电刺激迷走神经对感染性休克大鼠心脏功能及超微结构的影响

目的:研究电刺激迷走神经对感染性休克心脏功能及超微结构的影响。方法:采用盲肠结扎穿孔法(CLP)复制感染性休克模型。取成年雄性SD大鼠20只,随机分为4组:假CLP组(Sham);CLP组(CLP);迷切组(VGX);电刺激组(STIM)。刺激方法是将左迷走神经远端连接刺激电极,于CLP术毕即刻持续电刺激(5 V、2ms和1 Hz)20 min。各组动物均行颈总动脉置管连续监测平均动脉压(MAP),分别在各组模型制备完毕或者电刺激后0,1,2,4 h检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)和4 h抽动脉血行肌酸激酶(CK)、肌酸激酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平检测,电镜观察心肌细胞超微结构变化。结果:CLP组和VGX组平均动脉血压进行性下降,血浆TNFα、CK、CK-MB、LDH水平显著升高,透射电镜观察可见脓毒血症大鼠心肌细胞线粒体排列紊乱,空泡变性,肌纤维水肿;与CLP组比较,STIM组动物平均动脉压下降幅度减轻,血浆CK、CK-MB、LDH水平显著降低(P<0.01),电镜心肌损伤减轻。结论:电刺激迷走神经能缓解CLP致感染性休克大鼠的进行性血压下降及炎性因子表达,降低血清CK、CK-MB、LDH水平,减轻心肌组织损害,对心脏功能有潜在的保护作用。     

迷走神经电刺激保护失血性休克肺微血管内皮细胞

目的:观察电刺激迷走神经对失血性休克大鼠肺微血管内皮细胞的影响。方法:成年雄性SD大鼠30只,体质量240-260g,随机分为3组:假休克组(SS组)、失血性休克组(HS组)、迷走神经电刺激组(STM组),每组10只。Wiggers改良法制备失血性休克模型,模型制备成功3h后留取血和肺组织标本。光镜下观察肺组织形态学变化,电镜下观察肺微血管内皮细胞形态改变,Western印记法测Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)蛋白表达、ELISA法测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度。结果:HS组肺组织和内皮细胞形态较SS组遭到明显破坏,STM组较HS组破坏减轻,接近SS组;HS组SSeCKS表达和TNF-α浓度比SS组明显升高(P<0.05),STM组可减少SSeCKS表达和TNF-α浓度(P<0.05)。结论:电刺激迷走神经对失血性休克大鼠肺微血管内皮细胞可产生保护作用,其机制可能与激活胆碱能抗炎通路拮抗全身炎性反应有关。     

电刺激迷走神经对感染性休克大鼠肝脏炎性反应的影响

目的 :研究电刺激迷走神经对感染性休克大鼠肝脏炎性反应的影响。方法 :采用盲肠结扎穿孔法 (cecalligationandpuncture ,CLP)复制感染性休克模型。取成年雄性SD大鼠 2 0只 ,随机分为 4组 :假CLP组、CLP组、迷切组、电刺激组。刺激方法是将左迷走神经远端连接刺激电极 ,于CLP术毕即刻持续电刺激 (5V、2ms和 1Hz) 2 0min。各组动物均行颈总动脉置管连续监测平均动脉压 ,用酶联免疫吸附法 (ELISA法 )检测血浆TNF α水平 ,肝脏组织HE染色观察病理组织学变化情况。结果 :CLP术后平均动脉血压进行性下降 ,血浆TNF α水平含量显著升高 (各P <0 .0 1) ,肝脏组织发生明显的炎性病理改变 ;与CLP组比较 ,电刺激组动物平均动脉压下降幅度减轻 ,血浆TNF α含量显著降低 (各P <0 .0 1) ,肝组织炎性病理改变减轻。结论 :电刺激迷走神经能缓解CLP致感染性休克大鼠的进行性血压下降 ,降低血清TNF α含量 ,减轻肝组织病理损害 ,对肝功能有潜在的保护作用。     

