酶法测定糖化血红蛋白的应用评价

目的评价酶法测定糖化血红蛋白的可行性。方法酶法和离子交换高压液相色谱分析法(HPLC法)同时检测91例糖尿病患者的糖化血红蛋白,对两组数据进行线性回归分析。结果酶法与离子交换高压液相色谱分析法的线性范围分别是2.5%~15.5%和3.8%~18.5%,批内精密度分别是1.09%和1.17%,批间精密度分别是2.2%和2.8%,酶法测定糖化血红蛋白的结果与离子交换高压液相色谱分析法测定糖化血红蛋白的结果相关性良好,线性方程y=1.0137x-0.072,R2=0.9886。酶法测定糖化血红蛋白结果与HPLC法测定的结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论酶法与离子交换高压液相色谱分析法有良好的相关性。酶法在全自动生化分析仪上检测具有效率高、成本低的优点,适合在临床上推广。     

高效液相色谱法与酶法检测糖化血红蛋白结果一致性的比较

近年来,随着人们生活水平的提高糖尿病的发病率越来越高,预计到2025年全世界糖尿病患者将达3亿人．糖化血红蛋白（HbA1c）是血红蛋白与糖类经非酶促反应结合而成的,其合成过程缓慢且相对不可逆．因此可反映机体1～2月前的平均血糖水平,在糖尿病的监测、治疗方面具有重要意义．2002年美国糖尿病协会（ADA）将其作为监测糖尿病血糖控制的金标准,2010年ADA发布的糖尿病诊疗指南中以HbA1c≥6.5％作为耱尿病的诊断标准．目前HbAlc主要的测定方法有离子交换高效液相色谱法（HDLC）、免疫法及近年新发展的-酶法．为了解酶法与 HDLC 法HbA1c测定结果的一致性,笔者依据美国临床实验室标准化协会（CLSI）《用患者样本进行方法学对比及偏差估计EP9-A2指南文件》（EP9-A2）,对HPLC和酶法两种HbAlc检测结果进行了对比分析和偏倚评估,现报道如下．     

免疫比浊法检测糖化血红蛋白的应用评价

【目的】探讨免疫比浊法检测糖化血红蛋白(HbAlc)的应用价值。【方法】应用免疫透射比浊法和高效液相色谱法分别测定糖尿病者(20名)及健康人(20名)的HbAlc水平,比较两种方法的相关性并进行不精密度分析。【结果】两种检测方法的结果呈显著相关性(r=0.98,P<0.05),不精密度分析显示免疫比浊法的CV<5%。【结论】运用免疫比浊法检测HbAlc完全能够满足临床需求,且标本处理简便,不需额外的仪器,体现了良好的应用前景。     

低血红蛋白浓度在离子交换高压液相法中对糖化血红蛋白结果的影响

目的探讨低血红蛋白(Hb)浓度在离子交换高压液相法中对糖化血红蛋白(GHbAlc)检测结果的影响。方法用D-10 Hemoglobin Testing System糖化血红蛋白分析仪(Bio-Rad D-10)与血球分析仪分别检测Hb偏高、正常、偏低共40份的全血标本的GHbAlc和Hb水平。结果 Hb<70 g/L糖化血红蛋白检测不出结果;将Hb偏高、正常组标本稀释至Hb≥70 g/L,结果符合原标本GHbA1c检测结果;Hb稀释至<70 g/L后的糖化血红蛋白检测不出结果,标本量加倍后,结果同原标本GHbA1c相符合。结论 Hb<70 g/L在离子交换高压液相法(HPLC)法中对糖化血红蛋白结果有影响,将标本量增加,Hb稀释至≥70g/L,同原标本GHbA1c检测结果相符合。     

两种检测系统测定糖化血红蛋白相关性分析及偏倚评估

目的:比较两种检测系统测定糖化血红蛋白(HbA1c)结果的差异并评价其偏倚。方法:分别使用Bio-Rad D-10糖化血红蛋白分析仪应用全自动离子交换高效液相色谱(HPLC)法、Roche CobasINTEGRA400Plus全自动生化分析仪以免疫法测定HbA1c,对40例血液样本作比对测定,评估两检测系统之间测定结果的相关性和偏倚;应用高低两个水平质控品分别测定两种检测系统的不精密度。结果:两种检测系统测定糖化血红蛋白的结果有良好的相关性(P<0.01),HPLC的总不精密度<2.0%,免疫法总不精密度接近4.0%,符合临床测定的性能要求。以D-10HPLC为参考检测系统,Roche免疫法测定结果的相对偏倚分别为0.03%。结论:D-10HPLC法和Roche免疫法测定糖化血红蛋白的准确度、精密度和偏倚符合临床要求,Roche免疫法测定HbA1c结果变异系数较大,应以HPLC法作为参考检测系统定期作比对分析。     

