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1.
趋化素样因子1(CKLF1)对关节软骨细胞增殖及代谢的影响   总被引:9,自引:0,他引:9  
目的:研究趋化素样因子1(CKLF1)对兔关节软骨细胞增殖及代谢的调节作用。方法:采用体外细胞培养技术及同位素参入法,检测CKLF1真核表达载体转染293T细胞所得条件培养基对软骨细胞DNA、胶原及蛋白多糖合成能力的影响。结果:在含5%(体积分数)胎牛血清(FCS)的DMEM培养条件下,转染后293T细胞表达的CKLFl可抑制兔关节软骨细胞DNA、胶原及蛋白多糖的合成,并可促进诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的转录。结论:CKLF1可能通过提高iNOS的表达抑制关节软骨细胞增殖、胶原及蛋白多糖的合成。  相似文献   

2.
最近,我国学者应用抑制性减数杂交技术(SSH,Suppressive subtraction hybrization)首次成功的克隆到一个新的细胞因子,因其含有趋化因子的基本结构特征和趋化功能,同时又具有趋化因子没有的功能,被命名为趋化素样因子1(CKLFl),并发现其至少存在3种异构体。分别命名为CKLF2、3、4。CKLF基因为于16号染色体q22上,有4个外显子和3个内含子组成。CKLF1、3为分泌性蛋白,而CKLF2、4主要以膜结合形式存在。研究表明,CKLFl具有广谱的趋化活性、骨髓细胞增殖刺激活性和抑制软骨细胞增殖作用。CKLF2能促进细胞增殖和分化,并有抑制细胞凋亡作用。提示CKLF在机体的生理和病理作用中有重要意义,CKLFs的成功克隆表明CKLFs可能代表一个新的基因超家族,对这个超家族的深入研究将具有重要的理论意义和潜在的应用价值。  相似文献   

3.
目的:观察超化素样因子1(CKLF1)导入对小鼠肺巨噬细胞吞噬功能的作用.方法:将1%锥虫兰水溶液注入至CKLF1基因导入的小鼠腹腔内,观察小鼠肺巨噬细胞对锥虫兰的吞噬作用.结果:与对照组小鼠相比,导入CKLF1小鼠的肺组织巨噬细胞聚集增生,被肺泡巨噬细胞吞噬的锥虫兰颗粒数量为73.6±5.2与对照小鼠32.5±8.1相比明显增多,体积明显增大.结论:CKLF1在体内可明显增强小鼠肺巨噬细胞的吞噬功能.  相似文献   

4.
目的研究趋化素样因子-1(chemokine like factor-1,CKLF-1)在上皮性卵巢癌中的表达,探讨其与卵巢癌的关系及其临床生物学意义。方法采用免疫组化方法测定卵巢癌组织CKLF-1的表达,用人工半定量判定结果,并与各项临床指标进行统计学分析。结果CKLF-1在正常卵巢、良性及恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达水平依次增高(P〈0.05),分别为0、0、45%;手术病理期别高、远处转移、有腹水的患者癌组织CKLF-1表达量高(P〈0.05)。结论CKLF-1可能与上皮性卵巢癌的发生侵袭、转移及不良预后相关。  相似文献   

5.
趋化素样因子-1在狼疮性肾炎患者肾组织中的表达   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:探讨趋化素样因子-1(chemokine like factor-1,CKLF-1)在狼疮性肾炎的发生、发展过程中的作用.方法:对34例确诊为狼疮性肾炎以及10例对照组患者的肾组织进行免疫组织化学染色,在光镜下观察肾小球CKLF-1阳性细胞率和CKLF-1阳性肾小管百分率及反应强度.结果:狼疮性肾炎患者的肾小球CKLF-1阳性细胞率和CKLF-1阳性肾小管百分率分别为10.4%±1.5%和48.9%±4.3%,与对照组患者4.6%±1.1%和4.3%±0.9%比较均有统计学差异(P<0.01).CKLF-1在狼疮性肾炎患者的肾小球阳性细胞率和阳性肾小管百分率与狼疮性肾炎活动指数间均存在显著相关性,相关系数分别为0.74和0.53(P<0.05).结论:CKLF-1参与了狼疮性肾炎的发生、发展过程.  相似文献   

