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相似文献
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1.
p16 mRNA在乳腺癌中的表达及临床病理意义   总被引:6,自引:0,他引:6  
Guo S  Liao S  Ding H 《中华医学杂志》1998,78(6):464-466
目的探讨p16mRNA在原发性乳腺癌的表达情况及其临床病理意义。方法体外转录法生物素标记RNA探针,用原位杂交技术检测p16mRNA在120例乳腺癌标本中的表达。结果p16mRNA的阳性表达率708%(85/120),与患者年龄、肿瘤大小及雌、孕激素受体状态无相关性;淋巴结转移组的阳性率54%(31/57),未转移组86%(54/63)(P<001);p16mRNA表达阳性组的3年以上病死率为25%(21/85),阴性组为57%(20/35)(P<001)。结论p16mRNA的异常表达在乳腺癌的发生发展中可能起重要作用。  相似文献   

2.
目的 克隆人IL-12(hIL-12)p40和p35亚单位cDNA,构建人单链IL-2(rhscIL-2)融合基因,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法从经PDBu刺激的EBV转化的人B淋巴细胞株NC37中提取mRNA,经RT-PCR分别获得hIL-12p40和p35亚单位编码序列的cDNA,运用重组PCR技术将两段基因通过一疏水性多肽接头(Gly4Ser)3DNA序列进行体外基因重组,构建rhscI  相似文献   

3.
目的研究核因子κB(NFκB)对白细胞介素1β(IL1β)引起的体外培养的人肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子(ICAM1)的基因调控机理。方法采用凝胶迁移率法观测NFκB的活化,以Northern杂交方法检测细胞间粘附分子的基因表达,用细胞ELISA法检测ICAM1蛋白水平的表达。结果rhIL1β10ng/ml刺激肾小球系膜细胞1、2、4小时,均引起NFκB活化,且1小时为最强。4小时,ICAM1mRNA表达水平上调035(刺激前为014)。结论细胞因子IL1β刺激人肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子是通过NFκB调控,NFκB可能参与调节肾小球疾病的免疫炎症的过程。  相似文献   

4.
目的观察烫伤后重组杀菌通透性增加蛋白(rBPI21)对内毒素增敏系统脂多糖结合蛋白/脂多糖受体CD14(LBP/CD14)及肿瘤坏死因子α(TNFα)mRNA表达的影响及其意义。方法采用大鼠35%Ⅲ°烫伤模型,动物分为正常对照组(8只)、烫伤组(12只)和rBPI21治疗组(12只)。烫伤组和rBPI21治疗组动物分别于伤后12和24小时活杀。留取组织和血标本采用半定量RTPCR方法,分别检测组织LBP、CD14、TNFαmRNA表达及器官功能指标。结果rBPI21治疗可明显抑制局部组织LBP/CD14mRNA表达(P<005001),并不同程度抑制肝、肺及肾组织TNFαmRNA表达水平(P<005001)。同时,rBPI21治疗组动物血清谷丙转氨酶水平明显降低(P<001),而小肠组织二氨氧化酶活性显著高于烫伤组(P<005)。结论烫伤早期应用rBPI21可部分减轻肠源性内毒素移位诱发的病理损害,其作用机理可能与rBPI21对体内多种组织LBP/CD14mRNA表达的下调效应有关。  相似文献   

5.
本文探讨新生和脐血单个核细胞(CBMC)白细胞介素12(IL-12)和γ-干扰素(IFN-γ)基因表达水平;观察重组IL-12地CBMCIFNγ基因表达的影响。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT_PCR)测定8例新生儿CBMCIL-12p49RNA和IFN-γmRNA表达,用ELISA法测新一儿CBMC细胞培养上清液中IFN-γ浓度。结果显示:新生儿CBMC一外受刺激后表达的I国2p40mRNA、I  相似文献   

6.
利用构建分泌人IL-2的逆转录病毒的包装细胞,直接体内注射,观察了对B16小鼠黑色素瘤生长影响及转基因效果。狭缝印迹分析结果显示,B16细胞在体内获得IL-2mRNA表达。同时,肿瘤生长受到抑制,表现在小鼠成瘤与存活时间延长,免疫功能也获得增强,IFN-γ水平升高。本结果与本室以往报道的体外基因转移的动物实验结果相符,提示直接体内注射病毒包装细胞可转移外源基因及显示抑癌作用。  相似文献   

