基因芯片研究糖尿病肾病大鼠肾皮质基因表达

目的：研究正常与糖尿病肾病大鼠肾脏的基因表达谱,大规模分析糖尿病时基因表达水平的变化。方法：（1）实验大鼠分为两组,一组为正常对照组,另一组为糖尿病组;（2）从肾皮质中抽提mRNA,经反转录分别用Cy3,Cy5荧光标记,获得两组动物来源的cDNA探针;（3）cDNA探针与Biodoor基因表达谱芯片杂交,结果由扫描仪扫描并用软件进行分析统计。结果（1）18．4％的基因表达谱发生明显的变化,其中12条基因在糖尿病时表达量明显下降,而323条基因在糖尿 时表达量明显上升;（2）已报道基因占了差异表达基因总数的18．8％左右,大多数已报道基因在糖尿病时的表达模式与其他作者的报道类似。结论：利用基因芯片技术结合实验动物模型能大规模,高通是地研究糖尿病的基因表达谱,初步筛选出选出疾病相关基因,对进一步阐明疾病在基因水平上的发病机制有十分重要的作用。     

健肾颗粒剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织中ET-1mRNA表达及肾功能的影响

目的观察中药健肾颗粒剂对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏组织内皮素-1(ET-1)mRNA表达及肾功能的影响。方法雄性Wistar大鼠40只,采用5/6肾切除加尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制大鼠DN动物模型,并随机分为健肾颗粒剂、苯那普利、保肾康、病理对照4组,每组10只,另设正常对照组10只。采用生化法检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN);肾脏组织标本,经染色后用光学及电子显微镜观察肾脏组织病理结构;用PCR方法检测肾脏组织中ET-1mRNA。结果健肾颗粒剂组大鼠SCr、BUN水平低于苯那普利、保肾康及病理对照组(P<0.05或P<0.01);健肾颗粒剂组肾脏组织中ET-1mRNA表达明显低于其他3组(P<0.05或P<0.01)。光镜下肾脏组织病理结构示健肾颗粒剂组,肾小球体积,球囊粘连程度,肾小球系膜细胞增生程度,系膜基质等情况均较其他3组有明显改善;而电镜下肾小球上皮细胞增生、肿胀、足突融合、低矮、扁平、以及假绒毛样变,系膜细胞增生,基质增生,毛细血管扩张、细胞堆积等病理变化也均较其他3组有明显减轻。健肾颗粒剂降低DN大鼠血糖、尿蛋白及血脂的作用明显优于苯那普利、保肾康及病理对照组(P<0.05...     

氧化低密度脂蛋白内皮受体-1在糖尿病大鼠肾皮质的基因表达

目的　采用RT PCR法反转录链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病 (DM )大鼠肾皮质中氧化低密度脂蛋白内皮受体 (LOX 1)基因 ,并以半定量法测定其mRNA含量 ,探讨其在糖尿病肾病 (DN)的发生和发展中可能参与的机制。方法　选择 18只成年SD大鼠 ,注射STZ制备DM模型 ,14只为DM组 ,4只注射胰岛素作为治疗对照组 (TC组 ) ,另选 4只作为正常对照组 (NC组 )。每 4周测定尿白蛋白定量 ,14周取肾皮质匀浆后采用RT PCR检测其中LOX 1mRNA的表达 ,并采用半定量法测定其含量变化。结果　DM组肾皮质内LOX 1mRNA含量为 5 7.82± 9.37,显著高于NC组 (4 1.0 5± 1.90 ) ,与TC组 (6 0 .2 2± 9.84 )的差异无显著性 ;DM组的LOX 1mRNA的相对含量与尿白蛋白定量成正相关 (r =0 .85 0 6 ,P <0 .0 1)。结论　DM大鼠肾皮质内LOX 1的mRNA表达较正常对照组显著上调。且与尿白蛋白排泄存在相关性。提示LOX 1参与DN的发生及发展。     

