大麻素对大鼠三叉神经节神经元γ-氨基丁酸激活电流的抑制作用

目的探讨人工合成大麻素WIN55,212-2对大鼠三叉神经节神经元γ-氨基丁酸(GABA)激活电流(IGABA)的调制作用。方法采用全细胞膜片钳技术。结果①实验中大部分受检细胞(91.84%,99/108)对胞外给予GABA(10～1000μmol/L)敏感,可记录到具有浓度依赖性的内向电流,该电流可被GABAA受体特异性拮抗剂荷包牡丹碱(Bicuculline)阻断。②预加WIN55,212-2(0.03～10μmol/L)对IGABA产生抑制作用,该抑制作用呈可逆性、浓度依赖性和非电压依赖性。WIN55,212-2使IGABA的量效曲线明显下移,而两者的阈值基本不变;最大反应浓度时IGABA幅值减少了(48.83±4.78)%;两条曲线的半数有效浓度(EC50)值比较接近(36.85μmol/Lvs25.76μmol/L)。③WIN55,212-2对IGABA的抑制作用可被大麻素CB1受体选择性拮抗剂AM281阻断,不能被大麻素CB2受体选择性拮抗剂AM630阻断。细胞外灌流蛋白激酶C(PKC)的抑制剂BIM可部分逆转WIN55,212-2对IGABA的抑制作用。结论大麻素WIN55,212-2作用于CB1受体,部分通过激活PKC途径来减少GABAA受体介导的电流,加强突触前抑制作用,这可能是大麻素的外周镇痛机制之一。     

GABA受体对谷氨酸受体的调控机制研究

目的 研究γ-氨基丁酸（GABA）受体对离子型谷氨酸受体的调控机制。方法 采用细胞膜片钳电生理技术,以GABA、谷氨酸（Glu）刺激记录GABA受体及Glu受体离子通道介导的全细胞电流（IGABA,IGlu）,观察GABA对谷氨酸受体离子通道活性的调控;并以荷包牡丹碱（Bic）抑制IGABA、以SO2-4或葡萄糖酸根（gluconate-）代替Cl-,研究其抑制作用的分子机制。结果 相同浓度GABA与Glu共给药诱导IGABA+Glu较单独给药诱导电流IGABA与IGlu之和小,该差异随浓度升高而降低;不同浓度GABA对Glu 30μmol/L诱导电流IGlu抑制作用随GABA浓度升高而增强,该抑制作用可以被Bic、SO2-4与gluconate-消除。结论 GABAA受体能抑制谷氨酸受体介导的全细胞电流,该作用具有浓度依赖性,其抑制机制可能与Cl-的通透性有关。     

异丙酚、咪达唑仑复合芬太尼对海马锥体神经元γ-氨基丁酸A受体的作用

目的研究异丙酚、咪达唑仑分别复合芬太尼对大鼠海马锥体神经元γ-氨基丁酸A(GABAA)受体的作用,探讨复合麻醉的机制。方法采用酶-机械法急性分离出生3~10日龄SD大鼠的海马锥体神经元,采用全细胞膜片钳技术记录锥体神经元GABAA受体介导的Cl-电流(GABA电流,IGABA)。实验分为单纯异丙酚组(组Ⅰ)、异丙酚复合芬太尼组(组Ⅱ)、单纯咪达唑仑组(组Ⅲ)及咪达唑仑复合芬太尼组(组Ⅳ)。结果0.3~30.0μmol/L异丙酚(组Ⅰ、组Ⅱ)、0.03~100.0μmol/L咪达唑仑(组Ⅲ、组Ⅳ)能剂量依赖性地增强IGABA,两药的作用曲线呈钟形,3.0μmol/L时作用最强,与其他浓度的差异有显著性(P<0.05)。0.01μmol/L芬太尼抑制IGABA后,组Ⅱ3.0μmol/L异丙酚增强IGABA的作用较组Ⅰ更明显[电流增强率:组Ⅰ为(127.2±11.2)%,组Ⅱ为(212.5±14.9)%,P<0.05],组Ⅳ3.0μmol/L咪达唑仑的作用较组Ⅲ无明显改变(P>0.05)。结论芬太尼能够增强异丙酚对海马锥体神经元GABAA受体的作用,对咪唑安定的作用无影响。异丙酚、咪达唑仑复合芬太尼可能减轻芬太尼的神经兴奋性不良反应。     