离子交换层析微柱法及亲和电泳法与液相色谱分析法对糖化血红蛋白含量测定的比较

目的 探讨微柱法对HbA1C定量检测的意义。方法 采用微柱法、电泳法与HPLC法分别对同一标本进行HbA1C 含量测定,比较3种方法对HbA1C含量检测结果。结果 微柱法精确度和重复性好（批内变异系数CV＜1．5％,批间CV＜5％）,与参比方法HPLC经相关处理,其相关系数r=0．945,两法具有高度的相关性（P＜0．001）。结论 采用微柱法对HbA1C定量测定,无须贵重仪器设备,是一种简便快速的测定方法,能在大多数临床实验室广泛推广。     

G7糖化血红蛋白分析仪测定HbA1c的临床应用评价

目的:研究G7糖化血红蛋白分析仪的实验效果。方法:选取70例糖尿病患者和40例健康人,使用G7糖化血红蛋白分析仪检测样本HbA1c,对HbA1c结果的准确性、批内变异、批间变异、回收率、干扰因素进行研究。结果:G7糖化血红蛋白仪检测全血HbA1c,准确性很好,批内变异为0.43%,批间变异为2.33%,回收率为97.6%,高浓度的甘油三酯和胆红素对检验结果没有影响。结论:G7糖化血红蛋白仪检测HbA1c精密度较高、速度极快,而且成本相对较低,适合临床常规开展,可为糖尿病患者的治疗、预后提供准确的检测依据。     

2种糖化血红蛋白检测方法的比对和结果一致性评价

目的探讨离子交换高效液相色谱法(HPLC)与亲和层析法检测糖化血红蛋白的可比性及结果一致性。方法参照美国临床实验室标准化协会(NCCLS)EP9-A2文件设计方法,对io_Rad D10全自动糖化血红蛋白仪分析仪的所用的离子交换高效液相色谱法(HPLC)与ultra2糖化血红蛋白分析系统亲和层析法进行比对试验,以HPLC方法为目标系统,亲和层析法为试验系统,建立回归方程,以医学决定水平作为自变量(Xc)计算预期偏倚和相对偏倚,以临床实验室改进规范(CLIA′88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统的偏差于临床是否可以接受。结果 HPLC法和亲和层析法批内及批间RSD%均<3%,相关回归分析Y=0.935 4 X+0.483,R2=0.982 6,两种方法在4.8%、6.1%、11.1%3个医学决定水平的相对偏倚分别为1.1%(3.7%),2.0%(6.8%),2.6%(9.1%)。结论 HPLC和亲和层析法两种检测方法的结果具有可比性,两者之间的偏差临床可接受,可为临床提供可接受的HbA1c检验结果。     

微色谱柱糖化血红蛋白试剂盒的研制及应用

目的 :自行建立离子交换微色谱柱层析定量检测糖化血红蛋白组分HbA1c水平的方法。方法 :利用废弃材料自制的微色谱柱试剂盒与原装试剂盒检测全血中HbA1c的百分含量 ;进行方法学评价 ,并以 30例健康人HbA1c水平建立正常参考范围。结果 :平均批内变异系数为 2 .0 % ,平均批间变异系数为 6 .1% :HbA1c浓度为4 .3%、8.2 %、13.2 %时的回复实验均值为 10 3.8%。与Biosystems.SA公司原装HbA1c,试剂盒比较两者显正相关 (r =0 .971,P <0 .0 0 5 ,n =30 )。正常人群的HbA1c的范围 (5 .4 5± 1.18% )。结论 :自制微色谱柱检测HbA1c的水平具有简单、精确、经济、快速的特点 ,适用临床诊断。     