七氟醚对CLP感染性休克大鼠肺功能的影响

目的 探讨吸入2.4%七氟醚(SEV)对感染性休克大鼠肺功能及存活率的影响.方法 32只清洁级SD大鼠随机分为4组,每组8只:空白组(Sham组),单纯行开腹关腹手术;感染性休克组(CLP休克组),用盲肠结扎穿刺法建立感染性休克模型;SEV-Ⅰ组,CLP法建立感染性休克模型1 h后吸入2.4%SEV 30 min;SEV-Ⅱ组,CLP法建立感染性休克模型3 h后吸入2.4%SEV 30 min.各组均在感染性休克模型建立后1、3、5 h记录心率、平均动脉压(MAP),行动脉血气分析.在感染性休克模型建立5 h后处死大鼠,进行肺水含量、肺血管通透性(伊文氏蓝染色法)测定.另有40只大鼠分组方法同上,每组10只,观察CLP休克后12 h存活率.结果 与Sham组相比,CLP休克组、SEV-Ⅰ组和SEV-Ⅱ组大鼠的HR明显增快,MAP明显下降,血气分析参数pH值、PaO2、PaCO2明显下降,肺水含量和肺血管通透性明显升高(均P<0.05);但3组间差异无统计学意义(P0.05).Sham组大鼠12 h存活率为100%,CLP休克组为O%,SEV-Ⅰ组为12%,SEV-Ⅱ组为0%,感染性休克组、SEV-Ⅰ组和SEV-Ⅱ组间差异无统计学意义(P0.05).结论 感染性休克后吸入2.4%七氟醚30 min不能改善动物的肺功能和12 h死亡率.     

电刺激迷走神经对严重烫伤大鼠的治疗作用

目的:观察电刺激迷走神经对严重烫伤大鼠平均动脉压(MAP)、心率、存活时间及存活率的影响。方法:取24只健康成年SD雄性大鼠(200-240 g),30%TBSAⅢ度烫伤,随机分为假伤组(Sham组)、烫伤组(Scald组)、迷走神经切断组(VGX组)、迷走神经电刺激组(STM组)。各组大鼠右颈总动脉置管后通过压力传导系统与心电监护仪相连,以连续监测MAP和心率变化,并记录生存状况。结果:STM组血压、心率下降趋势平缓,各时间点血压和心率明显高于Scald组和VGX组,生存时间延长,存活率高。结论:电刺激迷走神经对严重烫伤大鼠具有治疗作用。     

电针足三里对感染性休克大鼠血浆肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-10的影响

目的探讨电针是三里穴对感染性休克大鼠血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10 (IL-10)水平的影响。方法取成年雄性SD大鼠35只按随机数字表法分为假CLP组、CLP组、是三里组、非经非穴组和迷切电针组,每组7只。采用盲肠结扎加穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法制备感染性休克动物模型后,以脉冲电流(2V,3Hz)连续刺激双侧是三里穴30 min。模型制备后4h取血,用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆TNF-a和IL-10水平。结果与假CLP组比较,CLP组、非经非穴和迷切电针组血浆TNF-α和IL-10含量都显著升高(均P＜0．01),是三里组血浆TNF-α含量较CLP组显著降低(P＜0．01),而IL-10无显著改变(均P＞0．05)。结论电针是三里穴可以降低促炎性细胞因子水平,而对抗炎性细胞因子无影响,从而起到抗炎作用。     

