金纳米颗粒基因探针同步检测HBV和HCV的初步研究

目的 建立一种简单、快速同时检测HBV DNA和HCV RNA的诊断方法.方法 利用PCR方法扩增HBsAg阳性合并抗HCV阳性的患者血清中HBV DNA和HCV cDNA并提取.制备Au纳米颗粒HBV DNA、HCV cDNA基因探针.在含有Au纳米颗粒HBV DNA、HCV cDNA基因探针的液相检测体系中加入HBV DNA和(或)HCV cDNA,透射电镜下观察.结果 PCR(可扩增HBV DNA和HCV cDNA.出现预期的431bp和323bp特异性条带.使用Au纳米颗粒基因探针通过透射电镜可同步检出乙、丙型肝炎合并感染患者血清中提取的HBV DNA和HCV RNA.结论 通过透射电镜,使用Au纳米颗粒基因探针可同步检出乙、丙型肝炎合并感染患者血清中的HBV DNA和HCV cDNA,甚至可达到无需PCR水平,此方法具有敏感性高、特异性好的特点.     

HBV重叠HCV感染与其传染性的关系

为研究乙型肝炎病毒(HBV)重叠丙型肝炎病毒(HCV)感染与其传染性的关系,我们对146例HBsAg阳性者进行了HBV和HCV血清学标志的检测,现将结果报告如下。一、对象与方法 146例均为我院住院病人,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBe及抗-HCV.试剂盒均为兰州标佳生物制品厂生产,按所附说明书进行检测和判定结果。二、结果 146例的检测结果,HBV血清学标志的组合有9种模式,共检出重叠HCV感染者4例,详见附表。     

原发性肝癌患者HBV,HCV感染情况分析

原发性肝癌患者ＨＢＶ、ＨＣＶ感染情况分析广西肿瘤防治研究所陆一平乙型肝炎病毒感染与原发性肝癌关系非常密切已众所周知，丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染与肝病关系的研究引起国内、外学者的关注（１）。国外研究表明，丙型肝炎极易转成慢性，与肝硬化和肝细胞癌关系密切...     

医护人员HBV和HCV院内感染

院内感染是当代临床医学、流行病学和卫生学的重要课题 ,是医疗实践的一大障碍 ,院内感染不仅限于病人 ,对医护人员的健康威胁亦很大。尤其是与患者血液及分泌物接触较多的科室更为严重。近年来国内已有丙型肝炎在一定范围内流行 ,故研究ＨＣＶ在医院工作人员中的感染极为重要。为了提高医护人员的健康水平 ,保证医疗质量和各项指标的完成 ,我们对哈尔滨市 5家综合性医院 10 0 2名职工体检的ＨＢＶ和ＨＣＶ感染情况进行了调查 ,凡有ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ、抗ＨＢｅ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｃ ＩｇＭ中一项阳性者为乙肝病毒感染者 ,抗 -ＨＣＶ阳…     

肝炎肝硬化患者血清病原学类型及HCV与HBV重叠感染临床意义

肝炎肝硬化患者血清病原学类型及ＨＣＶ与ＨＢＶ重叠感染临床意义常州市第三人民医院薛焕俊，白敬羽，葛其童，孙启源，查雁生，苏瑞福关键词肝炎；肝硬变；ＨＣＶ；ＨＢＶ；重叠感染中图法分类Ｒ５１２．６肝炎肝硬化多由ＨＢＶ引起，现已对ＨＣＶ引起的肝硬化引起了人们...     

Detection of 73 Kinds of HLA-DRB Alleles by 29 Kinds of Probes

Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆ７３ＫｉｎｄｓｏｆＨＬＡ－ＤＲＢＡｌｌｅｌｅｓｂｙ２９ＫｉｎｄｓｏｆＰｒｏｂｅｓＫｅＢｉｎｇｓｈｅｎ；（克丙申），ＳｈａｎｇＪｉｄｏｎｇ；（尚继栋），ｅｔａｌ．（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ＪｉｎａｎＭｉｌｉｔ...     

150例HBV感染者HCV标志的检测分析

探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染状况及对肝病的影响。方法对１５０例ＨＢＶ感染者分别用ＥＬＩＳＡ法和ＲＴ－ＰＣＲ法检测抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果ＨＢＶ／ＨＣＶ双重感染占１４．６７％；慢性肝炎、肝硬化的双重感染明显高于急性肝炎和病毒携带者；双重感染对ＨＢＶ的复制无明显干扰。结论ＨＢＶ感染者中的ＨＣＶ感染率较高；ＨＣＶ与ＨＢＶ有协同致病作用；ＨＣＶ感染对ＨＢＶ的复制无明显影响；ＨＣＶ与ＨＢＶ主要经血液和血制品传播     

HIV与HBV/HCV共感染的临床研究进展

人类免疫缺陷病毒（HIV）,乙型肝炎病毒（HBV）及丙型肝炎病毒（HCV）具有相似的传播途径,均可通过血液（包括输血和输血制品）、性接触（包括同性接触和异性接触）、母婴垂直及静脉注射吸毒等途径传播.所以,HIV合并HBV/HCV感染比较常见,引起了国内外研究人员的重视,近年来的相关研究取得了一些成果.该文就目前HIV合并HBV/HCV感染的流行病学、临床治疗等方面的研究进展予以综述.     