糖复康对早期糖尿病肾病大鼠肾皮质细胞间黏附因子-1的影响

[目的]探讨中药糖复康下调早期糖尿病肾病大鼠肾皮质细胞间黏附因子-1(ICAM-1)表达。[方法]以中药糖复康3.5kg/d、7.5kg/d等不同剂量灌喂大鼠,第12周后以代谢笼留取各组大鼠12h时尿后处死,心脏取血并取双肾固定后备检。[结果]中药糖复康高剂量组降低了糖尿病大鼠肾皮质ICAM-1水平(P<0.001)。[结论]糖复康可显著改善糖尿病时趋化、黏附因素等对糖尿病肾病(DN)发生发展的影响。     

Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾结缔组织生长因子的影响

目的:探讨Rg1、Rb1对糖尿病肾病(DN)大鼠肾结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠75只,按体质量随机分为正常组10只,模型组65只。模型组大鼠按55 mg/kg体质量腹腔一次性注射链脲佐菌素,72 h后血糖≥16.7 mmol/L,尿糖≥4"+"者为糖尿病造模成功。将造模成功的大鼠按血糖高低随机分为模型组、厄贝沙坦组、Rg1大剂量组、Rg1小剂量组和Rb1组。用药12周,处死大鼠无菌取肾,行肾组织HE、Mallory染色,观察各生化指标和肾组织病理形态学改变,采用免疫组化方法分析肾组织CTGF蛋白的表达情况。结果:模型组肾组织表现为DN病理改变;正常组及用药组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆有轻度CTGF表达,模型组CTGF则呈强阳性表达,Rg1、Rb1组CTGF表达较模型组明显减少(P<0.05)。结论:Rg1、Rb1可通过对肾组织CTGF蛋白表达下调而发挥治疗和预防糖尿病肾病的作用。     

海昆肾喜对糖尿病肾病大鼠肾保护及对肾MCP-1蛋白和mRNA表达的影响

目的:探讨海昆肾喜对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白(MCP)-1蛋白及mRNA表达的影响.方法:60只大鼠随机分为2组,正常组10只,造模组50只.造模组采用空腹一次性腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病模型.将造模成功的大鼠按血糖高低随机分组,分为模型组、厄贝沙坦组、海昆小剂量组和海昆大剂量组,给药12周.第4、8、12周末收集大鼠24小时尿量及检测尿蛋白量.12周末处死大鼠,取血并分离血清检测Scr、BUN和TG等,取肾后固定包埋切片,采用HE染色,Mallory染色及六胺银染色观察肾组织病理改变,并应用免疫组化检测肾组织MCP-1蛋白的表达及用原位杂交的方法检测肾组织MCP-1mRNA的表达.结果:海昆肾喜能够降低糖尿病大鼠的蛋白尿,增加体重,降低Scr和BUN,改善肾功能,调节TG,改善脂代谢紊乱,并且能够降低糖尿病大鼠肾小管上皮细胞、肾间质细胞内的MCP-1及mRNA在细胞浆内的表达(P＜0.01).结论:海昆肾喜可能抑制MCP-1蛋白及mRNA的过度表达,进而减缓DN的病程进展.     

糖尿病大鼠肾脏内皮素-1基因表达研究

内皮素（ＥＴ）包括ＥＴ１、ＥＴ２、ＥＴ３三种异构体。其中ＥＴ１为迄今所知体内最强的缩血管多肽。人体内，首先由前内皮素原（ｐｒｅｐｒｏＥＴ）经前内皮素剪切成３９个残基组成的大内皮素，最后再经内皮素转化酶作用形成活性形式的内皮素［１～４］。已有研究表明，ＥＴ１在糖尿病肾病的发生和发展中起着重要的作用。本研究检测了１２周链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾皮质ｐｒｅｐｒｏＥＴ１的ｍＲＮＡ水平，并探讨其意义。材料与方法一、动物模型的建立选择体重２００～２５０ｇ健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只，测血糖正…     