6.
目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础.方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体.经ELISA法测定抗体效价,Western-blot鉴定抗体与原核细胞体外翻译和果蝇S2细胞稳定转染表达的CKLF1反应,组织芯片检测该抗体与内源性表达的CKLFs结合.结果抗CKLF1 C端多肽抗体的效价为10-4,能识别在原核细胞体外翻译系统和真核细胞中表达的CKLF1蛋白,也可与多种组织中天然表达的CKLFs发生特异性反应,在正常支气管软骨、胃粘膜和平滑肌中呈阳性表达,在正常直肠和高分化直肠癌的腺上皮中呈强阳性表达,而在低分化的直肠癌中为阴性.结论抗CKLF1多克隆抗体效价高,亲和力强,可用于CKLF1的检测和研究.  相似文献   

7.
目的:通过建立精索静脉曲张大鼠模型,探讨人类趋化素样因子超家族2(chemokine like factor-like myelin and lymphocyte and related proteins for vesicle trafficking and membrane link transmembrane domain-containing protein 2, CMTM2)对精索静脉曲张大鼠生精过程的影响。方法:选取雄性SD大鼠40只(体重220~330 g,6~7周龄),将大鼠随机分为精索静脉曲张持续4、12周后处死取样组,和相应的接受假手术处理的对照组,每组均为10只大鼠。通过手术进行左肾静脉缩窄建立左侧精索静脉曲张的大鼠模型。将实验组和对照组大鼠于4周或12周后处死,取出左侧睾丸,游离附睾中精子,观察并计算精子密度与活力,测量生精小管外径、内径及上皮直径改变,并进行免疫组织化学分析以判断CMTM2蛋白的表达状况。结果:与对照组相比,精索静脉曲张4周组中大鼠的精子密度[(63.9±7.1)×106/mL vs.(74.3±5.0)×106/mL]和活力[(58.7%±7.9%) vs. (66.1%±4.3%)] 轻度下降(t=1.432, 1.563; P=0.076, 0.059),精索静脉曲张12周组中大鼠的精子密度[(40.5±7.2)×106/mL vs.(71.1±4.5)×106/mL]和活力[(35.2%±8.5%) vs. (63.4%±4.1%)]显著下降(t=3.754, 3.933; P=0.004, 0.002)。此外,CMTM2蛋白的表达水平在精索静脉曲张组也出现明显下降,对照组CMTM2水平为精索静脉曲张12周组的(2.3±0.4)倍(t=1.978; P=0.039)。4周时,精索静脉曲张组生精小管外径出现轻度降低[(271.1±8.4)μm vs. (280.0±8.1)μm,t=1.361, P =0.132],而12周组则出现明显降低[(198.2±10.2) μm vs. (255.8±12.7)μm,t=2.125, P=0.003],此外,精索静脉曲张12周组的生精小管上皮直径出现明显下降[(54.1±1.5)μm vs.(75.5±4.1)μm,t=2.246,P=0.021]。结论:在精索静脉曲张大鼠模型中,精索静脉曲张与CMTM2蛋白水平降低相关,同时可导致睾丸生精小管直径变小及精子密度与质量受损。  相似文献   

