疼痛行为学指标;各组大鼠分别在术后1,3,5,7,14d随机选取4只处死,取脊髓,用免疫荧光的方法检测脊髓小胶质细胞标志物OX-42的表达。结果SNI组从术后1d起即出现明显MWT降低和TWD延长,与术前及Sh组术后各时点比较均有统计学差异(P<0.05);Mb组和Ms组与SNI组相应时点比较MWT降低和TWD延长程度有显著性差异(P<0.05);Mb与Ms组比较MWT降低和TWD延长程度有统计学差异(P<0.05);Mb、Ms组与SNI组比较脊髓OX-42的表达减少,并呈剂量依赖性。结论米诺环素腹腔注射可剂量依赖性的减少OX-42的表达,抑制脊髓小胶质细胞的激活,减轻痛觉超敏和痛觉过敏,提示小胶质细胞的活化参与SNI神经病理痛的形成。     

丙戊茶碱对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及机制

目的 观察丙戊荼碱对大鼠坐骨神经分支选择性损伤(SNI)致神经病理性疼痛的镇痛作用.方法 将96只雄性SD大鼠随机分4组:假手术组(Sh)、模型组(S)、鞘内注射丙戊茶碱组(P1)及腹腔内注射丙戊茶碱组(P2).其中S组和P1组造模后分别单次鞘内注射盐水20μ1和丙戊荼碱20 μ1(0.05 μg/μ1);P2组造模后单次腹腔内注射丙戊茶碱1ml(1 mg/kg).记录全组动物术前1 d及术后1,3,7,14,21 d的机械缩足反射阅值(MWT)和热缩足反射维持时间(TWD),并在术后各时点随机选6只大鼠,取脊髓腰膨大,用免疫印迹法检测腺苷A1受体(A1-AR)蛋白量的变化,用ELISA法检测TNF-α和IL-1μ含量的变化.结果 S组术后出现明显的MWT下降和TWD延长,与术前及Sh组术后各时点比较有显著性差异(P<0.05).与S组比较P1、P2组行为学指标的变化幅度大(P<0.05),且P1组行为学指标的变化幅度大于P2组.S组TNF-α和IL-1β的含量术后均增加,与Sh组比较差异有统计学意义(P<0.01);P1和P2组TNF-α和IL-1β的含量升高的幅度小,与S组比较有统计学差异(P<0.05);P1、P2组腺苷A1受体的表达量升高明显,与S组比较有统计学差异(P<0.05).结论 丙戊茶碱能抑制SNI大鼠炎性介质的释放,且在脊髓水平增强A1-AR的激活,对SNI大鼠神经病理性疼痛的抑制发挥重要的作用.     

糖皮质激素对坐骨神经分支选择性损伤大鼠神经病理性疼痛的影响

目的 观察糖皮质激素对大鼠坐骨神经分支选择性损伤(SNl)所致神经病理性疼痛的影响.方法 将80只雄性SD大鼠随机分4组:假手术组(Sh);模型组(S);鞘内注射得宝松组(D1)及局部注射得宝松组(D2).其中S组和D1组术后分别单次鞘内注射盐水20 μl和得宝松20 μl(2 μg/μl);D2组术后单次鞘内注射盐水20 μl,同时于神经损伤的局部单次注射得宝松1 ml(1 mg/ml).记录全组动物术前1 d及术后1,3,7,14 d的机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射维持时间(TWD),并在术后各时点用免疫组化法检测星形胶质细胞酸性纤维蛋白(GFAP)和糖皮质激素受体(GR)的表达,同时用免疫印迹法检测GR蛋白量的变化,用ELISA法检测TNF-α和IL-1β含量的变化.结果 S组术后出现明显的MWT下降和TWD延长,与术前及Sh组术后各时点比较差异显著(P<0.01),与s和D1组比较D2组行为学指标的变化幅度小(P<0.05).S组GFAP、GR及TNF-α和IL-1β的含量术后均增加,与Sh组比较差异显著(P<0.01);D1和D2组GFAP及TNF-α和IL-1β的含量升高的幅度小,与S组比较有统计学差异(P<0.05);D2组GR的表达量升高最明显,与s和D1组比较有统计学差异(P<0.05).结论 糖皮质激素能抑制SNI大鼠脊髓星形胶质细胞的激活和炎性介质的释放;局部使用激素对脊髓内GR的影响小,且能改善SNI大鼠神经病理性疼痛.     

