β3肾上腺素能受体基因在肥胖大鼠神经肽Y Y5受体反义基因治疗中的作用

目的：探讨β3肾上腺素能受体基因在肥胖大鼠神经肽Y（NPY）Y5受体反义基因治疗中的作用。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、错义寡核苷酸或生理盐水，测定肥胖大鼠的腹腔内脂肪组织湿重与血脂，并采用RT-PCR技术检测腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平。结果：①高营养饮食诱导下肥胖模型大鼠的腹腔脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠；②经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠的腹腔脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低，腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平则显著高于肥胖对照大鼠。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著降低肥胖大鼠的体脂、血脂，其机制可能与腹膜后脂肪组织β3肾上腺素能受体基因的表达上调有关。     

应用神经肽YY5受体反义基因治疗肥胖大鼠高leptin血症效果的探讨

目的：探讨神经肽Y Y5（NPY Y5）受体反义基因治疗对肥胖大鼠高leptin血症的改善作用及其机制。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、正义、我寡核苷酸或生理盐水，观察大鼠腹膜后与生殖器周围脂肪组织湿重的变化，并采用ELISA双抗体心法测定血清leptin水平、放免法测定血清胰岛素水平。结果：（1）高营养饮食诱导的肥胖模型大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平及两部位脂肪组织湿重明显高于正常大鼠；（2）经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织湿重均明显降低，但生殖器周围脂肪组织湿重无明显变化；（3）大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织湿重间均存在一定的正相关关系。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著改善肥胖大鼠的高leptin血症，推测其机制可能与大鼠进食行为改变、腹膜后脂肪组织减少、血清胰岛素水平下降等因素有关。     

应用神经肽Y Y5受体反义基因治疗肥胖大鼠高Leplin血症效果的探讨

目的：探讨神经肽Y Y5（NPY Y5）受体反义基因治疗对肥胖大鼠高Leptin血症的改善作用及其机制。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、正义、错义寡核苷酸或生理盐水，观察大鼠腹膜后与生殖器周围脂肪组织温重的变化，并采用ELISA双抗体夹心法测定血清Leptin水平、放免法测定血清胰岛素水平。结果：①高营养饮食诱导的肥胖模型大鼠血清Leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪湿重明显高于正常大鼠；②经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠血清Leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织温重间均存在一定的正相关关系。结论：侧腔室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著改善肥胖大鼠的高Leptin血症，推测其机制可能与大鼠进食行为改变、腹膜后脂肪组织减少、血清胰岛素水平下降等因素有关。     

应用神经肽Y Y5受体反义基因治疗肥胖大鼠高Leptin血症效果的探讨

目的 :探讨神经肽YY5 (NPYY5 )受体反义基因治疗对肥胖大鼠高Leptin血症的改善作用及其机制。方法 :建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型 ,侧脑室插管后注射NPYY5受体反义、正义、错义寡核苷酸或生理盐水 ,观察大鼠腹膜后与生殖器周围脂肪组织温重的变化 ,并采用ELISA双抗体夹心法测定血清Leptin水平、放免法测定血清胰岛素水平。结果 :①高营养饮食诱导的肥胖模型大鼠血清Leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪湿重明显高于正常大鼠 ;②经NPYY5受体反义寡核苷酸干预后 ,肥胖大鼠血清Leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织温重均明显降低 ,但生殖器周围脂肪组织温重无明显变化 ;③大鼠血清Leption水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织温重间均存在一定的正相关关系。结论 :侧腔室注射NPYY5受体反义寡核苷酸可显著改善肥胖大鼠的高Leptin血症 ,推测其机制可能与大鼠进食行为改变、腹膜后脂肪组织减少、血清胰岛素水平下降等因素有关     

双侧海马注射神经肽Y Y2受体反义基因对大鼠学习记忆影响的初步探讨

目的：探讨神经肽YY2(NPY Y2)受体在大鼠学习记忆中的作用。方法：双侧海马插管，注射Y2受体的反义、错义寡核昔酸或生理盐水，采用跳台法记录训练期的错误次数(学习成绩)、记忆测试期的潜伏期和错误次数(记忆成绩)。结果：注射Y2受体反义寡核苷酸组大鼠训练期的错误次数较对照组无显著性差别，而记忆测试期的潜伏期较对照组显著缩短，错误次数显著增加，提示该组大鼠记忆能力受到显著损害。结论：NPY Y2受体参与了大鼠的记忆形成过程。     

