黄芪多糖抗氧化作用研究

目的:观察黄芪多糖的抗氧化作用。方法:应用D-半乳糖复制小鼠衰老模型与AS兔模型。结果:黄芪多糖显著提高了血SOD、CAT及GSH-PX活力,降低了血浆、脑匀浆及肝匀浆中LPO水平。并显著降低了TG、TC、LDL-C、ApoA、ApoB、MDA和TRAC水平,升高了HDL-C和SOD水平。结论:黄芪多糖有较好的抗氧化作用,从而起到抗衰老及抗AS作用。     

黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响

目的观察黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响。方法以黄芪多糖低、中、高浓度给小鼠连续灌胃7 d后,处死测定小鼠体重、脾脏及胸腺重量,计算脾指数与胸腺指数,观察小鼠免疫器官重量的变化;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测试黄芪多糖对小鼠非特异性免疫的影响;采用溶血空斑形成实验测试黄芪多糖对小鼠体液免疫的影响。结果黄芪多糖能够增加小鼠免疫器官重量,提高巨噬细胞吞噬功能及增加B细胞产生抗体能力。结论黄芪多糖具有调节免疫功能,对非特异性免疫和体液免疫均有一定的增强作用。     

黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响

目的探讨黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响。方法60只小鼠随机分为正常对照组(生理盐水20ml·kg-1)、低剂量多糖组(200mg·kg-1)、高剂量多糖组(400mg·kg-1)、环磷酰胺(CTX,40mg·kg-1)组、CTX(40mg·kg-1)+低剂量多糖组、CTX(40mg·kg-1)+高剂量多糖组,每日1次,连续14d,14d后检测多糖对小鼠免疫器官的影响、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞增殖情况。结果CTX对小鼠的免疫功能有明显的抑制作用(P<0.05),黄芪多糖不经仅能有效对抗免疫抑制(P<0.05),对正常小鼠也有免疫增强作用。结论黄芪多糖对小鼠特别是免疫抑制小鼠免疫功能有增强作用。     

黄芪及黄芪多糖对隐孢子虫感染小鼠的免疫调节作用

目的探讨黄芪及黄芪多糖对隐孢子虫感染的免疫抑制小鼠的免疫调节作用。结论 20日龄Balb/c小鼠连续8d灌服醋酸地赛米松后,于第9天经口接种1×106个隐孢子虫卵囊1次,建立隐孢子虫感染模型,再经黄芪水煎剂及黄芪多糖灌胃治疗10d,并设正常对照、模型对照和西药对照组。每日计数粪便隐孢子虫卵囊数量,组织切片HE染色后光学显微镜观察肠组织病理学改变,ELISA法检测血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平,流式细胞仪检测T细胞亚群。结果与模型组比较,黄芪水煎剂组、黄芪多糖组和西药组小鼠卵囊排出数量减少,肠组织病理学改变较轻,免疫学检测发现CD4、CD4/CD8及IL-2、IL-4和IFN-γ水平明显升高(P<0.05)。结论黄芪水煎剂及黄芪多糖通过增强免疫功能促进隐孢子虫感染小鼠恢复。     

黄芪皂苷和黄芪多糖对乳鼠肥大心肌细胞线粒体膜电位的影响

目的观察黄芪皂苷和黄芪多糖对心肌细胞线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）的干预作用,初步探讨黄芪防治心衰的机理。方法将体外培养乳鼠心肌细胞分为对照组、模型组、黄芪皂苷组、黄芪多糖组、黄芪皂苷＋多糖组。除对照组外各组加血管紧张素Ⅱ（Angn）造成肥大细胞模型,给药组予黄芪皂苷、黄芪多糖干预,分别测定各组24h、48h时心肌细胞MMP。结果24h时MMP比较：模型组较对照组下降,有显著性差异（P〈0．01）;3个给药组较模型组升高,有显著性差异（P〈0．01）;黄芪皂苷组较对照组升高,有显著差异（P〈0．01）。48h时MMP比较：模型组较对照组下降明显（P〈0．01）;3个给药组较模型组升高,以黄芪皂苷组、黄芪皂苷＋多糖组明显,与模型组比较有显著性差异（P〈0．01）。结论AngⅡ使心肌细胞MMP下降,黄芪皂苷和黄芪多糖使MMP趋于正常,黄芪皂苷和黄芪多糖可拮抗AngⅡ减低心肌细胞MMP的作用,这可能是黄芪防治心衰的机理之一。     