健肾颗粒剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织TGF-β1、ET-1mRNA及肾功能的影响

[目的]观察中药健肾颗粒剂对DN大鼠肾脏组织中TGF-β1、ET-1mRNA及肾功能影响。[方法]采用5/6肾切除加尾静脉注射STZ的方法复制大鼠DN动物模型,并随机分成健肾颗粒剂、苯拉普利、保肾康、病理对照及正常对照组,采用生化法检测肾功能,PCR方法检测肾脏组织中TGF-β1、ET-1mRNA,组织病理学方法观察肾脏组织结构。[结果]健肾颗粒剂组大鼠血中Cr、BUN水平低于苯拉普利、保肾康及病理对照组(P0.05或P0.01);健肾颗粒剂组肾脏组织中TGF-β1、ET-1mRNA表达明显低于其他三组(P0.05或P0.01),肾脏组织病理结构也较其他三组有明显改善;健肾颗粒剂降低DN大鼠血糖、尿蛋白及血脂的作用明显优于苯拉普利、保肾康及病理对照组(P0.05或P0.01)。[结论]健肾颗粒剂可明显改善DN大鼠肾功能,并有降血糖、调整血脂,下调DN大鼠肾脏TGF-β1、ET-1mRNA的作用。     

电针对局灶性脑缺血大鼠NO、NOS和ET-1的影响

目的：研究电针对局灶性脑缺血大鼠缺血区脑组织一氧化氮（NO）、NO合成酶（NOS）和内皮素（ET－1）的影响。方法：凝闭大鼠一侧大脑中动脉致局灶性脑缺血模型，选择缺血区脑组织NO、NOS和ET为指标，观察电针督脉经“大椎”、“百会”2穴对其影响。结果：缺血组在缺血60min后，NO、ET－1含量和NOS活性均明显升高；缺血加电针组，给予电针“大椎”、“百会”2穴治疗10min后，NO、ET－1含量和NOS活性均显著下降。结论：提示电针可抑制脑缺血后脑内NO、ET－1含量和NOS活性，从而保护脑缺血后继发神经元的损伤。     

2型糖尿病大鼠肾脏活性氧物质与NO关系的探讨

目的研究糖尿病大鼠肾脏活性氧物质与一氧化氮(NO)系统的关系。方法制备高脂高糖加小剂量链脲佐菌素(35mg/kg)诱导的2型糖尿病大鼠模型。将大鼠分为正常对照组10只和糖尿病组20只;观察糖尿病大鼠肾脏氧化应激状态及NO系统的表达,肾功能改变及抗氧化指标与NO的相关性分析。结果糖尿病大鼠成型12周时SOD,SOD/MDA降低,MDA升高,与正常对照组比较差异有统计学意义;NO、总NOS、iNOS、cNOS均较正常对照组明显升高。肾脏肥大指数、尿微量清蛋白、基质比、肾小球截面积与SOD/MDA呈负相关,与NO、总NOS呈正相关;SOD/MDA与总NOS、NO之间存在负相关。结论氧化应激,NO均参与糖尿病肾病的发生、发展,它们之间的平衡可能是抗氧化治疗在糖尿病肾病中的关键。     

2型糖尿病肾病患者内皮素-1及一氧化氮检测分析

目的探讨内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)在糖尿病肾病(DN)发病机制中的作用。方法用RIA测定70例2型DM患者和24例正常对照组血浆ET-1、尿白蛋白(Alb),用硝酸还原酶法测定其血清NO。结果随DN的发展,血浆ET-1水平逐渐增高,血清NO水平逐渐降低。在糖尿病(DM)患者中血浆ET-1与血清NO成负相关(r=-0·47,P<0·001)。结论2型DM患者血浆ET-1水平与DN的进展密切相关。血清NO水平与早期肾小球高滤过的形成有关。     

