首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 203 毫秒
1.
汉黄芩素对肺癌细胞株A549的体外作用研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:探讨体外汉黄芩素对肺癌细胞株A549增殖、侵袭及凋亡的影响。方法:应用MTT(噻唑蓝)法检测汉黄芩素对于A549细胞增殖活性;用形态学方法观察汉黄芩素对A549细胞的促凋亡作用;应用Transwell法观察细胞侵袭能力。结果:汉黄芩素对A549细胞增殖和侵袭活性具有明显抑制作用,对肺癌细胞有明显促凋亡作用,镜下可见染色体聚集及细胞核碎裂。结论:汉黄芩素对肺癌A549细胞的增殖迁移均有明显抑制作用并可促进肿瘤细胞凋亡。  相似文献   

2.
目的:研究人胚胎干细胞H9与肺癌细胞A549共培养上清液对A549细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法:建立人胚胎干细胞H9与肺癌A549细胞直接接触式共培养体系,收集共培养上清液,将共培养上清液作用于肺癌A549细胞。以单独培养的A549细胞上清液为空白对照组,单独培养的人胚胎干细胞H9上清为对照组。显微镜下观察共培养上清液对肿瘤细胞生物行为学的影响;用CCK-8检测共培养上清液对肿瘤细胞增殖能力的影响;Hoechst染色法检测共培养上清液对肿瘤细胞的凋亡影响;细胞划痕实验检测共培养上清液对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响。结果:显微镜下观察到实验组肿瘤细胞数量逐渐减少甚至凋亡;CCK-8检测到实验组肿瘤细胞的增殖受到显著抑制(P<0.05);Hoechst染色发现实验组细胞核出现典型凋亡形态;细胞划痕实验结果显示实验组肿瘤细胞的划痕愈合率明显低于空白对照组和对照组(P<0.05)。结论:人胚胎干细胞H9与肺癌A549细胞共培养上清液,在体外可以抑制肺癌A549细胞增殖、迁移,促进肿瘤细胞凋亡,具有一定的抗癌效应。  相似文献   

3.
目的:探讨氯化锂对人肺腺癌A549细胞增殖和侵袭转移能力的影响及其调控机制。方法:应用MTT法、平板克隆形成实验评价细胞生长活力和增殖的生物学特征变化;划痕实验、Transwell小室细胞体外侵袭实验检测肿瘤细胞迁移、侵袭能力;Western-blotting法检测肿瘤细胞GSK-3β、P-GSK-3β和β-catenin的表达水平变化。结果:MTT法显示细胞分化增殖能力随氯化锂浓度的增加受到明显抑制,具有浓度依赖性变化。同时,随着检测时间的延长,在低浓度药物作用下(<10 mmol/L)细胞出现增殖增强现象,可能存在药物时间耐受;平板克隆形成实验显示细胞增殖受到不同浓度氯化锂的抑制,增殖能力的变化亦具有氯化锂浓度依赖性;划痕实验、Transwell实验证实:氯化锂处理细胞后,细胞迁移、侵袭能力下降;Western-blotting法显示:氯化锂处理肺腺癌A549细胞后,GSK-3β总蛋白表达下降、P-GSK-3β表达增加,β-catenin总蛋白表达增多。结论:高浓度的氯化锂能够抑制肺腺癌A549细胞的增殖和侵袭迁移,氯化锂抑制肺腺癌A549细胞增殖和侵袭迁移可能是通过GSK-3β/β-catenin信号通路实现的。  相似文献   

4.
目的 研究Yes相关蛋白1(YAP1)在非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭中的作用.方法 通过慢病毒介导的小干扰RNA靶向抑制人非小细胞肺癌细胞株A549中YAP1基因的表达,采用CCK-8法、流式细胞术分别检测沉默YAP1对A549细胞增殖及凋亡周期的影响,Transwell实验观察沉默YAP1对A549细胞迁移、侵袭能力的影响.结果 沉默YAP1后,A549细胞YAP1 mRNA和蛋白表达均下调(P<0.01),CCK-8实验结果显示沉默YAP1抑制A549的增殖、增加G0/G期的细胞比例(P<0.01),Transwell实验结果示沉默YAP1抑制A549细胞的迁移、侵袭(P<0.01).结论 沉默YAP1基因对非小细胞肺癌细胞的恶性生物学特征具有抑制作用,YAP1可能成为肺癌治疗的潜在靶标.  相似文献   