探讨用高效液相色谱法与用胶乳凝集法测定糖化血红蛋白的效果分析

目的：比较用高效液相色谱法（HPLC）与用免疫胶乳凝集法测定糖化血红蛋白（HbA1c）结果的差异。方法：选取我院2013年9月间30例正常体检者和30例糖尿病患者的血液标本,每组每人各两份标本,每份标本2ml（EDTA-K2抗凝）,将这些标本分别用HLC-723G8糖化血红蛋白仪（高效液相色谱法）和贝克曼 DXC-800全自动生化仪（胶乳凝集法）测定 HbA1c,然后将两组检测的结果进行比较和相关性分析。结果：用高效液相色谱法（HPLC）和用免疫胶乳凝集法测定HbA1c的检验结果有良好的相关性,p<0.05,r=0.999。结论：用高效液相色谱法（HPLC）和免疫胶乳凝集法测定糖化血红蛋白的检验结果均有较高的精密度,且高液相色谱法的精密度要高于胶乳凝集法,但是各有优缺点。因此,在临床检验中,可以将用高液相色谱法测得的HbAlc结果作为参考值,用经胶乳凝集法测得的HbAlc结果进行校准。     

FPLC系统测定人红细胞HbA1c的方法

采用快速蛋白液相层析系统（ＦＰＬＣ）及ＭｏｎｏＳ柱，建立人血红细胞中糖化血红蛋白组份ＨａＡ１ｃ的测定方法。用本法重复测定３份样品，平均批内变异系数为２．５％，平均批间变异系数为４．８％；与常用的微柱法比较，两者呈正相关（ｒ＝０．４１３０，Ｐ〈０．０５，ｎ＝３６）。本法操作简单，重复性好，自动化程度高，具有广泛应用前景。     

联合检测血糖、糖化血清蛋白与糖化血红蛋白对糖尿病监测的意义

糖尿病是一种常见的、终生性的内分泌代谢障碍性疾病.糖尿病治疗的主要目的是将血糖控制在正常或接近正常的水平.由于血糖、糖化血清蛋白与糖化血红蛋白的检测反映的血糖控制水平不同,再联系3项检测指标的特点,联合检测3项指标对糖尿病的诊断和预防有较高的临床应用价值.     

两种糖化血红蛋白检测方法的比较和性能评价

目的 对两种糖化血红蛋白的检测方法进行比较和方法学评价.方法 用离子交换层析法、免疫比浊法测定糖化血红蛋白,依据美国临床实验室标准化协会EP9-A2文件要求,分别在上述两种检测系统中测定标本糖化血红蛋白的浓度,记录检验结果,检查离群点,计算线性方程、相关系数和直线回归方程.结果 离子交换层析法测定均值8.49,免疫比浊法测定均值9.04,线性回归方程Y=0.966X-0.24,两者相关性良好,两者之间的偏差在临床允许误差范围内.结论 当使用2种以上检测方法检测同一项目时,应进行方法比对和偏倚评估,免疫比浊法和离子交换层析法两种检测方法具有可比性,临床可接受.     

糖化血红蛋白检测的临床意义

目的:了解糖化血红蛋白(HbAlc)与糖尿病(DM)及其并发症的关系,及时控制糖尿病及其并发症的发生和发展。方法:选择80例糖尿病及糖尿病伴有并发症患者与40例正常人的糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FBG)进行测定,并做分析。结果:正常对照组的HbAlc为(5.37±0.58)%,FBG为(4.42±0.83)mmol/L;糖尿病组的HbAlc为(9.76±2.68)%,FBG为(8.96±4.94)mmol/L;糖尿病伴有并发症的HbAlc为(10.76±2.65)%,FBG为(11.34±5.32)mmol/L;糖尿病无并发症的HbAlc为(7.78±0.38)%。结论:糖化血红蛋白的控制,对预防糖尿病及其并发症的发生、发展极为重要。     

全血贮存条件对离子交换高效液相色谱法检测HbA1c的影响

目的探讨不同温度、不同时段的贮存条件对全血HbA1c测定结果的影响。方法用离子交换高效液相色谱法检测全血HbA1c。取60例全血新鲜样本,每样本分装成15份,1份作为新鲜样本标准当天检测;5份4℃贮存,分别于3d、1周、2周、3周、4周后取出检测;3份-20℃、3份-40℃、3份-80％贮存,分别于1、3、6个月后取出检测,比较各个贮存条件下结果的平均值。结果4℃样本2周内的结果略高于当日结果2．5％左右,从第3周开始逐渐下降,第4周低于当日结果7．2％。-20℃、-40℃、3和6个月的结果都比当日结果低,且随时间延长有逐渐降低的趋势;除-80％冻存1个月的结果与当日结果差异无统计学意义（P〉0．05）外,其余各组结果与当日结果比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。-80℃冻存1、3和6个月的结果都比当日结果略高,且随时间的延长结果略有升高,偏离当日结果的程度要比-20℃、-40℃偏离程度小。结论在相同温度条件下贮存时间越短贮存温度越低HbA1c越接近当日结果;贮存温度对结果的影响要比贮存时间更大。-80℃贮存1个月是本实验显示的最佳贮存条件。     