神经病理性痛大鼠脊髓背角钾氯共转运体的表达

目的 观察左侧坐骨神经分支选择结扎切断(SNI)模型致神经病理性痛大鼠的脊髓背角钾氯共转运体(KCC2)表达的变化.方法 将27只健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为SNI组(18只)和假手术组(9只).SNI组大鼠暴露坐骨神经及其3个末端分支(腓肠神经、腓总神经和胫神经),结扎并切断腓总神经和胫神经,保留腓肠神经完整;假手术组大鼠仅暴露坐骨神经及其分支,不切断.应用vonFrey纤毛检测SNI术后不同时间段的大鼠机械痛阈值;应用免疫印迹技术观察SNI术后不同时间相应的脊髓腰膨大(L4、L5)节段脊髓背角KCC2的表达.结果 术后1、3、5、7 d,SNI组大鼠左侧后肢的缩足阈值呈显著下降趋势,分别为(3.23±0.49)、(0.60±0.09)、(0.38±0.07)、(0.21±0.06)g,并且在随后的观察期内一直维持在这一低水平.术后1、3、5 d,SNI组大鼠腰膨大节段脊髓的左侧背角KCC2的表达量(即KCC2表达量与内参a-tublin表达量的比值)为0.97±0.09、0.32±0.10、0.53±0.15,分别较右侧的1.27±0.08、0.63±0.09、1.11±0.18显著减少(P值均＜0.05);术后3 d,右侧的表达量为0.63±0.09,较假手术组的1.15±0.13显著下降(P＜0.05);至术后7 d,脊髓背角两侧KCC2的表达量基本恢复正常水平.结论 SNI模型可致病理性神经痛早期损伤侧脊髓背角KCC2的表达明显减少,可能在慢性神经病理性痛的发展过程中发挥作用.     

丙戊酸钠参与脊髓水平疼痛-瘙痒调控的研究

目的 探讨丙戊酸钠( VPA)对小鼠坐骨神经分支高选择结扎切断 ( SNI)引起的神经病理性疼痛与氯喹诱发的急性瘙痒的影响. 方法 实验一:将昆明种雄性小鼠48 只随机分为6组:神经病理性疼痛组( SNI)、假手术组( Sham)、瘙痒组( CQ)、瘙痒溶媒组( NS)、疼痛瘙痒组( SQ)及空白对照组( CON);CON、SNI、Sham、SQ组在术前1 d,术后1、3、5、7、9、10 d测定左后足机械痛阈值(MWT),CON、CQ、NS、SQ组分别于右后足足底注射氯喹或生理盐水后观察小鼠舔足时间. 实验二:昆明种雄性小鼠16 只随机分为 SQ-V组和SQ-N组. SNI模型分别于术后5、6、7、8、9 d早晚8 时注射VPA( SQ-V 组)及VPA溶媒生理盐水( SQ-N组)后测定疼痛行为学,于术后第10天注射氯喹后观察瘙痒行为学. 行为检测结束后使用反转录PCR( RT-PCR)法检测脊髓L4-L6部位组蛋白去乙酰化酶2 ( HDAC2 )的表达. 结果 SNI组及SQ组在术后1 d MWT降低( P<0. 05 ) ,第5天仍在较低水平. SQ-V组较SQ-N组鞘注后MWT显著升高( P<0. 05 ).CQ组较NS组舔足时间显著延长,SQ组舔足时间明显低于CQ组(P<0. 05). SQ-V组舔足时间显著高于SQ-N组(P<0. 05). RT-PCR结果提示SNI引起HDAC2表达上调,CQ引起HDAC2表达下调. 结论 疼痛能够抑制瘙痒神经信号传导,脊髓水平HDAC2差异性表达介导疼痛-瘙痒的共同调节.     

