小鼠帕金森病模型中的大脑皮质细胞因子表达

目的:探讨甲基-苯基-四氢吡啶(MPTP)是否可诱导小鼠大脑皮质内细胞因子水平变化.方法:28只C57BL/6J雄性小鼠接受MPTP25mg/kgip注射连续5d,对照组(10只)注射生理盐水,在最后一次注射的第1日(10只),第3日(8只)和第14日(10只)杀鼠,然后用酶联免疫吸附的方法检测大脑皮质匀浆液上清内细胞因子IL-1β和IL-6的水平.结果:注射MPTP对大脑皮质IL-1β水平有影响(P<0.001),与对照组相比,IL-1β水平在注射后第3日降低(P<0.01);MPTP注射对大脑皮质IL-6水平没有影响.结论:MPTP诱导了大脑皮质促炎症细胞因子IL-1β的水平改变.     

脑不对称影响Balb/c小鼠海马白细胞介素-6蛋白水平的研究

目的 :研究Balb c小鼠海马内细胞因子白细胞介素 6 (IL 6 )含量与脑不对称的关系。方法 :用伸爪取食法将小鼠分为左利、右利和双利鼠。实验组于腹腔注射细菌脂多糖 (LPS) ,正常对照组腹腔注射无菌NS ,2h后快速断头杀鼠 ,冰上迅速分离海马 ,制备海马脑组织匀浆 ,用酶联免疫吸附测定法测定海马中IL 6蛋白含量。结果 :正常对照组海马IL 6水平为右利 >左利 >双利 (P <0 0 0 1) ;注射LPS 2h后 ,右利、左利和双利鼠海马IL 6水平变化趋势是右利、双利略有升高 (P =0 4 5 9)。结论 :海马IL 6水平与脑不对称有关     

精神应激Balb/c小鼠不同部位脑组织中IL-1β及IL-6水平的变化

目的探讨精神应激(天敌应激)小鼠模型皮层、海马及下丘脑IL-1β,IL-6水平的变化,深入了解精神应激对脑组织中细胞因子的影响。方法随机将Balb/c小鼠分别暴露在正常环境(对照组)、急性(45min,1次)、慢性(45min/次,1次/d,连续14d)鼠类天敌(猫)应激环境中。应激结束后用EIA法检测血浆皮质酮水平,用ELISA法测定皮层、海马及下丘脑匀浆中IL-1β,IL-6的含量。结果①血浆皮质酮:应激后水平升高,以慢性应激组显著,与正常生理组比较差异有显著性(P<0.05);②皮层IL-1β,IL-6水平:急、慢性应激组水平均降低,以慢性应激组更显著,与正常对照及急性应激组差异均有显著性(P<0.05)。③海马IL-1β,IL-6水平:急、慢性天敌应激后IL-1β水平降低,应激组与正常生理组比差异均具有显著性(P<0.01);IL-6水平无明显变化(P>0.05)。④下丘脑IL-1β,IL-6水平:急性应激组IL-1β水平降低而慢性应激组水平略升高,但变化均差异无显著性(P>0.05);应激组IL-6水平均降低,以急性应激变化更为明显,其与正常对照组及慢性应激组相比差异有显著性(P<0.05)。结论精神应激可影响小鼠脑组织中细胞因子的产生,细胞因子的变化在精神应激导致功能紊乱的过程中有重要作用。     

α-胞衬蛋白siRNA对干燥综合征模型NOD小鼠血清中IL-2、IL-6和TGF-β的影响

目的:观察α-胞衬蛋白(α-Fodrin)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对干燥综合征动物模型非肥胖糖尿病(NOD)小鼠细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β的影响及泪腺的病理改变。方法:0.5 mg/kg体重的pGFPV-RS空载体和α-Fodrin-siRNA表达载体分别尾静脉注射NOD小鼠,1周/次,共2次。注射后2、4、6 d尾部采血,酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β的表达;注射后7 d病理切片,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠泪腺的病理变化。结果:注射后2 d和4 d siRNA 1组和siRNA2组NOD小鼠血清中IL-6的浓度明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义;而对照组和空载体组间、siRNA 1组和siRNA 2组间比较差异无统计学意义。注射后2、4和6 d siRNA 1组和siRNA 2组NOD小鼠血清中TGF-β和IL-2的浓度较对照组和空载体组升高,但差异无统计学意义。病理切片结果显示,siRNA 1组和siRNA 2组与对照组和空载体组比较,小鼠泪腺淋巴细胞浸润减少。结论:NOD小鼠注射α-Fodrin siRNA载体后,血清中IL-6的水平降低、IL-2和TGF-β的浓度升高,泪腺淋巴细胞浸润减少,提示α-Fodrin siRNA可以减轻炎症反应。     