少年儿童肝炎72例血清抗—HCV检测及HCV、HBV重叠感染的临床意义

对７２例少年儿童各型肝炎进行丙型肝炎病毒抗体（抗—ＨＣＶ）和乙型肝炎病毒标志（ＨＢＶＭ）检测，发现抗—ＨＣＶ阳性率为４０．３％，ＨＢＶＭ阳性率为６１．１％，输血后肝炎抗—ＨＣＶ阳性率（６６．６％）高于非输血后肝炎者（３７．８％）。ＨＣＶ、ＨＢＶ重叠感染率分别为：ＡＨ５．８％，ＣＰＨ２７．２％、ＣＡＨ６８．７％，各组差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。提示本地少年儿童肝炎仍以乙型肝炎为主，但ＨＣＶ感染不容忽视；输血是ＨＣＶ感染的主要途径；ＨＣＶ、ＨＢＶ重叠感染易使病情慢性化和重症化。     

各类肝病患者HCV与HBV重叠感染的临床研究

本文采用第二代抗-HCV ELISA及RT—PCR法对275例HBsAg阳性的各类肝病患者血清进行了抗-HCV、HCV—RNA检测。结果发现:急性肝炎、慢活肝、慢迁肝、肝硬化、慢重肝及肝细胞癌患者HCV标志物阳性率分别为10.8％、14.1％、17.1％、22.8％、69.2％及22.7％,平均阳性率18.5％。由HCV与HBV重叠感染患者肝功能损害更严重,HCV、HBV重叠感染所致的重型肝炎预后较差。未发现HCV感染对HBV复制的阻遏作用。     

HCV与HBV共感染影响血清HBV核酸与表面抗原水平

分析和评估HCV与HBV共感染对HBV临床指征的影响。采集152例有静脉吸毒史HBV感染者血浆,其中HBV/HCV共感染组52例,HBV单感染组100例。检测分析包括ALT和AST、HBV表面抗原(HBsAg)、e抗原、e抗体、HBV DNA及anti-HCV IgG与HCV RNA。结果显示,两组样本的ALT和AST水平无显著差异(P=0.097, P=0.184);HBV/HCV共感染组HBsAg水平显著低于HBV单感染组HBsAg水平(P=0.020);共感染组HBV DNA阳性率显著低于HBV单感染组HBV DNA阳性率(P=0.004),且共感染组中HBV DNA载量也显著低于HBV单感染组HBV DNA载量(P=0.031)。进一步分析发现:在HBV单感染患者中的HBV DNA和HBsAg具有良好的正相关关系(r=0.752, P<0.001),但在HBV/HCV共感染患者中相关性减弱(r=0.387, P=0.042)。本研究显示HCV共感染可能与HBV存在竞争关系,从而影响HBV病毒复制水平及表面抗原分泌。     

慢性HBV和HCV合并感染患者肝损害的血清学改变

目的了解乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)合并感染的患者肝损害的血清学改变特点。方法收集225例慢性肝病(包括慢性乙型肝炎,慢性丙型肝炎,乙、丙肝病毒合并感染引起慢性肝炎或肝硬化,肝炎后肝硬化)患者的肝穿病理标本;所有病例均常规检测肝功能、血清HBVDNA、HBV血清标志物、血清HCVRNA,抗-HCV。所有肝活检标本均用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,做苏木素-伊红染色,进行肝炎分级分期,HBsAg、HBcAg免疫组化,HBVDNA、HCVRNA原位杂交检测。结果①重度慢性肝炎患者:HBV/HCV合并感染的患者(B加C组)谷-丙转氨酶(ALT)、谷-草转氨酶(AST)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)水平与HCV单独感染(C组)患者相比差异无显著性(P>0.05),而比HBV单独感染的患者(B组)低(P<0.05)。②非重度慢性肝炎患者:三组的血清学改变差异无显著性(P>0.05)。③C组与B加C组患者的发病年龄相似(P>0.05),但明显大于B组患者(P<0.01)。④单独感染组发病的病程长短差异无显著性(P>0.05),但比合并感染组长,与单纯感染组相比,合并感染组发展为重肝的时间要短(P<0.01)。结论在重度慢性肝炎的患者中,肝功能损害的血清学指标(AST、ALT、TB、DB)不能很好地反映肝内损害严重度。与单纯感染组相比,HBV与HCV合并感染组发展为重度肝炎的时间要短。     