利多卡因对大鼠海马锥体神经元GABA_A-Cl~-电流的影响

目的　研究利多卡因对大鼠海马锥体神经元全细胞γ 氨基丁酸介导的氯电流 (GABA Cl-电流 )的影响 ,及其中枢致惊厥作用的可能机制。方法　酶解急性分离 2周龄左右大鼠海马锥体神经元 ,采用全细胞膜片钳技术 ,记录利多卡因对单个海马锥体神经元GABA Cl-电流的影响。结果　将钳制电位固定在 - 6 0mV ,GA BA以剂量依赖性方式诱导出内向电流 ;利多卡因明显抑制GABA诱导的Cl-电流 (IGABA) ,5 0 %抑制浓度 (IC50 )为 4 .0 5mmol/L ,10mmol/L可使GABA浓度效应曲线明显右移 ,5 0 %有效浓度 (EC50 )由 7.72mmol/L增加到17.2mmol/L ,且最大电流明显降低。结论　利多卡因以非竞争性的方式 ,抑制海马锥体神经元GABAA Cl-电流 ,可能是其中枢致惊厥作用的机制。     

普鲁泊福对GABAA受体结合功能的影响

目的:观察普鲁泊福对离体小鼠脑细胞膜GABAA受体结合功能的影响.方法:采用放射配体受体结合分析法,测定普鲁泊福对小鼠脑细胞膜3H-GABA特异性结合以及GABAA受体饱和曲线的影响.结果:特异性结合试验显示,与对照组相比,10～300 μmol/L浓度组的普鲁泊福明显增强3H-GABA与脑细胞膜GABAA受体的特异性结合,并呈浓度依赖性(P<0.05),而浓度低于10 μmol/L的普鲁泊福无明显增强作用(P>0.05).GABAA受体饱和试验显示,普鲁泊福组(10 μmol/L)的饱和曲线解离常数Kd2值明显低于对照组(P<0.01),但2组的Kd1、Bmax1及Bmax2值相比无统计学差异(P>0.05).结论:临床相关浓度的普鲁泊福可显著增强内源性GABA与GABAA受体的结合功能,其主要机制是通过提高GABA低亲和力结合位点的亲和性而起作用的.     

P物质对大鼠三叉神经节神经元辣椒素激活电流的调制作用

目的研究P物质(SP)对急性分离的大鼠三叉神经节神经元辣椒素受体亚型1(VR1)的调制作用,探讨SP对辣椒素在疼痛传导中作用的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的三叉神经节神经元膜VR1介导的电流,并观察预加SP对VR1介导的电流的调制作用。结果大多数三叉神经节细胞对辣椒素敏感,细胞外应用辣椒素(1×10-7~3×10-6mol/L)后可引起缓慢激活无明显去敏感的内向电流,且呈浓度依赖性;分别预加1×10-9、3×10-9和1×10-8mol/L SP 1 min后,辣椒素引起的电流幅值分别增加2.4%、20.8%和51.8%,增加的程度与SP的浓度和预加的持续时间有关。应用SP受体特异性阻断剂GR82334(1×10-6mol/L)可以阻断SP对辣椒素激活电流的增强作用。结论SP可增强三叉神经节神经元膜辣椒素受体介导的电流。     

SKF38393对体外培养大鼠视皮层神经元GABA-激活电流的影响

目的:探讨多巴胺D1受体激动剂SKF38393对体外培养的大鼠视皮层神经元γ氨基丁酸(GABA)-激活电流IGABA的影响.方法:选择培养11～14 d的大鼠视皮层神经元,加入不同剂量的GABA,应用全细胞膜片钳技术记录IGABA并观察SKF38393对IGABA的作用.结果:视皮层神经元IGABA幅值随GABA剂量的增加而增大,且可被足量GABA A受体拮抗剂Bicuculline完全阻断.加入不同剂量SKF38393后视皮层神经元IGABA减小(P均<0.05),SKF38393剂量超过10 μmol/L后产生的作用趋于稳定.联合应用10 μmol/L的D1受体拮抗剂SCH23390与SKF38393后,IGABA抑制率较单独应用SKF38393减小(P均<0.05).结论:IGABA可被SKF38393抑制.多巴胺可通过D1受体作用于IGABA.     