8.
目的 探究抑制趋化素样因子1(CKLF1)对变应性鼻炎(AR)大鼠内白细胞介素-9(IL-9)与嗜酸性粒细胞的影响。方法 40只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、CKLF1抗体组(AR+CKLF1-C19组)、丙酸氟替卡松组(AR+FP组),每组10只。除对照组外,其余各组大鼠均用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝 [Al(OH)3]致敏法诱导AR,AR+CKLF1-C19组AR激发前连续10 d分别在双侧鼻腔滴5 μL CKLF1-C19肽干预,AR+FP组AR激发前连续10 d分别在双侧鼻腔滴5 μL丙酸氟替卡松喷雾剂干预,对照组和模型组均同时在双侧鼻腔滴5 μL生理盐水。末次鼻腔激发后,各组大鼠均进行表观行为学指标评分;ELISA法检测血清IL-9、免疫球蛋白E(IgE)、干扰素-γ(IFN-γ)水平;HE染色观察鼻黏膜组织嗜酸性粒细胞表达;瑞氏染色检测鼻腔内嗜酸性粒细胞数目;免疫组织化学染色检测鼻黏膜组织IL-9表达;实时荧光定量PCR 和Western blot检测鼻黏膜组织嗜酸性粒细胞主要碱性蛋白(MBP)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPO)在mRNA 和蛋白水平上的表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠出现打喷嚏、流涕以及频繁抓鼻的现象,血清中IL-9、IgE水平升高,IFN-γ水平下降,鼻黏膜有水肿、黏膜层增厚以及黏膜上皮脱落的症状,嗜酸性粒细胞数目增加,鼻黏膜组织内IL-9阳性表达升高,MBP、ECP、EPO在mRNA和蛋白水平上的表达均上调(P<0.05);与模型组比较,AR+CKLF1-C19组和AR+FP组大鼠打喷嚏、流涕、抓鼻等行为减少,血清中IL-9、IgE水平下降,IFN-γ水平升高,鼻黏膜水肿及炎症细胞浸润减轻,嗜酸性粒细胞数目减少,鼻黏膜组织内IL-9阳性表达下降,同时,MBP、ECP、EPO在mRNA和蛋白水平上的表达也均下调(P<0.05)。结论 抑制CKLF1能够明显降低变应性鼻炎大鼠嗜酸性粒细胞的浸润,抑制IL-9表达,从而对变应性鼻炎起到一定的治疗作用。  相似文献   

9.
目的: 探究人类趋化素样因子超家族2(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing protein 2, CMTM2)在小鼠精子生成过程中的作用。方法: 构建CMTM2基因敲除小鼠模型,利用Northern、RT-PCR及 Western 印迹检测野生型、杂合子及纯合子小鼠的CMTM2表达水平,统计小鼠生育幼崽数量及生育率,采集并分析精子活动度、形态及睾丸组织切片,检验血清睾酮及促卵泡激素(follicle-stimulating hormone, FSH)水平。结果: CMTM2在小鼠生精中呈现准确的调控式高度表达,基因敲除的成年小鼠和野生型成年小鼠在体重上差异没有统计学意义。纯合子的小鼠睾丸体积及重量小于野生型小鼠睾丸,野生型小鼠与CMTM2敲除小鼠的睾丸长径比较,差异有统计学意义[(11.32±1.21) mm vs. (8.29±1.92) mm, P<0.05],睾丸重量比较,差异有统计学意义[(101.63±2.33) mg vs. (85.22±2.84) mg, P <0.05]。与野生型小鼠相比,杂合子精子数量明显减少,纯合子小鼠精子发生停滞。在精子形态学方面,与野生型小鼠相比,杂合子小鼠有更多圆形精子,而纯合子则因精子发育停滞,多为圆形精子细胞。睾酮和FSH在3组间差异无统计学意义。纯合子雄性小鼠由于精子发生停滞而不育,纯合子小鼠缺失生精上皮层。结论: CMTM2在生精过程中发挥着不可或缺的作用,其参与精子发生的潜在机制有待于进一步实验研究以证实。  相似文献   

10.
大鼠趋化素样因子2 mRNA在心肌梗死大鼠心脏中的表达   总被引:5,自引:4,他引:1  
目的:观察大鼠趋化素样因子2(rCKLF2)的mRNA在心肌梗死后大鼠心脏组织的表达。方法:构建大鼠心肌梗死模型,分别于心肌梗死后1d、3d、1周、2周、3周(每个时间点各5例),取心肌梗死周边区心肌组织,提取组织总RNA,逆转录后行竞争性PCR,了解rCKLF2 mRNA的表达情况。结果:rCKLF2 mRNA在梗死心肌周边区的表达于术后上调,并呈动态变化,1周达峰值,为正常的6.7倍。结论:CKIF2可能参与心肌梗死的病理生理过程。  相似文献   