迷走神经电刺激对内毒素血症小鼠肠道上皮细胞紧密连接及肺的血气屏障的影响

目的 探讨迷走神经电刺激活化胆碱能抗炎通路对内毒素血症小鼠的肠道上皮细胞紧密连接及肺的血气屏障的保护作用及其可能机制.方法 雄性Balb/c小鼠腹腔注射脂多糖10 mg/kg,复制内毒素血症模型.将小鼠随机分为4组:(1)假手术组,暴露分离迷走神经但不给予电刺激,给予生理盐水0.25 mL腹腔注射;(2)内毒素血症组,暴露分离迷走神经但不给予电刺激,给予腹腔注射脂多糖10 mg/kg;(3)迷走神经电刺激组,在脂多糖腹腔注射后,用5%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,暴露分离右侧迷走神经,连接迷走神经电刺激仪刺激右侧迷走神经10 min;(4)α-银环蛇毒素(α-BGT)组,在迷走神经电刺激前20 min皮下给予α-BGT 0.5 μg/只,余操作同迷走神经电刺激组.在给予脂多糖腹腔注射12 h后采集小鼠的回肠及肺组织标本.结果 内毒素血症组、α-BGT组右旋糖酐(FITC-Dextran)水平均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05).内毒素血症组、α-BGT组FITC-Dextran水平均高于迷走神经电刺激组,差异有统计学意义(P<0.05).内毒素血症组肺组织occludin水平低于假手术组,肠道组织occludin水平低于假手术组、NF-κB水平高于假手术组(P<0.05);α-BGT 组occludin水平低于假手术组,NF-κB水平高于假手术组(P<0.05),肠道组织occludin水平低于假手术组、NF-κB水平高于假手术组(P<0.05);迷走神经电刺激组肺组织occludin水平高于内毒素血症组和α-BGT 组,NF-κB水平低于LPS组和α-BGT 组,肠道组织occludin水平高于内毒素血症组和α-BGT 组,NF-κB水平低于LPS组和α-BGT 组(P<0.05).结论 迷走神经电刺激活化胆碱能抗炎通路对内毒素血症小鼠肠道上皮和肺的血气屏障的通透性的保护是通过烟碱型乙酰胆碱受体α7亚基及NF-κB和MLCK通路来发挥作用的.     

肾上腺髓质素对腹腔感染所致肺损伤大鼠肺组织中PPAR-γ的影响

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对腹腔感染所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)蛋白表达的影响。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)制作大鼠腹腔感染模型,随机分为假手术组(Sham)、Sham ADM组,CLP组和CLP ADM治疗组。持续监测各组大鼠颈动脉压力。分别于手术后6h、18h测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;肺组织HE染色及肺损伤组织学评分;测定肺组织湿/干重比值(W/D);用Westernblot法观察肺组织中PPAR-γ蛋白表达变化。结果各组之间平均动脉压在各时段差异无统计学意义(P>0.05)。CLP组6h、18h时的肺损伤组织学评分(P<0.05)以及BALF中白细胞数(P<0.05)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量均明显高于Sham组和CLP ADM组(P<0.05)。CLP组在18h的W/D值较Sham组和CLP ADM有明显升高(P<0.05),而CLP ADM组18h的W/D值低于CLP组(P<0.05)。CLP组6h、18h大鼠肺组织中PPAR-γ蛋白表达较Sham组和CLP ADM均有显著下降(P<0.05)。结论肾上腺髓质素可以减轻腹腔感染大鼠的肺损伤程度,并且上调肺损伤大鼠肺组织中PPAR-r蛋白的表达。     

电刺激迷走神经和甲基泼尼松龙对兔脊髓损伤后TNF-α水平的影响

目的 探讨迷走神经刺激对兔脊髓损伤(SCI)后脊髓组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响,并与甲基泼尼松龙(MP)进行比较.方法 125只新西兰大白兔分为假手术组(SHAM组,25只)、SCI组(25只)、迷走神经刺激组(STM组,25只)、MP组(25只)和STM+ MP组(25只).采用改良Allen打击法制作兔脊髓损伤模型,STM组及STM+ MP组于脊髓损伤后接受右侧颈迷走神经电刺激(5V、2 ms和1 Hz,持续20min).术后1、4、8、12、24 h分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法及逆转录PCR(RT-PCR)法检测各组脊髓组织中TNF-α蛋白水平及mRNA水平.结果 与SCI组相比,STM组、MP组、STM+ MP组的脊髓组织中TNF-α蛋白水平均有明显下降,其中STM+ MP组降低最为显著;与SCI组和STM组相比较,在各个时间点MP组和STM+ MP组的TNF-α mRNA水平下降明显.结论 述走神经刺激可降低兔急性脊髓损伤的促灸因子TNF-α蛋白水平,其效果接近于MP,且在抑制TNF-α蛋白表达方面与MP具有协同作用.     