黄芪多糖对肺气虚小鼠免疫调节作用

目的探讨黄芪多糖对肺气虚小鼠的免疫调节作用。方法采用SO2气体熏法成功复制肺气虚小鼠模型,以肺气虚小鼠模型为研究对象,观察黄芪多糖对实验小鼠脾指数、胸腺指数,细胞亚群和血清IL-6、IFN-γ的影响。结果黄芪多糖可以提高肺气虚模型小鼠降低的胸腺和脾指数,明显提高气虚小鼠的TH细胞,降低TS细胞,明显提高TH/TS比值,提高血清的IL-6、IFN-γ水平。结论黄芪多糖具有调节肺气虚小鼠机体免疫力的作用。     

党参多糖对小鼠抗运动性疲劳作用的研究

目的观察党参多糖对小鼠抗运动性疲劳作用的影响。方法以不同剂量（0．8、0．4、0．2g／kg）党参多糖给小鼠连续灌胃21d,测定小鼠负重游泳时间,并检测运动疲劳小鼠血清中乳酸的含量。结果不同剂量的党参多糖均能延长小鼠的负重游泳力竭时间,降低运动疲劳小鼠血清中的乳酸含量,高、中剂量组各项指标改善明显,与空白对照组比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论党参多糖有提高小鼠抗运动性疲劳能力的作用。     

黄芪多糖对KKAy小鼠骨骼肌蛋白激酶B丝氨酸磷酸化的影响

目的:观察胰岛素刺激下蛋白激酶B(PKB)丝氨酸磷酸化水平在遗传性2型糖尿病小鼠(KKAy)骨骼肌组织的变化及黄芪多糖(APS)对其影响。方法:选取雌性KKAy16只,随机分为2组:糖尿病组和糖尿病黄芪多糖治疗组;选取雌性C57BL/6J小鼠20只作为对照组,随机分为正常对照组和黄芪多糖对照组。于黄芪多糖治疗前后观察体重、血糖、血胰岛素水平、胰岛素抵抗指数及口服葡萄糖耐量试验,治疗8周后用免疫印迹法检测骨骼肌组织胰岛素刺激的丝氨酸磷酸化PKB表达。结果:KKAy小鼠体重、血糖及胰岛素抵抗指数均显著高于C57BL/6J组,同时伴有明显的糖耐量异常(P<0.01),经APS治疗8周后,各项实验指标均明显降低(P<0.01)。KKAy小鼠骨骼肌组织胰岛素刺激的丝氨酸磷酸化PKB表达水平显著低于C57BL/6J小鼠(P<0.01),黄芪多糖可明显提高KKAy小鼠骨骼肌丝氨酸磷酸化PKB表达(P<0.05),但对C57BL/6J小鼠各项指标无显著影响。结论:胰岛素刺激下的PKB磷酸化障碍是2型糖尿病胰岛素抵抗的重要机制之一,黄芪多糖可增强胰岛素刺激的丝氨酸磷酸化PKB表达水平,从而改善KKAy小鼠胰岛素抵抗。     

黄芪多糖对小鼠实验性肝损伤的保护作用

黄芪多糖（ＡＳＧ）５０、１００ｍｇ·ｋｇ－１×６ｄｉｍ可明显对抗四氯化碳（ＣＣｌ４，０．０１５％花生油溶液，１０ｍｌ·ｋｇ－１，ｉｐ），扑热息痛（ＡＡＰ，５５０ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）和无水乙醇（０．５ｇ．ｋｇ－１，ｉｇ）引起的小鼠血清谷丙转氨酸和谷草转氨酶的升高，对ＣＣｌ４，及ＡＡＰ引起的小鼠病理组织改变有明显保护作用。     

黄芪多糖对小鼠迟发型超敏反应的影响

目的 探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharide, APS)对二硝基氟苯(Dinitrofluorobenzene, DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(Delayed-type hypersensitivity, DTH)的影响。方法 雄性6～8周龄ICR小鼠50只,SPF级,体重(20±2)g,将小鼠随机分成空白对照组(NC组)、模型对照组(MC组)、地塞米松组(DEX组)、黄芪多糖低剂量组(APS-L组)以及黄芪多糖高剂量组(APS-H组),每组10只小鼠;利用背部涂抹DNFB建立DTH模型;DEX组、APS-L组、APS-H组,分别灌胃地塞米松2.5 mg/(kg·d)、 APS 200 mg/(kg·d)、APS 400 mg/(kg·d)共7 d; NC组、MC组无菌三蒸水等体积灌胃7 d。MC组、DEX组、APS-L组、APS-H组末次给药0.5 h后,耳部涂抹DNFB。24 h后,检测小鼠耳肿胀和脾指数的变化;耳片组织做苏木素-伊红(Hematoxylin Eosin, HE)染色,光镜下观察小鼠耳片形态结构的变化;实时荧光定量PCR实验检测脾脏组...     