米诺环素对神经病理性疼痛大鼠海马促炎性细胞因子表达的影响

目的 观察米诺环素对腰5脊神经横断(L5-SNT)所致神经病理性疼痛大鼠模型海马水平TNF-α、IL-1β、IL-6表达变化的影响。方法 将雄性SD大鼠36只完全随机法分成4组,即正常组(Z组)、假手术组(J组)、模型+生理盐水组(MS组)及模型+米诺环素组(MM组),每组9只。MS组、MM组进行SNT神经病理性疼痛大鼠模型建立,而后MM组每天给予米诺环素40mg/kg腹腔内注射,而MS组给予同等剂量的生理盐水腹腔内注射。术后观察各组大鼠行为学变化并于术前1天及术后1～11天测定大鼠机械缩足阈值(PWT);选择术后第2、7、11天随机取每组动物处死,应用实时PCR法检测大鼠海马水平TNF-α、IL-1β及IL-6的表达。结果 (1)行为学检测:与术前1天比较,MS组与MM组大鼠出现明显的机械性痛觉过敏(P＜0.05),而与MS组比较,MM组大鼠机械性痛觉过敏得到明显改善(P＜0.05)。(2)促炎性细胞因子变化:与J组比较,MS组大鼠海马TNF-α、IL-1β、IL-6表达上调(P<0.05),而与MS组比较,MM组大鼠海马TNF-α、IL-1β、IL-6的表达均有不同程度的下降(P＜0.05)。结论 米诺环素具有明显的镇痛作用,其作用机制可能与抑制海马中TNF-α、IL-1β及IL-6的表达及释放有关。     

MPTP对C57BL/6J小鼠脑时钟基因mPer1 mRNA表达的影响

目的研究神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四羟基吡啶(MPTP)对小鼠脑组织中时钟基因mPer1mRNA表达的影响。方法将C57BL/6J小鼠用计算机辅助法随机分为MPTP组和对照组,MPTP组腹腔注射MPTP-HCl,对照组注射0.9%氯化钠注射液,连续5d,第11天连续24h按6个时间点取材。用HPLC-ECD检测纹状体中多巴胺(DA)含量,用实时定量RT-PCR检测纹状体和其余脑组织mPer1 mRNA水平。结果MPTP组纹状体DA水平较正常对照组减少了80%,并维持低水平长达10d;纹状体mPer1mRNA在24h内呈明显节律性变化,而其余脑组织mPer1 mRNA无明显节律性变化;MPTP处理导致纹状体和其余脑组织mPer1 mRNA水平增高及纹状体mPer1 mRNA表达高峰提前。结论MPTP引起小鼠纹状体时钟基因的表达水平和节律性发生改变,提示MPTP可能通过改变细胞内的节律控制中心而影响机体的生物节律。     