鞘内注射钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制剂对坐骨神经损伤大鼠的镇痛作用

目的 探讨钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在神经病理性疼痛中的作用.方法 大鼠48只随机分为6组:坐骨神经分支选择性损伤组(SNI组)、假手术组(Sham组)、术前鞘内注射AlP(autocamtide-2-related inhibitory peptide AIP)或生理盐水组(BA组、BN组)、术后鞘内注射AIP或生理盐水组(AA组、AN组).测定SNI大鼠注射AIP前后机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)的改变.结果 SNI大鼠从术后第2天至第14天出现明显的机械痛敏,鞘内注射AIP能够缓解SNI大鼠的机械痛敏,术前给药组术后1 d、2d、3d的MWT分别为(9.0±1.1)g、(9.1±1.5)g、(7.5±1.5)g,显著高于SNI组[分别为(5.9±0.9)g、(5.6±1.0)g、(5.7±1.0)g,均P<0.01];术后给药能缓解SNI大鼠的机械痛敏约4h,较之术前给药为短.结论 CaMKⅡ参人了神经病理性痛大鼠疼痛的调节.     

Expression of fibroblast 3 growth factor receptor of spinal astrocytes in rats with neuropathic pain

目的 观察成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)在坐骨神经分支选择结扎后神经病理性疼痛中大鼠脊髓的表达变化.方法 40只SD雄性大鼠,分为假手术对照组(sham)和手术组(SNI),每组20只.使用坐骨神经分支选择结扎方式建立大鼠神经病理性疼痛模型,观察sham组和SNI组大鼠术前1d以及术后1、3、5、7d的行为学改变并检测2组大鼠的机械痛阈,采用免疫荧光双标观察2组大鼠术后7d脊髓背角星形胶质细胞FGFR3和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的共表达,Western blot法检测SNI术后各时间点2组大鼠FGFR3蛋白表达.结果 术前1d2组大鼠机械痛阈无明显差异(P＞0.05),术后1、3、5、7 d SNI组大鼠机械痛阈值分别为(6.67±2.12)、(3.17±0.99)、(2.33±0.65)、(1.75±0.31),相应时间点sham组大鼠机械痛阈值分别为(12.75±2.83)、(12.33±2.84)、(12.08±2.57)、(11.50±2.65),SNI组大鼠机械痛阈在各时间点较sham组明显降低(P＜0.05);术后7d患侧脊髓背角GFAP阳性表达的细胞,FGFR3也呈阳性表达;术后1、3、5、7 d sham组大鼠脊髓FGFR3蛋白表达分别为(0.192 8 ±0.013 0)、(0.213 6±0.021 4)、(0.2946±0.025 1)、(0.2664±0.027 3),相应时间点SNI组大鼠脊髓FGFR3蛋白表达分别为(0.280 4±0.015 3)、(0.328 2±0.026 3)、(0.567 7±0.027 0)、(0.528 8±0.032 8),与sham组比较,SNI组脊髓FGFR3蛋白表达随时间增长而上调(P ＜0.05).结论 在神经病理性疼痛过程中FGFR3表达下调并可能参与GFAP的激活,提示FGFR3在神经病理性疼痛的发生以及发展过程中可能发挥着重要的作用.     

脊髓星形胶质细胞FGFR3在神经病理性疼痛中的表达改变及作用

目的观察成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)在坐骨神经分支选择结扎后神经病理性疼痛中大鼠脊髓的表达变化。方法 40只SD雄性大鼠,分为假手术对照组(sham)和手术组(SNI),每组20只。使用坐骨神经分支选择结扎方式建立大鼠神经病理性疼痛模型,观察sham组和SNI组大鼠术前1 d以及术后1、3、5、7 d的行为学改变并检测2组大鼠的机械痛阈,采用免疫荧光双标观察2组大鼠术后7 d脊髓背角星形胶质细胞FGFR3和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的共表达,Western blot法检测SNI术后各时间点2组大鼠FGFR3蛋白表达。结果术前1 d 2组大鼠机械痛阈无明显差异(P>0.05),术后1、3、5、7 d SNI组大鼠机械痛阈值分别为(6.67±2.12)、(3.17±0.99)、(2.33±0.65)、(1.75±0.31),相应时间点sham组大鼠机械痛阈值分别为(12.75±2.83)、(12.33±2.84)、(12.08±2.57)、(11.50±2.65),SNI组大鼠机械痛阈在各时间点较sham组明显降低(P<0.05);术后7 d患侧脊髓背角GFAP阳性表达的细胞,FGFR3也呈阳性表达;术后1、3、5、7 d sham组大鼠脊髓FGFR3蛋白表达分别为(0.192 8±0.013 0)、(0.213 6±0.021 4)、(0.294 6±0.025 1)、(0.266 4±0.027 3),相应时间点SNI组大鼠脊髓FGFR3蛋白表达分别为(0.280 4±0.015 3)、(0.328 2±0.026 3)、(0.567 7±0.027 0)、(0.528 8±0.032 8),与sham组比较,SNI组脊髓FGFR3蛋白表达随时间增长而上调(P<0.05)。结论在神经病理性疼痛过程中FGFR3表达下调并可能参与GFAP的激活,提示FGFR3在神经病理性疼痛的发生以及发展过程中可能发挥着重要的作用。     

