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1.
目的:探讨黄芪多糖对ABCA1蛋白表达的影响.方法:将RAW264.7巨噬细胞诱导分化成泡沫细胞,用不同浓度黄芪多糖对其干预24 h,酶法测定泡沫细胞内胆固醇酯含量,ELISA法检测细胞内ABCA1的蛋白表达.结果:对照组、10、20、50、100 mg/L的APS作用于泡沫细胞24 h后,细胞内胆固醇酯含量分别为45.15±3.57、37.67±2.26、34.59±3.51、28.57±10.34、15.92±3.86 nmol/mg.各组ABCA1蛋白浓度为(6.02±6.12)、(15.86±9.15)、(54.76±14.20)、(75.39±10.09)、(97.56±13.25)ng/L.各APS组与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.01).结论:黄芪多糖可能通过上调ABCA1的蛋白表达而降低泡沫细胞内胆固醇含量. 相似文献
2.
目的:观察载脂蛋白A-I(apoA-I)模拟肽D-4F对RAW264.7巨噬细胞胆固醇流出的影响,并探讨其机制.方法:巨噬细胞种植于24孔板,用1.85×107 Bq/孔 3H -胆固醇和含50 μg/mL氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共同孵育 24 h后,给予不同浓度的D-4F(0~100 μg/mL)干预24 ... 相似文献
3.
目的:观察载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)模拟肽D-4F对RAW264.7巨噬细胞胆固醇流出的影响,并探讨其机制。方法:巨噬细胞种植于24孔板,用1.85×10^7Bq/孔3H-胆固醇和含50μg/mL氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共同孵育24h后,给予不同浓度的D-4F(0~100μg/mL)干预24h,收集细胞用液体闪烁计数法检测胆固醇流出。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)含量,采用实时荧光定量PCR及Western印迹检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的mRNA及蛋白表达。结果:D-4F呈浓度依赖及时间依赖性促进巨噬细胞内胆固醇流出,增加细胞内cAMP水平,上调ABCA1mRNA和蛋白表达。8-Br-cAMP显著增加D-4F介导的胆固醇流出和ABCA1表达,而蛋白激酶A(PKA)抑制剂虽然对基础胆固醇流出及ABCA1表达几乎无作用,却可以抑制8-Br-cAMP对胆固醇流出和ABCA1表达的促进作用。结论:D-4F促进巨噬细胞胆固醇流出,cAMP释放及ABCA1表达,可能与激活cAMP-PKA-ABCA1通路有关。 相似文献
4.
目的观察KLF4过表达对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)胆固醇蓄积的影响及对ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)表达的影响。方法构建KLF4过表达的RAW264.7细胞株。将细胞分为三组:对照组、ox-LDL组、KLF4过表达+ox-LDL组,后两组加入终浓度为30 μg/mL的ox-LDL处理24 h。分别运用油红O染色观察细胞质脂滴变化,高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(FC)含量,Western blot法检测各组细胞ABCA1及KLF4蛋白表达。结果泡沫细胞模型组的细胞内存在大量的红色脂滴,KLF4及ABCA1蛋白表达及胆固醇含量较对照组升高;KLF4过表达细胞经ox-LDL处理后,细胞内脂滴较模型组明显减少,胆固醇含量下降,ABCA1蛋白表达进一步升高。结论KLF4可上调巨噬细胞ABCA1的表达,抑制ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积。 相似文献
5.
目的探讨外源性硫化氢(H2S)对泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响。方法氧化低密度脂蛋白孵育RAW264.7细胞诱导泡沫化,H2S供体硫氢化钠处理细胞,测定胆固醇流出率,高效液相色谱测定细胞内游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)和总胆固醇(TC)浓度。实时定量PCR和蛋白印迹法检测泡沫细胞中ABCA1mRNA和蛋白表达。结果与泡沫细胞组相比,外源性H2S以时间和浓度依赖的方式增加泡沫细胞胆固醇流出(P<0.05),降低细胞中TC、FC和CE及CE/TC水平(P<0.05),上调细胞中ABCA1表达。结论外源性H2S上调泡沫细胞中ABCA1表达,促进胆固醇流出。 相似文献
6.
