勃起障碍者阴茎海绵体Cx43和nNOS mRNA的表达

目的研究勃起障碍(ED)患者阴茎海绵体连接蛋白43(Cx43)和神经性一氧化氮合酶(nNOS)mRNA的表达,探讨ED的发病机理.方法应用RT-PCR方法检测9例器质性ED患者阴茎海绵体标本组织中Cx43、nNOS mRNA的表达,以6例具有正常勃起功能者的海绵体组织作为对照进行比较分析.结果器质性ED患者阴茎海绵体Cx43、nNOSmRNA的表达量明显低于正常对照组(P<0.05).结论器质性ED的发生与缝隙连接的Cx43 mRNA以及nNOS mRNA表达下降有关.     

阴茎头—阴茎海绵体分流术治疗阴茎异常勃起

自 1992年～ 1998年我院收治 3例阴茎异常勃起患者 ,采用阴茎头 -海绵体分流术治愈。现报道如下 :1　资料与方法1.1　一般资料　 3例阴茎异常勃起患者 ,年龄分别为 37岁、47岁、49岁 ,异常勃起时间为 72小时 2例 ,144小时 1例 ,2例为注射罂粟硷所致 ,1例原因不明 ,1例入院前在其他医院经多种治疗无效而转入我院 ,入院时查体 :阴茎勃起坚硬 ,触痛 ( ) ,阴茎头及尿道海绵体不充血 ,血常规检查无异常 ,尿糖 (- ) ,血糖在正常范围 ,心电正常。1.2　手术方法　 3例均采用硬膜外麻醉 ,常规消毒后 ,铺无菌巾 ,于阴茎头距冠状沟约 1.0ｃｍ处横行切开…     

阴茎包埋对大鼠阴茎海绵体缝隙连接蛋白43表达的影响

目的:探讨阴茎包埋对阴茎海绵体组织缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:通过建立隐匿阴茎大鼠模型获得实验标本,分2月组、4月组,每组25只大鼠,各阶段又分包埋组(15只),正常组(10只),光镜下观察海绵体形态结构的改变,免疫组化法观察海绵体平滑肌细胞Cx43的表达。结果:2月包埋组与2月正常组相比Cx43的表达无明显变化(吸光度值0.30±0.04比0.34±0.11,P>0.05),包埋4月组光镜下见大鼠阴茎海绵体大量间质组织增生,海绵窦狭窄,免疫组化观察包埋4月组大鼠阴茎海绵体平滑肌Cx43表达较正常组明显降低(正常4月组吸光度值0.38±0.06;包埋4月组0.18±0.03,P<0.05)。结论:随着包埋时间的延长,阴茎包埋导致海绵体形态结构上的病理改变、Cx43表达减少,可能引起阴茎勃起功能障碍。     

阴茎海绵体注射PGE1治疗勃起功能障碍186例

前列腺素E1(PGEl)为血管活性药物，是泌尿外科近十年来治疗勃起功能障碍(ED)的有效药物之一。2001年1月-2003年10月我院男科门诊共诊治186例ED患者，并采用前列腺素E1自行阴茎注射治疗，现报告如下。     

阴茎海绵体注射血管活性药和海绵体造影检查在外伤性勃起功能障碍司法鉴定中的应用

目的探讨阴茎海绵体注射血管活性药和海绵体造影在外伤性阴茎勃起功能障碍的司法鉴定中的应用价值。方法对32例自诉外伤后发生勃起功能障碍进行阴茎海绵体注射血管活性药和海绵体造影,同时还进行了IIEF-5评分,性激素测定及阴茎夜间勃起试验。结果注射罂粟碱后,阴茎能勃起者28例,其中达到充分勃起者24例,4例注射后无反应,海绵体造影有4例显示静脉漏,IIEF-5评分平均6．8分。结论阴茎海绵体注射血管活性药和海绵体造影用于外伤性阴茎勃起功能障碍的司法鉴定是一种较为客观、公正的方法。     

阴茎头—阴茎海绵体分流术治疗阴茎异常勃起体会

自1992～1998年我院收治3例阴茎异常勃起患者,采用阴茎头-海绵体分流术治愈.现报道如下.     

