顺铂与5-氟尿嘧啶对体外人胃癌细胞影响的研究

[目的]研究顺铂（DDP）与5-氟尿嘧啶（5-FU ）在合并用药前后对体外培养的人胃癌细胞的影响.[方法]采用MTT法观察体外培养的人胃癌细胞系SGC-7901在DDP与5-FU合并用药前后细胞存活率的差异,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化, 透射电镜观察细胞超微结构变化.[结果]DDP与5-FU合用与单独应用化疗药相比细胞存活率明显下降,其增效倍数为单独用药的2.73～4.48倍（P＜0.01）, 细胞生长停止在S期,S期数分数为0.51,有效抑制了细胞有丝分裂及DNA合成, 细胞超微结构显示：联合用药后,细胞核固缩、空泡形成、微绒毛减少、线粒体及内质网肿胀.[结论]结果表明顺铂与小剂量化疗药合用,可获得强于化疗药单独用药的疗效,5-氟尿嘧啶增加了化疗药物对肿瘤细胞的毒性,增加了细胞对药物的敏感性,降低了药物的副作用.     

人涎腺粘液表皮样癌耐药细胞系的建立及其生物学特性

目的　建立人涎腺粘液表皮样癌细胞系耐药细胞株并观察其生物学特性及耐药性能 .方法　采用浓度递增法长期不间断诱导并经克隆化筛选 ,建立稳定的人涎腺粘液表皮样癌细胞系耐药细胞株 (MEC- 1/ 5 - FU) .应用 MTT法、细胞计数法、软琼脂克隆形成试验、流式细胞术、免疫组化、电镜等方法观察及检测该细胞株的生物学特性、耐药性能及参数 .结果　倒置显微镜观察该耐药细胞和其亲本涎腺粘液表皮样癌细胞系 (MEC- 1)的细胞生长活跃 ,MEC- 1为单层贴壁生长于培养器皿中 ,MEC- 1/ 5 - FU则可见重叠生长 ,两种细胞形态及超微结构未见明显改变 .MEC- 1/ 5 - FU和 MEC- 1细胞的群体倍增时间分别为 2 8.8h和 30 .0 h;克隆形成率分别为4.9%和 1.2 %;细胞周期分布 S期细胞分别为 2 5 .4%和17.1%.MEC- 1/ 5 - FU耐药性能稳定 ,给药剂量已达 1.980μg· L- 1 . 12种化疗药物对 MEC- 1/ 5 - FU和 MEC- 1生长抑制作用的剂量效应参数显示 :耐药细胞诱导作用药物 5 - FU对 MEC- 1/ 5 - FU细胞和 MEC- 1的半抑制浓度 (IC50 )值分别为 6 .310 μg· L- 1和 0 .44 7μg· L- 1 ,耐药倍数为 14.1;药物敏感性试验结果同时可见该耐药细胞株对 VCR,VBL ,PYM,DNR,VP16 ,CODP,PADM等化疗药物的 IC50 较MEC- 1表现不同程度的耐药性 ,     

紫杉醇与白藜芦醇对MGC803细胞株作用机制的初步研究

目的 实验研究紫杉醇(PA)、白藜芦醇(Res)合用对人胃癌细胞MGC803的影响.方法 用MTT法观察PA与Res合并用药前后对体外培养的人胃癌细胞MGC803细胞存活率的影响,用光学显微镜观察形态学改变,并通过流式细胞仪检测细胞周期的变化.结果 Res与PA合用与分别单独应用相比,细胞存活率明显下降,其增效倍数为单独用药的1.75～3.71倍(P＜0.05).细胞生长停止在S期,S期所占分数为0.47,抑制细胞的有丝分裂及DNA合成.结论 白藜芦醇与小剂量化疗药物紫杉醇合用,可获得化疗药物单独用药相同的疗效,紫杉醇增加化疗药对肿瘤细胞的细胞毒性作用,增加敏感性,减少药物副作用.     