碱性成纤维细胞生长因子在大鼠坐骨神经分支选择性损伤后的动态变化

目的观察坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠机械刺激缩足反射阈值(PWMT)与脊髓碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-6表达变化的时程关系,探讨神经病理性疼痛中脊髓FGF-2的动态变化规律及致痛机制。方法雄性SD大鼠100只,采用随机数字表法,将其随机分2组(n=50):假手术组(Sh组)和手术组(SNI组)。于术前1 d,术后1、4、7、14、28 d观察疼痛行为学,检测机械刺激缩足反射阈值(PWMT),并于术后各时间点应用免疫组织化学、Western blot以及ELISA方法,检测脊髓FGF-2、TNF-α和IL-6含量。结果 SNI后1 d PWMT下降,7 d达最低,28 d仍处于较低水平,与Sh组术后各时间点和术前比较差异显著(P<0.05)。SNI组脊髓FGF-2含量于术后4 d开始增加,14 d达高峰,28 d仍维持较高水平,与Sh组术后各时间点比较差异显著(P<0.05)。SNI组术后各时间点TNF-α和IL-6的表达高于Sh组(P<0.05)。结论大鼠SNI模型成功模拟神经病理性疼痛的发生,并且诱发损伤侧脊髓FGF-2以及炎性因子表达增加。     

NR2B-ERK-CREB信号途径参与了大鼠逃避性长期记忆

目的明确NR2B-ERK-CREB途径是否参与了大鼠Y迷宫逃避性长期记忆。方法雄性SD大鼠45只（第一军医大学实验动物中心提供）,共分为4组：ifenprodil腹腔注射组14只,DMSO腹腔注射组15只,此2组中分别有7只动物在Y-迷宫训练后立即处死,用来进行免疫组织化学染色;ifenprodil脑室注射组和DMSO脑室注射组各8只,分别在Y-迷宫记忆测试后立即脑室注射ifen-prodil（2.0μg/μl,注射量0.5μl/侧）或等量DMSO,并于记忆再巩固测试后立即断颈取脑,进行Westernblot蛋白免疫印迹检测。结果训练前15min腹腔注射ifenprodil组动物的Y迷宫学习成绩与DMSOip组相比,没有明显差异（P〉0.05）,但是在24h后测试动物的Y迷宫记忆,ifenprodilip组成绩差于DMSOip组成绩（P〈0.05）。Y迷宫训练后ifenprodilip组各脑区pERK1/2和pCREB表达普遍下降,其中pERK1/2在海马、纹状体、杏仁核下降最为明显,pCREB在海马、纹状体、小脑最为明显,与DMSOip组相比差异显著（P〈0.01）。第一次Y迷宫测试ifenprodilic组与DMSOic组成绩没有明显差异（P〉0.05）,测试后立即脑室注射并在术后6h测试动物对Y迷宫的记忆再巩固,ifenprodilic组成绩下降,与DMSOic组相比有明显差异（P〈0.05）,同时ifenprodilic组动物各被检测脑区pERK1/2和pCREB表达与DMSOic组相比均普遍下降。结论 NR2B-ERK-CREB途径参与了大鼠Y迷宫的习得、长期记忆形成、记忆的再巩固等过程,而且该途径对于长期记忆的形成和记忆提取是必要的。     

