生存素反义寡核苷酸对人脑胶质瘤U87细胞株MMP-2及TIMP-2表达的影响

目的:研究生存素(survivin)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人脑胶质瘤U87细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissue inhibitor of metallo...     

反义寡核苷酸抑制survivin表达来增强乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231对多西他赛敏感性的研究

目的: 探讨利用反义寡核甘酸(ASODN)技术封闭乳腺癌细胞株survivin基因,观察survivin基因表达下调能否诱导细胞凋亡及增强对多西他赛(docetaxel)药物敏感性.方法: Survivin ASODN单独及联合多西他赛处理乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231,RT-PCR检测survivin mRNA的表达,免疫细胞化学方法和Western blotting检测survivin蛋白表达,倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法检测细胞的生长抑制率.结果: Survivin ASODN可下调人乳腺癌细胞株中survivin mRNA 和蛋白质的表达;survivin ASODN 与多西他赛联合用药组相比对照组和多西他赛组可明显抑制细胞株的生长(P<0.01).结论: Survivin ASODN明显抑制survivin基因在乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231中的转录及翻译,明显提高乳腺癌对多西他赛的敏感性.     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对SGC-7901细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响 Ⅰ.乙酰肝素酶反义寡核苷酸对SGC-7901细胞MMP-2和TMP-2表达的影响

目的:探讨乙酰肝素酶(HPA)反义寡脱氧核苷酸(AS-OND)对人胃癌细胞株SGC-7901细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响。方法:采用脂质体介导法将HPAAS-ODN转染SGC-7901细胞G用RT-PCR检测HPA-mRNA表达,用免疫细胞化学的方法检测细胞内MMP-2和TIMP-2的变化。结果:AS-ODN转染48h后GSGC-7901细胞内HPA-mRNA表达下降(P<0.01),MMP-2的表达量亦减少(P<0.01)。结论:HPAAS-ODN可以有效地抑制胃癌细胞MMP-2的表达。     

c-erbB-2、MMP-2、MMP-9表达水平与乳腺癌恶性程度的相关性

目的探讨c—erbB-2、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-2、MMP-9表达水平与乳腺癌恶性程度间的相关性。方法采用免疫组化染色法测定乳腺癌患者c-erbB-2、MMP-2、MMP-9的表达水平，结合临床资料进行相关性分析研究。结果MMP-2、MMP-9的表达水平与乳腺癌临床分期之间存在一定的相关性（P〈0．05），其中MMP-2的表达水平与乳腺癌的局部侵袭存在显著的相关性（P〈0．01），MMP-9的表达水平与乳腺癌的淋巴结转移存在显著的相关性（P〈0．01）；c—erbB-2的表达水平与乳腺癌组织的雌、孕激素受体表达水平之间存在显著的相关性（P〈0．01）。结论MMP-2、MMP-9与乳腺癌的局部侵袭和远处转移的发生、发展关系密切，既可以用于评价乳腺癌的恶性程度又可以用作乳腺癌治疗的靶点。     

鼻息肉中MMP-2、MMP-9的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在观察组织、正常组织中表达程度的差异性.方法 选取45例为观察组、15例为对照鼻甲组,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测标本中MMP-2、MMP-9的表达情况并行相关分析.结果 与对照组比较,观察组MMP-2、MMP-9的表达量明显增加(P＜0.05).结论 MMP-2、MMP-9在观察组织中表达增高,可能与鼻息肉发生、发展相关.     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对胃癌细胞侵袭和转移的影响Ⅰ.乙酰肝素酶反义寡核苷酸对SGC-7901细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的：探讨乙酰肝素酶（HPA）反义寡脱氧核苷酸（AS-OND）对人胃癌细胞株SGC-7901细胞基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及组织金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达的影响。方法：采用脂质体介导法将HPA AS-ODN转染SGC-7901细胞,用RT-PCR检测HPA-mRNA表达．用免疫细胞化学的方法检测细胞内MMP-2和TIMP-2的变化。结果：AS-ODN转染48h后,SGC-7901细胞内HPA-mRNA表达下降（P〈0．01）,MMP-2的表达量亦减少（P〈0．01）。结论：HPAAS-ODN可以有效地抑制胃癌细胞MMP-2的表达。     

穿心莲有效成分对巨噬细胞MMP-2、MMP-9表达和活性的影响

目的 探讨穿心莲有效成分(API0134)是否具有抑制小鼠腹腔巨噬细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-2,MMP-9)活性及其mRNA表达的作用.方法 用腹腔冲洗的方法收集小鼠腹腔巨噬细胞,使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激巨噬细胞,同时分别以不同浓度的API0134对巨噬细胞进行干预.采用免疫荧光方法、明胶酶谱法和RT-PCR的方法检测ox-LDL和API0134对巨噬细胞MMP-2、MMP-9活性和表达的影响.结果 与对照组相比,ox-LDL组MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达显著升高(均P＜0.01).与ox-LDL组相比,加入50 μg/mL API0134组MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达变化不明显(均P＞0.05),而加入100、200 μg/mL API0134组的MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达均有不同程度的下降(均P＜0.05).结论 穿心莲有效成分能够抑制ox-LDL对巨噬细胞MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达的上调作用,因此可能具有维护粥样斑块稳定,减少斑块破裂危险的作用.     