5.
目的:探讨肝癌HepG2细胞系外泌体与正常肝细胞LO2共培养对其增殖、侵袭、迁移能力的影响.方法:采用外泌体提取试剂盒收集肝癌HepG2细胞外泌体;采用透射电镜和纳米颗粒跟踪分析仪鉴定外泌体形态和粒径分布特征;采用CCK-8、流式细胞术、transwell侵袭和迁移等实验方法,检测外泌体对LO2细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等能力的影响.结果:成功提取到HepG2细胞外泌体.与正常肝细胞LO2对照组相比,肝癌HepG2细胞外泌体可促进LO2细胞增殖,增强LO2细胞的侵袭和迁移能力,并且抑制LO2细胞凋亡.结论:HepG2肝癌细胞来源的外泌体可促进LO2细胞的增殖、侵袭和迁移等能力.  相似文献   

6.
目的探讨siRNA沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达对耐药性非小细胞肺癌细胞株A549增殖及侵袭的影响。方法培养非耐药性和耐药性非小细胞肺癌A549细胞,应用RT-PCR技术检测MACC1 mRNA的表达水平;通过化学合成特异性siRNA,与阳离子脂质体Lipofectamine 2000形成复合体,转染耐药性A549细胞,RT-PCR检测转染效果;继续顺铂药物处理耐药性A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33258染色法观察siMACC1后耐药性A549细胞的凋亡形态;Transwell法检测siMACC1后耐药性A549细胞迁移能力;Western blot法检测siMACC1后耐药性A549细胞周期蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达水平。结果与耐药性A549细胞组比较,非耐药性A549细胞组中MACC1 mRNA表达量显著下降(P0.05)。与siRNA NC耐药性A549细胞组比较,siRNA MACC1耐药性A549细胞组中MACC1 mRNA表达量显著降低(P0.05),细胞增殖抑制率上升(P0.05);Hoechst 33258细胞染色结果表明siRNA MACC1耐药性A549细胞组发生细胞皱缩,细胞核聚集,细胞形态学呈现细胞凋亡改变;Transwell实验表明MACC1基因沉默后,细胞迁移能力变弱;Western blot结果表明MACC1基因沉默后,与siRNA NC耐药性A549细胞组比较,siRNA MACC1耐药性A549细胞组中E-cadherin蛋白表达显著增加(P0.05),N-cadherin蛋白表达显著减少(P0.05),细胞的侵袭转移能力显著减弱。结论 MACC1在耐药性A549细胞中的异常升高,可能是肺癌肿瘤细胞耐药性产生的分子机制之一。siRNA MACCl能够有效转染耐药性A549细胞,能显著地抑制耐药性A549细胞增殖与侵袭。  相似文献   

7.
目的 研究一种去除血清外泌体( exosomes, Exos)的超离方法,以及去外泌体血清对脂肪干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)和肿瘤细胞(胃癌细胞)的增殖、衰老、周期和凋亡的影响,为用于外泌体机制研究的细胞培养方法提供新方案.方法 超离法去除胎牛血清中的外泌体,Western印迹法检测外泌体的去除效果,使用去外泌体血清作为实验组以及正常血清作为对照组配置培养基,对培养的脂肪干细胞和肿瘤细胞用CCK-8法分析细胞生长情况,β-Gal半乳糖苷酶染色法分析细胞衰老情况,流式细胞分析法检测细胞周期及细胞凋亡情况.结果 Western印迹法结果显示超离法能高效去除血清中外泌体,对培养的细胞检测分析显示实验组ADSCs增殖减慢,细胞周期,衰老和凋亡均无明显变化.实验组肿瘤细胞的增殖、衰老、细胞周期、凋亡均不存在显著性差异.结论 超离法能有效去除血清外泌体对ADSCs和肿瘤细胞外泌体研究的干扰,且对细胞不产生影响.  相似文献   