艾芬地尔鞘内注射对骨癌痛模型小鼠痛行为的改善作用

目的 在小鼠骨癌痛模型上观察鞘内注射N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)拮抗剂艾芬地尔的镇痛效果.方法 将含2×105个纤维肉瘤细胞NCTC 2472的最小必需培养基(α-MEM)注射到C3H/HeJ小鼠右侧股骨远端骨髓腔,制作骨癌痛模型(T组).同时设假手术组(S组,n =10),注入不含肿瘤细胞的α-MEM.所有小鼠均于接种前1 d,接种后第3,5,7,10,14天检测痛行为学指标,包括自发性抬足次数、机械痛缩足阈值(PWMT)和热痛缩足潜伏期(PWTL).骨癌痛模型制作成功的T组小鼠在接种后第14天,进一步分为艾芬地尔 2.5 μg、5.0 μg、10.0 μg组(I1、I2、I3 组,n =10)和对照组(C组,n =10),I1～I3组鞘内注射相应剂量的艾芬地尔,C组及S组给予溶媒,注药体积均为5.0 μl,鞘内注射后2 h、12 h、24 h再进行行为学检测.结果 与S组[(2.44±0.79)次]和术前基础值[(2.20±0.85)次]相比,肿瘤细胞接种后第14天T组小鼠自发性抬足[(13.16±1.78)次]显著增多( P ＜0.05),PWMT[(0.47±0.19)g]较S组[(1.70±0.31)g]和基础值[(1.83±0.23)g]降低( P ＜0.05),PWTL[(10.01±1.42)s]较S组[(17.62±1.07)s]和基础值[(18.32±1.57)s]缩短( P ＜0.05);给药后2 h、12 h,与C组及14 d 给药前比较,I2和I3组自发性抬足次数减少( P ＜0.05),PWMT增高( P ＜0.05),PWTL延长( P ＜0.05),且I3组比I2组对痛行为学的改善更显著( P ＜0.05);I1组给药后痛行为学无明显变化( P ＞0.05).结论 鞘内注射艾芬地尔有效改善骨癌痛小鼠的痛行为学反应.     

N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基在骨癌痛 小鼠脊髓背角和背根神经节中的表达

目的：通过观察骨癌痛小鼠疼痛行为学变化和脊髓背角与背根神经节N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基（the 2B subunits of N-methyl-D-aspartate receptors,NR2B）的表达以及它们之间的相关性,探讨NR2B在癌性痛产生和维持中的作用。方法：选用45只成年雄性C57BL/6小鼠,随机分为3组,模型组（n=15）：于小鼠股骨远端骨髓腔内接种Lewis肺癌细胞2×106个,接种体积为10 μL;假手术组（n=15）：接种等体积的D-Hank’s液;正常对照组（n=15）：不予任何处理。术后第3天始隔日观察小鼠自发痛行为及测定机械性触诱发痛。术后第7,15,23天,各组任选5只取小鼠术侧后肢,HE染色,光镜下观察肿瘤生长及骨质破坏的程度;取腰段脊髓膨大（L2-4）和L4背根神经节行NR2B免疫组织化学检测。结果：通过小鼠行为学测定和组织学检测证实骨癌痛模型制备成功。NR2B在模型组术侧脊髓背角和背根神经节免疫反应阳性指数各时间点明显高于假手术组和正常对照组（P<0.05）。模型组中术侧第7与15,23天比较差异有统计学意义（P<0.05）。各组小鼠术后第23天,术侧脊髓背角和背根神经节NR2B免疫反应阳性指数与小鼠术侧后爪累计抬足时间明显正相关（分别为r=0.976,P<0.001;r=0.882,P<0.001）;与小鼠术侧机械性缩足阈值明显负相关（分别为r=-0.879,P<0.001;r=-0.760,P=0.001）。结论：骨癌痛小鼠脊髓背角和背根神经节中NR2B受体表达均增加,且与行为学表现有明显的相关性,推测脊髓背角和背根神经节的NR2B受体在小鼠骨癌痛产生和维持中起重要作用。     