神经肽Y-Y5受体反义基因治疗诱导大鼠脂肪细胞凋亡研究

目的：探讨神经肽Y-Y5受体反义基因治疗后正常SD大鼠减肥减重效应与外周白色脂肪细胞体积，数目变化的关系，方法：侧脑室插管，注射针对Y5受体编码起始区的反义，正义，错义寡聚脱氧核糖核酸及生理盐水，采用MPLAS-500多媒体彩色病理图分析系统计算平均脂肪细胞面积，基因组DNA提取物凝胶电泳检测脂肪细胞凋亡。RT-PCR分析凋亡相关基因Bcl-2,Bax表达的改变。结果：（1）Y5受体反义基因治疗后大鼠进食量与体重显降低，外周白色脂肪组织湿重与平均脂肪细胞面积明显减少；（2）脂肪组织基因组DNA提取物凝胶电泳出现凋亡特征性梯状条带；（3）凋亡相关基因Bcl-2表达下调，Bax表达上调。结论：平均脂肪细胞面积减小，脂肪细胞凋亡增加可能是Y5受体反义基因治疗减肥减重的重要原因。     

脂联素基因在肥胖易感大鼠与肥胖抗性大鼠脂肪组织中的表达差异

目的:探讨高脂高能量饮食诱导下肥胖易感(obesity-prone,OP)大鼠与肥胖抗性(obesity-resistance,OR)大鼠腹膜后脂肪组织中脂联素基因mRNA表达的差异。方法:18只雄性SD大鼠,以高脂高能量鼠料饲养2周后,按体重增值大小分组,增重最多6只为OP组,增重最少6只为OR组。OP、OR大鼠继续饲以高脂高能量鼠料4周后,观察各大鼠体重变化和腹膜后脂肪组织湿重,并采用RT-PCR技术检测脂肪组织中脂联素基因的mRNA表达水平。结果:①高脂高能量鼠料诱导下,OP组大鼠体重、腹膜后脂肪组织湿重均明显高于OR组(P<0.01);②OP组大鼠腹膜后脂肪组织中脂联素基因的mRNA表达水平显著低于OR组(P<0.05);③大鼠腹膜后脂肪组织湿重与脂联素基因mRNA的表达水平间存在显著的负相关关系(P<0.05)。结论:相同饮食条件下,个体发生肥胖的易感性是影响脂联素水平的重要因素。     

Resistin基因在肥胖易感大鼠与肥胖抗性大鼠脂肪组织中表达差异的研究

目的探讨高脂饮食诱导下肥胖易感(Obesity鄄prone,OP)大鼠与肥胖抗性(Obesity鄄resistance,OR)大鼠白色脂肪组织中Resistin基因mRNA表达的差异。方法25只雄性SD大鼠,以高脂高能量鼠料饲养2周后,按体重增值大小分组,增重最多9只为OP组,增重最少9只为OR组,余7只为正常对照组(C组),OP、OR大鼠继续饲以高脂高能量鼠料4周,对照组改饲标准鼠料。观察各大鼠体重变化、脂肪组织湿重、血脂、血糖、血清胰岛素等,并采用NorthernBlot技术分析脂肪组织中Resistin基因的mRNA表达水平。结果①高脂高能量鼠料诱导下,OP组大鼠体重、附睾周围及腹膜后脂肪组织湿重明显高于C组,OR组则显著低于C组,但各组间血脂、血糖、血清胰岛素水平并无显著差异(P>0.05);②OP组大鼠附睾周围和腹膜后脂肪组织中ResistinmRNA表达水平均显著高于C组与OR组,OR组则低于C组,且附睾周围脂肪组织中ResistinmRNA表达水平显著高于腹膜后脂肪组织。结论OP与OR大鼠外周脂肪组织存在Resistin基因mRNA表达的差异,其差异与大鼠发生肥胖的易感程度有关。     

