急性冠脉综合征患者外周免疫细胞的变化及临床意义

目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血中免疫细胞的表达变化及其临床意义.方法 采用流式细胞术检测24例急性心肌梗死(AMI)患者、22例不稳定性心绞痛(UA)患者、26例稳定性心绞痛(SA)患者和20例冠状动脉造影正常(NCA)的对照组的外周血T淋巴细胞亚群、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)、NK细胞和NKT细胞的表达水平.结果 与对照组和SA组比较,AMI组和UA组患者外周血CD4+T细胞的表达明显升高(P＜0.05),CD8+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞、NK细胞和NKT细胞水平显著降低(P ＜0.05); AMI患者CD4+T细胞明显高于UA患者,而CD8+T细胞和Treg细胞则显著低于UA患者(均P＜0.05); SA组患者除CD4+CD25+CD127kw Treg细胞表达率显著低于NCA组外,其余各指标与NCA组均无明显差异(均P ＞0.05).结论 ACS患者外周T细胞亚群、调节性T细胞、NK细胞和NKT细胞的异常表达反映其免疫调节受损,免疫细胞表达的变化与ACS的发生发展密切相关,免疫细胞可能成为ACS发病机制研究和干预治疗的重要靶点.     

肺结核患者CD4+T淋巴细胞凋亡及相关细胞因子水平变化

目的探讨肺结核患者外周血CD4 T淋巴细胞凋亡及相关细胞因子水平的变化。方法分离肺结核患者和正常人外周血单核细胞标记后用流式细胞仪测定CD4 T淋巴细胞凋亡率,用ELISA法检测白细胞介素-10(IL-10)与干扰素-γ(IFN-γ)的浓度。结果肺结核患者外周血CD4 T淋巴细胞凋亡率明显高于正常对照组,淋巴细胞培养上清液IL-10水平显著高于对照组,而IFN-γ水平显著低于对照组。涂阳组外周血CD4 T细胞凋亡率高于涂阴组与健康对照组,复治组外周血CD4 T细胞凋亡率显著高于初治组与健康对照组。外周血CD4 T细胞凋亡率与IL-10,IFN-γ水平相关。结论外周血CD4 T淋巴细胞凋亡增加可能是肺结核的免疫发病机制之一,对诱导或抗凋亡的某些因素进行干预有望为结核病的治疗带来新的希望和突破。     

肺结核患者T淋巴细胞凋亡的研究

[摘要] 目的 探讨肺结核患者外周血CD4+ T淋巴细胞凋亡及相关细胞因子水平的变化。方法 分离肺结核患者和正常人外周血单核细胞标记后用流式细胞仪测定CD4+ T淋巴细胞凋亡率，用ELISA法检测白细胞介素-10(IL-10)与干扰素-γ(IFN-γ)的浓度。结果 肺结核患者外周血CD4+ T淋巴细胞凋亡率明显高于正常对照组，淋巴细胞培养上清液IL-10水平显著高于对照组，而IFN-γ水平显著低于对照组。涂阳组外周血CD4+ T细胞凋亡率高于涂阴组与健康对照组，复治组外周血CD4+ T细胞凋亡率显著高于初治组与健康对照组。外周血CD4+ T细胞凋亡率与IL-10, IFN-γ水平相关。结论 外周血CD4+ T淋巴细胞凋亡增加可能是肺结核的免疫发病机制之一，对诱导或抗凋亡的某些因素进行干预有望为结核病的治疗带来新的希望和突破。     

结核患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋ Treg表达与巨噬细胞凋亡的临床意义

目的：探讨结核病患者外周血单个核细胞（PBMC）中CD4＋CD25＋ Foxp3＋调节性T淋巴细胞（Treg）表达与单核巨噬细胞（MΦ）凋亡的可能关系及临床意义。方法用流式仪测定29例活动性结核、17例肺外结核患者治疗前及治疗后3、6个月PBMC中CD4＋CD25＋ Foxp3＋ Treg表达及MΦ凋亡率,并与20例健康对照者（健康对照组）进行比较。结果活动性结核患者PBMC中CD4＋CD25＋ Foxp3＋ Treg表达明显高于健康对照组和治疗后患者,且复治患者高于初治患者,肺外结核高于肺结核;患者MΦ凋亡率明显高于健康对照组（P＜0．01）,初治组明显高于复治组（P＜0．01）。活动性结核患者 PBMC中CD4＋ CD25＋Foxp3＋ T reg表达与MΦ凋亡呈负相关。结论 CD4＋ CD25＋ Foxp3＋ T reg表达升高,MΦ凋亡下降,提示与结核病呈慢性感染有关。     