李华波 《湖北民族学院学报(医学版 )》2009,26(2):7-10
目的观察阿托伐他汀对THP-1巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响。方法THP-1细胞经160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育24 h,诱导分化成巨噬细胞,分别与不同浓度的阿托伐他汀(0、1、10、100μmol/L)作用不同时间(0 h、6 h、12 h、24 h)。提取各组细胞总RNA和蛋白质,分别采用RT-PCR和W esternB lot检测ABCA1的mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,不同浓度的阿托伐他汀与巨噬细胞孵育不同时间组的细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达无统计学差异(P〉0.05)。结论阿托伐他汀对巨噬细胞ABCA1的表达无影响。 相似文献
7.
目的观察脂肪因子Chemerin是否调节胆固醇流出和巨噬泡沫细胞脂滴蓄积,以及对巨噬泡沫细胞ATP结合盒转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-CoA:choles-terol acyltransferase-1,ACAT1)表达和NF-κB活化的影响。方法佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,随后加入胆固醇和ox-LDL培养促进巨噬细胞转化为巨噬泡沫细胞,免疫荧光染色检测巨噬细胞表面抗原CD68的表达,油红O染色后观察泡沫细胞形态,脂肪因子Chemerin干预巨噬泡沫细胞,应用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出变化,油红O染色观察细胞内脂滴变化,实时PCR和Western blot检测ABCA1及ACAT1mR-NA和蛋白表达水平。Sandwich ELISA法检测巨噬泡沫细胞NF-κB活化情况。实时PCR检测NF-κB抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)预处理后,Chemerin再干预时ABCA1表达的变化。结果 Chemerin抑制巨噬细胞内胆固醇流出,促进脂滴蓄积,下调ABCA1mRNA和蛋白的表达,增加NF-κB活化,差异有统计学意义(均P<0.05),且ABCA1mRNA表达与Chemerin浓度呈负相关,r=-0.936(P<0.05),NF-κB活化程度与ABCA1mRNA表达呈负相关,r=-0.917(P<0.05),但Chemerin对ACAT1mRNA和蛋白的表达无明显影响,PDTC预处理能够逆转ABCA1mRNA表达抑制。结论 Chemerin下调ABCA1mRNA和蛋白的表达,抑制THP-1巨噬泡沫细胞内胆固醇外流,增加细胞内脂滴蓄积,NF-κB活化可能是Chemerin抑制ABCA1mRNA表达的信号通路之一。 相似文献
8.
目的 探讨人胆固醇酯水解酶(hCEH)表达对泡沫细胞的影响及相关机制.方法 利用含hCEH的慢病毒转染RAW264.7小鼠单核巨噬细胞,转染成功后巨噬细胞泡沫化.油红O染色和高效液相色谱分析hCEH对细胞内脂滴堆积情况及游离胆固醇含量变化的影响;Western blot检测ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)的表达情况.结果 转染72 h后,荧光细胞数量最多,接近50%,hCEH在细胞内大量表达;随着时间的延长,油红O染色阳性细胞数逐渐减少,细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量逐渐下降;Western blot显示在0~8 h,ABCA1和ABCG1表达逐渐增加,8h达高峰,以后逐渐减少.结论 hCEH表达可以促进巨噬细胞表面ABCA1、ABCG1的表达,并且ABCA1、ABCG1之间存在一定的协同性,从而有效增加了游离胆固醇外流、减少胆固醇酯在细胞内聚积,抑制泡沫细胞形成. 相似文献
9.