肾脏缺血再灌注后内皮素-1、一氧化氮改变

目的：探讨再灌注后内皮细胞自分泌、旁分泌改变对肾脏血液动力学及肾功能的影响。方法：采用放免及生化方法测定内皮素、一氧化氮及肾功能改变，多谱勒血流计测定肾皮质血流变化。结果：缺血再灌注后肾组织及血液中ET－1水平升高，一氧化氮水平降低，肾皮质ET－1／NO水平与其血流量变化及血肌酐水平显著相关。结论：再灌注后肾血管内皮细胞的自分泌、旁分泌作用参与再灌注后肾脏血液动力学改变，在急性缺血性肾衰的发病机制中有重要作用。     

大剂量顺铂所致大鼠急性肾损害过程中内源性血管活性物质的动态变化及其意义

[目的]观察内源性血管活性物质内皮素（ET-1）和一氧化氮（NO）在大剂量顺铂（DDP）所致大鼠急性肾损害过程中的动态变化及其意义。[方法]SD大鼠24只,雌雄各半,依体重随机分组,DDP用药组18只和NS对照组6只。10 mg/kg DDP单次腹腔内注射,等量生理盐水对照。DDP用药前和DDP用药后3、6、48 h分别取大鼠6只,称重后内眦静脉取血,放射免疫法测定血浆ET-1水平,比色法测定血浆NO含量,统计学分析。[结果]大剂量DDP用药后3 h大鼠血ET-1升至（213.68±28.3）ng/mL,与对照组大鼠（157.45±27.7）ng/mL比较差异具有显著性意义（P〈0.01）。用药后6 h血浆ET-1较前稍下降,随后持续在较高水平,与对照组比较差异仍有显著性意义（P〈0.05）。大剂量DDP用药后3 h,大鼠血浆NO含量开始升高,用药后6 h升至（166.67±84.62）μmol/L,与对照组大鼠（32.85±12.98）μmol/L比较,差异具显著性意义（P〈0.01）;用药后48 h血NO较前稍微下降,但与对照组比较差异仍具有显著性意义（P〈0.01）。[结论]血浆ET-1和NO浓度的变化与大剂量顺铂所致急性肾功能衰竭有关,二者可能在顺铂所致肾毒性损伤早期的发病机制中发挥重要作用。     

糖尿病大鼠肾皮质内皮素基因表达及一氧化氮含量变化的研究

目的观察一氧化氮和血管内皮素这一对拮抗因子在糖尿病肾病中的作用。方法用逆转录半定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定12只STZ模型鼠(糖尿病组)12周时及8只对照组鼠的肾皮质内皮素的基因表达及一氧化氮含量。结果糖尿病组鼠肾皮质血管内皮素较正常对照组明显升高(P＜0.01)，而其一氧化氮含量却低于对照组(P＜0.05)。结论证实在糖尿病后期血管内皮素生成增加而一氧化氮合成受阻，加剧了糖尿病肾脏病变的进展。     

内皮素-1反义脱氧寡核苷酸对糖尿病肾病大鼠肾组织形态学的影响

目的：研究内皮素-1反义脱氧寡核苷酸（ET-1AS—ODN）对链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病大鼠肾组织形态学的保护作用及其机制．方法：一次性腹腔注射STZ（60mg／kg）,建立大鼠糖尿病模型,观察ET-1AS-ODN预防性给药对大鼠肾组织形态结构的保护作用．结果：ET-1AS—ODN可明显减轻糖尿病大鼠肾肥大指数,改善肾组织形态学损伤．结论：内皮素-1反义寡核苷酸可减轻STZ诱导的糖尿病肾病大鼠的肾损伤,对肾组织具有保护作用．其机制与减少内源性内皮素的产生有关．     

