生长抑素2型受体mRNA在人胃上皮永生细胞及肿瘤细胞株？…

目的 了解多种癌细胞上是否较广泛表达生长抑素２型受体,同时了解ｐ５３０突变与否对生长抑素２型受体的表达有无影响。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ和克隆的人生长抑素２型受体ｃＤＮＡ为探针检测人胃上皮永生细胞、人胃癌细胞、胰腺癌细胞、结肠癌细胞、膀胱癌细胞共１０株细胞上该受体ｍＲＮＡ的表达。结果 发现除１株胰腺癌细胞外,其余９个细胞株均表达生长抑素２型受体。一株胃癌细胞分别转染了野生型和突变型的ｐ５３基因,也同样     

生长抑素2型受体在12株肿瘤细胞中的表达

目的研究多种肿瘤细胞是否广泛表达生长抑素2型受体（SSTR2），以期探讨生长抑素类似物应用于各种肿瘤治疗的可能性。方法分别提取肺癌、鼻咽癌、宫颈癌、肝癌、乳腺癌及胰腺癌6种肿瘤，共12株细胞的总RNA，用反转录PCR检测SSTR2 mRNA的表达，同时制备12株细胞的总蛋白样品，经免疫印迹检测SSTR2蛋白的表达。结果除1株肺癌细胞外，其余11株细胞都表达SSTR2 mRNA；有1株肺癌细胞，2株胰腺癌细胞不表达SSTR2蛋白。结论除胰腺癌外，生长抑素2型受体在多种肿瘤细胞中的表达有较大的普遍性。     

生长抑素受体2基因转染抑制胰腺肿瘤细胞生长机制的探讨

目的探讨生长抑素受体2(SSTR2)基因转染抑制体内胰腺肿瘤生长的效果及其机制.方法利用lipofectAMINE将人类SSTR2全长 cDNA转染导入胰腺癌细胞株PC-3中,G418筛选出阳性克隆;免疫组织化学SABC法和RT-PCR检测生长抑素受体2的稳定表达.分别将表达生长抑素受体2的PC-3细胞 (实验组) 和空载体对照组及阴性对照组的PC-3细胞异种移植到无胸腺小鼠体内.TUNEL法测定这些细胞形成的胰腺肿瘤细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学SP法测定凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达,以及肿瘤微血管密度(MVD).另外,比较3组裸鼠之间胰腺肿瘤的大小和重量.结果实验组胰腺肿瘤细胞AI(3.39%±0.84%)显著高于空载体对照组(0.69%±0.08%)和阴性对照组(0.68%±0.09%)(P<0.05).与空载体对照组和阴性对照组相比,实验组Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax蛋白的表达则显著升高(P<0.05);实验组MVD(6.3±1.7)显著低于空载体对照组(12.6±1.7)和阴性对照组(13.5±1.9)(P<0.05).另外,实验组胰腺肿瘤的大小和重量也显著低于空载体对照组和阴性对照组(P<0.05).空载体对照组与阴性对照组之间未观测到任何有差异的指标(P>0.05).结论大多数人胰腺癌细胞中缺失SSTR2基因,生长抑素受体2在胰腺癌细胞中的再表达能诱导肿瘤凋亡,抑制肿瘤新生血管形成,最终明显抑制胰腺肿瘤的生长,而凋亡可能通过Bcl-2蛋白的下调及Bax蛋白的上调来调节.     

胃癌组织中生长抑素受体亚型mRNA的表达

目的:研究胃癌组织中生长抑素受体亚型(SSTRs)的表达,探讨其与胃癌临床病理学参数的关系.方法:应用RT-PCR技术检测30例胃癌及相应正常胃黏膜组织中生长抑素受体5种亚型(SSTR1～SSTR5)mRNA的表达.结果:胃癌及相应正常胃黏膜组织中SSTR1～SSTR5 mRNA均有表达.与正常胃黏膜组织比较,胃癌组织中SSTR3阳性率降低(P＜0.05),SSTR2和SSTR5阳性率升高(P＜0.05).低分化胃癌组织中,SSTR3阳性率较低(P＜0.05),SSTR1和SSTR5阳性率升高(P＜0.05);SSTR1阳性率与胃癌淋巴结转移有关(P＜0.05);SSTR1和SSTR5与胃癌浸润程度存在相关性(P＜0.05).结论:在胃癌的发生和分化过程中,SSTR3和SSTR5可能起重要作用,而SSTR1可能参与了胃癌的进展.     