吗啡耐受大鼠脊髓NMDA受体NR2A亚基的表达

目的 研究N-甲基-M-天冬氨酸受体(NMDA)NR2A亚基在吗啡耐受大鼠脊髓的分布和表达变化.方法 12只雄性SD大鼠随机分成对照组(C组,n=6),C组和吗啡耐受组(M组,n=6),C组:鞘内注射生理盐水10μl;M组:鞘内注射吗啡10μg.每日给药2次,连续7d.给药前和给药后30min通过测定甩尾潜伏期(TFL)观察大鼠热痛阈的变化.最后一次给药后次日处死动物,取L4～5脊髓组织,采用免疫荧光方法检测NR2A在各组大鼠脊髓的表达.结果 随着用药天数增加,M组TFL逐渐下降,到第7天M组与C组比较差异无显著性[(3.25±0.93)s,(2.66±0.27)s,P＞0.05],成功建立吗啡耐受模型.NR2A在脊髓的分布贯穿全层.M组脊髓背角浅层NR2A表达(OD值:9617±1233)较C组(OD值:2.66±0.93)升高(t=3.133,P＜0.05).结论 鞘内重复注射吗啡后大鼠脊髓背角NMDA受体NR2A亚基表达上调,可能是吗啡耐受形成机制之一.     

截肢前阻断疼痛刺激对大鼠截肢后疼痛及中枢神经系统NMDA受体激活的影响

目的：观察截肢前阻断疼痛刺激对大鼠截肢后痛行为学及中枢神经系统NR2B受体的影响，探讨截肢前阻断疼痛刺激对截肢术后疼痛的影响及其可能机制。方法：成年雄性SD大鼠36只，随机分为截肢前不致痛组(NA组，n=12)、致痛后假阻滞组(PA组，n=12)及致痛后阻滞组(PAB组，n=12)。测量基础值后PA组和PAB组在左后足底皮下注射完全福氏佐剂(complete freund adjuvant，CFA)100 μL，NA组在左后足底皮下注射生理盐水100 μL。PAB组大鼠于注射后5 d行左坐骨神经阻滞，NA组、PA组大鼠行左坐骨神经假阻滞，阻滞/假阻滞3 d后行左后肢膝上截肢手术。记录注射前、注射生理盐水/CFA后、坐骨神经假阻滞/阻滞后，截肢当天及截肢术后1，3，5，7 d左后足底/左残端的热缩腿反射潜伏期(thermal withdrawal latency，TWL)。截肢后7 d检测大鼠大脑前扣带回皮质(ACC)及脊髓NR2B受体的表达情况。结果：PA组和PAB组大鼠注射CFA后左后足底TWL值明显低于基础值(P<0.05)。截肢前，注射CFA后PA组各时点左后足底TWL值均低于NA组(P<0.05)，PAB组阻滞后各时点左后足底的TWL显著高于其致痛后和基础值(P<0.05)，并高于NA组和PA组(P<0.05)。与截肢当天残端的TWL值比较，NA组和PAB组于截肢术后第3天开始残端TWL值增高，PA组截肢后各时点残端TWL值与截肢当天的残端TWL值比较，无明显变化。截肢后7 d大脑前扣带回皮质及脊髓NR2B受体阳性细胞：PA组与NA组、PAB组比较显著增多(P<0.05)；PAB组与NA组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：术前患肢的持续性疼痛导致大鼠中枢神经系统NR2B受体的激活，截肢前阻断疼痛刺激能抑制中枢神经系统
NR2B受体的激活，阻止术后迁延性疼痛的发生，因而对截肢手术前患肢的疼痛进行合理的镇痛十分必要。     

脉冲射频对坐骨神经分支损伤模型大鼠机械痛阈的影响

目的观察坐骨神经分支损伤（sNI）大鼠接受脉冲射频（PRF）治疗后机械痛痛阈的变化。方法将雄性SD大鼠40只随机分为5组：健康对照组、SNI组、假SNI组、PRF组、假PRF组,每组8只。其中,SNI组接受坐骨神经分支损伤手术,建立SNI模型;假SNI组仅暴露坐骨神经分支而不切断;PRF组在建立SNI模型7d后,实施PRF治疗（脉冲频率为2Hz、交流电频率为500kHz、输出电压为45V、治疗时间120s）;假PRF组建立SNI模型7d后,仅置入射频针120s,不实施PRF治疗。于D0（建立SNI模型前）、D1～D7（建模后1～7d）,D8～D14（PRF后1～7d）,用von Frey丝刺激大鼠术侧后爪诱发触痛过敏的方法评估各实验分组大鼠疼痛行为。结果D0时各组机械痛阈值比较差异无统计学意义（P〉0．05）。D7时,SNI组、PRF组、假PRF组较健康对照组疼痛阈值显著降低（P〈0．05）;假SNI组与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。D9与D14时,PRF组较SNI组痛阈明显增高（P〈0．05）;PRF组较假PRF组痛阈明显增高（P〈0．05）;PRF组与健康对照组、假SNI组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PRF治疗后的SNI模型大鼠机械痛阈升高。     

