三氧化二砷、顺铂对人卵巢癌细胞联合作用研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)、顺铂(DDP)对人卵巢癌细胞HO-8910的联合作用及其相关机制。方法采用形态学方法研究As2O3、DDP对细胞增生的影响,用流式细胞术分析细胞周期,免疫细胞化学染色法检测p53基因表达。结果1.As2O3、DDP协同作用时,浓度分别在1.5μmol/L以上、2μmol/L以上时,有显著性差异;当三氧化二砷、顺铂浓度分别是12μmol/L、4μmol/L时,72h时癌细胞接近100%死亡。2.As2O3、DDP引起HO-8910细胞S期阻滞、p53基因表达增强。结论As2O3、DDP对人卵巢癌细胞HO-8910的生长有协同抑制作用;As2O3、DDP联合作用引起卵巢癌细胞凋亡的机制与S期阻滞、p53基因表达增强有关。     

三氧化二砷在肿瘤治疗中的应用

三氧化二砷是中药砒霜的主要成分,它被作为药物使用已经有2000多年的历史,最初的应用是治疗梅毒、肺结核等;从20世纪70年代在治疗复发性和难治性急性早幼粒细胞性白血病(APL)中取得较好疗效后,其药用价值开始受到了人们的关注,本世纪初,美国的FDA 批准三氧化二砷用于治疗APL、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓增生异常综合征(MDS).自此国内外掀起了研究三氧化二砷的抗肿瘤作用及其机制的热潮,并进行了大量实验,本文就其在抗肿瘤方面的研究进展作一综述.     

三氧化二砷联合顺铂治疗乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的初步研究

目的：观察联合应用三氧化二砷（As2O3）和顺铂（DDP）治疗人乳腺癌MCF-7裸鼠皮下移植瘤的疗效。方法：建立裸鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型,应用As2O3和DDP联合治疗,计算抑瘤率并用透射电镜观察瘤体细胞凋亡情况。结果：联合用药组的抑瘤率为76．47％,明显高于单独应用As2O3,或DDP的抑瘤率（P〈0．01）;且联合用药组的肿瘤细胞呈明显凋亡形态改变。结论：As2O3与DDP联合用药比两药单独应用具有较强的抑制肿瘤生长作用,二者具有协同抗癌作用。     

三氧化二砷与顺铂联用对肝癌HepG2细胞的作用

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)与顺铂(CDDP)联合对肝癌细胞HepG2的作用.方法 应用MTT法和细胞免疫组化酶法检测人肝癌HepG2细胞Bax,Bcl-2,Fas蛋白的表达情况.结果 As2O3与CDDP联合应用在抑制肝癌细胞的生长繁殖、诱导肝癌细胞凋亡,增强Bax,Fas的表达,下调Bcl-2的表达方面均较各自单用的作用明显增强.结论 As2O3与CDDP联合应用具有明显的协同抗肝癌作用,其主要机制可能为As2O3联合化疗能诱导肝癌细胞凋亡,与增强Bax,Fas的表达,下调Bcl-2的表达有关.     

三氧化二砷对肝癌细胞顺铂化疗敏感性的调节作用

目的 探讨三氧化二砷(ATO)对肝癌(HCC)细胞对顺铂(CDDP)化疗敏感性的调节作用。方法 采用HCC细胞(HepG2细胞),根据处理方法,将细胞分为3组:采用5μM的ATO联合20μM的CDDP联合(联合组)或单独采用20μM的CDDP处理(CDDP组)HCC细胞(HepG2细胞)48 h,对照组采用生理盐水处理细胞。采用MTT法检测各组HepG2细胞的增殖率。采用流式细胞仪检测各组HepG2细胞凋亡情况。比较ATO对CDDP处理后肝癌细胞增殖率及凋亡率的影响。结果 经过48 h处理,联合组细胞增殖率明显低于CDDP组[(0.48±0.05)vs.(0.62±0.06)](P=0.0002)。经过48 h处理,联合组细胞凋亡率明显高于CDDP组[(44.32±3.59) vs.(34.63±3.25)](P=0.0001)。结论 ATO联合CDDP处理可以通过降低HCC细胞增殖率并促进细胞凋亡增加HCC细胞对CDDP化疗的敏感性,增强CDDP对肝癌细胞的杀伤力。     