生长抑素受体亚型mRNA在大肠癌中的表达

目的:探讨大肠癌组织中生长抑素受体(SSTR)各亚型基因的表达以及与临床病理参数的关系。方法:采用RT-PCR法检测了41例大肠癌患者癌组织和癌旁组织中生长抑素受体亚型mRNA的表达。结果:41例大肠癌患者的癌组织和癌旁组织中SSTR1 mRNA表达的阳性率分别为82.93%(34/41)和68.29%(28/41);SSTR2mRNA表达的阳性率分别为92.68%(38/41)和90.24%(37/41);SSTR3 mRNA表达的阳性率分别为43.90%(18/41)和36.59%(15/41);SSTR4 mRNA表达的阳性率分别为60.98%(25/41)和39.02%(16/41),而SSTR5基因在大肠癌及癌旁组织表达缺失。结论:大肠癌组织中大多数有一种以上生长抑素受体亚型基因的表达,其中SSTR2为主要表达亚型;各亚型间可能存在有协同作用的关系。     

生长抑素受体2在小细胞肺癌中的表达及其与患者生物学特征的关系

目的:检测小细胞肺癌(SCLC)标本中生长抑素受体2(SSTR2)的表达,并对SCLC患者的生物学特征(年龄、性别、吸烟、TNM分期、预后)进行统计学分析,旨在判定SSTR2的表达与患者生物学特征是否具有相关性,评估能否将SSTR2作为诊断、治疗的靶点,拓宽SCLC的治疗途径.方法:采用免疫组化方法检测SCLC组织标本...     

生长抑素Ⅱ型受体在上皮性卵巢癌中的表达

目的:探讨生长抑素型受体在上皮性卵巢癌中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测48例上皮性卵巢肿瘤中生长抑素受体蛋白的表达水平。结果:卵巢癌组中晚期生长抑素型受体的阳性表达率为71.4%(10/14),早期生长抑素受体的阳性表达率为23.5%(4/17),两组的阳性表达率间有显著性差异。组织学分化1级阳性表达率为18.2%(2/11),分化2级阳性表达率为50%(7/14),分化3级阳性表达率为83.3%(5/6),三者间有显著性差异。生长抑素Ⅱ型受体表达有腹水组明显高于无腹水组。结论:随着卵巢癌病变进展,肿瘤细胞表面生长抑素Ⅱ型受体表达增强,相应的生长抑素类似物可望为生长抑素受体阳性表达的上皮性卵巢癌的诊治提供新的方向。     

多巴胺受体在人与小鼠胃黏膜泌生长抑素细胞中的分布

目的研究人与小鼠的胃黏膜泌生长抑素细胞(D细胞)上多巴胺D_1、D_2受体的分布。方法采用冰冻切片免疫荧光染色的方法分别对多巴胺受体在人与小鼠胃体D细胞的分布进行检测。结果多巴胺D_1、D_2受体均分布在人与小鼠的胃体黏膜层,且D细胞上存在有D_2受体的免疫阳性表达,而未见D_1受体的阳性表达,人与小鼠结果保持一致。结论多巴胺D_2受体分布于D细胞上,可能介导多巴胺对生长抑素分泌的调节进而参与调节胃的分泌及运动功能。     