8.
目的 研究不同浓度的二甲双胍丁酸盐(MFB)作用不同时间后对人肺腺癌细胞A549增殖、凋亡与迁移能力的影响.方法 用梯度浓度(0、0.5、1、2,、4、8 mmol/L)的MFB对离体培养的A549细胞进行处理,在作用24、48 h后,用 MTT法检测MFB对A549细胞增殖的抑制率;干预24、48 h后用流式细胞术分析A549细胞的凋亡率.用划痕实验分析 MFB对A549细胞株迁移能力的影响.结果 MTT实验表明,MFB对A549细胞的增殖具有抑制作用,并且在一定浓度范围内呈现出浓度和时间依赖性(P<0. 05).流式细胞术检测结果显示:实验组细胞凋亡率大于对照组(P< 0.05),具有一定的时间和浓度依赖性(P<0. 05).划痕实验结果显示实验组细胞迁移率小于对照组,高浓度用药组细胞迁移率小于低浓度用药组(P<0. 05),且药物作用48 h后细胞迁移率<24 h(P<0.05).结论 MFB在体外能够抑制人肺腺癌A549细胞的增殖和迁移,促进其凋亡,其强度可能与其浓度和作用时间有关.  相似文献   

9.
川芎嗪对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响及其机制   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:研究川芎嗪对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响,并探讨川芎嗪治疗肺癌的作用机制。方法:选用肺癌A549细胞体外培养,在不同浓度川芎嗪作用下,应用MTT法检测肺癌细胞的增殖抑制,应用流式细胞仪检测肺癌细胞的凋亡及细胞周期的分布,采用免疫细胞化学方法检测川芎嗪对肺癌A549细胞Bcl-2及Bax表达的影响。结果:川芎嗪对肺癌A549细胞增殖有明显抑制作用,且呈时间剂量依赖关系;川芎嗪能够使A549细胞G0/G1期、G2/M期细胞增多,与对照组比,差异显著(P<0.01);川芎嗪能够下调肺癌A549细胞Bcl-2的表达,对Bax无明显影响,使Bcl-2/Bax下降。结论:川芎嗪对肺癌A549细胞的增殖有抑制作用,其机制可能与川芎嗪能够改变A549细胞周期分布,下调肺癌A549细胞Bcl-2表达,改变Bcl-2/Bax比例,促进肿瘤细胞凋亡等有关。  相似文献   

10.
目的 研究SOCS7对肺癌A549细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法 在肺癌A549细胞中分别采取过表达SOCS7和干扰SOCS7的方法,以细胞计数法(CCK-8)检测各实验组细胞的增殖情况;以Transwell方法检测各实验组细胞的迁移能力;以蛋白质印迹法(Western blot)检测各实验组凋亡相关基因的蛋白表达量情况;以ELISA方法检测各实验组免疫相关基因的蛋白表达情况。结果 干扰SOCS7时,转染96 h后,与对照组和转染controlsiRNA组相比,肺癌A549细胞的增殖力明显降低,迁移能力明显降低。Western blot实验结果显示细胞中Bcl-2表达量显著降低,Cleaved Caspase3表达量升高;干扰SOCS7时,转染12 h后,与对照组和转染controlsiRNA组对比,肺癌A549细胞中人肿瘤坏死因子α(Tnf-α)和IL-1表达量显著升高,IL-6无显著性变化,在转染24 h后,与对照组和转染空载体组对比,IL-6表达量显著升高。结论 干扰SOCS7能够抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移能力,降低Bcl-2蛋白表达量,提高Caspase-3蛋白表达量,Tnf-α和IL-1表达量也显著升高,SOCS7可能通过炎症反应和Caspase-3途径来调节肺癌A549细胞的生长。  相似文献   

11.
目的 研究siRNA干扰Pokemon基因对肺腺癌A549细胞增殖抑制效应的变化.方法 专业设计合成3条针对Pokemon的siRNA,分别转染A549细胞后,RT-PCR检测转录水平Pokemon mRNA表达的变化,筛选出其中最高效的1条siRNA;用MTT法检测该siRNA干扰Pokemon对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞技术检测该siRNA干扰Pokemon对A549细胞凋亡的影响.结果 3条siRNA均成功转染A549细胞,倒置荧光显微镜下观察细胞呈圆绿色.RT-PCR结果显示有2条siRNA使细胞中Pokemon的mRNA表达降低(P<0.05).MTT法结果显示siRNA干扰Pokemon后对A549细胞增殖有抑制作用(P<0.05),其中48 h抑制效率达(24.14±1.39)%.流式细胞技术检测结果显示该siRNA干扰Pokemon可增加A549细胞的凋亡,凋亡率为14.05%.结论 应用RNA干扰Pokemon基因能够抑制A549细胞的增殖,促进A549细胞的凋亡.Pokemon基因有可能成为肺癌治疗中的一个新靶点.  相似文献   

