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相似文献
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1.
目前国内外测定尿蛋白方法很多,我们在诸方法中采用考马斯亮兰法,介绍如下: 考马斯亮兰G250在酸性溶液中呈棕茶色,当与蛋白质结合后产生兰色复合物.依颜色深浅,判断尿蛋白含量.称取考马斯亮兰G250,50mg于1000ml量瓶内,加甲醇10ml溶解,加浓盐酸35ml.蒸留水加至1000ml做成试剂置棕色瓶内,  相似文献   

2.
目的 建立一种快速灵敏的脑脊液和尿液蛋白质测定方法.方法 用溴酚兰丙酮与蛋白质结合,用白蛋白标准液作标准.结果 标本测定结果与考马斯亮兰-G250法相比无显著差异,相关系数r=0.99,线性范围0~1500mg/L,平均回收率100.5%.结论 溴酚兰丙酮比色法定量测定脑脊液和尿液蛋白,方法简便、快速、灵敏度高.  相似文献   

3.
应用自制的考马斯亮兰 G- 2 50染色蛋白定量试剂进行微量蛋白测定。考马斯亮兰染料能与蛋白质定量结合 ,通过比色可测得蛋白浓度。蛋白浓度在 1 0 0~ 1 0 0 0 mg/ L范围内。该法的实测值与吸光度间呈良好的线性关系。其敏感性、稳定性、重复性及简便程度均优于经典的双缩脲法、Folin-酚法蛋白测定法。实验结果显示 ,改良的考马斯亮兰 G- 2 50染色法是一种简便、迅速且可靠的微量蛋白浓度测定法  相似文献   

4.
本文介绍了一种用考马斯亮兰R-250固相染料结合法测蛋白质含量的方法。将蛋白样品点在滤纸上,甲醇固定,考马斯亮兰R-250染色,脱色,用洗脱液洗脱下与染料结合的蛋白质,在波长610nm处测其光密度(optical density.O.D)值。方法简便,所用样品少,灵敏度高,检测线性范围在0.1g/L ̄5g/L之间,重复性较好,批内变异3.56% ̄6.67%,批间变异1.48% ̄7.02%。样品稳定  相似文献   

5.
改良的考马斯亮兰G—250染色法简便快速测定微量蛋白浓度   总被引:11,自引:0,他引:11  
应用自制的考马斯亮兰G-250染色蛋白定量试剂进行微量蛋白测定。考马斯亮兰染料能与蛋白质定量结合,通过比色可测得蛋白浓度。蛋白浓度在100 ̄1000mg/L范围内。该法的实测值与吸光度间呈良好的线性关系。其敏感性、稳定性、重复性及简便程度均优于经典的双缩脲法、Folin-酚法蛋白测定法。实验结果显示,改良的考马斯亮兰G-250染色法是一种简便、迅速且可靠的微量蛋白浓度测定法。  相似文献   

6.
我们用改良的考马斯亮兰染料结合法测定正常成人、慢性浅表性胃炎、胃溃疡、慢性萎缩性胃炎和胃癌患者共388例血清样品中酸溶性糖蛋白(ASP)的含量并作分析。结果表明,在胃癌癌变过程中有血清ASP含量的规律性递增的变化,血清ASP测定可作为胃癌筛查和辅助诊断的生化指标,有一定的实用价值。  相似文献   

7.
目的 为了建立一种快速而灵敏的蛋白质检测方法。方法 在考马斯亮兰法测定蛋白质含量时,通过采用590nm 和450nm 双波长代替单波长检测,并以酶标检测仪取代紫外- 可见分光光度计作为检测仪。结果 此种改进不但提高了考马斯亮兰法检测蛋白质的灵敏度(0 .127μg/ml) 和检测范围(0 .127 ~31 .25μg/ml),而且使大量标本的检测可在一次检测过程中完成。标准直线相关系数r2 = 0 .9965,表明在检测限内A595/A450 和蛋白质浓度C呈良好线形关系。结论 双波长法可作为一种快速、灵敏的蛋白质检测方法。  相似文献   

8.
胰岛素是常用降血糖药。其质量控制通常采用生物检定法。在研究胰酶-胰岛素联产新工艺过程中,为了对胰岛素进行追踪,需检测大量样品,如用生物检定法则需用动物较多,且耗资、费时。本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮兰R—250染色法,测定微量胰岛素,结果较满意。该方法简便快速、适用于生产过程中大量产品的检测。  相似文献   