短期颈动脉压力感受器电刺激减轻犬心肌缺血再灌注损伤的机制研究

目的：验证短期颈动脉压力感受器电刺激(Carotid baroreceptors stimulation,CBS）是否通过激活迷走神经的胆碱能抗炎通路减轻犬心肌缺血再灌注损伤。方法36只成年杂种犬随机分为三组(n=12)：缺血再灌注组(I/R组)、颈动脉压力感受器刺激组(CBS组)和迷走神经干切除术(Vagotomy)组(VAG组)。各个组别的实验犬分别结扎左冠脉前降支1 h和再灌注6 h完成心肌缺血再灌注损伤模型。CBS组在心肌缺血前2 h对右侧颈动脉窦开始进行高频电刺激,直到实验结束,刺激参数：频率50 Hz,脉宽0.5 ms,刺激强度随血压进行调整,以保持血压较刺激前下降10%。VAG组在颈动脉窦刺激前实施双侧颈迷走神经干切除术。于缺血前、缺血15 min、30 min、60 min和再灌注0.5 h、2 h、6 h时记录心率(HR)和平均动脉压(MAP)。各组随机抽取6只犬于再灌注6 h后分别经颈内静脉采血,采用ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度。采血后,迅速取出缺血区心肌组织,检测髓过氧化物酶(MPO)活性观察中性粒细胞浸润情况。各组剩余6只犬于再灌注6 h后采用依文斯兰—氯化三苯基氮唑(TTC)双染色法检测心肌缺血和心肌梗死面积。结果与I/R组比较,CBS组心肌梗死面积,MPO活性,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量降低(P<0.05);与I/R组比较,VAG组心肌梗死面积,MPO活性,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论短期颈动脉压力感受器电刺激可减轻犬心肌缺血再灌注损伤,抑制中心粒细胞向缺血组织浸润以及抑制全身炎症反应,其机制与短期颈动脉压力感受器电刺激激活迷走神经的胆碱能抗炎通路有关。     

迷走神经兴奋对内毒素血症大鼠肝脏氧自由基及TNF-α的影响

目的探讨迷走神经兴奋与内毒素血症大鼠肝脏氧自由基和肿瘤坏因子变化的关系.方法雄性Wistar大鼠随机分为手术对照、LPS对照、迷走神经刺激和迷走神经切断后静注LPS等4组.分别测定肝组织TNF-α和丙二醛(MDA)及血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量.结果假手术组TNF含量较低,静注LPS后,TNF含量明显升高;迷走神经刺激组TNF含量较单纯LPS组和迷走神经切断后注射LPS组明显降低;迷走神经刺激组血浆ALT含量及肝组织MDA含量显著低于单纯LPS组和迷走神经切断后静注LPS组(P＜0.01).结论迷走神经兴奋能显著降低内毒素血症大鼠体内促炎细胞因子的产生,减缓体内氧自由基的释放,对肝组织具有潜在的保护作用.     

脓毒症大鼠DAO与TNF-α变化研究

目的研究TNF-α在脓毒症大鼠肠道损伤中的作用。方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(n=30),脓毒症组(n=30)。假手术组仅行盲肠探查术,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型。各组均于术后3、6、12、24与48 h时相点,经腹主动脉采血检测血清DAO、TNF-α水平。结果血清DAO水平逐渐升高,于48 h时达到最高值,高于假手术组(P0.05);血清TNF-α水平在CLP术后即明显高于假手术组(P0.05),在24 h达峰值,随后虽有下降,但仍显著高于假手术组(P0.05)。TNF-α与DAO具有正相关(r=0.897,P0.05)。结论 TNF-α的异常升高,可能在脓毒症大鼠肠道损伤中具重要作用。     