12.
目的 研究甲氨蝶呤(MTX)对映体大剂量冲击作用肺癌A549细胞后,MTX对映体耐药细胞血管分化是否具有手性选择性.方法 用大剂量冲击法诱导获得A549对映体耐药肺癌细胞,流式细胞双色分析细胞CD44/CD31以及P-170表达;皮下接种裸鼠,成瘤后取瘤体切片,进行CD34组化染色,计数新生微血管密度(MVD).以A549亲本细胞(未获得耐药)作为对照组.结果 分别建立耐药浓度为15 μmol/L的L-MTX和D-MTX的A549耐药细胞株;它们与各自对映体的耐药指数分别为12.4±1.2和20.1±2.3;A549亲本细胞、L-MTX耐药细胞和D-MTX耐药细胞中:CD31+阳性率分别为55.5%±9.7%、32.9%±8.0%和91.9%±3.2%,差异有统计学意义(F=511.92,P=0.000);P-170阳性率分别为85.5%±4.6%、71.5%±8.2%和87.0%±8.9%,L-MTX耐药细胞P-170的阳性率低于D-MTX耐药细胞(t=6.13,P=0.002);3种细胞植入裸鼠成瘤后切片免疫标记CD34统计新生MVD,A549亲本细胞为3.6±1.2,L-MTX耐药细胞为7.2±1.7,D-MTX耐药细胞为55.9±11.9,D-MTX耐药细胞显著高于L-MTX耐药细胞(t=13.37,P=0.000).结论 MTX对映体诱导肺癌A549耐药细胞向血管内皮细胞分化能力不同,D-MTX耐药细胞经血管转移高于L-MTX耐药细胞,这提示MTX制剂中D型组分不能简单当成污染物而忽视,应尽量选用单一对映体的L-MTX药物制剂,减少D-MTX带来的副作用.  相似文献   

13.
目的观察核素介导生长抑素类似物对非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)细胞的体外杀伤作用。方法 MTT法测定核素介导生长抑素类似物对人肺癌细胞A549和SPC-A1增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell侵袭实验验证核素介导生长抑素类似物对肿瘤侵袭的影响。结果 2~6 d内,核素介导生长抑素类似物对A549和SPC-A1细胞的抑制率随时间延长明显增加。经核素介导生长抑素类似物处理48 h后,A549和SPC-A1细胞凋亡率分别为23.1%和22.6%。与对照组相比,核素介导生长抑素类似物处理过的A549和SPC-A1细胞侵入胶原的数量减少了约1/3。结论核素介导生长抑素类似物具有诱导NSCLC细胞凋亡的作用,这可能为NSCLC的放射治疗提供了新的思路。  相似文献   

14.
目的探讨miR-18b-5p调控神经前体细胞表达下调蛋白9(NEDD9)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法qRT-PCR检测人正常乳腺癌上皮细胞MCF-10A与2株乳腺癌细胞株(SKBR-3和SKBR-3/PR)中miR-18b-5p的表达水平;Western blotting检测SKBR-3/PR细胞来源外泌体的表面标志物;CCK8和Transwell实验检测SKBR-3/PR细胞转染miR-18b-5p inhibitor并提取的外泌体与SKBR-3细胞共培养后对SKBR-3细胞增殖和侵袭、迁移能力。生物信息学预测软件Target Scan预测miR-18b-5p与NEDD9的靶向结合位点。双荧光素酶实验分析miR-18b-5p与NEDD9的靶向调控关系。Transwell实验检测上调NEDD9对SKBR-3细胞侵袭迁移能力的影响。结果miR-18b-5p在乳腺癌细胞株中相对于正常乳腺癌上皮细胞中高表达(P < 0.01);SKBR-3/PR细胞来源的外泌体高表达CD63和TSG101等特异性蛋白(P < 0.01),SKBR-3/PR细胞转染miR-18b-5p inhibitor提取外泌体后对SKBR-3细胞的增殖、侵袭和迁移显著被抑制(P < 0.01)。生物信息学软件Target Scan预测结果显示,NEDD9 3'UTR上存在潜在与miR-18b-5p靶向结合的位点,miR-18b-5p能够负向调控NEDD9基因表达(P < 0.01)。过表达NEDD9能抑制SKBR-3细胞侵袭能力(P < 0.01)。结论miR-18b-5p通过靶向NEDD9促进乳腺癌细胞侵袭、迁移。  相似文献   