生长抑素受体亚型SSTR2和SSTR5 mRNA在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的：分析肝癌组织中生长抑素受体亚型SSTR2和SSTR5 mRNA表达状况及其与肿瘤的关联性,为应用生长抑素及其类似物诊断和治疗肝癌奠定理论基础。方法：肝癌患者肝组织标本22例,采用RT-PCR检测并鉴定肝癌癌组织、癌旁组织及正常肝组织SSTR2和SSTR5　mRNA表达率,分析表达率与肿瘤特征之间的关系。结果：SSTR2mRNA肝癌癌组织的表达率为81.8%(18/22) ,表达水平为118.27±17.25,与正常肝组织［36.4%(8/22),69.49±19.43］比较差异有显著性（P<0.05）;与癌旁组织［72.7%（16/22）,111.18±23.74］比较差异无显著性（P>0.05）;癌旁组织与正常肝组织比较差异有显著性（P<0.05）。SSTR5 mRNA表达率和表达水平肝癌癌组织［18.2%（4/22）, 51.67±30.32］、癌旁组织［18.2%（4/22）,49.56±27.61］及正常肝组织［9.1%（2/22）,48.73±15.72］三组间两两比较差异均无显著性（P>0.05）。高分化肝癌组织中 ［SSTR2 100%（18/18）,SSTR5 25%（4/16）］和无淋巴结转移的肝癌组织中表达率［SSTR2 25.0%（4/16）,SSTR5 100%(4/4)］分别高于低分化的表达率［0(0/4),0(0/6)］和有淋巴结转移的表达率［0(0/6),0(0/18)］（P<0.05）;Ⅰ、Ⅱ期［SSTR2 85.7%（12/14）,SSTR5 21.4%（3/14）］与Ⅲ、Ⅳ期［75.0%（6/8）,12.5%（1/8）］表达率比较差异无显著性。结论:SSTR2 mRNA亚型在肝癌中呈高表达,其表达率、表达水平与癌组织分化程度、有无淋巴结转移有关联性,与肝癌的分期无关联。     

生长抑素受体在胆囊癌组织中的表达

目的生长抑素是一种生长激素释放抑制激素,通过结合细胞表面的生长抑素受体而起作用。探讨生长抑素受体(somatostatin receptor,SSTR)亚型蛋白在胆囊癌组织及正常胆囊组织中的表达及其相关性。方法对病理确诊的29例胆囊癌组织及25例正常胆囊组织标本采用免疫组化法检测SSTR亚型的表达。结果在胆囊癌组织及正常胆囊黏膜组织中5种SSTR亚型均有表达,其中SSTR3在两组SSTR中的表达均为最高,SSTR2的表达均最低;在正常胆囊组织中的SSTR1的表达高于SSTR5,而在胆囊癌组织中的表达与此相反。胆囊癌中SSTR5的表达明显高于正常胆囊黏膜(P<0.05)。结论在以上2种组织中,SSTR5表达在胆囊癌组织比在正常胆囊组织黏膜明显增加(P<0.05),提示SSTR5亚型表达可能在胆囊癌发展过程中发挥重要作用。     

生长抑素受体特异性激动剂对人肝癌细胞生长影响的实验研究

目的探讨生长抑素受体特异性激动剂对体外培养的人肝癌细胞HepG2生长的影响。方法分别采用MTS、TUNEL、Transwell法检测生长抑素受体亚型特异性激动剂对体外培养的人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡、迁移的影响。结果与对照组相比,SSTR2~4亚型特异性激动剂对人肝癌细胞的增殖、凋亡、迁移没有明显影响,SSTR5亚型特异性激动剂L-817、818在剂量为1μg·mL-1时可以出现较明显的迁移抑制作用,剂量达到5μg·mL-1时,差异有统计学意义（P〈0.05）。其他不同浓度激动剂对HepG2的迁移抑制作用不明显。结论 SSTR亚型特异性激动剂对肝癌细胞的增殖、凋亡、侵袭没有明显的影响,L-817、818在高剂量时可以抑制HepG2的迁移。     

胰腺癌组织生长抑素受体mRNA的表达及意义

目的研究人体胰腺癌组织生长抑素受体mRNA的表达。方法应用逆转录PCR(RT-PCR)检测30例胰腺癌组织和12例正常胰腺组织生长抑素受体亚型mRNA的表达。结果(1)胰腺癌生长抑素受体5种亚型SSTR1~5mRNA表达依次为2.29±0.87,3.72±1.42,1.91±0.92,1.80±0.98,2.25±0.92,其中SSTR2mRNA表达明显高于其他亚型(P<0.01)。(2)正常胰腺组织SSTR1~5mRNA表达依次为1.37±0.74,1.38±0.98,1.26±0.79,1.21±0.42,1.33±0.92,各亚型mRNA表达比较无显著性差异(P>0.05)。(3)胰腺癌SSTR1.2.5mRNA表达明显高于正常胰腺组织的相应亚型(P<0.01),SSTR3mRNA表达也明显高于正常胰腺组织(P<0.05)。结论胰腺癌组织SSTR1.2.3.5mRNA表达水平明显高于正常胰腺组织,并且胰腺癌以SSTR2mRNA表达最为显著。     