咳嗽变异性哮喘患者外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平分析

目的 分析咳嗽变异性哮喘（CVA）患者外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平.方法 连续选择2011年1月至2012年12月在中国医科大学附属第四医院门诊就诊的CVA患者（CVA组）35例和慢性持续期哮喘患者（哮喘组）21例,另有18例同期参加体检结论健康者为对照组.3组对象同期接受了外周血调节性T细胞（CD4＋CD25＋ Treg和CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg）和辅助性T细胞（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋）检测.结果 CVA患者外周血CD4＋表达水平及CD4＋/CD8＋比值均明显低于对照组,但都明显高于哮喘组（P＜0.05,P＜0.01）.CVA患者外周血CD4＋CD25＋ Treg和CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg均明显低于对照组,但都明显高于哮喘组（P＜0.05,P＜0.01）.CVA咳嗽程度重组外周血CD4＋、CD4＋CD25＋ Treg、CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg表达水平及CD4＋/CD8＋比值都明显低于咳嗽程度轻组（P＜0.05,P＜0.01）.结论 CVA患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达,且随着症状加重这些异常表达趋于显著.     

肺结核患者T淋巴细胞亚群的检测及临床意义

目的探讨外周血淋巴细胞亚群的比例变化在结核病的临床意义。方法采用流式细胞仪检测继发性肺结核患者93例（其中初治肺结核49例．复治耐药肺结核44例）,急性血行播散性肺结核29例患者的外周血CD3＋、CD4＋,CD8＋淋巴细胞亚群及CD4＋／CD8＋比值。结果急性血行播散性肺结核患者组外周血CD8＋T细胞比例明显增高[（34．64±5．45）％1,而CD3＋[（63．29±4．16）％]、CD4＋[（27．81±6．17）％]及CD4＋／CD8＋[（0．81±0．42）]则明显降低,与初治肺结核组及复治耐药肺结核组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。初治肺结核与复治耐药肺结核组间CD3＋、CD4＋,CD8＋及CD4＋/CD8＋比较．差异无统计学意义。继发性肺结核患者病变范围广泛者（病灶≥3个肺野）的CD3＋T细胞比例为（65．37±9．9）％,明显低于病变范围小者[（74．49±1．07）％],差异有统计学意义（P〈0．05）。结论T淋巴细胞亚群在结核病患者外周血中分布失衡,可能与疾病的发展相关。监测结核病患者T淋巴细胞亚群水平,对评价患者的细胞免疫功能及对疾病的免疫治疗均有重要的指导意义。     

肺结核患者外周血NKT细胞、NK细胞、T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的了解肺结核患者外周血NKT细胞、NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化及其意义。方法采用流式细胞仪抗体双标法检测472例肺结核和非结核患者外周血NKT细胞（CD3＋CD16＋CD56＋）、NK细胞（CD3-CD16＋CD56＋）及T淋巴细胞亚群（CD3、CD4、CD8及CD4/CD8）的表达率,并进行分析。结果肺结核患者的NK细胞和NKT细胞的表达水平显著低于非结核患者,T细胞亚群CD4在肺结核患者中的表达显著高于非结核患者。肺结核患者不耐药组NK细胞和NKT细胞的表达率明显高于耐药组（F值分别为7.926、5.689,P〈0.001）。初治病例CD4、CD4/CD8显著高于复治病例（t值为-2.179、-2.402;P值为0.030、0.017）,初治病例CD8低于复治病例（t=3.257,P=0.001）。NKT细胞、NK细胞在初治和复治病例中的分布差异无统计学意义。NKT细胞、NK细胞和T淋巴细胞亚群在不同病灶范围分组之间分布差异无统计学意义。NK细胞、NKT细胞、CD4、CD8以及CD4/CD8在肺部有无空洞及空洞数量分组之间分布差异有统计学意义,即NK细胞、NKT细胞数、CD4/CD8、CD8随着空洞累及范围的增加而降低,CD4则随空洞累及范围的增加而升高。结论肺结核患者NKT细胞和NK细胞的表达受到了抑制,且NK细胞和NKT细胞的表达率随着耐药及耐药程度的加重而降低,随着肺结核空洞累及范围的增加机体免疫进一步失衡,提示结核病尤其是耐药结核病采用免疫调节剂辅助治疗的必要性。     