高脂饮食诱导下肥胖易感大鼠与肥胖抗性大鼠间部分生理学指标差异的研究

目的：探讨高脂饮食诱导下肥胖易感(OP)大鼠肥胖抗性(OR)大鼠在体重、食量、Lee’s指数、脂肪湿重、血脂及脂肪组织脂蛋白脂酶(LPL)基因表达等方面的生理学差异。方法：48只SD大鼠，以高脂饲料饲养1周后，按体重增值从大到小百分排序，取第75百分位以上为OP组，第25百分位以下为OR组，继续高脂饲养4周；观察各大鼠体重变化、摄食量、Lee’s指数、脂肪湿重、血脂等，采用Northern Blot分析脂肪组织中LPL基因的mRNA表达水平。结果：①OP大鼠的体重增值、热能摄入、Lee’s指数及腹腔脂肪湿重均显著高于OR大鼠，但血脂水平两组间无差异；②高脂饲养1周、5周时OP大鼠体重增值分别是OR大鼠的6．54、4．25倍，热能摄入仅为OR大鼠的1．13、1．15倍；③OP大鼠脂肪组织中LPL基因的mRNA表达水平显著高于OR大鼠。结论：OP与OR大鼠间存在生理学差异，其原因除OP大鼠热能摄入较多因素外，0P大鼠体内较高的能量效能是其肥胖易感性较高的重要因素，而能量效能与脂肪组织LPL基因的表达水平可能存在密切关系。     

糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑神经肽Y mRNA的影响

目的：研究糖皮质激素对肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑中神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）mRNA表达的影响：方法：高脂饲料构建肥胖大鼠模型,肥胖大鼠和普通大鼠分别随机分为生理盐水组、小剂量组和大剂量组,分别连续20天腹腔注射生理盐水0．2ml／100g、琥珀酸氧化可的松5mg/kg和15mg／kg并观察其摄食变化,用实时荧光定量PCR方法,检测大鼠下丘脑中NPY mRNA的表达水平、结果：应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的摄食量低于盐水组（P〈0．05）;应用大剂量糖皮质激素后普通大鼠和肥胖大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组（P〈0．01）;应用小剂量糖皮质激素后普通大鼠的下丘脑中NPY mRNA的表达水平低于盐水组（P〈0．01）。结论：大剂量糖皮质激素使普通大鼠和肥胖大鼠食欲下降,抑制肥胖大鼠和普通大鼠NPY mRNA的表达;小剂量糖皮质激素抑制普通大鼠NPYmRNA的表达,NPY在食欲调节中起重要作用。     

肥胖患者大网膜脂肪组织中Leptin基因的表达及意义

目的 研究大网膜脂肪组织中Ｌｅｐｔｉｎ基因的表达及在肥胖和胰岛素抵抗发病机制中的作用。方法 选择肥胖患者（ＢＭＩ（３０ｋｇ／ｍ＾２）和正常人（ＢＭＩ〈２５ｋｇ／ｍ＾２）各１０例,抽提大网膜脂肪组织ＲＮＡ;用半定量ＲＴＰＣＲ方法研究肥胖合并胰岛素抵抗患者和正常人大网膜脂肪组织中Ｌｅｐｔｉｎ基因的表达。结果 实验组ＬｅｐｔｉｎｍＲＮＡ水平显著高于对照组（Ｐ〈０．０１）。结论 肥胖患者体内可能存在Ｌｅｐｔｉｎ抵抗。     

多烯磷脂酰胆碱对非酒精性脂肪肝大鼠脂肪组织相关基因表达的影响

目的 在脂肪组织基因表达水平上分析多烯磷脂酰胆碱对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型的干预效果及其作用机制.方法 以高脂饲料饲养Wistar大鼠诱发NAFLD并进行多烯磷脂酰胆碱干预,通过RT-qPCR方法 检测实验大鼠脂肪组织瘦素、肿瘤坏死因子α、脂联素、抵抗素和解偶联蛋白2的mRNA相对水平,并以t-检验进行数据统计分析.结果 干预组瘦素mRNA相对水平高于对照组(P>0.05),干预组肿瘤坏死因子αmRNA相对水平显著高于对照组(P<0.05),所有干预组样品的脂联素、抵抗素和解偶联蛋白2的mRNA均未被检测到.结论 多烯磷脂酰胆碱有助于增加瘦素基因的表达并适用于肥胖原因所致的NAFLD病例.     