迷走神经电刺激对内毒素致免肝脏损害的作用

目的 :探讨电刺激迷走神经对兔内毒素(LPS)血症肝脏损害的作用。方法 :16只兔随机分为实验组(A组 )和对照组 (B组 )。切断双侧颈迷走神经干 ,按 10 0μg kg静注大肠杆菌LPS ,A组选择左迷走神经近心端接刺激电极 ,在注射LPS前后各持续电刺激 (电压 10V ,频率 5Hz ,波宽 5ms) 10min ,共 2次。分别于输注LPS前及后 30、6 0、12 0 180 2 4 0、30 0min检测 2组血清中丙氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)及IL 10含量 ,并于实验结束后取肝标本进行病理检查。结果 :静注LPS后 ,与B组比较 ,A组血清中ALT ,AST和TNF α显著降低 ,而IL 10水平明显升高 ,肝脏炎性病理改变明显减轻。结论 :电刺激兔迷走神经传出纤维能抑制LPS导致的肝功能损害和炎症递质的产生 ,但并不抑制抗炎因子 ,从而减轻肝脏炎症 ,对肝功能有一定的保护作用。     

Effect of cholinesterase inhibitor galanthamine on circulating tumor necrosis factor alpha in rats with lipopolysaccharide- induced peritonitis

Background The nervous system, through the vagus nerve and its neurotransmitter acetylcholine, can down-regulate the systemic inflammation in vivo, and recently, a role of brain cholinergic mechanisms in activating this cholinergic anti-inflammatory pathway has been indicated. Galanthamine is a cholinesterase inhibitor and one of the centrally acting cholinergic agents available in clinic. This study aimed to evaluate the effect of galanthamine on circulating tumor necrosis factor alpha （TNF-a） in rats with lipopolysaccharide-induced peritonitis and the possible role of the vagus nerve in the action of galanthamine. Methods Rat models of lipopolysaccharide-induced peritonitis and bilateral cervical vagotomy were produced. In the experiment 1, the rats were randomly divided into control group, peritonitis group, and peritonitis groups treated with three dosages of galanthamine. In the experiment 2, the rats were randomly divided into sham group, sham plus peritonitis group, sham plus peritonitis group treated with galanthamine, vagotomy plus peritonitis group, and vagotomy plus peritonitis group treated with galanthamine. The levels of plasma TNF-α were determined in every group. Results The level of circulating TNF-α was significantly increased in rats after intraperitoneal injection of endotoxin. Galanthamine treatment decreased the level of circulating TNF-α in rats with lipopolysaccharide-induced peritonitis, and there was significant difference compared with rats with lipopolysaccharide-induced peritonitis without treatment. The 3 mg/kg dosage of galanthamine had the most significant inhibition on circulating TNF-α level at all the three tested doses. Galanthamine obviously decreased the TNF-a level in rats with lipopolysaccharide-induced peritonitis with sham operation, but could not decrease the TNF-α level in rats with lipopolysaccharide-induced peritonitis with vagotomy. Conclusion Cholinesterase inhibitor galanthamine has an inhibitory effect on TNF-α release in rats with Iipopolysaccharide-induced peritonitis, and the vagus nerve plays a role in the process of the action of galanthamine.     

