维格列汀的合成研究进展

维格列汀是一种二肽基肽酶Ⅳ（DPP-4）抑制剂,它是由Novartis公司研发的新型降糖药。该药物通过降低胰高血糖素的浓度降低血糖,在用药安全性方面具有显著优势,应用较为广泛,临床上主要用于治疗2型糖尿病。本文综述近年来文献报道的维格列汀的合成方法,并评述其优缺点。     

抗糖尿病新药物维格列汀的研究进展

二肽基肽酶IV（DPP-IV）抑制剂是一类新型的抗糖尿病药物,通过诱导促进胰岛素的生物合成和分泌、抑制β细胞凋亡、抑制高血糖素的分泌、减少食物摄取等多种机制发挥降血糖作用,且在控制血糖的同时能逆转糖尿病患者胰岛功能不断恶化的状况,显示了良好的应用前景。维格列汀是二肽基肽酶抑制剂的一个代表药物,在临床研究中无论单独用药还是联合用药,均显示了良好的抗糖尿病作用以及耐受性,本文检索相关文献,综述维格列汀的药动学、药效学以及用药安全性。     

磷酸西格列汀干预糖尿病大鼠肾脏中VEGF的表达

①目的研究磷酸西格列汀（sitagliptin phosphate,SP）对糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠肾脏中血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。②方法用50只雄性健康SD大鼠随机分为正常对照组（Normal control,NC组）、糖尿病对照组（DM组）和糖尿病sP治疗组（SP组）,除NC组外,其余两组经腹腔注射链脲佐菌素（str eptozotocin,STZ剂量65mg／kg）制备糖尿病大鼠模型。成功后治疗组每日灌胃给予磷酸西格列汀10mg／（kg·d）,分别采集各组大鼠3、6、8周后的尿液、血液标本,通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测肾脏中血管内皮生长因子的表达;取一侧肾组织经HE染色,光镜下观察肾脏组织的病理变化,利用全自动生化仪检测血糖、肌酐、尿素氮及24h尿蛋白。③结果与NC组比较,造膜后大鼠的血糖、血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量及肾脏组织中VEGF的表达明显升高（P〈0．01）有统计学意义;SP组血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量及肾脏组织VEGF的表达与DM组比较明显降低（P〈0．01）。④结论磷酸西格列汀这类新型降糖药物对肾脏有一定的保护作用,可延缓糖尿病肾病的发展。     

二肽基肽酶Ⅳ抑制剂的研究进展

糖尿病（Diabetes Mellitus,DM）是一种常见的慢性代谢性疾病,近年来,全球糖尿病患者的数量急剧增加,预计到2030年将达到5.52亿[1]。目前,治疗2型糖尿病的口服药物主要有胰岛素分泌促进剂（磺酰脲类、瑞格列奈）、胰岛素增敏剂（双胍类、噻唑烷二酮类）和α-葡萄糖苷酶抑制剂（阿卡波糖）,但它们长期服用会产生不同程度的副作用[2,3]。     

糖尿病药物治疗新靶点——维格列汀

糖尿病是一种慢性代谢性疾病,患病率逐年上升,维格列汀作为一种高选择性、安全、可逆的DPP-Ⅳ抑制剂是糖尿病治疗领域的重大发现,为糖尿病患者有效控制血糖提供了更好的选择.本研究对其发展历程、降糖机制、药理学特点、临床疗效、安全性、与其他DPP-Ⅳ抑制剂的对比及发展前景的研究进行综述.     