目的研究在不同的刺激因素及曲格列酮的干预作用下ATP结合盒转运体A1(ATP—binding cassette A1,ABCA1)在巨噬细胞中表达的变化,从而探讨ABCA1在糖尿病动脉粥样硬化中的作用机制及曲格列酮的防治作用。方法在体外模拟糖尿病状态,分别以高葡萄糖、高胰岛素或糖基化终末产物刺激巨噬细胞,以曲格列酮预处理,再以上述3种因素刺激,检测巨噬细胞中ABCA1 mRNA表达的变化。结果高葡萄糖、高胰岛素或糖基化终末产物均可抑制ABCA1 mRNA在巨噬细胞中的表达;曲格列酮预处理后,ABCA1 mRNA在巨噬细胞中的表达增加。结论糖尿病状态下的多种因素可抑制ABCA1 mRNA在巨噬细胞中的表达;曲格列酮可减弱这种作用,提示高糖等因素减少ABCA1 mRNA表达的作用可能与PPAR1有关。曲格列酮可能延缓糖尿病患者患动脉粥样硬化。 相似文献
10.
目的 腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor, vaspin)是新发现的脂肪因子,对代谢性疾病具有改善作用。该研究旨在研究vaspin对体外培养的THP-1细胞泡沫化的影响。方法 100nM佛波酯孵育THP-1巨噬细胞48h后分为对照组,氧化低密度脂蛋白组(ox-LDL浓度50μg/ml,48h),vaspin干预组(vaspin终浓度100ng/ml,预孵24h);采用油红0染色法检测vaspin对THP-1细胞泡沫化的影响;Real-time PCR和Western blot法检测vaspin对THP-1细胞中酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(acy1-coenzyme A:cholesterol acyltrasferase-1,ACAT-1)、ATP结合盒转运体A1(ATP binding casstte transporterA1,ABCA1)及细胞清道夫受体-A1(scavenger receptor-A1, SR-A1)mRNA及蛋白表达水平的影响。结果 与ox-LDL组比较,ox-LDL+vaspin组巨噬细胞泡沫化程度明显下降(P<0.05);ox-LDL+vaspin组ACAT-1和SR-A1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而ABCA1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 vaspin能够抑制巨噬细胞向泡沫细胞的转化,发挥抗动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)的作用。 相似文献
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氧化型低密度脂蛋白对巨噬细胞ABCA1表达及功能的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)对巨噬细胞内ABCA1表达及功能的影响。方法分别以100μg/ml乙酰化低密度脂蛋白(acLDL)和oxLDL温育RAW264.7细胞24 h,应用胆固醇外排实验、半定量RT-PCR、Western blot检测oxLDL及acLDL对小鼠巨噬细胞内ABCA1功能、mRNA及蛋白质表达的影响。结果加入载脂蛋白apoA-I 24 h后,acLDL负荷的胆固醇约(37.65±2.29)%被排出细胞,而oxLDL组仅排出(9.78±2.16)%,差异有显著性意义(P<0.05);oxLDL及acLDL均可使ABCA1 mRNA水平升高3倍左右,并分别使其蛋白质表达水平提高(1.57±0.18)倍和(1.26±0.09)倍,两组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。结论oxLDL胆固醇负荷对ABCA1表达及功能的影响不一致,推测还存在其他调控ABCA1功能的机制使oxLDL负荷的胆固醇外排障碍。 相似文献
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Effects of Oxidized Low Density Lipoprotein on the Expression and Function of ABCA1 in Macrophages 总被引:1,自引:0,他引:1
In the present study, we examined the regulation of the expression and function of ABCA1 by modified LDL (ox-LDL) in vitro. After incubation with apoA-I for 24 h, RAW264.7 cells effluxed 37.65 % cholesterol loaded by acetyl LDL (ac-LDL), and 9.78% cholesterol in ox-LDL group. The level of ABCA1 mRNA increased about three times either when cells were incubated with .100 μg/mL ac-LDL or with 100 μg/mL ox-LDL. However, the level of ABCA1 protein rose by 1.57 times in ac-LDL group and 1.26 times in ox-LDL group. These results demonstrated that ox-LDL had different effect on the expression and function of ABCA1, ox-LDL might decrease the cholesterol efflux mediated by ABCA1 through other unknown mechanisms. 相似文献