检测乙、丙型肝炎病毒基因芯片的制备

目的：探讨研制检测乙型和丙型肝炎病毒的基因芯片。方法：以HBV、HCV高度保守的基因片段为探针,同时用没有同源性的植物基因片段为内参照基因,制备成“乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片”。检测时抽提患者血清中的病毒核酸,进行RT－PCR扩增及荧光标记,然后与双检基因芯片杂交,结交结果用ScanArray3000扫描仪扫描。结果：双检基因芯片的内参照结果能做到绝对阳性和绝对阴性,同时对不同血清（正常人血清,乙肝E抗原阳性血清,丙肝RNA阳性血清,乙肝、丙肝阳性混合血清）能有效检测区分。结论：本研究成功地制作了乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片,可望使用于临床。     

原发性肝癌患者乙型及丙型肝炎病毒感染的检测

目的　调查原发性肝癌患者乙型及丙型肝炎病毒感染情况。　方法　采用免疫组织化学 SP法检测15 7例原发性肝癌患者乙型肝炎病毒 (HBV)及丙型肝炎病毒 (HCV)感染情况 ,每例患者均有血清学检测资料 ,另取 30例良性肝病组织作对照 ,所有数据用卡方检验。　结果　 15 7例原发性肝癌患者中 HBV感染阳性率为31.8% (5 0 / 15 7) ,HCV感染阳性率为 5 1.0 % (80 / 15 7) ,其中 10 7例原发性肝细胞癌 HBV、HCV感染阳性率分别为39.3% (42 / 10 7) ,4 5 .8% (49/ 10 7) ,5 0例胆管细胞癌 HBV、 HCV感染阳性率分别为 16 .0 % (8/ 5 0 ) ,6 2 .0 %(31/ 5 0 ) ,原发性肝细胞癌、胆管细胞癌 HBV、HCV重叠感染率分别为 2 7.1% (2 9/ 10 7) ,14 .0 % (7/ 5 0 ) ,良性肝病组HBV、HCV感染阳性率分别为 16 .7% (5 / 30 ) ,30 .0 % (9/ 30 )。原发性肝细胞癌 HBV感染、胆管细胞癌 HCV感染率高于良性肝病组 ,差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。原发性肝细胞癌 HBV、HCV血清学检测阳性率分别为 87.8%(94 / 10 7) ,13.1% (14 / 10 7) ,胆管细胞癌 HBV、HCV血清学检测阳性率分别为 6 8.0 % (34/ 5 0 ) ,16 .0 % (8/ 5 0 )。　结论　原发性肝癌与 HBV、HCV的感染有密切关系     

The detection of HBV DNA with gold nanoparticle gene probes

Objective:Gold nanoparticle Hepatitis B virus (HBV) DNA probes were prepared, and their application for HBV DNA measurement was studied. Methods:Alkanethiol modified oligonucleotide was bound with self-made Au nanoparticles to form nanoparticle HBV DNA gene probes, through covalent binding of Au-S. By using a fluorescence-based method, the number of thiol-derivatized, single-stranded oligonucleotides and their hybridization efficiency with complementary oligonucleotides in solution was determined. With the aid of Au nanoparticle-supported mercapto-modified oligonucleotides serving as detection probes, and oligonucleotides immobilized on a nylon membrane surface acting as capturing probes,HBV DNA was detected visually by sandwich hybridization based on highly sensitive aggregation and silver staining. The modified nanoparticle HBV DNA gene probes were also used to detect the HBV DNA extracted from serum in patients with hepatitis B. Results:Compared with bare Au nanoparticles, oligonucleotide modified nanoparticles had a higher stability in NaCl solution or under high temperature environment and the absorbance peak of modified Au nanoparticles shifted from 520nm to 524nm. For Au nanoparticles, the maximal oligonucleotide surface coverage of hexaethiol 30-mer oligonucleotide was (132 ± 10) oligonucleotides per nanoparticle, and the percentage of hybridization strands on nanoparticles was (22 ± 3% ). Based on a two-probe sandwich hybridization/nanoparticle amplification/silver staining enhancement method, Au nanoparticle gene probes could detect as low as 10-11 mol/L composite HBV DNA molecules on a nylon membrane and the PCR products of HBV DNA visually. As made evident by transmission electron microscopy, the nanoparticles assembled into large network aggregates when nanoparticle HBV DNA gene probes were applied to detect HBV DNA molecules in liquid. Conclusion:Our results showed that successfully prepared Au nanoparticle HBV DNA gene probes could be used to detect HBV DNA directly. The detection-visuallized method has many advantages, including high sensitivity,simple operation and low cost. This technique has potential applications in many fields, especially in multi-gene detection chips.     