7.
目的:研究小鼠B7基因转染对小鼠肝癌细胞Hepal6细胞株细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。方法:用逆转录病毒载体,将小鼠B7基因导入小鼠肝癌细胞Hepal6细胞株中,经G418筛选,获得高表达B7分子的阳性细胞克隆,采用CTLA4Ig的间接免疫荧光法检测B7分子的表达情况,并观察了B7基因转染对细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。结果:①亲本小鼠肝癌细胞株Hepal6不表达B7分子,转染B7基因的Hepal6细胞高表达B7分子;②转染B7基因的Hepal6细胞与亲本Hepal6细胞相比,体外生长速度和细胞形态无明显改变,但免疫原性大大增强,致瘤性消失。结论:B7基因转染使得小鼠肝癌细胞株Hepal6免疫原性大大增强,致瘤性消失  相似文献   

8.
B7—1基因转染小鼠EL—4淋巴瘤细胞的致瘤性研究   总被引:2,自引:1,他引:1  
目的研究B71基因转染小鼠EL4淋巴瘤细胞的致瘤性,为制备基因转染瘤苗提供实验依据。方法将B71基因转染小鼠EL4淋巴瘤细胞后,用G418选择和克隆的方法获得高表达B71分子的EL4B71+细胞,然后进行小鼠的体内致瘤试验。结果EL4B71+细胞接种小鼠后,与野生型EL4(EL4Wt)相比,肿瘤结节形成时间和荷瘤小鼠存活时间明显延长,EL4B71+细胞协同IL2接种小鼠后,效果更加显著。结论B71基因转染小鼠EL4淋巴瘤细胞的致瘤性比野生型EL4(EL4Wt)低。  相似文献   

9.
目的:探讨联合应用成纤维细胞介导IL2和IL3的基因疗法对骨髓移植(BMT)后荷瘤小鼠抗肿瘤作用的效果及机理。方法:将分别转染IL2基因及IL3基因的NIH3T3细胞以单独或联合方式移植至BMT的荷瘤小鼠腹腔内8d后,取出小鼠骨髓细胞检测杀伤活性的变化以及IL2受体的表达,并观察荷瘤小鼠的存活期。结果:IL3基因治疗虽然可加速BMT后造血重建过程,但对骨髓细胞的NK、LAK活性具有一定的抑制作用;IL2基因治疗可明显提高骨髓细胞的杀伤活性;联合应用基因治疗后荷瘤小鼠骨髓NK、LAK活性及骨髓细胞CD25表达升高,明显延长大剂量化疗后接受BMT的荷瘤小鼠的存活期。结论:联合应用IL2和IL3的基因疗法能协同提高骨髓细胞IL2受体表达水平,提高骨髓细胞毒活性,增强BMT后的抗肿瘤效果。  相似文献   

10.
应用细胞免疫学和分子生物学的斑点杂交技术,探讨H2O2对小鼠脾细胞产生IL2和IL2mRNA表达的影响。结果示103~10-2mol·L1H2O2对小鼠脾细胞产生IL2有抑制作用,并显著低于对照组(P<0.01);10-4mol·L-1有促进作用(P<0.01);10-8~10-5mol·L-1则影响不明显。斑点杂交结果示10-3mol·L-1H2O2对小鼠脾细胞IL2mRNA表达有抑制作用,10-4mol·L-1有促进作用,而10-5mol·L-1影响不明显。以上结果提示H2O2可能是通过影响IL2mRNA的水平来影响IL2的产生  相似文献   

11.
目的 探讨过表达IL-12的恶性黑色素瘤细胞B16对肿瘤免疫微环境重建过程中T细胞表面PD-1表达水平的影响。方法 利用慢病毒感染小鼠黑色素瘤细胞B16以构建稳定过表达IL-12的B16细胞株;利用qRT-PCR、ELISA检测IL-12的表达情况;通过平板细胞克隆形成实验验证转染病毒对B16细胞增殖能力的影响;利用ELISA检测B16/IL-12细胞在体内表达IL-12的能力;将健康的C57BL/6小鼠随机分为2组,分别接种B16细胞及B16/IL-12细胞,14 d后用流式细胞术检测肿瘤引流区淋巴结中高表达PD-1的T细胞比例;利用650cGy剂量的放射线照射C57BL/6小鼠以构建免疫重建模型,并将造模后的小鼠随机分为2组,分别接种B16细胞及B16/IL-12细胞,将未接受放疗处理的小鼠作为对照组接种B16细胞,记录各组小鼠肿瘤生长情况,接种细胞14 d后用流式细胞术分别检测肿瘤引流区淋巴结以及肿瘤组织中PD-1+T细胞比例。结果 B16/IL-12细胞相比于B16细胞显著增加IL-12的表达(P<0.001);转染IL-12过表达慢病毒并未对B16细胞增殖能力造成显著影响(P>0.05);接种B16/IL-12细胞的何瘤小鼠在其肿瘤组织中含有更高水平的IL-12(P<0.01);常规荷瘤小鼠模型中,B16/IL-12组小鼠较B16组小鼠具有更低比例的CD4+PD-1+T细胞(P<0.01),而CD8+T细胞群中,PD-1表达水平差异不显著(P>0.05);免疫重建小鼠模型中,接种B16细胞的小鼠肿瘤引流区淋巴结和肿瘤组织中的CD4+PD-1+T细胞(P<0.05)及CD8+ PD-1+T细胞比例(P<0.01)均高于正常B16组小鼠,接种B16/IL-12细胞的免疫重建小鼠肿瘤引流区淋巴结及肿瘤组织中的CD4+PD-1+T细胞比例(P<0.01)和CD8+ PD-1+T细胞比例(P<0.001)相比于接种B16细胞的免疫重建小鼠均有显著降低;在小鼠肿瘤生长过程中,接种B16/IL-12细胞的免疫重建小鼠的肿瘤生长受到明显抑制(P<0.001)。结论 肿瘤区域过表达IL-12后可减少免疫重建过程中肿瘤区域T细胞表面PD-1 的表达,达到良好的肿瘤控制效果。  相似文献   