番泻叶提取物对豚鼠结肠平滑肌细胞的收缩作用（英文）

目的　研究番泻叶提取物对游离的豚鼠结肠平滑肌细胞收缩的影响 .方法用含 1 g· L-1胶原酶及 0 .1 g· L-1大豆胰蛋白酶抑制剂的消化液消化 ,获得游离的单个豚鼠结肠平滑肌细胞 ;将不同浓度番泻叶提取物加入细胞悬液中 ,用测微尺观察随机遇到的 50个细胞长轴变化情况 ,计算用药前后细胞平均长度 .结果　成功获得了游离的结肠平滑肌细胞 .证实不同浓度的番泻叶提取物 (0 .2 2 ,0 .44,0 .89g· L-1 )与平滑肌细胞共孵育后 ,可使细胞的平均长度缩短为 (93±2 0 ) ,(86± 2 5) ,(85± 1 5)μm,生理盐水对照组为 (1 0 2± 2 3)μm,细胞长度下降的百分数为 8.7% ,1 5.7%和 1 6.6% ,与对照组相比有显著差异 (P<0 .0 5) ;在剂量为 0 .2 2～ 0 .89g·L-1 范围内 ,番泻叶对平滑肌细胞的收缩作用逐渐增强 (P<0 .0 5) ,呈剂量 -效应关系 .结论　番泻叶提取物对豚鼠结肠平滑肌细胞有直接的收缩作用     

沙利度胺对裸鼠原位种植人胃癌生长和转移的抑制作用

目的 :研究沙利度胺对裸鼠原位种植人胃癌生长和转移的抑制作用及其对胃癌细胞凋亡的影响。方法 :建立人胃癌裸鼠原位种植转移模型。随机分为 4组 ,种植 1周后开始 ,分别自腹腔注射生理盐水 (0 .5 ml/ d,对照组 )、5 -氟尿嘧啶 (30 m g·kg- 1 · d- 1 ,5 - FU组 )、沙利度胺 (2 5 0 mg· kg- 1 · d- 1 ,沙利度胺组 )、5 - FU与沙利度胺联合 (5 - FU 30 m g· kg- 1 · d- 1 ,沙利度胺 2 5 0 mg· kg- 1 · d- 1 ,联用组 ) ,1次 / d,共用 5周。种植后第 6周处死动物 ,测量原位肿瘤质量、抑瘤率、肿瘤微血管密度(MVD)、胃癌细胞凋亡指数 (AI) ,观察肿瘤细胞肝、腹膜转移情况。 结果 :5 - FU组、沙利度胺组、联用组的抑瘤率分别为39.8%、4 8.1%、74 .1% ,4组动物肝转移情况分别为 8/ 11、4 / 12、3/ 12、0 / 12 ;腹膜转移分别为 7/ 11、3/ 12、3/ 12、0 / 12。沙利度胺组、联用组 MVD受到明显抑制 (P<0 .0 5 ) ,AI明显增高 (P<0 .0 5 ) ,且以联用组抑制作用最显著 (P<0 .0 5 )。结论 :腹腔注射沙利度胺可通过抑制肿瘤血管生成 ,诱导癌细胞凋亡 ,对胃癌生长和转移具有较强的抑制作用 ,且可与传统腹腔化疗药物联用起协同抑制作用。     