9.
脑脊液蛋白质的定量常用磺基水杨酸和三氯醋酸比浊法。磺基水杨酸和三氯醋酸对脑脊液中的清蛋白及球蛋白的沉淀效力不一样,因而形成的浊度并不一致,测定结果的准确性欠佳。1978年Johnson和Lott报道了应用考马斯亮兰染料测定脑脊液中的蛋白质含量的方法。此法灵敏度高,所得结果较磺基水杨酸和三氯醋酸法准确,经我们实际应用,甚感满意,介绍如下。  相似文献   

10.
考马斯亮兰G—250染料测定蛋白质方法的改进   总被引:1,自引:1,他引:0  
考马斯亮兰G-250(简称G-250)酸性溶液呈红棕色,与蛋白质结合时变为兰色,A_(max)从465nm移至595nm。在一定条件下,蛋白质浓度与A_(595nm)成正比,据此作蛋白质定量。本法有快速、简便、灵敏和抗多种化学试剂干扰等优点,已得到广泛使用。但此法对不同的蛋白质定量有时差异较大,并时有不稳定的染料蛋白复合物沉出,影响测定准确度~4。作行用正交试验法选出了试剂配制的最佳条件,对经典法作了改进。  相似文献   

11.
中药药性与蛋白质含量相关性研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:初步探讨中药寒热药性与蛋白质含量的相关性。方法:采用考马斯亮蓝法测定20味中药的蛋白质含量,以蛋白质含量为指标,确定中药药性与蛋白质含量的相关关系。结果:中药的寒热药性与蛋白质含量没有统计学意义,但10种热性药蛋白质平均含量为12.6670mg/g,10种寒性药蛋白质平均含量为6.5036mg/g,热性药蛋白质含量是寒性药的1.9倍。结论:蛋白质含量与中药寒热药性有一定的相关性。  相似文献   

12.
伊文思蓝脂质体的制备及其在小鼠体内的分布   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的:研究伊文思蓝脂质体在小鼠体内的组织分布状况,为研究脑靶向脂质体奠定基础.方法:用反相蒸发法制备伊文思蓝脂质体,用凝胶柱分离的方法测得脂质体的包封率为25.07%,比较了伊文思蓝脂质体和伊文思蓝水溶液在小鼠体内的组织分布状况.结果:磷脂与胆固醇的比例对伊文思蓝脂质体的包封率有较大的影响;尾静脉注射后2~4 h时脂质体组在脑中伊文思蓝的浓度高于水溶液组.结论:伊文思蓝可作为检测脂质体跨血脑屏障的模型药物,脂质体对药物跨血脑屏障有一定的促进作用.  相似文献   

13.
产黄青霉粗提液系由我科实验室制备,经用考马氏亮蓝G250法测定蛋白含量为44~48mg/ml 此粗提液经聚丙烯酰胺凝胶电泳出现3条蛋白带.即P_1、P_2a、P_2b,与标准蛋白比较,分子量约为94 000,43 000及25 000。Sephadex G 200凝胶层析结果呈现两个峰带.经连续收集样品.并按电泳结果分装为3管,即T_1 T_2,T_3,以3管样品对青霉菌致哮喘患者作皮内试验,证实T_2具有最强的生物活性.由于P_2是产黄青霉中T_2的主要部分.从而提出P_2a是产黄青霉中变应原性最强的蛋白成分。  相似文献   

14.
目的对王不留行及伪品进行了电泳鉴州,并考察考马斯亮蓝G-250的染色效果及电泳方法的效果。方法可溶性蛋白质凝胶电泳,结果王不留行及伪品的电泳图谱存在显差异。结论电泳图谱可作为王不留行及伪品的鉴别依据.所用电泳方法简便、怏捷,弩马斯亮蓝G-250可用于中药的电泳鉴别。  相似文献   