维格列汀联用二甲双胍治疗2型糖尿病疗效和安全性的Meta分析

目的 评价维格列汀联用二甲双胍治疗2型糖尿病的疗效和安全性.方法 计算机检索Cochrane图书馆(2012年第12期)、PubMed(1978-2012年),中国期刊全文数据库(CNKI,1978-2012年)、中国生物医学文献数据库(CBM,1978-2012年),筛选关于维格列汀联用二甲双胍治疗2型糖尿病疗效和安全性的中、英文随机对照试验(RCT),同时追查相关综述和纳入文献的参考文献.试验组采用维格列汀联用二甲双胍治疗,对照组采用安慰剂联用二甲双胍治疗.根据Cochrane系统评价员手册进行质量评价,采用RevMan 5.0软件进行Meta分析.结果 共纳入5个符合标准的RCT,Meta分析结果显示:试验组降低糖化血红蛋白(HbA1c)的疗效优于对照组[MD=-0.80,95%CI(-0.95,-0.65),P＜0.00001],降低空腹血糖(FPG)的疗效亦优于对照组[MD=-0.96,95%CI(-1.21,-0.71),P＜0.00001],体质量减少量小于对照组[MD=0.43,95%CI(0.08,0.78),P=0.02],而两组不良反应发生率[RR=0.98,95%CI(0.90,1.07)]及低血糖发生率[RR=1.21,95%CI(0.39,3.73)]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 维格列汀联用二甲双胍治疗2型糖尿病与单用二甲双胍比较,有助于更好地控制血糖,且不会导致更大的风险,但长期疗效及安全性有待于进一步验证.     

2型糖尿病治疗的新药——维格列汀

2型糖尿病以胰岛素抵抗为特征,表现为胰岛13细胞进行性衰竭,从而导致糖负荷后胰岛素分泌不足,以及损伤肠促胰岛素对糖的反应。长期的高血糖将导致严重的微血管和大血管并发症。     

磷酸西格列汀治疗2型糖尿病40例临床观察

目的探讨磷酸西格列汀治疗2型糖尿病的疗效。方法将选择的40例病例随机分为2组,对照组给予口服西药降糖药,治疗组在对照组基础上加用西格列汀,观察期3个月,观察期间监测FPG、PPG、HbA1c、低血糖发生率、体重变化情况。结果治疗组在血糖控制上优于对照组（P〈0.05）;治疗组在降低HbA1c方面优于对照组（P〈0.05）;治疗组在减少低血糖和体重增加的风险方面优于对照组（P〈0.05）。结论磷酸西格列汀可有效控制2型糖尿病患者的血糖,降低HbA1c,使治疗达标,减少低血糖和体重增加的风险。     

利格列汀与阿卡波糖治疗2型糖尿病患者的疗效比较

目的:对比利格列汀与阿卡波糖治疗2型糖尿病患者的临床疗效。方法:将82例优泌乐25治疗血糖控制不佳的2型糖尿病患者随机分为利格列汀组和阿卡波糖组,每组各41例。利格列汀组患者在应用优泌乐25的基础上联合利格列汀口服;阿卡波糖组患者在应用优泌乐25的基础上联合阿卡波糖嚼服。治疗12周后,监测两组患者的空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2h PG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、体质指数(BMI)、胰岛素优泌乐25用量变化及不良反应。结果:治疗后,两组患者的BMI无明显变化(P>0.05);两组患者的FPG、2h PG、Hb A1c、胰岛素优泌乐25用量较治疗前明显下降(P<0.05)。结论:胰岛素联合口服药降糖治疗优泌乐25治疗血糖控制不佳的2型糖尿病患者的疗效更好,可减少胰岛素用量;利格列汀与阿卡波糖疗效相当,无明显不良反应。     