黄芪多糖对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注过氧化的影响

目的:探讨黄芪多糖(Astragalus Polysacharin,APS)对高同型半胱氨酸血症(hyperhomecysteinemia,Hhcy)大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:应用腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg复制Hhcy大鼠模型,10周后,腹腔注射戊巴比妥钠麻醉下气管插管安装呼吸机,开胸结扎冠状动脉左室降支90 min后松开结扎线再灌注90 min。标Ⅱ导联全程记录心电图,并于再灌注90 min取血。检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)、同型半胱氨酸(Hcy)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果:每天腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg,10周后,血浆Hcy升高。黄芪多糖干预组与Hhcy模型对照组比较CK、LDH、Tn-Ⅰ水平明显降低,而CAT、SOD明显升高。结论:黄芪多糖对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与抗过氧化密切相关。     

黄芪多糖对1型糖尿病小鼠的免疫调节作用

目的：探讨黄芪多糖（Astragalus polysaccharide,APS）对1型糖尿病的免疫调节作用。方法：以低剂量链脲菌素（streptozotocin,STZ）多次腹腔注射,建立1型糖尿病小鼠模型,每天分别用100、200、400mg/kg APS或1ml生理盐水腹腔注射,15d、30d时将小鼠处死。以形态学方法观察胰岛炎症,以放射免疫法检测血胰岛素自身抗体,以放射性同位素氚标记的嘧啶核苷（[^3H]thymidine incorporation,^3H-TdR）掺入法研究脾细胞对刀豆蛋白A（concanavalin A,Con A）的增殖反应,以酶联免疫吸附（enzymelinkedi mmunosorbent assay,ELISA）法检测脾细胞白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）和干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）的分泌,以蛋白免疫印迹（Western-blot）法检验脾过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）的表达。结果：与对照组比较,APS处理组胰岛炎症减轻,血胰岛素自身抗体水平下降,脾细胞对Con A的增殖能力减弱,Th1/Th2分泌因子比值下调,脾PPARγ水平提高,所有这些均与APS的剂量和使用持续时间密切相关。结论：APS可通过调节体液免疫和细胞免疫治疗小鼠1型糖尿病。     

黄芪多糖干预环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的免疫功能

目的 探讨黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用,并建立一套可行的多糖类物质免疫调控指标与评价体系。方法 运用黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)分别处理正常及环磷酰胺(Cytoxan,CTX)致免疫抑制模型小鼠,通过测定其胸腺和脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数,并对小鼠胸腺和脾脏的组织发育情况进行观察;结合流式细胞术检测了各组小鼠外周血T淋巴细胞亚群(CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺)百分含量的变化。结果 黄芪多糖能显著促进正常小鼠及免疫抑制小鼠的免疫器官增重,增大其脾脏和胸腺器官指数;组织学观察结果也显示黄芪多糖可以促进正常小鼠脾脏和胸腺的组织发育,并能改善CTX所致的小鼠脾脏和胸腺组织发育损伤。黄芪多糖可提高正常小鼠及免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率及吞噬指数,并可明显提高正常及免疫抑制小鼠外周血血清中CD3⁺、CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺比值,降低CD8⁺百分含量(P<0.05或P<0.01)。结论 黄芪多糖可提高小鼠机体的免疫机能,并建立了较为全面的多糖类物质免疫调控评价指标。     

Impairment of Myocardial and Skeletal Mitochondria in Mice with Viral Myocarditis and Their Correlation