12.
共刺激信号B7—1表达对小鼠肿瘤细胞生长和转移的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
为B71分子基因在肿瘤免疫基因治疗中的应用提供实验依据。方法通过逆转录病毒介导的基因转移技术,将B71cDNA导入具有不同免疫原性的小鼠肿瘤细胞获得表达,并观察转基因细胞在纯系小鼠体内生长和转移的改变。结果由于B7-1基因的转导表达,使具有免疫原性的EL4T淋巴瘤细胞致瘤性丧失;使非免疫原性的B16黑色素瘤、P815肥大细胞瘤和MA891乳腺癌细胞的致瘤性减弱;使B16细胞的实验性转移和MA891细胞的自发肺转移能力降低。通过转导B7-1基因的B16细胞的免疫接种,可使再次接种的亲本B16细胞的致瘤性减弱:但对已生长的亲本B16细胞影响不明显。结论B71基因导入不同的肿瘤细胞后,可引起机体产生不同程度抗肿瘤免疫反应,使肿瘤细胞在体内的生长和转移能力丧失或减弱,这种反应的强弱与肿瘤细胞本身的特性有关。  相似文献   

13.
目的:研究重组鼠白细胞介素12(AdCMVIL-12)与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(AdCMVGM-CSF)的腺病毒载体联合应用对B16黑色素瘤的抗肿瘤作用。方法:将B16黑色素瘤细胞接种于C57/BL6小鼠右侧背部皮下后,待瘤体直径达5mm时将荷瘤小鼠随机分为4组,分别为AdCMVIL-12组、AdCMVGM-CSF组、AdCMVIL-12加AdCMVGM-CSF组(联合治疗组)和AdC MVLacZ组(对照组),每组12只,并于肿瘤组织局部分别多点注射相对应剂量的腺病毒载体,观察各组小鼠肿瘤的生长情况及其诱导的细胞免疫反应,检测各组小鼠血清IL-12和GM-CSF表达水平的变化。结果:病理学观察,联合治疗组肿瘤组织内可见大片凝固性坏死,有大量的淋巴细胞、巨噬细胞浸润。治疗30 d后,联合治疗组肿瘤平均体积为(60.73±11.36 )mm3,与对照组、AdCMVIL-12组和AdCMVGM-CSF组[分别为(675.18±80.59)、(1 86.91±19.15)和(223.45±23.11)mm3] 比较差异均有显著性(P>0.01)。同时,AdCMVIL-12与AdCMVGM-CSF联合基因治疗可有效延长IL-12和GM-CSF的表达时间,并且对B16黑色素瘤细胞具有很强的特异性杀伤作用,杀伤率为(69.53 ± 9.20)%。 结论:IL-12与GM-CSF联合基因治疗可增强荷B16黑色素瘤小鼠的抗肿瘤免疫反应,并能有效降低单独应用AdCMVIL-12的毒副作用。  相似文献   

14.
目的 探讨不同剂量的黄芪多糖对小鼠B 16-BL6黑色素瘤肺转移的影响及机制.方法 采用B 16-BL6小鼠人工肺转移模型研究不同剂量黄芪多糖对黑色素瘤肺转移的影响;测量给药后小鼠免疫器官指数的变化探讨其可能的机制.结果 高剂量组的黄芪多糖能够显著抑制小鼠B16-BL6黑色素瘤肺转移,并能增加小鼠脾脏指数.结论 高剂量黄芪多糖可能通过增强免疫达到抗黑色素瘤细胞肺转移的作用.  相似文献   