阿格列汀联合不同胰岛素强化方案对2型糖尿病患者miR-144、miR-142表达的影响

目的探究阿格列汀联合不同胰岛素强化方案对2型糖尿病患者微小RNA-144（microRNA-144,miR-144）、微小RNA-142（microRNA-142,miR-142）表达的影响。 方法选取我院接诊的2型糖尿病患者106例,按随机数字表法分为两组,每组各53例。两组均采用阿格列汀进行治疗,胰岛素泵组采用胰岛素泵进行治疗,基础治疗组采用皮下胰岛素进行治疗。采用血糖测试仪检测空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、餐后2 h血糖（2 h blood glucose,2 hBG）水平;Hb201+快速血红蛋白检测仪检测糖化血红蛋白（hemoglobin,HbAlc）水平;酶联免疫吸附法检测C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）水平;实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-144、miR-142表达水平。观察比较两组治疗总费用、治疗效果以及不良反应发生情况。 结果治疗后两组FBG、2 hBG、HbAlc水平均低于治疗前,胰岛素泵组FBG、2 hBG、HbAlc水平、治疗总费用低于基础治疗组（P＜0.05）,治疗后两组炎性因子水平低于治疗前,胰岛素泵组炎性因子水平低于基础治疗组（P＜0.05）,治疗后两组miR-144表达低于治疗前,miR-142表达高于治疗前,胰岛素泵组miR-144表达低于基础治疗组,miR-142表达高于基础治疗组（P＜0.05）,胰岛素泵组治疗总有效率高于基础治疗组（P＜0.05）,两组总不良反应发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论阿格列汀联合胰岛素泵可有效缓解2型糖尿病患者临床症状,降低miR-144表达及并发症的发生率,升高miR-142表达,缩短治疗周期,减少治疗费用,效果显著。     

犬副流感流行毒株的分离与鉴定

目的 分离和鉴定犬副流感病毒。方法 无菌抽取病犬脑脊液,接种到Ｖｅｒｏ细胞,７２ｈ后收集培养液进行回归动物试验,并采用形态８这观察,血凝特性、血球吸附试验以及细胞敏感性、中和试验和交叉中和试验等方法进行系统鉴定。结果 从病犬脑脊液中分离出一株ＣＰＩＶ流行毒株（ＣＰＩＶＸＮ９３１）,接种Ｖｅｒｏ细胞后,出现明显的细胞病变作用,对Ｖｅｒｏ和ＭＤＣＫ敏感,对２．５ｍＬ．Ｌ＾－１豚鼠红细胞具有显的吸附作     

注射用双黄连冻干粉化学成分的分离与鉴别

目的 究注射用双黄连粉针剂药效物质基础,为双黄连粉针剂更合理的应用和更广泛的开发提供依据。方法 用各种柱色谱方法对其化学成分进行分离,并利用各种理化、光谱技术鉴定所分离得到的化学成分。结果 双黄连粉针剂中分离得到7个化合物,经鉴定分别为：绿原酸、咖啡酸、大黄酚、大黄素甲醚、芦丁、黄芩苷和葡萄糖。结论 绿原酸、咖啡酸和黄芩苷外,其他4种化合物均系从该制剂中首次分得。     

人表皮干细胞的分离和鉴定

目的　探索一种分离人表皮干细胞的新途径 ,为组织工程皮肤的构建提供种子细胞。方法　以基底细胞作常规细胞培养 ;采用分类技术并结合表皮干细胞的特性 ;免疫细胞化学S P法鉴定。结果　用中性蛋白酶和胰酶消化可分离基底细胞 ,(1～2 )× 10 4/ml的基底细胞接种于以 3T3为滋养层的培养瓶内 ,以含EGF等因子的DMEM为培养液 ,2d后细胞开始增殖 ,一周许去除滋养层 ,10～ 12d可传代。异硫氰酸酯荧光素 (FITC)标记的基底细胞经流式细胞仪分选及IV型胶原 2 0min内的粘附后获得一些圆形、大小较一致的细胞。以鼠抗人K19的单抗为一抗 ,免疫细胞化学S P法呈棕黄色阳性反应 ,证实分离出的细胞为表皮干细胞。结论　通过荧光激活细胞分类和IV型胶原的粘附可分离出表皮干细胞 ,为组织工程皮肤的研究打下基础     

核小体的提取纯化及鉴定

目的探索一种操作简便、实用的核小体提取方法.方法取无菌新鲜鸡血,提取细胞核,用葡萄球菌核酶消化后裂解、离心,获得上清组分用连续性密度梯度蔗糖进行分离,收集分子量350 bp左右的组分.结果2%琼脂糖电泳显示该组分含有长度为150 bp的双链DNA,15%SDS-PAGE电泳显示该组分含有组蛋白H2A、H2B、H3和H4;本实验分离的核小体在0 ℃条件下存放4周未见DNA成分和组蛋白成分发生解聚.结论该方法可以正确的分离出核小体,且具有良好的稳定性,为深入研究核小体在SLE自身抗体产生中的作用打下基础.     