參附注射液對敗血性休克大鼠心肌損傷的影響

目的:觀察參附注射液對敗血性休克大鼠心肌損傷的保護作用并探討其可能機制。方法:Wistar大鼠隨機分為假手術組(C)、休克組(S)、參附治療組(SF),各組均為 16 只。采用改良的盲腸結扎穿孔(CLP)方法復制敗血性休克模型,觀察術后6 h和18 h的心肌組織病理改變;免疫組織化學技術檢測心肌組織中核轉錄因子 κB(NF κB)、細胞間粘附分子 1(ICAM 1)的表達和分布;用ELISA法檢測血漿中腫瘤壞死因子 α(TNF α)、白細胞介素 10(IL 10)的含量,連續監測動脈壓及心率變化。結果:較之C組, 6 h時S組大鼠動脈壓即明顯下降,心率增快(P<0.01),到18 h心率、動脈壓均極度降低(P<0.01),而SF組18 h才出現 MAP下降(P<0.05)。與同時點 S組比較,SF組心肌組織病理損害明顯減輕;SF組CLP后心肌組織 NF κB及 ICAM 1 的陽性表達比 S組明顯降低(P<0.01);SF組血漿中TNF α含量較S組明顯降低(P<0.01),18 h時 IL 10 含量較 S組明顯降低(P<0.01)。結論:參附注射液能抑制敗血性休克后心肌組織NF κB的活化及ICAM 1、TNF α、IL 10的表達從而起到心肌保護的作用。     

脓毒血症小鼠致肺损伤模型的研究

目的探讨盲肠结扎穿刺建造的脓毒血症小鼠模型中肺组织损伤的相关机制。方法选取42只C57BL/6雄性小鼠,随机分为正常对照组、假手术组及脓毒血症组,各14只。正常对照组不做处理,假手术组行盲肠结扎,脓毒血症组予以盲肠结扎穿刺。24 h收集各组肺组织,观察脓毒血症情况评分（MSS）、生存率、肺组织形态改变情况、肺组织损伤评分、中性粒细胞以及肺组织中炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素（IL）-6表达水平的差异。结果脓毒血症组MSS评分、肺损伤评分、中性粒细胞数、TNF-α及IL-6表达水平均较正常对照组、假手术组升高（P < 0.01）。结论脓毒血症可造成病理学层面的小鼠肺组织损伤,致炎症因子表达升高,降低小鼠的生存率。通过观察该模型中反映肺损伤程度的相关指标的变化,可评估脓毒血症严重程度和研究损伤相关机制。     

凝血酶敏感蛋白-1介导脓毒症肝损伤中ERK通路的作用研究

目的观察凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)介导的脓毒症肝损伤中细胞外调节激酶(ERK)通路的作用.方法选用雄性Balb/c小鼠随机分为4组(n=5):假手术(sham)组、CLP对照组、阴性片段对照组、有效片段组.利用流体尾静脉注射法予以TSP-1特异性的siRNA片段进行RNA干扰(RNA)i,下调肝脏TSP-1表达,采用盲肠结扎穿刺(CLP)制作脓毒症模型,检测肝脏TSP-1表达变化,检测血清转氨酶和TNF-α含量,检测肝脏ERK蛋白表达变化.结果有效片段组中肝脏TSP-1的表达明显下调,验证RNAi有效.与假手术组相比,CLP组和阴性对照组转氨酶ALT和AST含量、TNF-α含量明显升高(P<0.05),磷酸化ERK蛋白表达明显降低(P<0.05),予以有效片段进行RNAi后,ALT和AST含量、TNF-α含量明显降低(P<0.05),磷酸化ERK蛋白表达明显升高(P<0.05).结论 TSP-1参与介导脓毒症肝损伤,导致血清转氨酶及TNF-α含量升高,ERK通路的抑制是其分子机制之一.     

自由基代谢在大鼠脓毒症肝损伤发病机制中的作用

目的：采用大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）复制脓毒症模型造成急性肝损伤，探讨自由基代谢在脓毒症肝损伤发病机制中的作用。方法：将Wistar大鼠随机分为对照组、假手术组和模型组，每组叉分6h、12h、24h和48h四个时间点。动态观察血清丙氨酸转氨酶（ALT）、血清和肝组织中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的变化。结果：从血清含量变化和肝脏细胞形态学检测确认CLP脓毒症模型造成了肝损伤。CLP组血清和肝组织MDA于6h时间点增高，48h达到峰值，血清和肝组织GSH—Px活性亦于6h时间点降低，48h达到最低值。结论：脓毒症所致的肝细胞损伤与自由基代谢紊乱有关。