鞘内注射LY294002对保留性脊神经损伤大鼠脊髓中PI3K和pERK信号的影响

目的：观察保留性脊神经损伤（SNI）大鼠鞘内注射LY294002能否通过抑制脊髓中磷脂酰肌醇‐3‐激酶PI3K ,进而影响pERK信号而缓解神经病理性疼痛。方法24只雄性 SD大鼠随机分为4组,即假手术（Sham）组、SNI组、SNI＋二甲基亚砜（DMSO）组及 SNI＋ LY294002（PI3K 抑制剂）组,每组6只,其中 SNI＋LY294002组和SNI＋DMSO组分别于SNI后第5天经鞘内注射LY294002和等体积DMSO ,每天1次,直到SNI后第14天。SNI前和SNI后1,3,5,7,10,14 d ,测定大鼠机械刺激缩足反应阈值（PWM T ）和热辐射刺激缩足反应潜伏期（PWTL）。SNI后第14天,大鼠麻醉后取腰段脊髓行Western‐blot检测PI3K和pERK的表达。结果与Sham组比较,SNI后各时点SNI组大鼠的 PWMT 和PWTL 均下降,脊髓中PI3K和 pERK表达则显著增强（P＜0．05）。与SNI组和SNI＋DMSO组比较,SNI后各时点SNI＋LY294002组大鼠的PWMT和PWTL均显著增高（P＜0．05）,PI3K和pERK的表达则下降（P＜0．05）。结论经鞘内注射LY294002可抑制脊髓中PI3K ,进而影响pERK信号而缓解SNI大鼠神经病理性疼痛。     

缝隙连接蛋白pannexin1在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角的表达变化

目的 观察缝隙连接蛋白pannexin1(PX1)在坐骨神经分支选择结扎模型大鼠脊髓背角上的表达变化.方法 健康SD雄性大鼠50只 ,分为对照组(WT组 ,n=10)、假手术组(sham组 ,n=10)和坐骨神经分支选择性损伤组(SNI组 ,n=30).SNI组20只大鼠于术后3、5、7、14 d(n=5) ,WT、sham组于术后14 d(n=5)取脊髓腰段用Western blot法检测PX1表达变化 ,另20只大鼠于术后7 d取脊髓腰段进行免疫组化染色 ,检测脊髓背角内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达水平.SNI组中10只于建模前进行鞘内置管 ,术后7 d分别向鞘内注射生理盐水20 μL(SNI+NS组)或甘珀酸(CBX)20 μL(SNI+CBX组) ,再进行免疫组化染色.结果 SNI组脊髓背角内PX1表达增多 ,并随时间增强 ,明显高于WT、sham组(P＜0 .05);7 d后SNI组脊髓背角内GFAP表达较WT、sham组明显增强(P＜0 .05);SNI+CBX组GFAP表达较SNI+ NS组明显下调(P＜0 .05).WT、sham组脊髓背角的PX1蛋白和GFAP表达差异无统计学意义(P＞0 .05).结论 缝隙连接蛋白PX1可能参与了星形胶质细胞的激活 ,提示其在因外周神经损伤引起的神经病理性痛中起重要作用.     