In order to investigate the impairment of mitochondrial membrane phospholipid local- ization and DNA3867 (mtDNA3867) deletion and the correlation between cardiac and skeletal muscle cells in mice with viral myocarditis, 50 BALB/c mice were divided into two groups randomly. In ex- perimental group (n=40), the mice were intraperitoneally injected with 0.1 mL Eagle liquid with CVB3 (TCID50=108), while in the control group (n=10), the mice were subjected to equal volume of Eagle liquid. The impairment of mitochondrial membrane phospholipid localization and mtDNA3867 deletion rate of cardiac and skeletal muscle were detected separately at day 3, 11 and 24 after injec- tion. The correlation of mitochondrial membrane phospholipid localization and mtDNA3867 deletion rate between cardiac and skeletal muscle cells cells was analyzed using Spearman method. At the day 3 after injection, in both cardiac and skeletal muscle cells, mtDNA3867 deletion rate was significantly higher in experimental group than in control group (P<0.05), but the localization of mitochondrial membrane phospholipid showed no difference between two groups (P>0.05). At day 11 after injec- tion, the mtDNA3867 deletion rate of both cells in experimental group was increased to the peak level (P<0.05), and the impairment of mitochondrial membrane phospholipid localization of both cells also increased markedly in experimental group as compared with control group (P>0.05). At the day 24 after injection, the impairment of mitochondrial membrane phospholipid localization and mtDNA3867 deletion of both cells showed a recovery tendency, but still severer than those at the day 3 after injec- tion (P<0.05). The impairment of mitochondrial membrane phospholipid localization and mtDNA3867 deletion were consistent and synchronistic between cardiac and skeletal muscle cells, and showed good correlations (P<0.05). The impairment of mitochondria plays an important role in the patho- genesis of viral myocarditis, and the skeletal muscle cells might act as a peripheral "window" to re- flect the mitochondrial damage of cardiac myocytes.     

1,25(OH)2D3联合黄芪多糖对体外骨骼肌细胞胰岛素抵抗的改善作用及其机制

目的 探讨骨化三醇［1,25（OH）₂D₃］联合黄芪多糖（APS）对骨骼肌细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用及其作用机制,为采用1,25（OH）₂D₃和APS缓解IR提供依据。 方法 采用CCK-8法和己糖激酶法确定棕榈酸（PA）溶液（0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mmol·L^－1）的最佳作用剂量和最佳作用时间、APS（25、50、100和200 mg·L^－1）最佳作用剂量及1,25（OH）₂D₃（1、10、100和1 000 nmol·L^－1）最佳作用剂量。将骨骼肌细胞分为对照组（不进行任何处理）、PA组（给予0.4 mmol·L^－1 PA 作用24 h）、PA+APS组（给予0.4 mmol·L^－1 PA 作用24 h后再给予100 mg·L^－1 APS作用24 h）、PA＋1,25（OH）₂D₃组［给予0.4 mmol·L^－1 PA作用24 h后再给予100 nmol·L^－1 1,25（OH）₂D₃作用24 h］、PA＋APS＋1,25（OH）₂D₃组［给予0.4 mmol·L^－1 PA作用24 h后再给予100 mg·L^－1 APS和100 nmol·L^－1 1,25（OH）₂D₃作用24 h］。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞培养上清中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平,Western blotting法检测各组细胞中胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物1（IRS-1）、磷酸化胰岛素受体底物1（p-IRS-1）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）、P65、磷酸化P65（p-P65）、P38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和Toll样受体4（TLR4）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,PA组骨骼肌细胞中ROS、IL-6、TNF-α、MCP-1水平和P65、p-P65、p38MAPK及TLR4蛋白表达水平均升高（P<0.05）,IL-10水平和InsR、IRS-1、p-IRS-1及GLUT4蛋白表达水平均降低（P<0.05）;与PA组比较,PA+APS、PA+1,25（OH）₂D₃和PA+APS+1,25（OH）₂D₃组细胞中ROS、IL-6、MCP-1和TNF-α水平及P65、p-P65、p38MAPK及TLR4蛋白表达水平均降低（P<0.05）,IL-10水平和InsR、IRS-1、p-IRS-1及GLUT4蛋白表达水平均升高（P<0.05）。PA+APS+1,25（OH）₂D₃组细胞中ROS水平、p-P65和p38MAPK蛋白表达水平均低于PA+APS和PA+1,25（OH）₂D₃组（P<0.05）,InsR、IRS-1、p-IRS-1和GLUT4蛋白表达水平均高于PA+APS和PA+1,25（OH）₂D₃组（P<0.05）。 结论 1,25（OH）₂D₃联合APS可有效减轻IR,其机制可能是通过抑制氧化应激通路以及炎性因子的释放来实现的,且联合应用效果优于单独应用。     

