灵芝孢子破壁对其多糖提取率的影响

灵芝孢子是赤芝Ganoclerma luadum(Fr.)kast的孢子,是灵芝的精华,也是近年抗癌及增强机体免疫功能的热门药物之一.灵芝孢子是否需要破壁的研究非常活跃,有的人认为破壁后内含成分容易氧化;有的人认为灵芝孢子不破壁就很难被吸收利用.对此本实验以多糖为指标,破壁的孢子与未破壁的孢子进行提取率的比较,以供用药参考.     

甘草多糖对H22荷瘤小鼠的免疫调节作用

目的：建立H22荷瘤小鼠模型,观察甘草多糖对模型小鼠脾脏调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）及脾淋巴细胞转化率的影响,探讨甘草多糖的免疫调节机制。方法：50只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、环磷酰胺组、甘草多糖组和甘草多糖加环磷酰胺组。除正常组外,其余各组建立H22荷瘤小鼠模型。造模第2天各组开始给药,正常组和模型组腹腔注射生理盐水,环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺1周,甘草多糖组颈后皮下注射甘草多糖,连续14 d。取脾制备脾单细胞悬液,用流式细胞仪检测脾调节性T细胞,四甲基偶氮唑盐比色法检测脾淋巴细胞转化率。结果：模型组小鼠Treg细胞比例明显高于正常组,甘草多糖组Treg细胞比例低于模型组（P〈0.01）,甘草多糖组脾淋巴细胞转化率明显高于环磷酰胺组。甘草多糖与环磷酰胺无交互作用。结论：甘草多糖可能通过降低荷瘤小鼠Treg细胞的比例及提高脾淋巴细胞转化率而发挥抗肿瘤免疫调节作用。     

复合多糖对荷瘤小鼠T细胞亚群的影响

目的:探讨复合多糖对荷瘤小鼠外周血T细胞亚群的影响.方法:(1)模型:HepA荷瘤小鼠动物模型,(2)免疫检测方法:流式细胞术测定外周血T细胞亚群功能.结果:复合多糖能够使荷瘤小鼠外周血CD4 ,CD8 T细胞数量增加P＜0.01,调节CD4 /CD8 比例.结论:复合多糖有显著抗肿瘤作用,其机理可能是通过提高机体的细胞免疫功能实现的.     

灵芝多糖对NK细胞活性影响的研究

灵芝具有滋补强壮 ,扶正固本之功效 ,是祖国医药宝库的精华之一。灵芝多糖 (ｇａｎｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅＧＰＳ )作为灵芝的有效成分 ,具有多种生理活性与药理作用。近年来 ,对其研究已进入细胞、分子乃至基因水平。我们就灵芝多糖对ＮＫ细胞活性的影响进行了实验研究 ,探讨不同浓度灵芝多糖下ＮＫ细胞活性的变化 ,进而指导临床科学用药。1　材料和方法1 1　材料1 1 1　灵芝多糖 :以泰山赤灵芝为原料 ,提取灵芝多糖 ,由泰山医学院药理教研室提供。1 1 2　Ｋ5 6 2 :对数生长期的Ｋ5 6 2 ,由山东省医科院免疫室提供。1 1 …     