15.
目的 :采用两种虾壳为原料制备甲壳素与壳聚糖 ,为内地开展甲壳素与壳聚糖的研究提供可行的原料制备方法。方法 :将收集的虾壳处理干净 ,用 2mol·L-1盐酸浸泡 ,除去虾壳中钙质 ,10 %NaOH煮沸除去虾壳中的蛋白质 ;4 0 %NaOH煮沸 ,脱去甲壳素的部分乙酰基 ,制得壳聚糖。结果 :两种虾壳制备甲壳素收率分别为 15 .92 % ,17.2 5 % ;制备壳聚糖的收率分别为 10 .84 % ,11.78% :由甲壳素制备壳聚糖的收率均为 6 8%。制备的壳聚糖均溶于 1%HAc。结论 :制备方法稳定、可行 ,可以采用本方法 ,利用废弃的虾壳制备甲壳素、壳聚糖  相似文献   

16.
目的:测试甲壳胺膜在体内外的降解性,探讨甲壳胺膜在外科手术中应用的可能性。方法:体外组用1%溶菌酶溶液浸泡甲壳胺膜。体内组将甲壳胺膜置于大鼠腹腔器官和皮下组织。结果:体外组在浸泡10天时,甲壳胺膜降解近50%。在体内组中甲壳胺膜在腹腔中有明显降解,但皮下组织中的甲壳胺膜被周围组织纤维化而无法测试。结论:甲壳胺膜在不同的介质中有不同的降解性,其在体内降解速度与多种因素有关。  相似文献   

17.
目的 :从补骨脂95%乙醇提取物中,进一步探讨补骨脂雌激素样作用的活性成分和有效部位。方法 :通过系统溶剂提取法,采用HPLC法测定提取物中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂甲素、补骨脂乙素和补骨脂酚的含量,采用C18柱色谱柱,流动相A∶B(乙腈∶0.1%甲酸水溶液);B相浓度洗脱梯度:0~25 min,90%~55%;25~35 min,55%~40%;35~65 min,40%~40%;65~75 min,40%~90%;检测波长246 nm;进样量20μL;流速1.0 m L/min。结合药理实验:采用补佳乐作为阳性药物,小鼠按体质量均衡和随机的原则分为7组(正常对照组、补佳乐组,95%乙醇提取组及各溶剂提取物组),每组10只,各组按0.2 m L/10 g灌胃。正常对照组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液,每日灌胃1次,连续1周。1周后解剖测定各组小鼠体质量增长率和子宫系数。结果:与正常组小鼠子宫系数比较,除了乙酸乙酯组外,其他各组均能使小鼠子宫系数显著升高;石油醚组比95%乙醇提取物组能使小鼠子宫系数升高的更明显(P<0.05)。与正常组小鼠体质量增幅比较,95%乙醇提取组、石油醚萃取组均能使小鼠体质量增长速度显著加快,其中石油醚萃取组差异具有统计学意义(P<0.01);与95%乙醇提取组小鼠体质量增幅比较,各组体质量增幅不明显。结论:初步确定石油醚部位为补骨脂雌激素样作用的有效部位,结合液相数据,可能跟萃取物中补骨脂酚含量高有关。  相似文献   

18.
为研究乙醇固定后肿瘤细胞的蛋白质提取及Western印迹的可行性。于低温(4℃)或常温条件下裂解经75%冷乙醇固定的肿瘤细胞(HL-60细胞和Molt-4细胞),提取细胞蛋白质进行SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹。结果显示经预处理后的肿瘤细胞中提取的蛋白质不论是在SDS-PAGE后的考马斯亮蓝染色,还是转膜后的Western印迹均可得到可分析的蛋白质条带。提示75%冷乙醇固定的肿瘤细胞仍适用于SDS-PAGE和Western印迹。并可结合流式细胞术对肿瘤细胞蛋白质进行细胞周期定性、定量和定时相的同步分析。  相似文献   

19.
目的:在体外条件下检测重组人透明带蛋白诱导的顶体反应。 方法:体外采集已生育健康男子精液,采用非连续密度梯度法分离精子,将获能的精子悬液分成阴性对照组(C组,200 μL精子悬液加1 μL DMSO)、阳性对照组(A组,200 μL精子悬液加A23187至终浓度为10 μmol•L-1)和ZP3组(200 μL精子悬液加ZP3至终浓度为10 mg•L-1),考马斯亮蓝染色法检测重组人ZP3蛋白诱导的顶体反应。结果:C组、A组和ZP3组发生顶体反应的精子百分率分别为(5.00±1.70)%、(46.10±7.49)%和(13.20±2.70)%,各组间比较差异有显著性(P<0.05)。 结论:重组人透明带蛋白能够诱导人精子发生顶体反应。  相似文献   

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