维生素D对老龄小鼠脾部分切除术后认知功能的影响及其作用机制研究

目的探讨维生素D对老龄小鼠术后认知功能的影响及作用机制。方法将老龄C57BL/6小鼠（18～20月龄）随机分为对照组、手术组和维生素D治疗组。对照组不做特殊处理,手术组在麻醉下行脾部分切除术,维生素D治疗组为术前3 d开始每天腹腔注射维生素D。T迷宫实验检测实验小鼠的学习和记忆能力;HE染色光镜及透射电镜观察实验小鼠海马组织结构病理改变;术后第3天处死实验小鼠,迅速获取海马组织,利用实时定量聚合酶链反应（real time-PCR）检测海马组织Th17细胞亚群特异性细胞因子及其分化相关的细胞因子白细胞介素（IL）-17、IL-6、转化生长因子-β（TGF-β）的mRNA表达;利用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测海马组织IL-17、IL-6、TGF-β的蛋白表达。结果与对照组比较,手术组小鼠认知功能于术后3 d明显下降（P〈0.05）;维生素D治疗组小鼠认知功能改变同手术组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。术后3 d光镜下维生素D治疗组小鼠海马组织炎症细胞浸润较手术组明显减轻;透射电镜下手术组可见海马神经元胞质内空泡形成明显,部分出现裸核,线粒体肿胀,峭大部分消失,基质呈空泡状;突触间隙增宽,电子密度降低,维生素D治疗组海马组织的超微结构改变明显减轻。术后3 d手术组小鼠海马组织IL-17、IL-6、TGF-β的mRNA和蛋白表达增加,与对照组比较差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）;维生素D治疗可明显抑制术后海马组织IL-17、IL-6、TGF-β的表达（P〈0.01）。结论维生素D可通过调控Th17细胞亚群的分化而改善老龄小鼠的术后认知功能。     

益智仁提取物对β淀粉样肽致小鼠学习记忆障碍的改善作用及机制分析

目的:观察益智仁水提物对β淀粉样肽(Aβ)所致小鼠学习记忆障碍模型的影响以及作用机制研究.方法小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ4nmol,次日开始给予益智仁水提物,10天后开始进行Morris水迷寓训练.检测各组空间学习记忆能力以及皮层、海马组织内的炎性细胞因子(IL-6、TNFα)的变化.结果:与模型组相比,益智仁水提物可显著提高小鼠的空间学习记忆能力,减少皮层和海马组织内的炎性细胞因子的表达.结论:益智仁水提物可改善Aβ所致的空间学习记忆能力下降,其机制可能与其抑制炎性细胞因子的产生有关.     

HO-1对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的作用

目的探讨抑制血红素加氧酶-1(HO-1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的作用。方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、MPTP组及锌原卟啉(ZnPPIX)+MPTP组,每组6只。腹腔注射MPTP(30mg/kg)5d制备帕金森病小鼠模型,MPTP组于MPTP注射前4d行侧脑室注射9g/L氯化钠溶液2μL,连续8d;ZnPPIX+MPTP组于MPTP注射前4d行侧脑室微注射ZnPPIX(50μg/kg)2μL,共8d;对照组以等量的9g/L氯化钠溶液取代ZnPPIX和MPTP。应用Western blots法检测黑质内HO-1和酪氨酸羟化酶(TH)的表达水平。结果 ZnPPIX+MPTP组小鼠黑质内HO-1表达明显低于对照组和MPTP组,差异有显著性(F=6.844,q=5.943、4.444,P<0.05);MPTP组、ZnPPIX+MPTP组黑质区TH表达较对照组明显下降(F=5.095,q=4.303、4.030,P<0.05),ZnPPIX+MPTP组小鼠TH表达量与MPTP组比较差异无显著性(q=0.234,P>0.05)。结论抑制HO-1表达对MPTP致帕金森病小鼠黑质内多巴胺能神经元的损伤无明显作用。     

JNK通路对亚急性帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX-2表达的影响

目的:研究JNK在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中对环氧合酶-2(COX-2)的表达调控作用,以探讨可能导致PD黑质多巴胺(DA)能神经元变性失活的机制. 方法:采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,观察模型小鼠行为学变化,观察PD模型小鼠黑质区酪氨酸羟化酶(TH),COX-2,磷酸化c-Jun的表达变化;观察给予JNK通路特异性抑制剂SP600125对上述变化的影响. 结果:与对照组小鼠相比,模型组小鼠出现典型PD症状,在MPTP第3次注射后6 h,黑质区COX-2阳性细胞显著增加,p-c-Jun特异性表达于黑质区细胞核内,在MPTP第5次注射后7 d,黑质区TH阳性神经元显著丢失65% (P＜0.01);经SP600125处理后,模型小鼠PD症状减轻,与对照组比较,在MPTP第5次注射后7 d,TH阳性细胞数仅下降约15%,与模型组比较,在MPTP第3次注射后6 h,黑质区COX-2阳性细胞明显减少(P＜0.01),黑质区p-c-Jun表达于细胞质内. 结论:JNK通路在亚急性PD MPTP模型早期对黑质COX-2表达中可能起重要调控作用;抑制JNK通路对PD小鼠具有神经保护作用.