反相高效液相色谱法分析肝癌血清蛋白质组

目的:建立肝癌血清蛋白质组RP-HPLC技术筛选肝癌血清差异蛋白质.方法:8例肝癌和20例正常组血清样品采用Agilent高丰度蛋白质分离系统洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后,样品采用色谱柱ZORBAX 300SB-C18(250mm×4.6mm,5 μm)分离,以A=0.1%三氟乙酸溶液,B=0.09%三氟乙酸乙腈为流动相梯度洗脱,在波长280 nm处检测.结果:在肝癌血清和健康志愿者血清的RP-HPLC图谱中存在一组疏水性较强的差异蛋白质.结论:建立的血清蛋白质RP-HPLC技术可以发现肝癌发生发展过程中血清蛋白表达谱质的变化,从而为肝癌的早期诊断及治疗打下基础.     

BMI对血压、血糖、糖化血红蛋白及C肽的影响

目的：探讨年龄32～56岁的健康者体质指数（body mass index,BMI）增高对血压、血糖、糖化血红蛋白及C肽的影响。方法：79名健康者按BMI分为标准组（18.5≤BMI〈24,n=44）、超重组（24≤BMI〈28,n=27）及肥胖组（BMI≥28,n=8）三组,比较三组之间血压、血糖、糖化血红蛋白及C肽的变化。结果：随着BMI的增高,收缩压（SBP）[（115.8±15.24）mm Hg vs（121.1±18.38）mm Hg vs（133.4±18.36）mm Hg]（1 mm Hg=0.133 kPa）、餐后2 h血糖（PBG）[（5.76±0.73）mmol/L vs（5.86±0.76）mmol/L vs（6.61±1.85）mmol/L],及糖化血红蛋白（HbA1C）[（5.20±0.29）%vs（5.29±0.28）%vs（5.64±0.53）%]显著增高,差异有统计学意义（P=0.033,P=0.048,P=0.004）;而舒张压（DBP）[（72.57±11.14）mm Hg vs（75.81±10.04）mm Hg vs（80.71±11.31）mm Hg]、空腹血糖（FBG）[（5.73±0.52）mmol/L vs（5.48±0.54）mmol/L vs（5.85±0.61）mmol/L]、空腹C肽[（1.37±0.81）pmol/L vs（1.26±0.43）pmol/L vs（1.98±0.75）pmol/L]及餐后2 h C肽[（2.70±1.14）pmol/Lvs（2.99±1.49）pmol/L vs（3.25±1.53）pmol/L]也有增高趋势,但差异无统计学意义（P=0.137,P=0.107,P=0.110,P=0.530）。结论：肥胖使血压、血糖水平增加,从而增加高血压以及糖尿病的患病风险。     

高效液相色谱法测定人血清中茶碱浓度

目的 :建立反相高效液相色谱法测定人血清中茶碱浓度。方法 :甲醇 水为流动相 ,硝基安定为内标 ,紫外 2 75nm处检测。结果 :线性范围 2 .5～ 40 μg/ml,r =0 .9998。平均回收率 10 0 .5 1%。日内、日间CV均 <5 %。 结论 :本测法稳定、可靠、专一性好、灵敏度高 ,可用于茶碱的血药浓度监测及药动学研究。     

高效液相色谱分析虚拟仿真教学实施及效果评价

目的 研究传统教学结合虚拟仿真教学在高效液相色谱法中进行药物含量分析的教学效果。方法 以2016级两个平行班的学生为研究对象,分为试验组（44名）和对照组（38名）。以高效液相色谱法分析甲硝唑注射液含量及其方法学研究为例,试验组采用传统线下教学结合虚拟仿真教学,对照组采用传统线下教学。通过比较两组期中、期末考试成绩来评价两组教学效果。用SPSS 22.0软件进行独立样本t检验。结果 期中测试结果表明试验组在实际操作考核方面优于对照组[（17.98±6.75） vs. （14.03±5.92）],差异有统计学意义（P < 0.05）,而在理论、汇报及报告成绩方面两组差异无统计学意义。两组期末考试成绩各方面差异都无统计学意义。结论 采用传统线下教学结合虚拟仿真训练,可提高学生的实际操作能力,有助于提高药物含量分析实验的教学效果。通过本项目的训练,学生掌握了高效液相色谱法操作、药物制剂的含量测定、分析方法的验证、数据处理及分析报告的撰写等能力,具备了一定的实际分析工作能力。