紫杉醇对顺铂耐药卵巢癌细胞的影响

目的研究抗癌药物诱导顺铂耐药细胞的调亡的规律,为卵巢癌的化疗提供理论依据。方法紫杉醇作用于体外培养的顺铂耐药的卵巢癌细胞COC1细胞系通过HE染色、电子显微镜、流式细胞术等方法进行检测和观察。结果经紫杉醇处理的卵巢癌COC1细胞出现典型的细胞调亡特征。紫杉醇诱导细胞调亡在一定范围内具有剂量依赖性,最高达到39%,但是浓度加大〉50nmol/ml,调亡率下降。结论紫杉醇能有下得诱导顺铂耐药的肿瘤细胞的调亡。     

人卵巢癌顺铂耐药细胞株OVCAR-3/DDP的建立及相关基因表达水平的研究

目的建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株OVCAR-3/DDP,初步探讨其耐药机制。方法采用顺铂(DDP)浓度梯度递增诱导法,建立人卵巢癌OVCAR-3细胞株的顺铂耐药细胞株OVCAR-3/DDP;通过细胞计数和MTT法评估细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期情况,以评价OVCAR-3/DDP的生物学特性;采用RT-PCR法检测Mfn2、EGFR及MMP2 mRNA水平。结果成功建立了OVCAR-3/DDP顺铂耐药细胞株,其对DDP耐药指数是1.92;与亲本细胞株OVCAR-3相比,OVCAR-3/DDP生长速度减慢,倍增期是OVCAR-3细胞的1.36倍(P<0.05);流式细胞术检测结果显示细胞主要停滞于G2/M期(P<0.05);与OVCAR-3细胞相比,OVCAR-3/DDP细胞中Mfn2、EGFR及MMP2 mRNA水平均明显升高(P<0.05)。结论建立的OVCAR-3/DDP细胞株对顺铂耐药性稳定;OVCAR-3/DDP细胞对顺铂耐药可能与Mfn2、EGFR、MMP2基因转录水平上调有关。     

米非司酮体内增强顺铂对人卵巢癌细胞的抗癌作用

目的：观察米非司酮在体内对顺铂抗人卵巢癌细胞作用的影响。方法：采用人卵巢腺癌细胞耐药亚株COC1／顺铂，建立人类卵巢癌裸鼠异种移植瘤耐药模型，观察体内应用米非司酮后荷瘤裸鼠肿瘤体积及其瘤组织形态学变化，应用RT－PCR技术检测瘤组织葡萄糖神经酰胺合成酶（GcS)mRNA表达。结果：顺铂与米非司酮联用后，细胞形态发生变化，抑瘤率为70．48％，显著高于顺铂组的抑瘤率21．55％（P＜0．01），联合用药组和米非司酮组的移植瘤GcSmRNA表达较对照组显著下降，联合用药组尤为明显，结论：无毒性剂量米非司酮可以在体内增加COC1／顺铂细胞对顺铂的敏感性，作用机制与抑制GcSmRNA表达有关。     

顺铂作用于耐顺铂卵巢上皮癌细胞后其细胞生物学特性的改变

目的:探讨耐顺铂卵巢癌SKOV3/DDPⅡ细胞对于顺铂作用后其细胞周期、凋亡、增殖及铂类耐药相关基因ARHGDIB和CCND1表达量的变化。方法:采用流式细胞术检测不同浓度和时间顺铂作用后SKOV3/DDPⅡ细胞周期和凋亡率的变化,并与标记GFP的上皮性卵巢癌细胞株SKOV3-GFP(敏感株)相比较;通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测不同浓度和时间顺铂作用后细胞增殖的变化;实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测裸鼠体内瘤块耐药基因CC-ND1和ARHGDIB基因的表达情况。结果:半抑制浓度的顺铂作用48h后,SKOV3-GFP和SKOV3/DDPⅡ两株细胞分布于G0/G1期的比例相对于无顺铂处理组明显下降(P<0.01,P<0.05),SKOV3/DDPⅡ细胞分布于G2/M期的比例则相对于无顺铂处理组明显升高(P<0.01);而顺铂作用48h内SKOV3-GFP和SKOV3/DDPⅡ两株细胞凋亡率随时间和浓度的增大而增大;以9.9,19.8,29.7μmol/L浓度的顺铂处理6d以后,SKOV3/DDPⅡ的增殖抑制得到解除,并继续生长,而SK-OV3-GFP细胞则随顺铂作用时间延长增殖持续受到抑制。顺铂作用体内移植瘤5次后,CCND1在SKOV3/DDPⅡ-5的相对表达比SKOV3/DDPⅡ-0增高92.98倍,作用第8次后,ARHGDIB在SKOV3/DDPⅡ-8的相对表达比SKOV3/DDPⅡ-0增高2.51倍。结论:具有耐药表型的卵巢上皮癌细胞在顺铂作用下降低分布于G0/G1期细胞数使细胞生长受到一定程度的抑制,但在顺铂刺激后肿瘤细胞过度表达CCND1基因使细胞顺利通过G1/S检查点促进肿瘤细胞增殖,同时上调表达ARHG-DIB基因抵抗顺铂诱导的肿瘤细胞凋亡。     