丙型肝炎病毒核心抗原在HBV/HCV合并感染者血清中的检测状况及影响因素分析

 【目的】 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCVcAg)在乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)合并感染者血清中的检出状况,并分析其影响因素。【方法】检测88例慢性丙型肝炎和62例HBV/HCV合并感染患者血清HCVcAg和HCV RNA,对后者血清进行HBV DNA、HBeAg检测,分析HCVcAg检出率与HBeAg、HBV DNA定量检测关系。【结果】 88例慢性丙型肝炎和62例HBV/HCV合并感染者血清HCVcAg的检出率分别是72.7%(64/88)和38.7%(24/62),χ²= 17.358,P < 0.001,HCV RNA检出率分别是81.8%(72/88)和53.2%(33/62),χ² = 20.11,P < 0.001;62例HBV/HCV合并感染者血清中,HBeAg阳性和HBeAg阴性感染者HCVcAg检出率分别为28.6%(12/42)和60%(12/20),χ² = 5.641,P = 0.011,HCV RNA阳性率分别为42.9%(18/42)和80%(16/20), χ²= 15.452,P < 0.001;HBV DNA阳性和阴性时HCVcAg检出率分别为39.1%(18/46)和37.5%(6/16),?字2 = 0.013,P=0.908;与单纯HCV感染者血清HCVcAg检出率72.7%(64/88),相比较HBeAg阴性合并感染者为60%(12/20),χ²= 1.266,P = 0.261,HBV DNA阴性合并感染者37.5%(6/16),χ²=7.635,P < 0.01。【结论】 HBV/HCV合并感染时HCVcAg检出率较低,可能是由于HBeAg抑制HCV的复制,从而减少HCVcAg的表达所致。     

广州地区吸毒人员HBV、HCV感染流行病学特征

目的了解广州地区吸毒人员乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）的感染状况及其影响因素。方法收集广州地区吸毒人员的血液标本,采用ELISA检测HBsAg及HCV抗体,并对吸毒人员采取统一调查表进行问卷调查,采用统计学方法进行相关性分析。结果 1375名吸毒者HBV、HCV的感染率分别为20.8%、39.2%,HBV/HCV合并感染率为7.7%（106/1375）。其中采用静脉吸毒者HBV、HCV的感染率分别24.5%、84.5%,均高于非静脉吸毒者的19.2%、19.8%,差异有统计学意义（P〈0.05）。吸毒者年龄越大、吸毒时间越长越容易发生HBV或HCV感染。结论吸毒尤其是静脉吸毒是HBV、HCV感染的高危因素。吸毒者年龄、吸毒时间长短及吸毒方式与HBV、HCV感染相关。     

HBV/HCV合并感染e抗原阴性和阳性患者临床特征对比分析

【目的】了解乙型肝炎e抗原阴性和阳性HBV/HCV合并感染患者临床特征的异同。【方法】 回顾分析我院1999年5月至2010年5月间HCV和HBV合并感染患者总186例;利用SPSS16.0软件,统计分析乙型肝炎e抗原阴性和阳性HBV/HCV合并感染患者的人口学、病毒学和生化学等指标。 【结果】 186例患者中, e抗原阴性患者140例, e抗原阳性患者46例。e抗原阴性的HBV/HCV合并感染患者与e抗原阳性患者相比,具有年龄较大、TBil水平较高、病毒复制水平低和输血感染居多等特征(P < 0.05);但是e抗原阳性合并感染患者ALT水平比e抗原阴性患者明显升高(P = 0.031)。e抗原阴性患者HBV DNA阳性比例高于e抗原阴性患者(P=0.000);但是,HCV RNA水平分布无差异(P = 0.169)。其他临床特征均无统计学差异。 【结论】 e抗原阴性和阳性HBV/HCV合并感染患者临床特征存在差异,此差异与HBV单一感染时不同。e抗原仍可以作为HBV/HCV合并感染患者体内HBV DNA复制水平判断指标之一;e抗原状态与HCV RNA的水平无关。     

128例经血感染HIV患者合并HCV和HBV感染状况

目的了解经血感染人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)患者合并感染乙型肝炎病毒(HBV)及丙型肝炎病毒(HCV)的情况及发病特点。方法回顾性分析128例经血感染HIV患者合并感染HBV和HCV的感染率、肝脏表现及部分免疫学特征。结果128例患者中,单纯合并HCV感染者107例(83.6%),其中40例(31.3%)出现肝功能异常或肝损害,15例(11.7%)合并肝炎症状;单纯合并HBV感染3例(2.3%),均出现肝功能异常和肝炎症状;HIV、HBV、HCV三重感染7例(5.5%),无1例存在肝功能异常和肝炎症状;11例(8.6%)患者未合并HBV或HCV。结论经血感染HIV的患者与HCV的合并感染率高于与HBV的合并感染率,HIV合并HCV感染与HBV感染的临床转归也存在差异。