葡萄胎组织中印迹基因H19 mRNA表达及意义

目的:探讨葡萄胎(HM)组织中印迹基因H19 mRNA表达情况,了解其与HM的关系。方法:实时荧光定量PCR检测36例完全性葡萄胎、25例部分性葡萄胎、21例早孕绒毛组织中H19 mRNA表达。结果:完全性葡萄胎和部分性葡萄胎组织中H19 mRNA表达水平[(0.16±0.14)和(0.19±0.18)]均明显低于早孕绒毛中H19 mRNA表达水平(1.28±1.95)(P=0.017,P=0.021)。结论:印迹基因H19与葡萄胎发生具有一定的相关性。     

脂肪组织的干细胞作为神经系统基因治疗载体的研究

目的观察大鼠脂肪组织源性基质细胞表达外源基因的能力和脑内移植后的分布，以获取基因治疗自体移植的载体细胞。方法腺病毒载体Ad5βgal介导法将LacZ转入培养的大鼠脂肪组织源性基质细胞。Hoechst33258标记细胞，立体定向移植到大鼠的纹状体，脑组织切片，在荧光显微镜下检查存活的细胞。结果脂肪组织源性基质细胞能够在体内和体外稳定表达LacZ基因，细胞移植到脑内可以移行，移植细胞没有过渡增生和肿瘤形成，对宿主脑组织无破坏。结论脂肪组织源性基质细胞可以稳定表达夕J源基因，与脑组织有很好的相容性，是中枢神经系统基因治疗的良好载体。     

p63基因蛋白在喉癌中的表达及意义

目的 探讨p63蛋白在喉鳞癌发生、发展中的作用与意义。方法 采用免疫组化S-P法检测50例喉鳞癌组织中p63、p53的表达。结果 (1)50例喉癌组织中有46例p63阳性表达,阳性率92％;42例p53阳性表达,阳性率84％。(2)在喉癌组织中,p63与临床分期相关(r=-0.338,P<0.05),p63表达与p53表达之间的关系无统计学意义。结论 (1)p63高表达的肿瘤恶性度相对较低。(2)p63与喉鳞状细胞癌的细胞分化发展关系密切。(3)p63对鳞状细胞癌具有特异性标记作用。     

心外膜脂肪与心周脂肪对冠状动脉粥样硬化诊断价值的对照研究

目的分别分析心外膜脂肪(epicardial adipose tissue,EAT)、心周脂肪(Pericardial adipose tissue,PAT)与冠状动脉粥样硬化之间的关系,比较其优劣。方法对104例受检者进行CTA检查,在钙化积分图像基础上测量心外膜脂肪和心周脂肪体积,分析两者之间的关系及各自与冠状动脉粥样硬化间的关系。结果 EAT体积与PAT体积具有显著相关性(r=0.877,P0.01);两者与冠状动脉粥样硬化Gensini积分间均具有相关性(P0.05);2支、3支冠脉病变的EAT、PAT体积大于单支病变(P0.05),2支、3支之间差异无统计学意义(P0.05);ROC曲线提示两者对冠状动脉粥样硬化的诊断价值相仿。结论 EAT体积与PAT体积显著相关,对冠状动脉粥样硬化均具有一定的诊断价值。     

PTEN基因蛋白在胆囊癌组织中表达的研究

目的 :探讨抑癌基因PTEN蛋白在胆囊癌组织中的表达情况及其临床病理意义。方法 :应用免疫组化对 2 8例胆囊腺癌 ,4例胆囊鳞癌及其相应癌旁组织中PTEN蛋白进行检测 ,并结合患者的临床病理资料进行分析。结果 :PTEN蛋白在 32例癌旁组织中全都呈阳性表达 ,而癌组织中PTEN阳性表达率仅 34.4 %。胆囊癌组织中PTEN蛋白阳性表达与患者性别、年龄及组织类型无明显相关性 ,但与组织分化程度明显相关。结论 :PTEN蛋白在胆囊癌组织中阳性表达率较低 ,说明该基因失活可能在胆囊癌发生发展中起重要作用。PTEN阳性表达对胆囊癌患者的预后有一定意义