米非司酮体内增强顺铂对人卵巢癌细胞的抗癌作用

目的观察米非司酮在体内对顺铂抗人卵巢癌细胞作用的影响。方法采用人卵巢腺癌细胞耐药亚株COC1/ 顺铂,建立人类卵巢癌裸鼠异种移植瘤耐药模型,观察体内应用米非司酮后荷瘤裸鼠肿瘤体积及其瘤组织形态学变化。应用RT-PCR技术检测瘤组织葡萄糖神经酰胺合成酶(GcS)mRNA表达。结果顺铂与米非司酮联用后,细胞形态发生变化,抑瘤率为70.48%,显著高于顺铂组的抑瘤率21.55%(P<0.01)。联合用药组和米非司酮组的移植瘤GcS mRNA表达较对照组显著下降,联合用药组尤为明显。结论无毒性剂量米非司酮可以在体内增加COC1/顺铂细胞对顺铂的敏感性,作用机制与抑制GcS mRNA表达有关。     

三氧化二砷对卵巢癌细胞抑制作用及机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对卵巢癌细胞HO-8910体外生长的影响及其相关机制.方法：用倒置显微镜对细胞进行观察,用免疫细胞化学染色法检测p53基因表达.结果：（1）三氧化二砷作用浓度在0～12.0 μmol/L时,随着剂量的增加对卵巢癌细胞抑制作用增强.（2）卵巢癌细胞p53基因表达增强.结论：较高浓度三氧化二砷对卵巢癌细胞株HO-8910细胞有生长抑制作用并呈剂量-时间依赖效应 As2O3作用引起卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡的机制与p53基因表达增强有关.     

STUDY ON EFFECTS OF ARSENIC TRIOXIDE ON GASTRIC CANCER CELL LINES

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三氧化二砷对人子宫内膜癌移植瘤的影响

目的：探讨三氧化二砷（aresenic trioxide,AS2 O3）对裸鼠荷人子宫内膜癌皮下移植瘤的生长抑制作用及作用机制。方法建立裸鼠荷人子宫内膜癌 HEC-1-A 细胞移植瘤动物模型,随机分为5组,A 组（AS2 O34mg· kg-1·d-1）、B 组（AS2 O36mg·kg-1·d-1）、C 组（AS2 O38mg·kg-1·d-1）、D 组（顺铂3mg·kg-1·d-1）、阴性对照 E 组（生理盐水组）,腹腔连续给药14d,计算瘤体积和瘤质量抑制率,观察用药前后裸鼠体质量改变。结果A、B、C、D 组肿瘤体积抑制率分别为50．97％、75．58％、56．92％、52．23％,肿瘤质量抑制率分别为10．15％、29．33％、16．67％、14．69％,与 E 组比较差异均有统计学意义（P ＜0．05）。用药前后 AS2 O3各组体质量变化不明显,而 D 组裸鼠体质量变化差异有统计学意义。结论 AS2 O3对鼠荷人子宫内膜癌移植瘤的生长有抑制作用,且治疗剂量的AS2 O3对子宫内膜癌异种移植瘤的抑制作用强于顺铂,而不良反应弱,因此 AS2 O3有希望成为一种新型的子宫内膜癌治疗药物。     

三氧化二砷诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡的形态学研究

目的:探讨三氧化二砷对卵巢癌细胞株HO8910的抑制作用.方法:用三氧化二砷处理HO8910细胞,采用MTT法检测药物对细胞的抑制作用,倒置显微镜和电镜观察细胞形态学改变.结果:在三氧化二砷作用下,HO8910细胞呈凋亡改变,形成凋亡小体.结论:三氧化二砷能诱导卵巢癌细胞凋亡,抑制卵巢癌细胞增殖.     