ATRA和5-FU对胃癌细胞端粒酶活性的影响及其抗癌作用

【目的】观察全反式维甲酸 (ATRA)、5 FU单用和合用对胃癌细胞端粒酶活性的影响及其抗癌作用。【方法】A TRA、5 FU单用和合用处理体外培养的胃癌MGC 80 3细胞和荷胃癌裸鼠 ,用MTT法测定细胞活力 ,测量裸鼠用药前后的瘤体积 ,用端粒重复序列扩增法测定端粒酶活性。【结果】随着ATRA、5 FU浓度增高 ,作用时间延长 ,胃癌细胞活力逐渐下降。40 μmol/LATRA组、5 μmol/L 5 FU组和合用组 (AF组 ,40 μmol/LATRA加 5 μmol/L 5 FU)处理胃癌细胞 3d细胞活力分别为 46 %、47%和 8% (P <0 0 1) ,端粒酶活性分别为 45 7% (P <0 0 1)、10 0 %和 46 1% (P <0 0 1)。用药后ATRA组、合用组 (AF组 )瘤体积显著小于溶剂对照组 (不加药 ) ,5 FU组瘤体积显著小于对照组 ,用药后ATRA组、5 FU组、合用组端粒酶活性分别为 6 1%、10 0 %和 6 3 %。【结论】ATRA、5 FU在体外、体内均能显著抑制胃癌细胞的生长 ,二者合用对体外培养的胃癌细胞生长有协同抑制作用。抑制胃癌细胞端粒酶活性可能是ATRA抗肿瘤效应的机制之一。     

卡托普利对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响

目的　观察卡托普利对外源性羟自由基诱导心肌细胞凋亡的影响 .方法　采用培养的第 2代心肌细胞 ,随机分成 4组 :1正常对照组 :仅用 DMEM培养 ;2羟自由基组 :OH-终浓度为 10 - 4 m ol· L- 1 ;3卡托普利组 :卡托普利终浓度为 10 - 5mol· L- 1 ;4卡托普利 +羟自由基组 :卡托普利10 - 5mol· L- 1 +10 - 4 mol· L- 1 OH- .观察心肌细胞存活率和形态学 ,流式细胞仪双标法检测细胞凋亡率 .结果　 1羟自由基组心肌细胞存活率降低 ,和对照组比较有显著性差异(P<0 .0 5 ) ;卡托普利 +羟自由基组细胞存活率较羟自由基组高 (P<0 .0 5 ) . 2 Annexin V+/PI- 细胞即凋亡细胞在羟自由基组有较高的发生率 ,明显高于其他各组 (P<0 .0 5 ) ;卡托普利 +羟自由基组的细胞凋亡率显著低于羟自由基组 (P <0 .0 5 ) . 3羟自由基组凋亡心肌细胞呈特征性超微结构 .结论　卡托普利能减轻外源性羟自由基诱导的心肌细胞凋亡     

重组TRAIL诱导肺腺癌细胞系细胞凋亡的实验研究

目的 研究重组可溶性TRAIL作用于人肺癌系A549细胞培养物后,细胞凋亡的形态变化和凋亡率测定.方法 MTT比色法测定重组TRAIL对肺腺癌A549细胞的生长抑制率.TRAIL处理前后细胞核、质的形态学变化.经不同浓度重组TRAIL处理后A549细胞的双色荧光变化.定量重组TRAIL与亚毒性浓度的CDDP联合使用,对肺腺癌A549细胞生长抑制率和凋亡率的影响.结果 重组TRAIL对A549细胞生长有明显的抑制作用,TRAIL 100 μg&#183;L-1作用24 h后,抑制率达到41.6%.细胞形态学观察显示,A549肺腺癌细胞经50 μg&#183;L-1TRAIL处理24 h后,可观察到典型的细胞凋亡特点.3.3 mg&#183;L-1的CDDP与50 μg&#183;L-1重组TRAIL合用,A549细胞凋亡率高达75.2%.结论 重组TRAIL具有明显的诱导多种恶性肿瘤细胞凋亡的作用;化疗药物CDDP能加强重组TRAIL的抗肿瘤活性.     