15.
【目的】探讨miRNA-155在正常肺组织和非小细胞肺癌组织中的表达及miRNA-155对人肺癌细胞A549增殖的影响。【方法】采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测15例非小细胞肺癌组织及其癌旁组织中miRNA-155的表达;A549细胞分别转染miR-NC和miRNA-155 mimic ,采用Real-time PCR技术检测转染后A549细胞中的miRNA-155表达水平,同时采用MTT 技术和流式细胞技术检测转染后A549细胞增殖情况,Western印迹法检测转染后A549细胞中Akt、p-Akt(Ser473)、p27、bcl-2、bax的表达。【结果】miRNA-155在非小细胞肺癌组织中的表达情况明显高于癌旁组织( P <0.05);与转染 miR-NC 组相比, A549细胞转染miRNA-155 mimic后miRNA-155表达水平明显增高( P <0.001),MTT实验和流式细胞技术显示miRNA-155促进A549细胞的增殖;Western印迹法结果显示:转染miRNA-155的A549细胞p-Akt (Ser473),bcl-2的表达水平增高,p27、bax的表达水平降低。【结论】miRNA-155可能通过促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,上调p-Akt(Ser473)、bcl-2表达,同时抑制p27、bax的表达来促进非小细胞肺癌的发生发展。  相似文献   

16.
目的 研究碱制法炮制前后斑蝥对人肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法 提取生品斑蝥中的斑蝥素和碱制斑蝥中的斑蝥酸钠。以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,生斑蝥与碱制斑蝥处理细胞后,采用CCK-8法检测药物对细胞增殖活性的影响,划痕实验观察细胞迁移作用,Transwell实验观察细胞侵袭作用,WB观察药物对A549细胞MMP1、MMP2蛋白表达的影响,ELISA法检测细胞炎症因子IFN-γ、IL-1β和TNF-α水平,AnnexinV/PI染色观察细胞凋亡情况。结果 生斑蝥与碱制斑蝥均可使A549细胞活力明显降低;生斑蝥与碱制斑蝥均能抑制A549细胞迁移,且生斑蝥高浓度组划痕愈合程度最低,与生斑蝥高浓度组相比,差异具有显著性(P<0.01);碱制斑蝥较生斑蝥抑制A549细胞侵袭作用更明显,差异具有显著性(P<0.01);且生斑蝥与碱制斑蝥均可抑制 MMP1和MMP2蛋白的表达,显著上调炎症因子IFN-γ水平,但对IL-1β、TNF-α含量则没 有显著影响,Annexin V/PI双染荧光拍照发现生斑蝥组与碱制斑蝥组红绿荧光强度均增加,且碱制斑蝥组荧光增加更明显。结论 碱制法炮制后斑蝥的抗癌作用显著提高,具有抑制A549细胞增殖,侵袭和迁移的作用,其机制可能与下调MMP1和MMP2的表达,促进凋亡及上调炎症因子IFN-γ水平有关。  相似文献   

17.
目的探讨中成药得力生诱导肺癌细胞株A549细胞凋亡及其对survivin基因表达的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖抑制率,在显微镜下观察细胞凋亡的形态特点,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用逆转录聚合酶连反应(RT—PCR)法测定survivin mRNA的表达。结果(1)得力生在4mL/L-100mL/L浓度范围内可抑制A549细胞增殖,此作用与药物体积浓度无明显相关关系,但该作用具有时间依赖性(r=0.991,P=0.001)。(2)20mL/L浓度的得力生在体外可诱导A549细胞凋亡,且其作用具有时间依赖性(r=0.997,P=0.049)。(3)RT—PCR结果显示,得力生可明显抑制A549细胞中表达survivin,与对照组相比,差异具有统计学意义(r=4.333,P〈0.05)。结论得力生可抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与抑制survivin基因表达有关。  相似文献   