11.
小鼠骨髓树突状细胞体外扩增方法的建立   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的建立小鼠骨髓树突状细胞(DC)体外大量扩增方法。方法应用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子联合白细胞介素-4诱导培养小鼠骨髓细胞,应用相差显微镜观察形态学变化,’H-TdR掺入法检测细胞增殖能力,FACS检测细胞表面分了,ELISA检测细胞因子。结果体外诱导培养8天后可获得大量形态学典型的DC,具有强烈的激活同种异体或自体T细胞增殖反应能力。FACS检测表明,扩增的DC表达IaK^b、CDllc、CD80、CD86、ICAM-1分子。DC接受LPS刺激后,可以促使DC成熟,分泌IL-12(p70)、IL-6、TNF-a和IL-1β水平增强。结论小鼠骨髓细胞体外诱导培养,可生成大量功能成熟的DC,为进一步开展DC基础和临床研究打下基础。  相似文献   

12.
摘要:目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)用于造血干细胞动员对健康供者骨髓和外周血中骨髓来源的抑制细胞
(MDSC)的影响和MDSC与移植物抗宿主疾病(GVHD)的关系。方法对12例健康造血干细胞供者,在G-CSF动员前和
动员后第5天分别获取骨髓、外周血及外周血干细胞采集物,用流式细胞术检测其中MDSC的含量变化,统计分析MDSC
与GVHD的关系。结果在正常生理状态下,健康供者外周血、骨髓中均能检测到MDSC,MDSC在外周血中占单个核细
胞比例为(1.35±0.35)%,骨髓中为(2.44±1.11)%,骨髓中MDSC比外周血中高(P=0.015);G-CSF动员5 d后MDSC在外周
血中占单个核细胞比例为(4.01±1.82)%,骨髓中为(4.38±2.19)%,动员后骨髓与外周血中MDSC比例相比无明显变化
(P=0.083)。动员后外周血中MDSC含量明显高于动员前(P=0.047),而动员前后骨髓MDSC细胞比例变化无统计学意
义(P=0.761)。采集物中MDSC细胞数量与GVHD发生率呈明显负相关关系(P=0.048)。结论健康人PB与BM中均能
检测到MDSC,且骨髓中比外周血中要高;G-CSF能动员骨髓中MDSC到达外周血,使外周血中MDSC增高;G-CSF动员
的外周血干细胞采集物中MDSC增加与造血干细胞移植后低GVHD发生率有关。  相似文献   

13.
目的:以大鼠骨髓造血干细胞为来源,建立体外诱导、扩增树突状细胞(dendritic cells,DC)的方法,并进行表型鉴定及功能检测。方法:从大鼠骨髓细胞中分离出造血干细胞,加入rGM-CSF、rIL-4和nrhTNF-α培养12天获得大量DC,经标抗大鼠OX62单抗免疫磁珠分离纯化后的DC,进行形态学观察、表型检测及刺激T细胞增殖能力分析。结果:大鼠骨髓造血干细胞经诱导培养12天后,倒置显微镜和电镜下显示典型的DC形态和超微结构;流式细胞术分析显示细胞表面抗原高表达,其中OX62为62.19%;MHCⅠ为70.40%;MHCⅡ为78.28%;CDSO为55.58%;CD86为68.38%,是典型的大鼠DC表型特征,同种混合淋巴细胞反应结果显示,DC具有高效的刺激T淋巴细胞活化增殖的能力。结论:大鼠骨髓造血干细胞可成功诱导为具有典型形态特征及功能的DC,为进一步研究其在肿瘤免疫治疗中的应用打下基础。  相似文献   