生存素反义寡核苷酸对人胃癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨生存素（survivin）反义寡核苷酸（ASODN）对人胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用。方法 设计合成特异性靶向生存素的反义寡核苷酸。胃癌细胞株SGC7901分为4组：空白对照组、单纯脂质体对照组、正义链转染对照组、ASODN转染组。作用48h后收获各组细胞。Westernblot法检测各组细胞生存素表达情况，流式细胞仪检测各组细胞凋亡率，MTT法检测各组细胞的生长抑制率。结果 脂质体介导生存素反义寡核苷酸转染后的胃癌细胞出现生存素蛋白表达明显下降；ASODN转染组细胞凋亡率明显高于各对照组（P〈0．05），而各对照组问差异无显著性（P〉0．05）；ASODN转染组细胞的抑制率明显高于各对照组（P〈0．05），而各对照组问差异无显著性（P〉0．05）。结论 生存素反义寡核苷酸转染胃癌细胞能下凋生存素蛋白表达，诱导胃癌细胞凋亡，抑制细胞增殖，具有明显的抗癌作用。     

氨肽酶N在乳腺癌中的表达及与MMP-2、MMP-9 的相关性研究

目的 研究氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)在乳腺癌中的表达及临床意义,并观察其与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的关系.方法 收集河北省人民医院病理科2011年7月至2012年9月乳腺癌石蜡标本60例,癌旁正常乳腺组织石蜡标本20例,及患者的临床病理资料.采用免疫组织化学SP法检测APN在80例标本中的表达,并分析APN表达与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系.检测MMP-2、MMP-9在乳腺癌组织中的表达,及与APN表达的相关性.结果 APN在乳腺癌中的阳性表达率36.7％ (22/60)明显高于癌旁正常乳腺组织0％(0/20)(x2=10.115,P=0.001).APN在乳腺癌中的表达与肿瘤病理类型有关(P =0.035),多表达于浸润性导管癌;与患者绝经状况、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、淋巴结转移状态、ER、PR、Her-2等无关(P＞0.05).乳腺癌组织APN的表达与MMP-2、MMP-9的表达无相关性(P＞0.05).结论 APN在乳腺癌中的表达高于正常乳腺组织,但APN在乳腺癌中侵袭转移的机制有待进一步深入研究.     

西利马林抑制MCF-7细胞侵袭和MMP-9表达

目的探讨西利马林与紫杉醇对乳腺癌细胞MCF-7增殖侵袭以及MMP-9表达的影响。方法体外培养MCF-7细胞,并分为空白对照组、紫杉醇组、西利马林组和紫杉醇＋西利马林组。采用噻唑蓝法检测细胞的增殖情况,反转录PCR检测MMP-9mRNA的表达,小室侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果西利马林和紫杉醇均能抑制MCF-7细胞增殖,并能抑制细胞侵袭力和MMP-9mRNA的表达。但两者联合使用时能进一步抑制细胞增殖、侵袭和MMP-9表达。结论西利马林能增强紫杉醇对乳腺癌细胞增殖侵袭的抑制效应,其机制可能与MMP-9表达有关。     

CTGF基因转染对宫颈癌细胞MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖的影响

目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因对人宫颈癌Hela细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及细胞增殖的影响,探讨CTGF在宫颈癌侵袭和转移中的作用机制。方法:经脂质体介导将含有CTGF重组表达质粒转染人宫颈癌Hela细胞株,用G418筛选阳性细胞克隆及实时荧光定量PCR、蛋白质印迹鉴定;采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测阳性克隆细胞MMP-2及MMP-9的表达;噻唑盐(MTT)比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果:成功建立稳定高表达CTGF的阳性Hela细胞克隆,证实其MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖活性均显著增高。结论:CTGF转染可显著增加宫颈癌细胞MMP-2及MMP-9的表达并促进其细胞增殖,CTGF可能是宫颈癌基因治疗的潜在靶点。     

生存素及基质金属蛋白酶-9对胎盘发育的调节

目的 研究生存素及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对胎盘发育的调节作用.方法 采用荧光实时定量多聚酶链式反应方法检测正常早期妊娠绒毛组织(20例)、中期妊娠胎盘组织(15例)及晚期妊娠胎盘组织(20例)中生存素及MMP-9 mRNA的表达.结果 正常妊娠早、中、晚期胎盘组织生存素mRNA及MMP-9 mRNA表达随孕周...     