鸦葱中黄酮成分的提取分离及结构鉴定

目的：提取、分离鸦葱中的黄酮成分并鉴定其结构,为开发利用其药用价值提供实验依据。方法：取鸦葱全草粉末,用70％乙醇提取,提取液经大孔树脂、硅胶、ODS柱、高效液相色谱仪分离纯化,并对分离的化合物进行结构鉴定。结果：分离得到3个化合物,经光谱学数据分析和理化常数鉴定其分别为：5,7,4′- 三羟基黄酮-8-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷、5,7,4′- 三羟基黄酮-6-C-α-L-吡喃阿拉伯糖8-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷及5,7,3′,4′- 四羟基黄酮-6-C-α-L-吡喃阿拉伯糖8-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷。结论：3种化合物均为首次从鸦葱中得到的黄酮苷类化合物。     

小鼠视网膜干细胞的分离与鉴定

目的小鼠视网膜干细胞的分离与鉴定。方法①对胎龄17d昆明小鼠眼睫状体部(CMZ)细胞进行分离与体外培养；②通过免疫荧光方法研究视网膜干细胞的增殖及分化特性。结果①在bFGF作用下，所培养细胞可形成悬浮生长的细胞团，经多次传代，细胞增殖能力未见衰减。BrdU标记结果显示悬浮细胞团主要是由分裂增殖的细胞组成。而且培养细胞可表达神经干细胞的特异性抗原Nestin及胚胎发育早期视网膜内原始细胞的特异性抗原Chx-10。②培养细胞经5％胎牛血清诱导可向成熟细胞分化，分别表达神经元与神经胶质细胞的特异性抗原NSE、GFAP。免疫荧光检测显示分化细胞可分别表达感光细胞、双极细胞以及节细胞的特异性抗原Opsin、PKC及β-tubulin。结论小鼠睫状体部存在视网膜干细胞。     

高效液相色谱法测定细辛脑注射液的含量及有关物质

目的建立测定细辛脑注射液的含量及有关物质的高效液相色谱法。方法采用KromasilC18柱,以甲醇-水(体积比80∶20)为流动相,检测波长313 nm。结果本色谱条件能分离细辛脑及有关物质;在2~80 mg.L-1浓度范围内,细辛脑的峰面积与其浓度呈线性关系,方法平均回收率为100.2%,RSD为0.37%。结论本法可用于细辛脑注射液的含量及有关物质测定。     

人脂肪源性间充质干细胞的分离培养和鉴定

目的:分离培养并鉴定人脂肪源性间充质干细胞(hAD-MSC).方法:采用贴壁法从人脂肪组织分离获得hAD-MSC,并从表面分子表达和定向分化两个方面进行鉴定.结果:成功从脂肪组织中分离获得间充质干细胞,该群细胞贴壁生长,形态类似成纤维细胞样;具有较强的体外增殖能力和自我更新能力;一致性好,纯度高,99％的细胞阳性表达CD105、CD90、CD13、CD44分子;CD117、CD34、CD45和HLA-DR阴性表达,阳性率低于2％;可向脂肪和成骨细胞定向分化.结论:分离所得细胞符合间充质干细胞基本特点,可确定为hAD-MSC.     

新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞的体外培养及鉴定

目的从新生大鼠大脑皮质中分离、培养并鉴定星形胶质细胞。方法分离出生1-3d的大鼠大脑皮质细胞加入含有10％马血清、10％小牛血清以及10ng／mL EGF的MEM培养基培养，于第3-4周将细胞固定后采用免疫细胞化学技术检测特异性星形胶质细胞抗原GFAP的表达。结果从新生大鼠大脑皮质分离的细胞生长旺盛。星形胶质细胞形态典型，并表达星形胶质细胞特异性抗原GFAP，未见其他种类细胞生长。结论笔者建立了一种简单、可靠的大鼠星形胶质细胞的体外培养方法，为应用胶质细胞饲养层与其他细胞联合培养奠定了基础。