阴茎头海绵体切开分流术治疗缺血性阴茎异常勃起

阴茎异常勃起是临床上较为少见的阴茎血流动力学障碍,处理不及时,可能导致海绵体纤维化和ED。采用外科分流手术是治疗阴茎异常勃起的有效方法。我院从2003年6月-2008年1月,采用阴茎头海绵体切开分流术治疗9例缺血性阴茎异常勃起患者,随访疗效满意,现报告如下。     

外源性硫化氢通过抑制阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡改善海绵体神经损伤大鼠勃起功能障碍

目的 观察外源性硫化氢对双侧海绵体神经损伤（BCNI）大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSMC）凋亡及勃起功能障碍的影响。方法 将24只SD雄性大鼠随机分为3组（n=8只/组）：假手术组、双侧海绵体神经损伤组（BCNI组）、硫化氢干预组（BCNI+NaHS组）。通过钳夹损伤双侧海绵体神经构建BCNI模型。BCNI+NaHS组每天腹腔注射100 μmol/kg的NaHS溶液;BCNI组每日腹腔注射等量生理盐水。治疗4周后检测海绵体内压（ICP）和平均动脉压（MAP）,并通过Western blot检测胱硫醚-β-合成酶（CBS）和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）,α-SMA,Collagen-Ⅰ,Caspase-3、Bax、Bcl-2表达水平,通过免疫组化检测CBS、CSE表达情况,Masson’s Trichrome染色检测海绵体平滑肌/胶原比值,以及 TUNEL+α-SMA组织免疫荧光双染检测CCSMC凋亡水平。结果 治疗4周后,BCNI+NaHS组ICP/MAP比值高于BCNI组（P<0.05）;Masson’s Trichrome染色结果显示,BCNI+NaHS组海绵体平滑肌/胶原比值较 BCNI 组显著升高（P<0.05）;Western blot 结果显示 BCNI+NaHS 组α-SMA 蛋白表达高于 BCNI 组（P<0.05）,同时 Collagen-Ⅰ蛋白表达低于 BCNI组（P<0.05）;TUNEL+α-SMA组织免疫荧光双染结果显示,BCNI+NaHS组CCSMC凋亡数较BCNI组降低（P<0.05）。与BCNI组相比,BCNI+NaHS组Caspase-3、Bax蛋白表达降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值升高（P<0.05）。BCNI组CBS、CSE表达较其余两组显著降低（P<0.05）。结论 外源性硫化氢可提高经典的抗凋亡蛋白Bcl-2及抑制CCSMC凋亡,进而改善BCNI大鼠勃起功能。     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白的表达及意义

目的了解糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞Ot一肌动蛋白（actin）的表达及意义。方法利用链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病及糖尿病性勃起功能障碍模型,40只SPF级SD雄性大鼠,先按时间随机分为两组（每组20只）,分别是注射STZ后7周组和4周组,再按处理因素即给予大鼠腹腔注射STZ（60mg／kg）是否成模,分为对照组（未注射STZ,5只）、成糖尿病性勃起功能障碍模型组、成糖尿病性非勃起功能障碍组、未成模组。利用免疫组化SP染色法对不同处理组的标本进行α-肌动蛋白的研究,利用免疫组化SABC染色法对不同处理组的标本进行肌间线蛋白的研究,利用原位杂交技术检测不同组别骨桥蛋白（OPN）mRNA含量的改变。图像分析利用彩色图文分析系统,第三人进行图像分析及数据采集,测量随机每高倍镜视野下累积光密度（IOD）,以IOD的值反映组织切片中相应阳性物质的表达程度。结果糖尿病性勃起功能障碍组IOD均小于对照组、糖尿病非勃起功能障碍组及未成模组（均P〈0．05）,糖尿病非勃起功能障碍组的IOD小于对照组和未成模组（P〈0．05）,不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F＝3．801,P＝0．62）,交互效应不显著（F＝1．549,P=0．225）。免疫组化染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=0．052,P=0．821）,各处理组间的IOD不存在显著性差异（F=0．045,P=0．987）,交互效应不显著（F=0．572,P=0．639）。OPN mRNA原位杂交染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=1．288,P=0．266）,交互效应不显著（F=1．819,P=0．168）,糖尿病性勃起功能障碍组的IOD均大于其余三组（P均〈0．001）。糖尿病非勃起功能障碍组的IOD大于对照组和未成模组（P均〈0．001）。对照组的IOD与未成模组未见显著差异（P=0．873）。结论糖尿病可以引起阴茎海绵体平滑肌的表型转化;阴茎海绵体平滑肌表型转化可以导致勃起功能障碍。     