转染CTGF基因对乳腺癌细胞MMP－2及TIMP－2表达的影响

目的: 通过研究结缔组织生长因子（CTGF）基因对人乳腺癌MCF-7细胞株基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）表达的影响,深入探讨CTGF在乳腺癌侵袭和转移中的作用机制。方法: 采用脂质体介导法,将CTGF基因瞬时转染体外培养的人MCF-7细胞,并用免疫荧光、RT-PCR和蛋白质印迹法检测其转染成功与否;再采用蛋白质印迹法检测转基因MCF-7 MMP-2及TIMP-2表达改变。结果: 与对照组相比,转染CTGF基因的MCF-7,其CTGF mRNA和蛋白表达均显著增高,MMP-2蛋白表达水平显著增高,而TIMP-2蛋白表达水平显著降低。 结论: CTGF可能通过增加乳腺癌细胞MMP-2表达及抑制TIMP-2的生成而起到促进乳腺癌侵袭和转移的作用。     

WAVE1、MMP-2及MMP-9在卵巢癌组织中的表达及意义

目的 探讨WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1(WASP-family verprolin-homologous protein 1,WAVE1)及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在卵巢癌的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SABC三步法检测47例卵巢癌、30例卵巢良性肿瘤和21例正常卵巢组织中WAVE1、MMP-2、MMP-9的表达,并对卵巢癌组织WAVE1与MMP-2、MMP-9的表达进行相关性分析.结果 ①WAVE1、MMP-2及MMP-9在卵巢癌中的表达均高于在正常卵巢组织及卵巢良性组织中的表达,差异有统计学意义(P＜0.05);Spearman相关分析显示,WAVE1和MMP-2、MMP-9两两表达成正相关(r=0.773,r=0.664,P＜0.05).②WAVE1的表达与卵巢癌的临床分期、组织分化及Ca-125水平有关(P＜0.05),与年龄、肿瘤的直径无关(P＞0.05).MMP-2、MMP-9表达与卵巢癌的临床分期有关(P＜0.05),与年龄、组织分化、Ca-125水平及肿瘤直径无关(P＞0.05).结论WAVE1和MMP-2、MMP-9在卵巢癌中呈现高表达,早期联合筛查WAVE1和MMP-2、MMP-9指标对卵巢癌病情演变和预后评估有着重要的临床意义.     

CTGF基因转染对胰腺癌细胞MMP-9、VEGF表达及增殖的影响

目的：通过研究结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）基因对人胰腺癌SW1990细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）表达及细胞增殖的影响,深入探讨CTGF在胰腺癌侵袭和转移中的作用机制。方法：经脂质体介导将含有CTGF重组表达质粒转染人胰腺癌SW1990细胞株,用G418筛选阳性细胞克隆及RT-PCR、蛋白质印迹法鉴定;采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测阳性细胞克隆MMP-9及VEGF表达的改变;噻唑盐（MTT）比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果：成功建立稳定高表达CTGF的阳性SW1990细胞克隆,与对照组相比,阳性克隆MMP-9、VEGF mRNA及蛋白表达显著增高,细胞增殖活性也显著增加。结论：CTGF转染可显著增加胰腺癌细胞MMP-9、VEGF的表达并促进其细胞增殖,CTGF可能是胰腺癌基因治疗的潜在靶点。     

吗啡对乳腺癌MCF-7细胞生存素及livin表达的影响

目的:探讨吗啡对人乳腺癌MCF-7细胞生存素(survivin)和livin的表达及细胞增殖与凋亡的影响。方法:人乳腺癌MCF-7细胞以1×103个/ml密度接种在6孔板内,随机分为对照组,0.1μmol/L吗啡组,1.0μmol/L吗啡组。于吗啡孵育24 h时,分别采用RT-PCR法和蛋白质印迹法测定细胞内生存素及livin mRNA及蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡改变;于吗啡孵育24,48及72 h时采用MTT法检测细胞增殖改变情况。结果:与对照组比较,0.1μmol/L吗啡组及1.0μmol/L吗啡组生存素和livin蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P<0.01),0.1μmol/L吗啡组及1.0μmol/L吗啡组细胞增殖降低而细胞凋亡增加(P<0.01)。结论:吗啡通过下调MCF-7细胞生存素和livin的表达,从而抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。     

犀黄丸对大肠癌LoVo细胞基质金属蛋白酶2,9蛋白表达的影响

[目的] 研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义.[方法] 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平.[结果] 在犀黄丸含药血清的干预下,LoVo细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白分泌水平与空白对照组比较明显下调,差异具有统计学意义(P < 0.05).[结论] 犀黄丸可能通过抑制MMP-2和MMP-9的蛋白表达,达到抑制大肠癌转移的作用.     

二氧化硅对人肺泡巨噬细胞基质金属蛋白-9表达的影响

①目的　探讨二氧化矽 (SiO2 )对人肺泡巨噬细胞基质金属蛋白 (MMP - 9)表达的影响。②方法　收集矽肺患者肺泡巨噬细胞 (AM) ,在体外以 50 μg/mlSiO2 刺激、LPS或无血清培养基培养 2、6、1 2、1 8、2 4、36h ,用免疫细胞化学的方法检测AM中MMP - 9的表达。③结果　经SiO2 刺激的AM中MMP - 9表达明显上调 ,且随刺激时间不同表达量也不同 ,于 1 8h达高峰。不同时间的表达量与同期对照组AM相比差异显著 (P <0 .0 1 )。④结论　SiO2 可诱导AM高表达MMP - 9,提示AM在损伤早期通过产生MMP - 9而降解基底膜 ,可能与包括成纤维细胞在内的各种细胞的迁移有关。