14.
Background The dysfunction of vascular endothelial cells plays a key role in starting and facilitating restenosis. The acceleration of intima repair and the recovery of endothelial function would reduce the restenosis rate. This study was undertaken to assess the effect of granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) on the repair of damaged iliac arteries.Methods Twenty-four male New Zealand white rabbits undergoing primary iliac artery deendothelialization were randomly divided into two groups (GM-CSF group and control group). The GM-CSF group received a subcutaneous injection of GM-CSF [10 μg·kg(-1)·d(-1)], and the control group was given a subcutaneous injection of equivalent saline. The iliac arteries of all animals were damaged by balloon after 7 days. The levels of nitric oxide (NO) were detected before, 1 week, 2 weeks and 4 weeks after angioplasty. The repair and hyperplasia of the intima were observed microscopically and the indices of stenosis were evaluated by computerized planimetry after 4 weeks of angioplasty.Results The NO levels of the GM-CSF group were higher than those of the control group 2 weeks and 4 weeks after angioplasty [(91.92±11.57) μmol/L vs. (81.67±12.18) μmol/L; (97.67±10.13) μmol/L vs. (83.16±12.64) μmol/L]. Four weeks after balloon damage, histological examination showed that neointima formation, vascular smooth muscle cells and fibrous tissue of the GM-CSF group were less than those of the control group. The endothelium of the GM-CSF group was more integrated, and stenosis of lumen was slighter than that of the control group. Morphometry showed the lumen area of the GM-CSF group was larger than that of the control group [(1.27±0.31) mm2 vs. (0.92±0.24) mm2], the neointimal area and percent of intima hyperplasia were significantly smaller than those of the control group [(0.85±0.34) mm2 vs. (1.18±0.38) mm2; (40±7)% vs. (55±6)%].Conclusion GM-CSF could facilitate the repair of the intima, reduce neointima formation, better the function of the endothelium, and decrease the rate of restenosis.  相似文献   

15.
毛文凯  刘志勇 《现代医学》2005,33(3):154-157
目的探讨基因重组人粒细胞集落刺激因子(rhGCSF)动员骨髓干细胞对急性心肌梗死动物模型的治疗作用。方法将60只SD大鼠随机分成对照组和治疗组,结扎冠状动脉左前降支建立大鼠心肌梗死实验模型。治疗组在复制大鼠心肌梗死模型3h后用经生理盐水稀释的rhGCSF(2mg·L-1)皮下注射10μg·kg-1·d-1,共5d;对照组复制大鼠心肌梗死模型3h后皮下注射等量生理盐水,共5d。在复制大鼠心肌梗死模型24、48h和2周后,两组分别先后各取10只大鼠行在体心功能(±dpdtmax)测定,测定完毕后各组随机选取6只大鼠处死行心脏梗死范围的测量,其余大鼠处死取出心脏行HE染色及CD34+免疫组织化学分析。结果结扎冠状动脉左前降支24、48h和2周后治疗组±dpdtmax均高于对照组(P<0.01);治疗组心脏梗死范围低于对照组(P<0.01)。病理检查显示对照组心肌梗死区周围有较多以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润,而治疗组大鼠心肌坏死程度较对照组轻,浸润的细胞以CD34+的单个核细胞为主,并可见新生的心肌细胞生长。结论rhGCSF动员自体骨髓干细胞原位移植可修复梗死心肌、减少梗死范围、提高心功能,可用于急性心肌梗死的治疗。  相似文献   

16.
骨髓细胞多向分化潜能的初步研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的:探讨骨髓细胞在受致死剂量照射的受体鼠体内的多向分化潜能。方法:将C57-TgN(Mx-cre)雄性小鼠的骨髓细胞经尾静脉植入受致死剂量照射的雌性受体鼠,重建受体鼠骨髓,然后分别用PCR和免疫组化分析检测受体鼠的多个器官组织中sry及Mx-cre基因的分布及表达情况。结果:PCR和免疫组化分析结果均显示,供体细胞的两个标志sry及Mx-cre在受体鼠的肝脏,肾脏,皮肤,脾脏等多个器官中都有表达。结论:骨髓细胞不仅可以重建受致死剂量照射受体鼠的造血系统,而且具有分化为肝脏,肾脏,皮肤,脾脏等组织细胞类型的多向潜能性。  相似文献   