阴茎海绵体内注射血管活性药物治疗心因性勃起功能障碍的评价

目的：探讨阴茎海绵体内注射血管活性药物对心因性勃起功能障碍的疗效。方法：67例心因性勃起功能障碍患者进行阴茎海绵体内注射盐酸罂粟碱和酚妥拉明混合液，配合心理咨询，性知识讲解和性咨询等二阶段综合治疗，结果：第一，二阶段治疗的有效率分别为25．4％，78．0％，总有效率为83．6％，结论：阴茎海绵体内注射，配合心理咨询，性知识讲解和性咨询等综合治疗对病人恢复信心和诱发勃起完成性生活有重要的作用，是一种简单，有效的治疗方法。     

Cx43在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨非小细胞肺癌组织及癌旁正常肺组织中Cx43蛋白及mRNA的表达及意义.方法 应用免疫组织化学、Western blot和原位分子杂交观察48例非小细胞肺癌（NSCLC）及22例癌旁正常肺组织中Cx43蛋白及mRNA的表达.结果 ①癌旁正常肺组织和NSCLC组织中Cx43蛋白阳性表达率分别为90.91%和47.92%;Cx43mRNA的阳性表达率分另别为95.45%和60.42%.NSCLC组织中Cx43蛋白及mRNA阳性表达率均低于正常肺组织（P均＜0.05）.②有淋巴结转移组Cx43蛋白及mRNA阳性表达率分别为16.00%和20.00%;无淋巴结转移组两者的阳性表达率分别为69.57%和78.26%.两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）.③Western blot显示NSCLC组织中Cx43的蛋白表达水平低于正常肺组织,有转移组中Cx43的蛋白表达水平低于无转移组,各组比较差异均有统计学意义,P均＜0.05.结论 Cx43蛋白和mRNA低表达与非小细胞肺癌发生和转移有关.     

2型糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的建立及氧化应激对海绵体组织内nNOS表达的影响

目的通过2型糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的建立观察其阴茎海绵体组织内氧化应激及神经型一氧化氮合酶（n NOS）的表达水平,初步研究2型糖尿病对大鼠阴茎海绵体组织的氧化应激损伤及其对海绵体组织内n NOS表达的影响。方法 40只SPF级10周龄SD雄性大鼠,其中30只被随机选出作为实验组,剩下的10只作为对照组,对照组大鼠未被行特殊处理。实验组大鼠被行高脂和高糖饮食4周,然后将链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）静脉注射入尾静脉。所有大鼠被喂食8周后,于颈部皮下注射阿朴吗啡（Apomorphine,APO）,观察阴茎在半小时内勃起次数。将所有大鼠称重后,取阴茎海绵体,检测氧化指标MDA和抗氧化指标SOD水平的变化及n NOS的表达情况。结果实验性大鼠有25只成功建模2型糖尿病,其中19只最后存活,包括阴茎可以正常勃起的7只大鼠;对照组大鼠全部存活且阴茎都能够正常勃起。与对照组相比,实验组大鼠阴茎组织内SOD活性明显下降（P〈0.05）,而MDA含量显著增加（P〈0.05）;实验组大鼠的阴茎海绵体组织中n NOS蛋白表达量显著降低（P〈0.05）。结论低剂量STZ联合高脂高糖饮食可造成2型糖尿病动物模型。2型糖尿病可致成年雄性SD大鼠阴茎海绵体组织中MDA含量升高、SOD活性降低、发生氧化应激从而导致n NOS的表达降低可能是引起糖尿病性勃起功能障碍发病的重要病因之一。     