氟比洛芬酯复合小剂量吗啡术后镇痛和预先镇痛的效果分析

目的分析比较氟比洛芬酯复合小剂量吗啡术后静脉镇痛、术前预先镇痛及单纯吗啡术后静脉镇痛的效果。方法120例接受上腹部手术的患者,随机分为术后吗啡30 mg 0.9%NaCl镇痛组(A组,n=30),术后吗啡20 mg 0.9%NaC l镇痛组(B组,n=30),术后氟比洛芬酯100 mg 吗啡20 mg 0.9%NaCl镇痛组(C组,n=30),术前氟比洛芬酯100 mg 术后吗啡20 mg 0.9%NaC l镇痛组(D组,n=30)。镇痛泵参数设定:负荷量5 mL,持续输注量2 mL/h,自控镇痛(PCA)量2 mL,锁定时间30 min。记录各组24 h内的视觉模拟评分(VAS)、PCA泵使用次数及不良反应的发生情况,并进行比较分析。结果术后3 h,B组VAS显著高于其他各组(P<0.05);术后24 h内,B组PCA使用次数显著多于其他各组(P<0.05)。A组不良反应发生率显著多于其他各组(P<0.05)。各组患者镇痛期间均无呼吸抑制、异常出血等并发症发生。结论氟比洛芬酯复合吗啡术后静脉镇痛效果良好,可明显减少吗啡的用量和不良反应的发生率;氟比洛芬酯术前预先镇痛与术后静脉镇痛的效果无明显差异。     

丁苯酞对酒精依赖大鼠海马硫化氢含量及NMDA受体2B亚基表达的影响

目的 研究丁苯酞(NBP)对洒精依赖大鼠海马硫化氢(H2S)含量及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体2B亚基(NR2B)表达的影响.方法 84只SD雄性大鼠随机分为6组,除正常组外,各组饮含6%(V/V)酒精水溶液28 d,饮6%(V/V)酒精水溶液14 d后,NBP低、中、高剂量组大鼠灌胃不同剂量NBP,检测戒断症状评分、海马组织H2S含量、胱硫醚β-合酶(CBS)活性以及NR2B的表达.结果 NBP中剂量组大鼠戒断症状评分[(12.27±1.19)分]、H2S含量[(30.25±8.82)nmol/g]、CBS活性[(72.44 ±7.46)nmol·g-1·h-1]及NR2B mRNA的表达(19.47 ±0.86)与实验对照组大鼠戒断症状评分[(14.09±2.21)分]、H2S含量[(44.50±6.65)nmol/g]、CBS活性[(79.06±4.57)nmol·g-1·h-1]及NR2B mRNA的表达(29.13±1.39)相比均降低,差异有显著性(P<0.05).NBP高剂量组大鼠戒断症状评分[(12.18±1.08)分]、H2S含量[(33.00±5.38)nmol/g]、CBS活性[(67.81±9.37)nmol·g-1·h-1]及NR2B mRNA的表达(23.12 ±1.86)与实验对照组大鼠相比均降低,差异有显著性(P<0.05).结论 NBP能够减轻酒精依赖大鼠的戒断症状,可能与NBP抑制H2S/CBS体系表达及抑制NR2B mRNA表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect of butylphthalide (NBP) on H2S content and the expression of NR2B in the hippocampus of alcohol dependence rats. Methods A total of 84 SD male rats were randomly divided into 6 groups. Except for the normal group, other groups were subjected to alcohol solution with concentration of 6% ( V/V) for 28 d. Drug intervention began at the 14th day,and rats in the low,medium,high dose group were treated with NBP with a different concentration. Erden abstinence scoring was used to evaluate the rats withdrawal symptom. H2S content was measured in one side of hippocampus and CBS activity was tested in the other side of hippocampus. Hippocampus of 3 rats from each group was used to investigate NR2B mRNA level. Results Withdrawal symptom score ( 12.27 ± 1. 19),H2S content(30. 25 ±8.82), CBS activity (72. 44 ±7. 46) and NR2B mRNA expression( 19. 47 ±0. 86) in medium dose NBP group rats were lower than withdrawal symptom score(14.09 ±2.21) ,H2S content(44. 50 ±6. 65) , CBS activity(79. 06 ±4. 57) and NR2B mRNA expression (29. 13 ±1.39) in experimental control group (P<0.05). Withdrawal symptom score(12. 18 ±1.08) ,H2S content(33.00 ±5.38) ,CBS activity(67. 81 ±9. 37) and NR2B mRNA expression(23. 12 ± 1. 86) in high dose NBP group rats were lower than experimental control group (P < 0. 05). Conclusion NBP can reduce withdrawal symptoms of alcohol dependence rats,may be related to decreased expression of H2S/CBS system, and NR2B mRNA expression.