内皮素-1反义脱氧寡核苷酸对糖尿病肾病大鼠肾组织超微结构的影响

目的　研究内皮素-1反义脱氧寡核苷酸(ET-1AS-ODN)对链脲佐菌素（streptozotocin , STZ）诱导的糖尿病肾病大鼠肾组织超微结构的保护作用及其机制。方法　一次性腹腔注射STZ(60mg•kg-1 ) ,建立大鼠糖尿病肾病模型,并观察ET-1AS-ODN预防性给药对大鼠肾组织超微结构的保护作用。结果　实验动物饲养5周后,与生理盐水对照组相比, 糖尿病肾病模型组大鼠一般状况差,体重明显降低（P < 0.01）,肾损伤明显;与DM组比较,ET-1AS-ODN各组大鼠精神状态有所改善、电镜下肾组织超微结构损伤减轻。结论 内皮素-1反义寡核苷酸可减轻STZ诱导的糖尿病肾病大鼠的肾损伤,对肾组织超微结构具有保护作用。     

川芎素对肾性高血压并慢性肾功能不全患者血浆ET-1和NO的影响

目的 :观察轻、中度肾性高血压合并慢性肾功能不全患者血浆ET 1和NO水平变化及川芎素对其干预作用。方法 :轻、中度肾性高血压并慢性肾功能不全患者 6 0例分为A与B组 ,A组静滴川芎素 30 0mg ,每日 1次 ,加对症治疗 ;B组采用对症治疗 ,疗程均为 2周。选择 2 0例健康体检者作为对照组 (C组 )。用放射免疫方法测定血浆ET 1浓度和生化比浊法测定血浆NO水平。结果 :A ,B组血浆ET 1浓度明显高于C组 (P <0 .0 1) ,而血浆NO浓度明显低于C组 (P <0 .0 1)。A与B两组治疗前、后血浆ET 1,NO ,BUN ,Scr,尿蛋白定量比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。ET 1与血压成正相关 (γ =0 .5 2 9P <0 .0 1) ,而NO与血压成负相关 (γ =- 0 .345 ,P <0 .0 1)。结论 :轻、中度肾性高血压并慢性肾功能不全患者血浆ET 1浓度高于正常人 ,血浆NO浓度低于正常人。川芎素具有调节患者血浆ET 1与NO浓度 ,减少尿蛋白排泄 ,改善肾功能作用     

ET-1受体拮抗剂、NO供体联合输注防治急性缺血性肾衰的实验研究

目的 观察ET-1受体拮抗剂、NO供体联合输注对实验性急性缺血性肾衰的防治作用。方法 大鼠急性缺血性肾衰模型,于再灌注同时输注ET-1受体拮抗剂、NO供体,观察肾皮质血流、肾功能、肾脏病理改变。结果 ET-1受体拮抗剂、NO供体联合输注可显著改善缺血再灌注后的肾皮质缺血,减轻肾功能及组织学损害。结论 联合使用ET-1受体拮抗剂、NO供体可通过改善肾血流减轻急性缺血性肾衰后的肾功能损害。     

牛磺酸对糖尿病大鼠血浆、肾脏内皮素和一氧化氮水平的调节作用

目的：观察牛磺酸对糖尿病大鼠血浆、肾脏内皮素（ Ｅ Ｔ）和一氧化氮（ Ｎ Ｏ）水平的调节作用。方法：链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠接受牛磺酸（３００ ｍ ｇ／ｋｇ）处理 ３ 周后,测定血浆 Ｅ Ｔ、 Ｎ Ｏ、尿 Ｅ Ｔ 和肾皮质 Ｎ Ｏ 水平。结果：链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血浆 Ｅ Ｔ、肾皮质 Ｎ Ｏ 水平和尿 Ｅ Ｔ 排泄量均较对照组明显升高,而血浆 Ｎ Ｏ 水平明显降低;牛磺酸处理的糖尿病大鼠上述参数均有不同程度逆转。结论：牛磺酸可影响糖尿病状态下 Ｅ Ｔ 和 Ｎ Ｏ 的合成和／或释放。