灵芝多糖对辐射损伤小鼠的防护作用

目的：辐射可引起多种组织器官的损伤。文中旨在探讨灵芝多糖对受60 Coγ射线损伤小鼠的辐射防护作用,为灵芝多糖的临床应用提供实验依据。方法采用大剂量60 Coγ射线全身照射雌性小鼠,制成放射损伤动物模型。小鼠按随机数字表法分为正常对照组、灌胃对照组、辐射对照组、灵芝多糖高剂量保护组、灵芝多糖低剂量保护组。灵芝多糖保护组小鼠在照射前3 d及照射后,以不同剂量的灵芝多糖连续灌胃14 d。观察受致死剂量60 Coγ射线照射小鼠的30 d存活率及生存时间长短。同时,检测用药后外周血指标、脾指数、血清超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase, SOD）活性的变化。结果实验结束时,灵芝多糖组小鼠的30 d生存期[（23．7±6．8）、（28．3±5．9）d]显著高于辐射对照组[（18．3±5．4）d],差异有统计学意义（P＜0．01）;灵芝多糖组小鼠的外周血WBC[（2．89±0．67）×109／L、（2．77±0．72）×109／L]显著高于辐射对照组[（2．54±0．63）×109／L],差异有统计学意义（P＜0．05）,且灵芝多糖组PLT 数[（487．20±165．77）×109／L、（716．36±223．44）×109／L]显著高于辐射对照组[（387．45±154．22）×109／L],差异有统计学意义（P＜0．05）;灵芝多糖高剂量组脾指数显著高于辐射对照组[（0．0054±0．0021） vs （0．0032±0．0007）, P ＜0．05）];灵芝多糖组小鼠的血清 SOD 含量[（401．27±35．26）、（369．02±29．70）U／mL]明显高于辐射对照组[（311．32±23．71）U／mL],差异有统计学意义（P＜0．05）结论灵芝多糖具有较强的抗辐射作用,能显著提高受致死剂量60 Coγ射线照射小鼠的存活率,降低辐射对小鼠外周血WBC和PLT的损伤作用,并提高SOD活性,其具体作用机制有待进一步深入研究。     

枸杞多糖对小鼠ＮＫ细胞和白细胞活性的免疫调节作用

目的 探讨枸杞多糖对小鼠免疫功能的正向调节作用。方法 以ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠为研究对象,灌服枸杞多糖２０天,另分别以环磷酰胺、环磷酰胺加枸杞多糖为不同组,测定ＮＫ细胞伤活性和白细胞数量。结果 枸杞多糖能增强ＮＫ细胞杀伤活性及增加白细胞数量,对环磷酰胺所诱发的ＮＫ细胞杀伤活性的降低,枸杞多糖有回复作用。结论 枸杞多糖具有正向免疫调节作用。     

灵芝多糖肽和小分子灵芝多糖肽抗肿瘤作用和免疫调节作用比较

目的 比较灵芝多糖肽（GLPP）和小分子灵芝多糖肽（GL-LPP3）离体抗肿瘤作用及对免疫调节作用.方法 以GLPP和GL LPP3作用于肿瘤细胞株（SW480、MCF-7、K562细胞）,以5 Fu作对照,24、48 h后收集细胞,考察其对肿瘤细胞的抑制率.建立混合淋巴细胞培养体系,以环孢素A为对照,用MTT法测定24,48,72 h细胞活性,观察GLPP和GL-1PP3对免疫的调整作用. 结果 GLPP和GLLPP3对肿瘤细胞株SW480、MCF-7、K562存活率无抑制作用;GLPP和GL-LPP3可增强淋巴细胞免疫作用. 结论 GLPP和GL-LPP3体外不能直接抑制或杀伤肿瘤细胞,可增强T淋巴细胞免疫功能.     

灵芝活性多糖的提取工艺研究

目的确立水提醇沉法与超声提取法相结合提取灵芝活性多糖的最佳工艺。方法以脾细胞代谢MTT活力为评价指标,采用正交试验对超声时间、水提温度和水提时间等因素进行考察,寻求最佳的提取工艺。结果各因素对灵芝多糖脾细胞代谢MTT活力的影响大小排列为：超声时间〉水提温度〉水提时间,超声时间对灵芝多糖活性影响显著。提取最佳工艺为：超声提取时间20min,水提取温度80℃,水提取时间2h。结论本工艺为提取活性灵芝多糖提供了一定的参考。     