肺结核病患者外周血前炎性因子及细胞亚群凋亡的研究

目的探讨前炎性因子及CD4＋T淋巴细胞凋亡在结核病免疫病理过程中的作用及临床意义。方法对45例肺结核患者采用免疫酶联吸附法检测血清中的TNF-α及IL-10水平,分离外周血单核细胞标记后用流式细胞仪测定CD4＋T淋巴细胞凋亡率,并进行相关性分析。结果肺结核患者血清中的TNF-α及IL-10水平明显高于健康对照组（P〈0.05）,其外周CD4＋T淋巴细胞凋亡率明显高于健康对照组（P〈0.05）;涂阳组外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率与涂阴组和健康对照组差异有显著性（P〈0.05）;复治组外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率显著高于初治组和对照组;外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率与TNF-α及IL-10水平呈正相关（P〈0.05）。结论外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率与TNF-α及IL-10水平呈正相关,均参与了对结核杆菌感染的免疫病理过程。     

含左氧氟沙星化疗方案治疗复治涂阳肺结核的临床效果

目的探讨含左氧氟沙星化疗方案治疗复治涂阳肺结核的临床效果。方法选取60例复治涂阳肺结核患者,按照随机数表法分为对照组与研究组,各30例。对照组接受常规化疗方案,研究组接受含左氧氟沙星化疗方案,比较两组临床疗效、T细胞亚群水平、涂片转阴率及不良反应发生情况。结果研究组治疗总有效率与涂片转阴率高于对照组(P<0.05);研究组治疗后CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+均高于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论含左氧氟沙星化疗方案可有效治疗复治涂阳肺结核,提升患者机体免疫力,且不良反应少。     

CD4+CD25+调节性T淋巴细胞在儿童传染性单核细胞增多症的变化及作用

目的观察儿童传染性单核细胞增多症(IM)治疗前后外周血T淋巴细胞亚群和CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞(Treg细胞)比例变化,分析Treg对IM的影响。方法选取2017年1月至2018年5月安徽医科大学第二附属医院儿科收治的IM患儿60例作为观察组,以同期于本院儿童保健门诊行体检的40例健康儿童作为对照组,采用流式细胞术检测观察组治疗前、后及对照组的外周血T细胞亚群(CD3+T细胞、CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞比例,CD4/CD8比值)、CD4~+CD25+调节性T淋巴细胞比例,对比分析两组患者机体细胞免疫功能的变化。结果观察组治疗前CD3+T细胞比例、CD3~+CD8~+T细胞比例显著高于对照组; CD3~+CD4~+T细胞比例、CD4/CD8比值低于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。观察组治疗后CD3~+T细胞比例、CD3~+CD8~+T细胞比例均低于观察组治疗前; CD3~+CD4~+T细胞比例、CD4/CD8比值高于治疗前,差异均有统计学意义(P <0. 05)。观察组治疗前外周血Treg细胞比例低于正常对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);而观察组治疗后外周血Treg细胞比例高于治疗前,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 IM患儿存在T细胞亚群比例的变化,Treg细胞水平的降低,可能参与IM患儿疾病的发生发展过程。     

妊娠期高血压疾病妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达分析

目的 分析妊娠期高血压疾病(PIH)妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达变化。方法 连续选择近期住院确诊的PIH 妇女27例(PIH组),入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD+4CD+25 Treg 和CD+4CD+25 Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测,并与同期住院正常怀孕产妇 (对照组,20例)相同测试结果进行比较。结果 调节性T细胞数据中,PIH组血清CD+4CD+25 Treg和CD+4CD+25 Foxp3+ Treg水平明显低于对照组(P均<0.05～0.01)。辅助性T细胞中,PIH组血清CD+4/CD+8表达水平明显高于对照组,而CD+8表达水平则显著低于对照组(P均<0.05～0.01)。结论 PIH患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

慢性乙型肝炎患者CD4+ CD25+调节性T细胞免疫抑制功能的研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)免疫抑制功能.方法 收集北京大学人民医院22例慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)以及18名健康对照的PBMC标本,以流式分析对PBMC中CD4+ CD25+ Treg的频率进行分析;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法评价CD4+ CD25+ Treg的免疫抑制功能;并同时通过磁珠分选去除CHB患者PBMC中的CD4+ CD25+ Treg,分别以MHC-肽-五聚体法和酶联斑点免疫法(Elispot)检测HBVcore18-27抗原肽刺激对HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的频率以及IFN-γ的分泌.结果 CHB患者外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞群所占CD4+T细胞群的比例明显高于健康对照(t=3.74,P＜0.01);CHB患者CD4+ CD25+ Treg细胞可非特异抑制自身活化的CD4+ CD25- T细胞,并呈剂量依赖的特点,且抑制能力与健康对照相比无明显差异;在经HBVcore18-27抗原肽诱导条件下,去除CD4+ CD25+ Treg CHB患者,HBVcore18-27特异性CTLs的频率以及CTLs分泌IFN-γ的频数与未去除CD4+ CD25+ Treg组比出现显著上调(t=4.75,t=7.828,P＜0.01).结论 CHB患者循环中CD4+ CD25+ Treg细胞频率升高.在体外去除CHB患者PBMC的CD4+ CD25+ Treg后可显著地增强HBV抗原诱导的抗HBV细胞免疫应答.     