瘦素及瘦素受体在胃癌组织和胃癌细胞株中的表达

[目的]探讨胃癌细胞株和胃癌组织是否有瘦素和瘦素受体表达,以及瘦素对胃癌细胞株的增殖作用.[方法]免疫组化和RT-PCR检测胃癌细胞株及胃癌组织中瘦素和瘦素受体表达,MTT法测定瘦素对胃癌细胞株SGC7901、MGC803、MKN45的增殖作用.[结果]胃癌细胞株SGC7901、MGC803及MKN45均有瘦素及瘦素受体表达;47例胃癌组织石蜡切片标本检测有瘦素表达20例,有瘦素受体表达23例,两者共同表达17例;19例新鲜胃癌组织标本,有瘦素mRNA表达13例,瘦素受体mRNA表达12例,两者共同表达10例;与对照组相比,100ng/mL的瘦素可使胃癌细胞株SGC7901、MGC803、MKN45的增殖率分别为1.45、1.56及1.54.[结论]胃癌细胞株及胃癌组织普遍存在瘦素和瘦素受体表达,瘦素可促进胃癌细胞株增殖.     

姜黄素和TSA对胃癌c-myc表达影响

目的了解姜黄素和TSA对胃癌c—myc基因表达影响,探讨组蛋白乙酰化／去乙酰化的动态平衡在胃癌基因表达和调控中的意义。方法进行胃癌细胞株SGC-7901和MGC803培养,然后加入不同浓度的组蛋白乙酰化酶抑制剂姜黄素和组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA分别进行干预,RT—PCR检测c—myc的mRNA的表达。结果通过RT—PCR的检测我们发现随着姜黄素的浓度增加及TSA浓度的减小c—myc的表达受到抑制（P〈0．01）。结论姜黄素与TSA对c—myc表达影响作用是相反的。     

胃腺癌细胞株和高转移株中雌激素受体相关受体的表达

目的探讨雌激素受体相关受体（ERR）α、β、γ各亚型在胃腺癌细胞系SGC-7901及高转移株OCUM-2MD3中的表达情况。方法采用RT-PCR法定性检测ERRs家族各亚型的mRNA表达,采用Western blot蛋白印迹检测ERR各亚型的表达。结果ERRα在SGC-7901低表达、在OCUM-2MD3高表达;ERRβ基本无变化;ERRγ在SGC-7901高表达、在OCUM-2MD3低表达。结论在不同类型的胃腺癌细胞株中,ERRα和ERRγ表达方式不同,提示用ERRα/ERRγ比值的改变显示胃腺癌转移有一定的临床意义。     

生长抑素受体和雌孕激素受体在子宫内膜癌的表达及临床意义

目的 研究生长抑素受体(SSTR)在子宫内膜癌中的表达及其意义;探讨SSTR表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的关系及意义.方法 采用免疫组织化学染色方法(SP法)检测60例子宫内膜癌组织中SSTR各亚型及ER、PR的表达情况,分析SSTR各亚型的表达与ER、PR表达的关系.结果 在60例子宫内膜癌组织中,SSTR各亚型(SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5)的阳性表达率分别为70%,15%,21.7%,23.3%及18.3%;ER、PR的阳性表达率分别为46.7%,70%.SSTR3、SSTR4在中高分化组表达阳性率明显高于低分化组(P＜0.05);SSTR各亚型表达与患者年龄、手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度无显著相关(P＞0.05);SSTR2、SSTR4的表达与ER的表达显著相关(P＜0.05),SSTR3、SSTR5的表达与PR表达显著相关(P＜0.05).结论 在子宫内膜癌中存在着SSTR各亚型的表达,一些亚型的表达与ER或PR的表达相关,相应的生长抑素类似物(SSTA)可能为SSTR阳性表达的子宫内膜癌的诊治及预后判定提供新的靶点,对孕激素有效的子宫内膜癌,SSTA也可能具有治疗作用.     