大蒜多糖对慢性酒精中毒小鼠肝损伤的保护作用

目的：通过大蒜多糖对小鼠酒精性肝损伤的干预效果研究,阐明其对慢性酒精中毒小鼠肝脏损伤的保护作用及机理,为研制开发防治酒精性肝病的天然抗氧化药物提供实验依据。方法：70只昆明小鼠随机分为对照组、模型组以及大蒜多糖低、中、高剂量（100、150和200 mg•kg^-1•d^-1）组,每组14只,采取剂量递增法,用56°白酒建立小鼠慢性酒精中毒模型,同时用大蒜多糖进行干预。实验8周后,测定小鼠体质量、肝质量指数、肝脏丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）水平、检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、Na⁺-K⁺-ATP酶、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性,光镜下观察小鼠肝脏组织形态学改变。结果：与对照组比较,模型组小鼠体质量明显下降（P<0.05）,肝质量指数、血清ALT和AST活性及肝脏MDA水平均明显增高（P<0.05）,Na⁺-K⁺-ATP、GSH-Px和SOD活性及GSH水平明显降低（P<0.05）;肝脏出现明显脂肪空泡、炎细胞浸润等病理学改变。与模型组比较,大蒜多糖各剂量组小鼠肝质量指数、血清ALT和AST活性明显降低（P<0.05）,GSH水平增加(P<0.05),GSH-Px和SOD活性明显增高（P<0.05）;高、中剂量组小鼠体质量和Na⁺-K⁺-ATP活性明显增加（P<0.05）,MDA水平明显降低（P<0.05）,肝组织病变减轻。结论：持续过量饮酒可导致小鼠酒精中毒并对肝脏产生严重损伤;大蒜多糖对小鼠酒精性肝损伤有一定的保护作用,机理与其增强机体抗氧化能力有关。     

酵母发酵技术对黄芪中多糖含量的影响

目的:初步探讨酵母菌发酵对黄芪药材中多糖含量的影响。方法:采用苯酚-浓硫酸法对不同发酵时间下的药材发酵液中的多糖含量进行测定,并与传统水煎法中黄芪多糖含量进行比较。结果:传统水煎法中黄芪多糖的产量约为16.1 mg/g,产率为1.61%;微生物发酵法在发酵最佳时间黄芪多糖的产量约为18.4 mg/g,产率为1.84%,两种处理方法对黄芪多糖的产率影响相差0.23%。结论:酵母菌发酵黄芪药材对黄芪多糖含量有一定影响,且其产率与传统水煎方法相比有一定程度的提高。     

梭果黄芪不同极性部位抗疲劳和免疫调节研究

目的：考察梭果黄芪不同极性部位对小鼠抗疲劳作用和免疫调节作用的影响。方法：分别采用小鼠负重力竭游泳实验,碳粒廓清指数、免疫器官重量法以及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验观测梭果黄芪不同极性部位对小鼠抗疲劳和免疫调节的影响。结果：①梭果黄芪乙酸乙酯部位对小鼠运动所致疲劳具有抗疲劳作用,能显著增加小鼠游泳时间t=（16.28±4.28）min（P〈0.05）。②乙酸乙酯部位、水部位能增加小鼠血清溶血术抗体的生成,其OD值分别为0.9851±0.1232、1.0527±0.1950（P〈0.05）。③梭果黄芪各部位对小鼠巨噬细胞吞噬功能有一定影响作用,但在吞噬指数和廓清指数上无显著性影响;乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位能显著增加胸腺器官的重量,胸腺指数分别为（3.1960±0.4820）、（3.5550±0.8259）、（2.6960±1.0834）mg/g（P〈0.05）。结论：梭果黄芪乙酸乙酯部位能明显提高正常小鼠机体的抗疲劳能力,乙酸乙酯部位和水部位能明显增加小鼠血清溶血术抗体的生成,各部位对小鼠巨噬细胞吞噬功能有一定影响作用。     

黄芪多糖抗氧化活性的研究

目的:评价黄芪多糖的体外抗氧化活性.方法:通过观察黄芪多糖的总还原能力以及其对羟基和超氧阴离子自由基的清除作用研究黄芪多糖的抗氧化活性.结果:黄芪多糖的总还原能力在一定范围内随着多糖浓度的增加而增强;黄芪多糖对羟基自由基和超氧阴离子具有较强的清除能力.结论:黄芪多糖具有很强的抗氧化活性.