17.
Background Stem cell transplantation has been shown to have beneficial effects on dilated cardiomyopathy. However, mechanism for stem cell homing to cardiac tissue in dilated cardiomyopathy has not yet been elucidated. Methods Mesenchymal stem cells were obtained from rat bone marrow, expanded in vitro, and labeled with 99mmc. Cardiomyopathy model was induced by doxorubicin in rats. 9ernTC labeled cells were infused into the left ventricles in cardiomyopathy and control rats. Sixteen hours after injection, animals were sacrificed and different tissues were harvested to measure specific radioactivity. By use of real-time polymerase chain reaction and immunohistochemistry, mRNA and protein expressions for stromal-cell-derived factor 1 in cardiac tissue were measured. Results Labeling efficiency of mesenchymal stem cells was (70.0±11.2)%. Sixteen hours after mesenchymal stem cell transplantation, the heart-to-muscle radioactivity ratio was increased significantly in cardiomyopathy hearts as compared to control hearts. Both mRNA and protein expressions of cardiomyopathy hearts as compared with control hearts. Conclusion In dilated cardiomyopathy induced by doxorubicin in heart may induce mesenchymal stem cells home to the heart. stromal-cell-derived factor 1 were up-regulated in up-regulated expression of stromal-cell-derived factor I  相似文献   

18.
应用人骨髓CFU F体外培养技术 ,观察rhGM CSF和rhG CSF对急性白血病骨髓CFU F生成的影响。结果表明 ,上二者对CFU F的形成均有明显促进作用及协同效应 ,且rhGM CSF的作用大于rhG CSF。提示二者可能通过这种促进作用和改善骨髓微环境而更有效地发挥造血调节机能 更多还原  相似文献   

19.
目的:探讨重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)对于牙龈创伤修复的影响,为其在口腔牙周领域中的应用奠定基础。方法:16只健康大耳白兔随机分为实验组和对照组,每组8只。采用手术刀切除上下切牙唇侧牙龈2 mm。术后实验组每日3次创面涂抹rhGM-CSF,对照组以生理盐水替代。于术后3、7、11和15 d各处死动物2只,HE染色观察镜下上皮及上皮下结缔组织的结构、分布,各种创伤修复细胞的变化,PCNA染色后观察阳性染色上皮细胞和成纤维细胞数目。结果:形态学观察,第3天2组均表现出炎细胞浸润,但实验组浸润数目更多;第7天2组均可见到新生血管、成纤维细胞和胶原纤维,实验组新生血管化的程度较为显著;第11天2组出现大量增殖的成纤维细胞,但实验组和程度更广泛,至第15天时2组的创伤均已基本恢复正常,组间差异不明显。PCNA染色,随着时间的推移,增殖的上皮细胞数目逐渐增加,至第15天时达到高峰,增殖的成纤维细胞数目从第3天起开始增加,至第11天达到高峰,第15天则明显降低为最低值。实验组增殖的上皮细胞数量在第3和11天显著高于对照组(P<0.01),增殖的成纤维细胞数量在第11和15天明显高于对照组(P<0.05),其余时间点组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:rhGM-CSF可以促进牙龈组织中炎细胞的浸润、血管的新生、上皮细胞和成纤维细胞的增殖,rhGM-CSF可以促进牙龈组织创伤愈合。  相似文献   

20.
目的观察大鼠趋化素样因子1(rCKLF1)的mRNA在支气管哮喘大鼠肺组织的表达。方法将30只SD大鼠分为对照组(N组)及哮喘组,根据激发时间(1d、3d、7d、14d)不同将哮喘组分为A、B、C、D4组。哮喘激发后取右肺中叶提取组织总RNA。逆转录后行实时荧光定量PCR。了解rCKLF1mRNA的表达。结果rCKLF1在哮喘大鼠的肺组织中表达上调,并呈动态变化,7d达峰值,为正常的12.2倍。结论CKLF1与哮喘的病理生理过程有关。  相似文献   

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