GABA_A受体在尼可刹米引起的新生大鼠呼吸兴奋中的作用

目的 探讨γ-氨基丁酸A(GABAA)受体在尼可刹米引起的新生大鼠呼吸兴奋中的作用.方法 制作新生大鼠离体延髓脑片标本,包含面神经后核内侧区并保留舌下神经根,给予灌流改良Krebs液,记录舌下神经根的呼吸相关节律性放电活动(RRDA).实验分为5组:第1组分别以浓度为0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0μg/ml尼可刹米灌流脑片.观察舌下神经根RRDA的变化,做出尼可刹米的量效曲线并选择最适浓度;第2组以浓度为10、20、40、60μmol/L的GABA灌流脑片,观察RRDA的变化做出量效曲线选择最适浓度;第3组以10 μmol/L荷牡丹碱灌流脑片;第4组联合应用40μmol/L GABA和10 μmol/L荷牡丹碱灌流脑片;第5组5μg/ml尼可刹米灌流脑片产生明显作用后冲洗至RRDA基本恢复,再联合灌流5 μg/ml尼可刹米和10 μmol/L荷牡丹碱.结果 尼可刹米浓度在0.5～7.0 μg/ml对延髓脑片RRDA有兴奋作用,5μg/ml时对吸气时程(TI)、放电幅度积分(IA)、呼吸周期(RC)等呼吸指标综合效果最显著.GABA在40μmol/L对RRDA放电的TI、IA、RC抑制作用最显著.荷牡丹碱对TI、IA、RC均有兴奋作用.联合使用GABA和荷牡丹碱,RRDA与对照组相比无显著改变.联合使用尼可刹米和荷牡丹碱,与单独使用尼可刹米相比TI、IA显著增强.RC无显著改变.结论 尼可刹米能够增强新生大鼠离体脑片舌下神经根RRDA,GABAA受体可能是尼可刹米作用途径之一.     

L-ENK对DRG神经元膜GABR激活电流的调制

已有的资料证明：背根神经节(DRG)神经元膜存在有多种受体，其中包括GABA(GABAA及GABAB)受体和脑啡肽(ENK)受体，这两类受体均与初级传人末梢膜突触前抑制的产生有关。本文研究的目的是探索此两种受体能否在同一细胞共存?二者之间有无相互作用?实验应用全细胞膜片钳技术在大鼠新鲜分离DRG神经元上观察了预加Leu-ENK对GABA激活电流的调制作用。在受检的101个细胞中大多数对GABA敏感(99／101)，反应具有明显的浓度依赖性(10^-6～10^-3M),GABA激活电流去敏感现象非常明显，即GABA激活引起的内向流幅值急速增大，在达到峰值后尽管GABA持续存在且浓度不变但电流逐步地呈指数下降直至一稳定值为止，此激活电流可为muscimol，isoguvacine所模拟，并为bicuculline所阻断。     

PKC抑制剂chereythrine对大鼠皮层神经元延迟整流钾电流的抑制作用

目的 观察蛋白激酶C (PKC)抑制剂chereythrine对大鼠皮层神经元延迟整流钾电流(IK)的影响.方法 采用全细胞式膜片钳技术,检测了chereythrine对大鼠皮层神经元IK的影响.结果 ①chereythrine(20μmol/L)对大鼠皮层神经元IK有抑制作用,抑制率为(41.2±9.62)%(P<0.01);②chereythrine(20μmol/L)可使大鼠皮层神经元IK的电流-电压曲线下移,并呈现一定的电压依赖性.结论 PKC抑制剂chereythrine对大鼠皮层神经元IK具有抑制作用.     

可溶性Hela细胞柯萨基B组病毒受体性质的研究

研究探讨可溶性柯萨基B组病毒受体(Coxsackievirus B group receptors,简称CBR)的性质,发现可溶性CBR活性及抗原性对pH的改变较敏感,而在温度4～60℃时能基本保持稳定;氧化还原均可改变CBR的活性及抗原性;肝素处理不影响CBR的生物学性质,表明脂蛋白在CBR的活性中心中所起的作用不大。蛋白酶K及胰蛋白酶可完全灭活受体,弹性蛋内酶部分灭后受体活性。研究结果提示,CBR是对温度较不敏感的糖蛋白,巯基团对维持受体活性是非必需的。     

谷氨酸受体辅助亚单位的研究进展

谷氨酸受体是中枢神经系统重要的兴奋性氨基酸受体,参与调节学习记忆、突触可塑性等生理功能。新近发现的谷氨酸受体辅助亚单位是一系列膜蛋白,能够与突触后膜谷氨酸受体相互作用,具有调节突触后膜谷氨酸受体的转运与定位等生物学功能,这些蛋白的发现与研究,揭示了突触传递的复杂性。     

甲地孕酮硅橡胶阴道环避孕机制的探讨

本实验测定了25例安放甲地孕酮硅橡胶阴道环妇女排卵期子宫内膜雌,孕激素胞浆受体含量及DNA、RNA含量,并作了内膜病理学检查;测定了血清FSH、LH、E_2及P浓度;还观察了宫颈评分及宫颈粘液蛋白含量的变化。以47例未放环的正常妇女作对照。结果表明,甲硅环对妇女的排卵功能影响不大,其避孕作用主要为局部的。     