结直肠癌患者抗肿瘤免疫参数的比较

目的比较总淋巴细胞计数、CD4＋CD25＋Treg细胞、Th/Tr淋巴细胞比值、CD4/CD8比值评估结直肠癌患者抗肿瘤免疫状态的意义。方法应用流式细胞术检测60例结直肠癌患者和30例健康者外周血Th/Tr比值、CD4/CD8比值,计算CD4＋CD25＋Treg计数、淋巴细胞总数,并与30例健康志愿者进行比较。结果结直肠癌患者总淋巴细胞计数较健康志愿者减少,CD4＋CD25＋Treg较健康志愿者增多（P〈0.05）;有转移与无转移的结直肠癌患者总淋巴细胞计数、CD4＋CD25＋Treg细胞计数分别为1478±349vs1576±369（P〉0.05）、121±47vs107±64（P〉0.05）;结直肠癌患者Th/Tr比值小于健康志愿者（P〈0.01）,有转移结直肠癌患者Th/Tr比值小于无转移患者（P〈0.01）;CD4/CD8比值在患者与健康志愿者间无统计学差异（P〉0.05）,且与有无转移无关。结论Th/Tr比值对结直肠癌患者抗肿瘤免疫状态的评估可能优于总淋巴细胞计数、CD4＋CD25＋Treg细胞计数和CD4/CD8比值。     

Treg和淋巴细胞亚群在急性髓系白血病中的意义

目的：研究 CD4+CD25+CD127 low/-调节性 T 细胞(Treg)和淋巴细胞亚群在急性髓系白血病(AML)患者外周血中的变化、相互关系及临床意义。方法采用流式细胞仪对初治组和完全缓解( CR)组外周血Treg及淋巴细胞亚群水平进行检测,并与正常对照组进行对比。结果初治组和CR组AML患者外周血中Treg水平均高于正常对照组( P<0．05),初治组高于CR组(P<0．05)。初治组和CR组AML患者外周血的NK( CD3-CD16+CD56+)细胞占淋巴细胞的比例均低于正常对照组(P<0．05),初治组低于CR组(P<0．05)。初治组 CD3+ T 细胞、CD4+ T 细胞含量和 CD4+/CD8+比值均低于正常对照组( P<0．05),但初治组CD8+T细胞含量却明显高于正常对照组( P<0．05);CR组CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞含量及CD4+/CD8+比值接近正常对照组,与初治组比较差异有统计学意义(P <0．05)。结论 AML患者外周血中Treg及CD8+T细胞比例明显升高, NK 细胞、CD3+ T 细胞、CD4+ T 细胞含量和CD4+/CD8+比值降低,表明AML患者免疫功能处于抑制状态。 Treg控制CD8+T细胞免疫应答,同时抑制NK细胞的天然免疫反应,在CD4+T细胞与CD8+T细胞平衡的失调中起主要作用,与 AML 疾病发生发展密切相关。通过下调Treg的数量或去除其抑制功能,优化AML患者的免疫治疗。     

S180腹水癌小鼠肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+CD25+Treg细胞在肿瘤逃逸中的作用

目的：研究肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）中CD4⁺CD25⁺Treg细胞及免疫监视功能的变化,探讨CD4⁺CD25⁺Treg 细胞在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法：建立小鼠S180腹水癌模型,采集S180腹水癌小鼠TIL、脾脏细胞及对照组小鼠脾脏细胞,采用流式细胞术检测CD4⁺CD25⁺Treg细胞、CD8⁺T细胞、NK细胞的数量及NKG2D的表达水平,采用RT-PCR方法检测Foxp3 mRNA的表达水平,采用乳酸脱氢酶(LDH) 释放法检测CD8⁺T细胞的杀伤功能。结果：与对照组小鼠比较,S180腹水癌小鼠脾脏、TIL中CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达均明显增高(P<0.05),并且肿瘤组小鼠TIL中CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达较肿瘤组小鼠脾脏均明显增高(P<0.05);TIL中CD8⁺T细胞数量明显增高(P<0.05),其杀伤功能却有所下降;TIL中NK细胞数量及NKG2D表达均明显增高 (P<0.05)。结论：肿瘤局部CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量增加、功能增强,可能是肿瘤逃避免疫监视的机制之一。     