胃癌组织中Cx43和Skp2的表达及其相关性

目的:检测Cx43和Skp2在胃癌中的表达,探讨其与胃癌发展的关系以及两者的相互关系。方法:采用免疫组织化学法检测Cx43和Skp2在胃癌和正常胃组织中的表达,研究它们的表达与胃癌的关系以及二者的相关性。结果:在胃癌中,Cx43的阳性表达率以及染色强度均随分化程度的降低而呈现出下降趋势(P<0.05)。Skp2的阳性表达率随分化程度的降低而呈现出上升趋势(P<0.05)。Cx43与Skp2的表达呈现负相关性。结论:在胃癌组织中Cx43的低表达与Skp2的表达上调显示二者存在负相关,对胃癌的发生发展起一定作用。     

Cx43在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨细胞间隙连接蛋白43(Cx43)在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法收集2007年2月至2013年2月中国人民解放军第251医院收治的骨肉瘤患者70例,采用免疫组织化学(EnVisionTM)法分别检测70例骨肉瘤组织及30例骨肉瘤旁组织中Cx43的表达情况。结果Cx43在骨肉瘤组织、骨肉瘤旁组织中阳性表达率分别为14.28%、86.67%,比较差异有统计学意义(χ2=47.75,P<0.01)。在临床病理因素中,Cx43的表达与年龄、性别、组织学类型无关(P>0.05),但与肿瘤大小、临床分期、肺转移、Ki-67有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Cx43在骨肉瘤组织中呈现低表达,其低表达在一定程度上可反映骨肉瘤的生物学行为。     

淫羊藿苷对家兔阴茎海绵体的舒张作用及机制

目的　观察淫羊藿苷 (ICA)对家兔阴茎海绵体平滑肌的舒张效应及机制。方法　采用离体平滑肌张力记录法。结果　①淫羊藿苷、西地那非 (sildenafil,Sil)、罂粟碱 (Pap)及氨力农 (amrinone ,Amr)均可浓度依赖性地引起舒张效应 ,EC50 分别为 0 2 ,11 2 ,31 6和 5 0 1μmol/L。②NO合酶抑制剂N 硝基左旋精氨酸甲酯 (L NAME ) 5μmol/L可将ICA引起的最大舒张效应由 6 0 %降低到 9% ,而NO前体左旋精氨酸 (L Arginine) 2 0 μmol/L ,可部分恢复ICA的最大舒张效应到 4 0 % (P <0 0 5 )。③ICA (1,10 μmol/L)增强Ach引起的舒张效应 ,最大效应由 6 0 %分别升高到 6 7%和 80 % (P <0 0 5 )。④ICA (3,10 μmol/L)能使高K (2 0～ 12 0mmol/L)去极化引起的最大收缩反应分别降低到 88%和 81% (P <0 0 5 )。⑤在经 1μmol/L阿托品和 5 μmol/L胍乙啶预先处理的标本上 ,电场刺激可以引起海绵体平滑肌频率依赖性的舒张效应。ICA (1、 10 μmol/L)能增强电场刺激引起的舒张效应 ,最大效应由对照水平的4 1%分别升高到 5 9%和 6 3% (P <0 0 5 )。结论　ICA可以直接舒张阴茎海绵体平滑肌 ,其壮阳作用机制与影响NO cGMP信号通路有关。     