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ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)是一种以ATP为能源进行物质转运的膜蛋白,胆固醇、磷脂等脂类物质是ABCA1的主要转运底物,胆固醇负荷、cAMP、PPAR等信号在调节ABCA1表达中有重要影响。ABCA1在胆固醇逆转运(reverse cholesterol transport,RCT)过程中与载脂蛋白结合参与高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)的形成,是RCT中的第一步也是关键的一步,也是该领域中研究的热点。 相似文献
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目的 检测三磷酸腺苷结合盒转运体A3(ABCA3)基因在急性髓系白血病(AML)细胞中的表达,探讨ABCA3在AML耐药方面的作用及临床意义。 方法 ①应用半定量RT PCR检测33例初治、13例复发/难治成人AML患者及10例正常对照者骨髓单个核细胞ABCA3 mRNA的表达水平,并分析其在不同组间的表达规律;②将初治AML患者按化疗效果分为完全缓解组和未完全缓解组,比较两组间ABCA3的表达水平;③分析ABCA3与AML患者初诊白细胞数、免疫表型、FAB分型等临床特征之间的相关性。结果 ABCA3的表达水平:初治及复发/难治AML组均明显高于正常对照组(P均<0.01);复发/难治AML组高于初治组(P<0.05);完全缓解组低于未完全缓解组(P<0.05);慢性粒细胞白血病急变患者高于其他AML亚型(除M3外,P均<0.05)。ABCA3的表达水平与AML患者初诊白细胞数、骨髓原始细胞百分数、免疫表型、性别及年龄无明显相关性。结论 ABCA3与AML患者的多药耐药及治疗、预后密切相关。 相似文献
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目的观察内脂素(visfatin)对人单核细胞株(THP-1)源性巨噬细胞胆固醇代谢相关基因ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)表达的影响,探讨visfatin诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制。方法 THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞,随机分组,给予不同浓度和不同作用时间的visfatin进行干预,分别运用油红O染色观察细胞质脂滴变化,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组细胞ABCA1及ACAT1 mRNA和蛋白表达,酶荧光学法检测细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(FC)含量,TC与FC之差为胆固醇酯(CE)含量。结果与对照组比较,visfatin干预组细胞质脂滴明显增多,细胞内FC和CE含量增加(均P<0.05),CE与TC的比值明显增加(>50%),ABCA1 mRNA和蛋白表达水平降低(均P<0.05),ACAT1 mRNA和蛋白表达水平升高(均P<0.05)。相关分析显示,visfatin呈浓度和时间依赖性下调ABCA1 mRNA和蛋白的表达,上调ACAT1 mRNA和蛋白的表达。结论 visfatin下调巨噬细胞ABCA1的表达,上调ACAT1的表达,使细胞内FC流出减少,CE合成增加,从而诱导THP-1源性泡沫细胞的形成,这可能为visfatin致动脉粥样硬化发病机制的研究提供一个新的理论依据。 相似文献
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ZHANG Xin Sheng ZHANG Peng LIU Ying Hua XU Qing ZHANG Yong LI Hui Zi LIU Lu LIU Yu Meng YANG Xue Yan XUE Chang Yong 《Biomedical and environmental sciences : BES》2022,35(2):95-106,中插1
Objective This study aimed to investigate the effects of caprylic acid(C8:0) on lipid metabolism and inflammation, and examine the mechanisms underlying these effects in mice and cells.Methods Fifty-six 6-week-old male C57 BL/6 J mice were randomly allocated to four groups fed a highfat diet(HFD) without or with 2% C8:0, palmitic acid(C16:0) or eicosapentaenoic acid(EPA). RAW246.7 cells were randomly divided into five groups: normal, lipopolysaccharide(LPS), LPS+C8:0, LPS+EPA and LPS+cAMP. The s... 相似文献