FoxP3基因在胃癌患者Treg细胞中的表达及其对Treg细胞的调节作用

目的:研究Foxp3基因在CD4+、CD25+调节性T细胞(Treg细胞)中的表达水平及其对Treg细胞的调节作用。方法:应用流式细胞术(FACS)测定实验组和对照组患者术前外周血中T淋巴细胞及Treg细胞含量的改变;采用RT-PCR技术检测FoxP3基因在胃癌患者外周血Treg细胞中的表达与对照组的差异。结果:胃癌患者外周血中T淋巴细胞(CD3+T)及抑制杀伤性T细胞(CD8+T)总数,与健康对照组相比无明显统计学差异(P>0.05);Treg细胞含量显著高于健康对照组(P<0.01);FoxP3基因在胃癌患者外周血Treg细胞中呈现高表达,明显高于健康对照组(P<0.01)。结论:FoxP3基因可能与Treg细胞发挥抑制胃癌病人产生的抗肿瘤自身免疫功能作用有着密切的关系。     

艾滋病合并结核病患者抗结核药物血药浓度的研究

目的：比较艾滋病合并结核病人同单纯结核病人抗结核药物血药浓度是否存在差异;比较艾滋病合并结核病病人CD4＋T淋巴细胞水平与抗结核药物血药浓度是否存在相关性。方法：高效液相色谱法测定28例艾滋病合并结核病患者及28例单纯结核病人血清中利福平,异烟肼及吡嗪酰胺血药浓度,比较两组病人抗结核药物血药浓度是否存在差异。用流式细胞仪测定艾滋病合并结核病病人CD4＋T淋巴细胞水平,比较其与抗结核药物血药浓度是否存在相关性。结果：艾滋病合并结核病组病人利福平血药浓度低于单纯结核病人（t=-6.563,P=0.000）。两组病人异烟肼血药浓度对比无统计学差异（t=-0.675,P=0.506）。两组病人吡嗪酰胺血药浓度对比无统计学差异（t=0.063,P=0.951）。CD4＋T淋巴细胞水平与血清中利福平浓度无相关性（r=0.38,P=0.099）,CD4＋T淋巴细胞水平与血清中异烟肼浓度无相关性（r=0.081,P=0.681）,CD4＋T淋巴细胞水平与血清中吡嗪酰胺浓度无相关性（r=0.125,P=0.527）。结论：艾滋病合并结核病病人利福平血药浓度低于单纯结核病人。两组病人异烟肼及吡嗪酰胺血药浓度无差异。CD4＋T淋巴细胞水平与血清中利福平,异烟肼,吡嗪酰胺血药浓度无相关性。     

从Th17和CD4+CD25+Foxp3+T细胞功能变化探讨肺结核的耐药机制

目的 分析耐药肺结核患者外周血Th17细胞与CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例及细胞因子的变化,从免疫学角度探讨其耐药机制。 方法 分别选取33例耐药肺结核(耐药组)、49例普通肺结核(普通组)及51例健康志愿者(对照组)展开对比研究。检测Th17细胞与CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例;采用RT-PCR检测其特异性转录因子RORγt与Foxp3的mRNA表达水平;采用ELISA实验检测IL-17A、IL-17F、TGF-β1及IL-10的血清水平。 结果 普通组Th17细胞比例和RORγt mRNA表达水平低于对照组,耐药组低于普通组;普通组CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例和Foxp3 mRNA表达水平高于对照组,耐药组高于普通组;普通组Th17/CD4+CD25+Foxp3+T和RORγt/Foxp3低于对照组,耐药组低于普通组(P＜0.05)。普通组IL-17A、IL-17F水平低于对照组,耐药组低于普通组;普通组TGF-β1、IL-10水平高于对照组,耐药组高于普通组;其组间差异均有统计学意义(P＜0.05)。 结论 Th17/CD4+CD25+Foxp3+T平衡向CD4+CD25+Foxp3+T偏移、免疫系统功能抑制,可能是结核病慢性化和产生耐药的重要机制之一。      

Detection of lymphocyte subsets and regulatory T cells in peripheral blood of patients with acute leukemia and its clinical significance

Objective To study the changes of lymphocyte subsets and regulatory T cells in peripheral blood of patients with acute leukemia (AL) and its clinical significance.Methods The different levels of periph...