15.
Objective To study the effect of gene radiotherapy combining injection of recombinant plasmid pNEgr-mIL-12 with local X-irradiation on cancer growth and to elucidate the mechanisms of tumor inhibition. Methods Alkaline lysis was used to extract the plasmid and polyethylene glycol 8000 (PEG 8000) was applied for further purification of plasmids. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the expression of IL-12 protein. C57BL/6J mice were subcutaneously inoculated with B16 melanoma cells and the plasmid was injected directly into the tumor. Gene-radiotherapy combining pNEgr-mIL-12 recombinant plasmid with X-irradiation was given three times to C57BL/6J mice bearing B16 melanoma. Changes in immunologic parameters of tumor-bearing mice were detected with relevant immunologic assays. Results Results showed a significant decrease in tumor growth rate (P<0.05-0.001) after 3 times of gene-radiotherapy with IL-12 and X-irradiation. Immunologic studies showed a significant increase in CTL and NK cytolytic activity (P<0.05-0.001) and an up-regulated secretion of IFN-γ and TNF-α (P<0.01-0.001). Moreover, the expression of mIL-12 in B16 melanoma cells of the treated tumor-bearing mice was found to be higher than that of control. Conclusion pNEgr-mIL-12 plasmid combined with X-irradiation can increase tumor control and the mechanism of increased tumor inhibition is related to the enhancement of anticancer immunity in tumor-bearing mice.  相似文献   

16.
白细胞介素12基因修饰的Lewis肺癌瘤苗的抗肿瘤免疫作用   总被引:1,自引:1,他引:1  
目的:研究白细胞介素12(IL-12)基因修饰的Lewis肺癌瘤苗的抗肿瘤免疫作用。方法:用含IL-12基因的腺病毒载体,在体外以不同感染系数感染Lewis肺癌细胞,并分别接种于C57BL/6小鼠皮下,观察其致瘤性的变化;并用Lewis肺癌细胞及B16黑色素瘤细胞再 次攻击免疫后的C57BL/6小鼠,观察肿瘤发生情况。 结果:以各种感染系数AdCMVIL-12制备的瘤苗,接种于小鼠皮下后,无肿瘤生长,完全消除了Lewis肺癌细胞的致瘤性;瘤苗注射6 d后,用Lewis肺癌细胞再次攻击,仍无肿瘤生长,抑瘤率达100%;用B16黑色素瘤细胞攻击,10~12 d均有肿瘤生长,说明此瘤苗具有肿瘤特异性。结论:AdCMVIL-12能消除Lewis肺癌细胞的致瘤性,并能诱导显著的抗肿瘤免疫反应,对肿 瘤的复发及转移有较好疗效。  相似文献   

17.
18.
CD3AK和黄芪多糖联合治疗荷瘤动物的实验研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的 探讨CD3AK和黄芪多糖 (APS)对荷瘤动物的治疗作用。方法 将黑色素瘤B1 6细胞移植到C57BL/ 6小鼠腹腔建立动物模型 ,分别用APS、CD3AK及二者联合治疗荷瘤鼠 ,检测荷瘤鼠脾NK细胞活性和脾淋巴细胞IL - 2诱生水平以及荷瘤鼠生存期。结果 单纯APS和单纯CD3AK细胞能延长荷瘤鼠的生存期 ,分别为 1 8.64± 1 .2 1天和 2 5 .34± 3 .68天 (荷瘤鼠对照组为 1 4 .67± 2 .82天 ,P <0 .0 1 ) ;二者联合应用 ,APS能显著增强CD3AK细胞的抗肿瘤作用 ,延长荷瘤鼠的生存期 ,其生存期为 35 .65± 3 .74天 (P <0 .0 0 1 )。通过对荷瘤鼠进行细胞免疫功能观察发现 ,CD3AK细胞和APS均具有抵抗荷瘤鼠NK细胞活性、IL - 2产生能力下降的作用 ;APS对CD3AK仍有显著增强效应。结论 APS是一种实用而有效的生物反应调节剂 ,CD3AK和APS联合应用对晚期肿瘤有一定治疗效果  相似文献   

19.
以NIH3T3细胞作为载体细胞,用基因转染的方法建立了持续分泌白细胞介素2(IL-2)的细胞株。在体外此细胞上清可以增强小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞对黑色素瘤B16细胞的杀伤作用(与对照组比较,均为P<0.01)。体内注射基因转染细胞则可以抑制黑色素瘤细胞在体内的生长(与对照组比较,均为P<0.01)。结果表明,分泌IL-2的成纤维细胞可以通过激活非特异性免疫杀伤细胞而达到抗肿瘤的作用,是一种有较大潜力的肿瘤生物治疗的新途径。  相似文献   

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