18.
目的:探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移、侵袭及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响,阐明其外泌体在宫颈癌发生发展过程中的可能作用机制。方法:取对数生长期宫颈癌HeLa细胞,采用超速离心法分离宫颈癌HeLa细胞外泌体,透射电镜下观察外泌体形态表现,Western blotting法检测外泌体标志蛋白CD63和CD81的表达,鉴定分离出来的外泌体。将HeLa细胞分为外泌体组(Exo组)和对照组,2组细胞分别用含和不含HeLa细胞外泌体的培养基培养。共聚焦显微镜下观察HeLa细胞摄取外泌体情况,其中外泌体采用PKH26荧光标记,HeLa细胞用DAPI荧光进行核染色,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验测定细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中Wnt1、β-catenin和T细胞因子4(TCF4)蛋白表达水平。结果:透射电镜下观察,HeLa细胞中分离的外泌体为是圆形或椭圆形、直径为40~100 nm的囊泡状小体,且富含CD63和CD81蛋白。共聚焦显微镜下观察,Exo组HeLa细胞膜表面有外泌体附着,而对照组HeLa细胞膜表面无外泌体附着。Transwell小室实验,Exo组HeLa细胞中侵袭细胞数明显高于对照组(t=17.894,P<0.01)。细胞划痕实验,Exo组HeLa细胞迁移距离明显长于对照组(t=9.689,P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,Exo组HeLa细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt1、β-catenin和TCF4蛋白表达水平均明显升高(t=13.159,P<0.01;t=15.478,P<0.01;t=7.734,P<0.01)。结论:宫颈癌HeLa细胞来源的外泌体可促进宫颈癌细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与HeLa细胞来源外泌体可促进Wnt/β-catenin信号通路的激活及下游TCF4基因的表达有关。  相似文献   

19.
目的:探讨A激酶锚定蛋白9(AKAP9)对肺腺癌细胞A549的作用及其可能的分子机制。方法:通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测shRNA的沉默效果;通过MTT和克隆形成实验检测AKAP9对肺腺癌细胞A549增殖的影响;Transwell实验检测AKAP9对肺腺癌细胞A549迁移的影响;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测周期相关蛋白P27、细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)的表达和细胞外信号调节激酶(ERK)通路中表皮生长因子受体(EGFR)、ERK的磷酸化水平。结果:RT-qPCR和Western blot结果显示,shRNA可以有效地沉默肺腺癌细胞A549中AKAP9的表达(P <0.01)。MTT和克隆形成结果示,与对照组相比,沉默AKAP9显著抑制癌细胞A549的增殖和克隆形成能力(P <0.01)。Transwell实验示,与对照组相比,沉默AKAP9显著抑制癌细胞A549的迁移能力(P <0.01)。流式细胞术结果示,与对照组相比,沉默AKAP9可以诱导肺腺癌细胞G1-S期阻滞(P <0.01)。Western blot结果示,与对照组相比,沉默AKAP9增加细胞周期负性调控因子P27,减少正性调控蛋白Cyclin D1、CDK4的表达,并降低EGFR、ERK的磷酸化水平(P <0.01)。结论:沉默AKAP9可以通过抑制ERK通路活性减弱肺腺癌细胞A549增殖和迁移的能力。  相似文献   

20.
目的:研究人非小细胞肺癌A549细胞中Klotho基因表达的KL1蛋白的相关功能及其机制?方法:分别用表达KL1蛋白和表达KL蛋白(Klotho基因表达的另一种同源蛋白)的质粒转染非小细胞肺癌细胞株A549后,通过Western blot验证转染结果;MTT法检测细胞的生长情况;平板细胞克隆形成实验检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞转染后对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)信号通路的中下游靶位点蛋白ERK1/2磷酸化水平的影响?结果:转染48 h后细胞显著表达外源性KL(P < 0.01)?KL1蛋白(P < 0.01)?KL1基因过表达后可以抑制A549细胞生长(P < 0.01);同时显著抑制细胞增殖(P < 0.01),促进细胞凋亡(P < 0.01);KL1过表达能够明显降低bFGF通路中ERK1/2的磷酸化水平(P < 0.01);过表达KL1与过表达KL比较,两者在影响细胞生长?增殖?凋亡和对bFGF信号通路的激活中并无明显统计学差异(P > 0.05)?结论:KL1与KL蛋白均能够抑制肿瘤细胞生长增殖,促进肿瘤细胞凋亡,作用效果相当?KL1能够抑制bFGF信号转导通路,可能是KL中发挥抑制肿瘤作用的主要功能片段?  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号