STUDY ON THE RELATIONSHIP OF ARSENIC TRIOXIDE INDUCED BIOLOGICAL EFFECTS AND DEGRADATION OF PML PROTEINS

aR6SUIn6 Objedif POur mvoir st ies effets bioltwques induits per ie triQxwt d'aramic scut ~ids dba ~non ac staines Pad. --' lipe cellulaires ant utilso cd modals in vital. nshgit de: Iignd cellularic APL (acute Pr~Impic leukemia ), Iignd cellulfoire Jurkat (T-IndOCyticIeUkereai), liar celluaire U937 (acute mploal leukemta ) et lipe Celluleire ~ (chronic mplOCyticIeukemia baest crisis ). Dens las differentes ligthe eel!ulaires, Ies effets biologiqare induits per ASZO3 out atedwlnd ~…     

维生素C与三氧化二砷联用诱导K562细胞株凋亡的研究

目的：观察维生素C与三氧化二砷相互联用时K562细胞株凋亡率的变化。方法：联用不同浓度的维生素C与三氧化二砷孵育K562细胞株不同时间，采用电镜观察及流式细胞术通过PI染色检测在两种药物单用及联用情况下的细胞凋亡比例。结果：维生素C与三氧化二砷联用组细胞凋亡率明显高于单用三氧化二砷组。结论：与维生素C联用可明显提高三氧化二砷对K562细胞株凋亡诱导作用，与低剂量1μmol/L三氧化二砷联用时其凋亡率甚至明显高于单用5μmol/L三氧化二砷组。为临床上砷剂对急性非淋巴细胞性白血病治疗的应用提供了新思路。     

顺氯氨铂联合化疗配合手术治疗晚期卵巢癌

用高、低剂量顺氯氨铂(DDP)联合化疗,配合手术,治疗32例晚期卵巢上皮性癌,近期疗效为81.5％(22/27)～85.7％(18/21),2年存活率71.9％(23/32)。27例有残余肿瘤,经9个疗程以上化疗后,其中8例无癌的证据。结果表明,该方案毒性反应轻,可反复应用,对延长肿瘤缓解期有一定作用,并在争取适宜的手术时机,创造尽量切除肿瘤的条件等方面,取得成效。     

苦参素诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡及细胞周期的影响

目的：探讨苦参素对卵巢癌细胞株H08910的抑制增殖效应及凋亡诱导作用。方法：用苦参素处理H08910细胞，采用MTT法检测药物对细胞的抑制作用，倒置显微镜观察细胞形态学改变；琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解，以及应用流式细胞仪观察细胞凋亡过程中细胞周期的变化。结果：在苦参素作用下，H08910细胞呈凋亡改变，DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的凋亡特征。细胞凋亡的同时，细胞周期发生特定的改变。结论：苦参素能抑制卵巢癌细胞增殖，能诱导卵巢癌细胞凋亡。     

As2O3对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用

目的 探讨不同剂量三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及机制.方法 将4×106个Hela细胞接种于裸鼠皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为As2O3低剂量(1.0 mg/kg)、中剂量(2.5 mg/kg)、高剂量(5.0 mg/kg)组及生理盐水空白对照组、顺铂阳性对照组,腹腔连续给药10 d,停药后24 h处死裸鼠留取标本计算抑瘤率,流式细胞仪检测细胞凋亡率, RT-PCR方法检测移植瘤组织caspase-3基因的相对表达量,免疫组化SP法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)的表达.结果 各剂量As2O3组及顺铂组瘤质量与生理盐水组相比均有统计学意义(F=39.14,P<0.05);As2O3高、中、低剂量组流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,凋亡率分别为17.89%、17.19%、18.52%;As2O3作用后caspase-3基因的表达较生理盐水组明显升高,差异均有统计学意义(F=8.76,q=3.06～5.81,P＜0.05);As2O3各剂量组pERK的表达较生理盐水组降低.结论 As2O3 对人宫颈癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制与上调caspase-3基因的表达诱导细胞凋亡,下调pERK的表达与抑制MAPK信号传导通路有关.     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶对人肝癌SMMC-7721细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨三氧化二砷联合氟尿嘧啶（5-FU）对肝癌细胞凋亡相关因子Bcl—2和Bax表达的影响。方法体外培养人肝癌SMMC-7721细胞株,将细胞分为四组,即AS2O3组、5-FU组、As2O3＋5-Fu组及对照组,采用免疫细胞化学法检测各组SMMC-7721细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果As2O3组、5-Fu组、As2O3＋5-FU组细胞Bcl-2蛋白表达较对照组明显降低,Bax蛋白表达明显升高（P〈0．01）;联合用药组细胞Bcl-2蛋白表达较单用药组明显降低,Bax蛋白表达明显升高（P〈0．01）。结论As2O3联合5-FU可下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达,从而诱导肝癌细胞凋亡。