血小板源性生长因子对人视网膜色素上皮细胞的作用

目的　观察血小板源性生长因子 (PDGF)对人视网膜色素上皮细胞 (hRPE)增殖和移行能力的影响 .方法　将体外培养的第 46代人视网膜色素上皮细胞分为DMEM组(改良型Eagle培养液 )和含有 2 0mL·L-1小牛血清的DMEM组(2 0 g·L-1DMEM ) ,每组分别加入不同浓度 (0 .1,1,5 ,10 ,5 0和 10 0 μg·L-1)的PDGF ,然后采用MTT比色法观察分析其对hRPE的增殖作用 ;应用hRPE损伤模型 ,计数进入缺损区的细胞 ,定量观察PDGF对hRPE移行的影响 .结果　①增殖作用 :0 .110 0 μg·L-1的PDGF均能促进hRPE的增殖 ,DMEM组 10 μg·L-1时促增殖作用最明显 ,增殖率达15 3% ;2 0 g·L-1DMEM组 5 0 10 0 μg·L-1的增殖率为 174% ,作用最强 .②移行作用 :PDGF能够显著促进hRPE的移行 ,并呈剂量依赖性 ,5 0 10 0 μg·L-1时促移行能力最强 ,DMEM组移行率为 5 10 % ,2 0mL·L-1FBS +DMEM组达 6 40 % .结论　PDGF能够促进hRPE的增殖和移行 ,有血清时可以加强这种作用 ,提示它在PVR的发病过程中可能发挥了重要作用     

异搏定对非p-gp高表达细胞株的增敏及耐药逆转作用

目的 :观察异搏定 (verapamil ,Ver)对非p -gp高表达细胞株的增敏及耐药逆转作用。方法 :使用二甲氧唑黄比色法 (XTT法 )检测药物敏感性 ,观察Ver对鬼臼乙叉甙 (etoposide ,VP16)的增敏及耐药逆转作用。结果 :单独Ver对HL 60和HL 60 /Adr细胞株的IC50 分别为 2 6.13mg·L-1和 3 9.0 0mg·L-1,单独VP 16对HL 60细胞的IC50 为 2 47.17μg·L-1,而加用Ver 5mg·L-1预处理 1h后 ,VP16对HL 60细胞的IC50 值下降为原来的 1/1.73 ;单独VP 16对HL -60 /Adr细胞的IC50 为872 .97μg·L-1,而加用Ver 5mg·L-1预处理 1h后 ,IC50 下降至 2 0 8.45 μg·L-1,为原来的 1/4.19,与VP16对HL 60敏感株的IC50 接近。结论 :Ver对非p gp高表达细胞株具有增敏及耐药逆转作用     

In vitro chemosensitivity of hepatocellular carcinoma for hepatic arterial infusion chemotherapy using the MTT assay with the combinations of antitumor drugs

Despite the hepatic arterial infusion chemotherapy (HAI) has been advocated as an effective therapy for hepatocellular carcinoma (HCC) with multiple intrahepatic metastases, chemosensitivity of HCC for HAI with multidrug regimen has not been sufficiently investigated. The purpose of this study was to evaluate the in vitro chemosensitivity of HCC using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay with the combinations of various antitumor drugs, and compared with the clinical results of HAI for patients with multiple intrahepatic recurrences of HCC. To evaluate the in vitro chemosensitivity of HCC to the combinations of antitumor drugs, 54 resected specimens of HCC were assayed using MTT assay with seven antitumor agents, 5-fluorouracil (5-FU), mitomycin C (MMC), adriamycin (ADM), etoposide (VP-16), cisplatin (CDDP), methotrexate (MTX) and CPT-11 (SN-38), exposed singly, or in combination. The data were compared with the clinical results of HAI for patients who manifested the multiple intrahepatic recurrence. In addition, the in vitro combined effect of CDDP and 5-FU for human hepatocellular carcinoma cell, KYN-1 and KYN-2, was analysed quantitatively. Of 54 resected specimens, 40 specimens assayed successfully, and an increased in vitro chemosensitivity of HCC when treated with combinations of antitumor drugs was observed: single drug 12.2%, two drugs combined 50.9% and three drugs combined 67.0%. The results of in vitro assay were well correlated, 85.7% in predicting accuracy, with the clinical results of 14 patients who underwent HAI for multiple recurrence of HCC, and also correlated with the experimental results of the combined use of CDDP and 5-FU in KYN-1 and KYN-2 in terms of pharmacokinetic reactions, i.e. synergism or antagonism. The MTT assay with the combinations of antitumor drugs represents an informative chemosensitivity test to HAI with multidrug regimen for recurrence of HCC.     