Effects of Ganoderma lucidum spores on sialoadenitis of nonobese diabetic mice

Background Sjǒgren syndrome （SS） is a systematic autoimmune disease, on which traditional therapeutic agents show limited effect. More effective agents with longer-lasting and fewer side effects are needed in the clinic. The aim of this study was to investigate the effects of Ganoderma lucindum spores （GLS） on sialoadenitis of nonobese diabetic （NOD） mice. Methods Thirty-two female NOD mice were assigned randomly into 4 groups： low-dose GLS-treated （L-GLS） group and high-dose GLS-treated （H-GLS） group, a dexamethasone group, and a normal saline （NS） control group. Stimulated total saliva flow rate （STFR）, area of lymphocytic infiltration in submandibular glands and ratios of CD4^＋ and CD8^＋ T lymphocytes and B lymphocytes in peripheral blood as well as apoptosis of these subsets and serum IgG level were tested after 10 weeks of treatments. Differences among the groups were analyzed by one-way analysis of variance （ANOVA）, Student-Newman-Keuls Test （SNK） was used between each two groups and a P 〈0.05 was considered statistically significant. Results STFR of the high-dose GLS group increased significantly after a 10-week treatment compared with those of the NS control group （P 〈0.05）. The incidence of sialoadenitis in GLS-treated NOD mice groups showed no significant difference compared with the control group （P 〉0.05）, but the area of lymphocytic foci in both the H-GLS and L-GLS groups decreased significantly to 50% of the NS control group （P 〈0.05）; the ratio of CD4^＋/CD8^＋ T lymphocytes and apoptosis of B lymphocytes of NOD mice with sialoadenitis were less and apoptosis of CD4^＋ and CD8^＋ T lymphocytes were significantly increased compared with the control group （P 〈0.05）. After pretreatment with H-GLS before sialoadenitis onset, the ratio of CD4^＋/CD8^＋ T lymphocyte and the serum IgG levels of NOD mice decreased significantly （P 〈0.05）. Conclusions Pretreatment with H-GLS can relieve symptoms of sialoadenitis in NOD mice. GLS has some protective effects on sialoadenitis in NOD mice through increasing STFR and decreasing the area of lymphocytic foci by regulating the ratio of CD4^＋/CD8^＋ T and apoptosis of B lymphocytes.     

灵芝多糖对妊娠期糖尿病大鼠血糖及胰岛素水平的影响

目的：探讨灵芝多糖对妊娠期糖尿病大鼠的降糖作用及机制。方法：将24只大鼠随机分为正常对照组、妊娠期糖尿病模型组、灵芝多糖治疗组。分别检测0、7、14 d空腹血浆血糖和胰岛素水平。结果：与妊娠期糖尿病模型组比较,灵芝多糖治疗组大鼠空腹血糖明显降低、胰岛素水平显著增高（P〈0.01）。结论：灵芝多糖具有治疗妊娠期糖尿病大鼠的作用,其机制可能和上调胰岛素水平有关。     

灵芝提取物镇痛抗炎作用研究

目的研究灵芝提取物的镇痛与抗炎作用。方法用冰醋酸化学刺激疼痛模型和二甲苯诱导的鼠耳肿胀炎症模型，观察灵芝提取物的镇痛作用与抗炎作用。结果灵芝提取物能明显减少冰醋酸诱导的小鼠扭体次数（P〈0．01），对二甲苯诱导的鼠耳肿胀有明显的抑制作用（P〈0．01）。结论灵芝提取物具有镇痛和抗炎作用。     

灵芝多糖预防大鼠动脉粥样硬化的实验研究

目的:探讨灵芝多糖对食饵性实验动脉粥样硬化大鼠动脉粥样硬化形成的作用及机制。方法:将24只大鼠随机分为正常对照组、动脉粥样硬化模型组、灵芝多糖预防组。12周末颈动脉取血检测血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和脂蛋白a[Lp(a)]含量。处死大鼠,光镜观察主动脉粥样斑块形成情况。结果:与动脉粥样硬化模型组比较,灵芝多糖预防组大鼠血清TG、TC、LDL、Lp(a)含量明显降低(P<0.05),主动脉内膜泡沫细胞数量明显减少。结论:灵芝多糖具有防止大鼠动脉粥样硬化形成的作用,其机制可能和调节血脂障碍有关。     