姜黄素和TSA对胃癌c—myc表达影响

目的了解姜黄素和TSA对胃癌c—myc基因表达影响,探讨组蛋白乙酰化／去乙酰化的动态平衡在胃癌基因表达和调控中的意义。方法进行胃癌细胞株SGC-7901和MGC803培养,然后加入不同浓度的组蛋白乙酰化酶抑制剂姜黄素和组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA分别进行干预,RT—PCR检测c—myc的mRNA的表达。结果通过RT—PCR的检测我们发现随着姜黄素的浓度增加及TSA浓度的减小c—myc的表达受到抑制（P〈0．01）。结论姜黄素与TSA对c—myc表达影响作用是相反的。     

胃癌组织中诱导型一氧化氮合酶表达及其与增殖细胞核抗原、p53表达的相关性研究

目的：探讨胃癌组织中诱导型一氧化氮合酶表达，及其与增殖细胞核抗原（PCNA）、肿瘤抑制基因p53表达的相关性。方法：应用免疫组织化学SABC法检测85例胃癌组织、30例癌旁组织及25例正常胃黏膜组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS)蛋白表达，同时检测胃癌组织中PCNA，p53的表达。结果：81．2％胃癌组织中表达iNOS蛋白，而癌旁组织及正常胃黏膜组织则分别为33．3％和20．0％（P＜0．001）。iNOS表达与胃癌组织的分化程度，临床分期淋巴结转移有明显相关性，而与胃癌组织的大体类型，病理组织类型无明显相关关系。p53、PCNA表达与iNOS蛋白表达显著相关（P＜0．05），而且iNOS表达阳性区，PCNA的阳性率高，占83％，结论：iNOS在胃癌组织中表达上调，提示iNOS可能在胃黏膜细胞癌变过程中起重要作用。iNOS表达可促进胃癌细胞增殖。iNOS的异常表达及抑癌基因p53的失活在胃癌的癌变过程中起协同作用。     

胃癌细胞多药耐药基因相关蛋白和p53表达及其相互关系

目的：研究胃癌细胞中多药耐药基因相关蛋白（multidrug resistance-associated protein,MRP)和抑癌基因p53的表达以及与胃癌生物学行为之间的关系。方法：用免疫组织化学方法对40例胃癌组织标本MRP及p53表达进行检测。结果：MRP阳性率为45％（18／40）。MRP阳性病例中p53阳性率为44．4％（8／18）。MRP阴性病例中p53阳性率为40．8％。MRP的表达与胃癌大体类型、组织类型、浸润深度、淋巴转移、远隔转移等因素无关。与p53的表达之间关系无显著意义。结论：MRP在胃癌组织中有较高水平的表达，其表达水平与胃癌生物学行为特点无关。p53对MRP的表达无调控作用。     

凋亡相关基因的表达与胃癌的关系

目的：研究凋亡相关基因bcl-2、bax、p53表达在胃癌发展过程中可能的作用机制。方法：采用免疫组化SABC法检测81例临床标本(慢性浅表性胃炎29例、萎缩性胃炎13例、胃炎伴异型增生21例、胃癌18例)的bcl-2、bax、p53蛋白表达。结果：在慢性浅表性胃炎组中无bcl-2表达，异型增生组阳性表达率5％，胃癌组为20％，阳性表达率呈逐渐增加趋势；bax蛋白阳性表达率在慢性浅表性胃炎组为83．3％，萎缩性胃炎组为64．3％，异型增生组为60％，胃癌组为46．7％，阳性表达率呈逐渐减少趋势；p53在慢性浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组无表达，在异型增生组阳性表达率20．6％，胃癌组为42．4％，阳性表达率呈逐渐增加趋势。结论：在胃癌的发展过程中可能存在凋亡抑制，促凋亡基因bax的表达逐渐受抑而抑凋亡基因的表达逐渐增加。