化疗药物不同配伍诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡

目的通过对临床常用化疗药物５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）、丝裂霉毒（ＭＭＣ）、卡铂（ＣＢＰ）、阿霉素（ＡＤＭ）和表阿霉素（Ｅ－ＡＤＭ）相互配伍诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡的观察,探讨化疗药物抑制胰腺癌细胞生长的作用机制,为临床制定合理的化疗方案提供理论依据。方法不同配伍的化疗药物作用于胰腺癌细胞后,以倒置显微镜和荧光显微镜观察其形态变化;以流式细胞仪检测细胞ＤＮＡ含量的变化,计算出凋亡细胞的比例;提取细胞ＤＮＡ,进行凝胶电泳确定细胞凋亡的发生。结果联合化疗可以诱导胰腺癌细胞凋亡,与引起细胞坏死相比,诱导肿瘤细胞凋亡的化疗药物剂量小、作用时间短;随作用时间的延长和药物剂量的增加,凋亡细胞的比例也增加;不同配伍的化疗药物诱导不同胰腺癌细胞株细胞发生凋亡的情况是不完全相同的。结论诱导肿瘤细胞凋亡是化疗药物抑制胰腺癌细胞生长的主要机制,能否诱导胰腺癌细胞发生凋亡可作为判断不同配伍的化疗药物抑制胰腺癌细胞生长能力的重要指标之一。     

艾迪联合抗癌药物对肝癌细胞系体外药物敏感性研究

目的 通过测定艾迪及艾迪联合抗癌药物ADM、DDP、5—Fu、MMC对肝磁细胞系7721细胞的体外药物敏感性试验，为肝癌化疗、介入治疗用药提供参考依据。方法 用24孔板培养肝癌细胞系7721细胞，观察细胞在单药及联合用药时的生长、抑制和集落形成情况，以判定药物的敏感性。结果 艾迪对肝癌细胞系7721细胞有抑制作用，引起癌细胞G0／G1期阻滞，艾迪与MMC和ADM有协同作用，其中以艾迪和ADM联合应用时作用最强。结论 艾迪对肝癌细胞系7721细胞有抑制作用，剂量增加与疗效提高有较大关系；艾迪与ADM和MMC联合应用，有协同作用。     

Cytotoxic activity of FK973 against human oral and breast cancer cells.

FK973 (11-acetyl-8-carbamoyloxymethyl-4-formyl-14-oxa-1, 11-diazatetracyclo [7.4.1.0.0] tetradeca-2, 4, 6-trien-6, 9-diyl diacetate), an analogue of mitomycin C (MMC), was tested against human oral squamous cancer cell lines Ca 9-22, HSC-2, HSC-3, breast adenocarcinoma cell lines MCF-7, BT-20 and breast ductal carcinoma cell line T-47D using MTT assay. FK973 showed cytotoxic effects against six tested cell lines and much wider effective dose range than MMC, adriamycin (ADM), and cisplatin (CDDP). FK973 was the most potent of the four drugs tested against the growth of the three squamous cancer cell lines derived from oral cavity. However, in breast cancer cell lines, FK973 was less potent than MMC and ADM. FK973 was time and dose dependent. The combination effects of FK973 with 5-Fluorouracil (5FU) or CDDP were synthetical. It may be a promising candidate for the treatment of oral and breast cancer.

     

绿茶儿茶素与抗癌药联合应用对二株人肝癌细胞生长的影响

目的：研究绿茶儿茶素（GTC）与抗癌药阿霉素（ADM）,5－氟尿嘧啶（5－Fu)和阿糖胞苷（AraC)联合应用对人肝癌细胞体外生长的抑制作用。方法：应用MTT法检测GTC先于抗癌药,抗癌药作用后或与抗癌药同时作用,对BEL－7402和SMMC－7721人肝癌细胞的生长抑制作用。结果：GTC与抗癌药有相加性抑瘤效应。结论：GTC很可能具有临床应用前景。     