23例鼻咽癌雌、孕激素和雄激素受体检测的初步研究

目的 探讨雌孕激素受体和雄激素受体与鼻咽癌的关系。方法 对23例鼻咽癌蜡块标本用免疫组化SP法进行测定，DAB显色，在光镜下计算阳性细胞数。结果 ER阳性率为65．2％(15／23)，PR阳性率为26．1％(6／23)，AR阳性率为56．5％(13／23)。鼻咽癌ER阳性中组织胞核含量高于胞浆11例，胞浆含量高于胞核仅4例；PR阳性中组织胞核含量高于胞浆和胞浆含量高于胞核相同，都是3例；鼻咽癌AB阳性中组织胞核含量高于胞浆10例，胞浆含量高于胞核仅3例。结论 ER鼻咽癌具在高表达性，定位于鼻咽癌组织中的细胞核；ER、PR的阳性情况与年龄、性别无关。     

趋化因子诱骗受体D6的研究进展

趋化因子诱骗受体D6是非典型的趋化因子受体之一,与典型的趋化因子受体结构相似,可以高亲和性结合炎性CC趋化因子,但无法传递信号,不能趋化及活化细胞。其主要功能是对炎性CC趋化因子内化并清除,在控制炎症、调节免疫等方面发挥作用。该文对其结构特点、表达特点、基本功能及与疾病关系的研究现状予以综述。     

dl-18-甲基炔诺酮-[2,3,d]异(口恶)唑及其卤代物的合成

dl-18-甲基炔诺酮是现用的避孕药之一。甾体化合物引入[2,3 d]异噁唑环或C_(21)卤代后生物活性均有不同程度的提高。我们参考文献方法,合成了dl-18-甲基炔诺酮-[2,3 d]-异噁唑2;并采用简便的方法,合成了化合物2的卤代物3、4及炔诺酮的C_(21)     

30例乳腺癌AR、ER和PR的研究

研究了30例乳腺癌的性类固醇激素受体含量和阳性检出率。乳癌组织胞液与~(3H)-睾酮,~(3H)-雌二醇和~(3H)-孕酮的最大特异结合量分别是154.2,121.6和159.0 fmol/mg胞液蛋白;它与三种标记配基的结合亲和力各为0.21,4.65和1.03nM。30例乳腺癌AR、ER和PR的阳性检出率分别是33.3%,70%和60%。不同病理类型乳腺癌间的AR、ER和PR阳性检出率差异有统计学意义。二元线性回归分析结果表明同时含有三种受体的乳腺癌AR的含量与ER和PR的含量无明显的相关关系。     

熟地黄对雌性小鼠老化进程中雌、孕激素受体含量的上调作用

目的 :探讨熟地黄对雌性小鼠老化进程中血清雌激素 (E2 )浓度、脾细胞雌激素受体 (ER)含量、成骨细胞孕激素受体(PR)含量的调节作用。方法 :应用放射免疫法、放射配体结合分析法技术 ,研究熟地黄对雌性小鼠老化进程中上述指标的调节作用。结果 :对照组随着老化进程的发展 ,血清中E2 浓度、脾细胞ER含量和成骨细胞PR含量均明显下降 ,并随老化程度呈阶段性变化 ;熟地黄组对应指标也有所下降 ,与对照组相比 ,PR、ER含量的下降速度明显减慢 (P <0 .0 1)。结论 :熟地黄有抵抗老化进程中血清E2 浓度、脾细胞ER含量和成骨细胞PR含量下降这种生理性变化的功能 ,即有抗衰老作用。     

dl-18-甲基炔诺酮-[2,3,d]异(口恶)唑及其卤代物的合成

dl-18-甲基炔诺酮是现用的避孕药之一。甾体化合物引入[2,3 d]异噁唑环或C_(21)卤代后生物活性均有不同程度的提高。我们参考文献方法,合成了dl-18-甲基炔诺酮-[2,3 d]-异噁唑2;并采用简便的方法,合成了化合物2的卤代物3、4及炔诺酮的C_(21)     

卵巢上皮性肿瘤的雌、孕激素受体定位研究

本文对19例卵巢不同类型的上皮性肿瘤进行了雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)的免疫定位研究。ER、PR的分布方式有三种:腔膜型、弥散型及核主型。浆液性癌以腔膜型分布为主,宫内膜样癌多呈弥散型及核主型分布;2例分泌型宫内膜样癌(透明细胞癌)的孕激素受体均呈核主型分布,且呈明显强阳性。ER、PR的定位研究较生化法更直接地反映了雌、孕激素与卵巢肿瘤的关系,对临床内分泌治疗具有重要指导意义。