灵芝多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤细胞核酸及其细胞周期的影响

目的 研究灵芝多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤细胞核酸及其细胞周期的影响,探讨其抗肿瘤作用的可能机制.方法 分别给荷S180腹水瘤小鼠灌胃灵芝多糖(400,200,100mg/kg·b.w.)、生理盐水、或皮下注射环磷酰胺(25 mg/kg·b.w.),1次/d,连续9 d.观察腹水瘤细胞RNA、DNA含量,RNA/DNA比值以及细胞周期的改变.激光扫描共聚焦显微镜技术和吖啶橙(AO)荧光染色技术检测肿瘤细胞DNA和RNA荧光强度.流式细胞仪和碘化丙啶荧光染色技术分析肿瘤细胞的细胞周期.结果 与生理盐水组比较,灵芝多糖各剂量组的RNA、DNA含量有不同程度的减少,中剂量组(200mg/kg)具有统计学意义(P=0.000);灵芝多糖各剂量组的RNA/DNA比值均下降(P=0.003,0.000,0.008),说明灵芝多糖减少在体肿瘤细胞RNA的含量比DNA更为明显.环磷酰胺使肿瘤细胞的RNA和DNA含量均下降(P=0.000),但对RNA/DNA比值没有影响.灵芝多糖各剂量组使G0/G1期细胞百分数增加(P=0.003,0.000,0.000),而环磷酰胺作用相反(P=0.000).灵芝多糖对S期细胞的百分率没有影响,而环磷酰胺使S期细胞的百分率减少(P=0.011).灵芝多糖各剂量组使G2/M期细胞百分数下降(P=0.014,0.049,0.016),而环磷酰胺作用相反(P=0.000).结论 灵芝多糖对在体S180肿瘤细胞DNA和RNA含量及细胞周期的影响与环磷酰胺不同;通过动员机体的免疫功能,抑制肿瘤细胞DNA和RNA的复制与合成,从而影响其细胞周期的正常运转,可能是灵芝多糖抑制肿瘤细胞生长的机制之一.     

灵芝孢子粉对小鼠实验性突变和移植性肿瘤的影响

目的 观察灵芝孢子粉对小鼠实验性突变和移植性肿瘤的影响。方法 健康昆明品系小鼠以灵芝孢子粉（0.2～5.0 g/kgb.w.）灌胃,用环磷酰胺腹腔注射诱导产生骨髓嗜多染红细胞微核后,进行微核试验测定微核出现的千分率。S180瘤源小鼠瘤细胞接种于健康小鼠体内,14 d后取出瘤块进行瘤重比较。结果 灵芝孢子粉可明显降低环磷酰胺所致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,也能明显抑制S180移植性肿瘤生长。结论 灵芝孢子粉能抑制或对抗细胞染色体的突变,具有一定抗肿瘤作用。     

大分子灵芝多糖对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用

目的:探讨超滤管截留得到的大分子量灵芝多糖(ultrafiltered macromolecular Ganoderma lucidum polysaccharide,UM-GLP)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用。方法:以非小细胞肺癌细胞A549和NCI-H1299作为研究对象,并以空白培养基和紫杉醇(PTX)处理分别作为空白对照和阳性对照。采用MTT法检测UM-GLP对A549和NCI-H1299细胞增殖的抑制作用,划痕实验检测UM-GLP对A549和NCIH1299细胞迁移能力的抑制作用,Transwell实验检测UM-GLP对A549和NCI-H1299细胞侵袭能力的抑制作用。结果:MTT实验结果显示,随着UM-GLP和PTX药物浓度的增加,细胞增殖抑制率明显增加,UM-GLP浓度在0.5~2.0 mg/ml时,与PTX浓度在25~100 nmol/L的抑制效果相仿。A549和NCI-H1299细胞划痕实验结果显示,与空白对照组比较,UM-GLP组和PTX组的迁移距离均明显缩短(P0.05)。Transwell实验结果显示,UM-GLP(2 mg/ml)处理后,非小细胞肺癌细胞侵袭数量显著低于空白对照组(P0.05);并且UM-GLP对A549细胞侵袭能力的抑制作用与紫杉醇组(0.1μmol/L)相当,对NCI-H1299细胞侵袭能力的抑制作用小于紫杉醇组(0.1μmol/L)(P0.05)。结论:大分子量灵芝多糖可有效抑制非小细胞肺癌细胞A549和NCI-H1299的增殖、迁移和侵袭能力。