胃癌耐药细胞株耐药谱的体外实验

观察胃癌细胞与抗肿瘤药作用后对不同药物耐的耐受情况，方法：胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１在体外分别与长春新碱（ＶＣＲ），５氟尿嘧啶（５－Ｆｕ），阿霉素（ＡＤＭ）及氨甲喋呤（ＭＴＸ）作用，获得ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ，ＳＧＣ７９０１／ＡＤＭ，ＳＧＣ７９０１／５－Ｆｕ及ＳＧＣ７９０１／ＭＴＸ４个耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它们对ＶＣＲ，ＡＤＭ，５－Ｆｕ，ＭＴＸ，顺铂（ＣＤＤＰ）以及丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）的敏     

化疗对胃癌细胞体外抗肿瘤药物敏感性的影响

目的探讨抗肿瘤药物化疗后,胃癌细胞体外对抗肿瘤药物敏感性有无改变。方法采用体外原代胃癌细胞培养、四甲基偶氮唑盐（MTT,3－（4,5－dimethylthiazol－2－yl）－2,5－diphenyltetrazoliumbromide）比色法测定药物对胃癌细胞的抑制率。结果5-氟尿嘧啶、顺铂、甲氨喋呤对胃癌细胞的抑制率在化疗和未化疗病例无显著差异（P＞0．05）,阿霉素和长春新碱在化疗组的抑制率显著低于未化疗组（P＜0．05）。结论化疗后胃癌细胞对有些抗肿瘤药物的敏感性降低,提示对曾化疗过的患者,临床上应注意更换化疗药物,最好进行肿瘤细胞药敏试验选择敏感的化疗药物。     

川芎嗪联合维拉帕米对人胃癌耐药细胞SGC7901/ADM多药耐药的逆转作用研究

目的:观察中药钙通道阻滞剂川芎嗪(TMP)联合维拉帕米(VP)对胃癌耐药细胞系SGC7901/ADM多药耐药(MDR)的逆转.方法:采用四唑氮蓝(MTT)法以川芎嗪、维拉帕米为逆转剂,观察化疗药物对SGC7901/ADM的杀伤作用.结果:采用非细胞毒性剂量300mg/L的TMP和/或10mg/L及100mg/L的VP与5-Fu联合应用,均能提高5-Fu的细胞杀伤作用,其结果比较为:VP(100mg/L)＞TMP(300mg/L) VP(10mg/L)＞TMP(300mg/L)＞VP(10mg/L).结论:TMP与VP具有协同逆转作用,是一种有效的中药胃癌MDR逆转剂.     

洛贝林逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADM耐药作用及其机制

目的：探讨哌啶生物碱洛贝林对人乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM耐药的逆转作用及其分子机制。方法：利用MTT比色法测定不同浓度洛贝林对人乳腺癌细胞株MCF-7/ADM的阿霉素（ADM）和氟尿嘧啶（Fu）的耐药逆转指数。多功能酶标仪测定洛贝林干预对细胞内罗丹明123荧光强度以反映其对细胞多药耐药蛋白P-gp活性的影响。同时用流式细胞术检测洛贝林对MCF-7/ADM细胞内罗丹明123积聚浓度的影响,从功能学的角度观察洛贝林的耐药逆转作用及其机制。结果：洛贝林(10 μmol/L)干预下,多药耐药细胞株MCF-7/ADM对化疗药的敏感性增加,ADM对耐药细胞株的IC50由（44.81±0.43)mg/L降至（16.72±0.75）mg/L,逆转指数为2.68;Fu对耐药细胞株的IC50由（53.12±1.60）mg/L降至（38.90±1.43）mg/L,逆转指数为1.37。洛贝林对细胞的罗丹明123外排有显著的浓度依赖性抑制作用。洛贝林（20 μmol/L）的多药耐药逆转有效率为经典耐药逆转剂维拉帕米（20 μmol/L）的71.6%,但毒副作用显著降低。结论：洛贝林对乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药性具有逆转作用,其机制主要为抑制细胞多药耐药蛋白P-gp的活性