大鼠窦房结周围组织缝隙连接蛋白Cx43表达的增龄性变化

目的: 研究幼年、成年和老年SD大鼠窦房结传导时间(SACT)变化,检测窦房结周围组织缝隙连接蛋白Cx43的表达,部分探讨窦房结电生理重构的分子基础. 方法: 大鼠麻醉后行心电图检查,放置食道电极,测量SACT. 分离窦房结及其周围组织,制备成10 μm厚的连续冰冻切片. 相邻4张为一组,分别行HE染色、Masson染色、FITC标记抗Cx43和抗HCN4的免疫组化法染色,激光共聚焦显微镜测量Cx43荧光强度.结果: ①随年龄增长,SACT(ms) 延长(幼年組15.2±2.2, 成年組17.6±1.6, 老年組19.3±0.9). ②窦房结周围组织Cx43表达随年龄增长逐渐降低,(界嵴处: 幼年组21.3±3.9,成年组15.7±2.7,老年组6.9±1.8;腔静脉窦:幼年组14.2±4.2,成年组10.7±3.0,老年组5.3±2.1). 结论: 窦房结周围组织Cx43表达增龄性降低可能是构成窦房结功能增龄减退的一个重要的电生理分子基础.     

构建Cx43特异性shRNA真核表达载体及体外干扰效率的鉴定

目的 本研究前期研究结果表明Cx43与穴位、经脉之间存在着密切联系,为了进一步研究Cx43在针刺活动中的作用,我们应用RNA干扰技术首先构建针对Cx43基因的特异性shRNA(small hairpin RNA)真核表达载体,并转染体外培养的NIH/3T3细胞,观察其对Cx43基因的沉默效果,从而挑选出一条能有效沉默Cx43表达的shRNA,为进一步在体研究作准备.方法 针对大、小鼠Cx43 mRNA同源序列的两个靶点,体外合成两对互补的寡核苷酸链.经退火连接形成双链,插入到Pgenesil-1真核表达载体.经酶切鉴定及测序等步骤后,将构建好的表达载体[分别命名为P-Cx43-shRNA(1)、P-Cx43-shRNA(2)]分别转染NIH/3T3细胞,G418筛选后应用免疫荧光、Western blot等方法观察P-Cx43-shRNA对Cx43蛋白水平的影响.结果 酶切鉴定及测序结果表明,成功构建了两个针对Cx43基因的shRNA真核表达载体及对照质粒(P-con-shRNA);Western blot结果说明两个Cx43特异性shRNA真核表达载体分别使Cx43蛋白水平下降了73.5%(P＜0.01)和10.8%(P＞0.05).阴性对照质粒(P-con-shRNA)对NIH/3T3细胞Cx43蛋白水平无明显影响.结论 重组质粒P-Cx43-shRNA(1)能较好的特异性抑制Cx43基因在NIH/3T3细胞中的表达,为进一步在体研究提供了实验依据.     

缬沙坦抑制缺氧时肥大心肌细胞凋亡及Cx43表达下调

目的探讨缬沙坦对缺氧环境下肥大心肌细胞缝隙连接蛋白Cx43表达的影响。方法培养心肌细胞或在诱导肥大后分别缺氧24h,采用免疫荧光方法和Western-blot法分别检测缝隙连接蛋白Cx43总蛋白表达变化,同时观察缬沙坦对缺氧状态下肥大心肌细胞Cx43表达的影响。结果缺氧24h后可致正常心肌细胞Cx43表达下调13%（P〈0.01）,心肌细胞经血管紧张素Ⅱ诱导48h后可出现肥大,而肥大心肌细胞比正常心肌细胞在缺氧24h后Cx43总蛋白表达显示出更明显的下调（P〈0.01）,缬沙坦可抑制缺氧状态下肥大心肌细胞的凋亡和Cx43总蛋白表达的下调。结论缺氧可导致心肌细胞Cx43表达下调,而肥大心肌细胞在缺氧时总蛋白下调更为明显,而缬沙坦可部分抑制肥大心肌细胞缺氧时的凋亡和Cx43总蛋白下调,这可能与缬沙坦改善缺氧时肥大心肌的电生理重构和恶性心律失常的机制有关。