结肠癌组织中TGF-β1 和nm23-H1 及pS2 protein的表达与生物学行为的关系

目的 观察转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤转移抑制基因H1(nm23-H1)、雌激素调节多肽pS2蛋白(pS2 protein)在结肠癌组织中的表达,探讨它们与结肠癌生物学行为的关系.方法 68例原发性结肠癌组织及30例同期正常结肠切缘组织石蜡包埋标本,用免疫组织化学方法检测TGF-β1,nm23-H1,pS2 protein的表达情况.结果 结肠癌组织中TGF-β1,nm23-H1,pS2 protein的阳性表达分别为51.47%,39.71%和35.2%,均显著高于正常结肠组织(P<0.05).TGF-β1,nm23-H1的表达与肿瘤的分化程度,Dukes分期及有无转移之间有相关性,而与组织学类型无关;在有转移的结肠癌组织中,nm23-H1的表达显著低于无转移组(P<0.05),TGF-β1表达显著高于无转移组(P<0.05);pS2 protein的表达与结肠癌Dukes分期及有无转移无相关性,但与分化程度有关(P<0.05).结论 TGF-β1,nm23-H1,pS2 protein在结肠癌的发生、发展中起着重要作用,可以反映结肠癌的生物学行为.     

肝癌组织中nm23-H1、PTEN的表达及其临床病理的意义

目的探讨nm23-H1、PTEN在肝细胞癌中的表达及其与患者的临床病理特点的关系。方法应用免疫组化S-P方法,检测50例肝癌组织中nm23-H1、PTEN的表达,分析其与临床病理之间的关系。结果 nm23-H1、PTEN蛋白阳性表达为棕黄色,定位于细胞浆。10例正常肝组织和50例癌旁肝组织均可见阳性表达。肝癌组织nm23-H1、PTEN阳性率表达分别为60%（30/50）、54%（27/50）,明显低于癌旁肝细胞阳性率表达100%（50/50,P〈0.001,P〈0.001）。nm23-H1和PTEN表达与肝癌病理分级、临床分期、肝内转移密切相关,而与患者性别、年龄、肝癌癌灶大小、肝包膜有无、甲胎蛋白水平无明显相关性。结论肝癌组织中nm23-H1、PTEN表达减低与肝癌发生发展有相关性。检测nm23-H1、PTEN两种蛋白在肝癌组织中的表达能反映肝癌的恶性程度及侵袭转移能力。     

胆管癌组织中MMP-9和nm23-H1的表达与浸润转移的关系

目的 探讨胆管癌组织中MMP-9和nm23-H1的表达水平,了解胆管癌组织中MMP-9和nm23-H1表达的相关性及其与胆管癌浸润转移的关系. 方法 采用免疫组织化学法(PV-9000)检测60例胆管癌(35例浸润转移组,25例无浸润转移组)MMP-9和nm23-H1的表达. 结果 有浸润转移的35例胆管癌标本中,MMP-9和nm23-H1表达的阳性率分别为71.4%(25/35)和25.37%(9/35);无浸润转移的25例胆管癌标本中,MMP-9和nm23-H1表达的阳性率分别为40.0%(10/25),和60.0%(15/25);MMP-9的表达与胆管癌浸润转移倾向呈正相关性(P<0.05),nm23-H1的表达与胆管癌的浸润转移倾向呈负相关性(P<0.01).而MMP-9与nm23-H1的表达呈负相关性(P<0.01). 结论 MMP-9及nm23-H1的表达可能作为胆管癌预后及转移潜能判断的指标.     

nm23-H1、CD44v6在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因nm23-H1、细胞粘附分子变异型CD44v6在食管鳞癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法,检测54例食管鳞癌手术标本nm23-H1蛋白、CD44v6蛋白表达,分析其表达与食管鳞癌生物学特性及临床特点之间关系。结果淋巴结转移组与无淋巴结转移组相比,nm23-H1表达降低,CD44v6表达增强;大于3年生存组与小于3年生存组相比,nm23-H1表达增强,CD44v6表达降低;nm23-H1表达与肿瘤浸润深度和临床分期呈负相关;CD44v6表达与肿瘤浸润深度和临床分期呈正相关。结论nm23-H1表达降低、CD44v6表达增强与食管鳞癌浸润转移有一定相关性。     

nm23-H1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义研究

为探讨转移抑制基因nm23-H1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义.应用SABC免疫组化染色方法,检测了38例食管鳞状细胞癌患者中nm23-H1蛋白的表达.发现17例(44.7%)nm23-H1蛋白染色阳性,21例(55.3%)nm23-H1蛋白染色阴性.nm23-H1蛋白表达与淋巴结转移呈负相关,而与其它临床指标无相关.nm23-H1蛋白染色阴性患者的总的生存时间显著低于nm23-H1蛋白染色阳性患者(P<0.05),而且在有淋巴结转移的患者中,nm23-H1蛋白的低表达与短的生存时间相关(P<0.05).结果表明nm23-H1蛋白的表达可成为判断食管鳞状细胞癌患者有无淋巴结转移及其预后的指标.     

nm23-H1、p16抑癌基因蛋白在甲状腺肿瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨nm23-H1、p16抑癌基因蛋白在甲状腺肿瘤中的表达意义.方法应用SP免疫组化方法检测了54例甲状腺癌、16例腺瘤、10例甲状腺非瘤病变及癌旁正常组织中nm23-H1、p16抑癌基因蛋白的表达.结果 nm23-H1、p16基因在正常组织中阳性表达率为分别为100%(12/12)及91.7%(11/12),但两者均以弱表达为主,并且阳性着色均定位于胞核.甲状腺腺瘤及分化型甲状腺癌中nm23-H1、p16表达率及表达强度均增强(P<0.05),而甲状腺未分化癌中nm23-H1及p16表达率及表达强度则降低(P<0.01).nm23-H1及p16蛋白表达与甲状腺癌的分化程度呈正相关(P<0.01),与颈淋巴结转移无相关性,但nm23-H1与包膜侵犯呈负相关(P<0.05),nm23-H1、p16在甲状腺癌中的表达有相关关系(P<0.01).结论 nm23-H1及 p16在甲状腺癌的表达中有相关关系(P<0.01).以nm23-H1及p16蛋白失活与甲状腺未分化癌的发生密切相关,但与颈淋巴结转移无关.nm23-H1及p16可作为临床判断恶性程度及生物学行为的一个参考指标.     

唾液酸化糖原分子和nm23-H1基因的表达与乳腺癌转移和预后的关系

目的:明确不同类型唾液酸化糖原分子,Sialyl Lewis A(SleA)、Slalyl Lewis X(SleX)的异常表达与乳腺癌转移和预后的关系,评价SleX和nm23-H1基因表达的综合分析对乳腺癌预后判断的价值.方法:采用免疫组织化学染色的方法,检测102例乳腺癌组织内SleA、SleX和nm23-H1的表达,分析与乳腺癌转移和预后的关系.结果:102例乳腺癌中SleA和SleX阳性率分别为24.5%(25/102)和59.8%(61/102),nm23-H1低表达率为37.3%(38/102).SleA的表达与多项临床病理资料、淋巴结转移和预后之间无显著相关性.SleX、nm23-H1基因的表达也与多项临床病理资料无显著相关性,但与淋巴结转移相关.生存曲线分析显示,SleX阴性表达者的无瘤生存率明显高于SleX阳性表达者,P<0.05;nm23-H1非低表达者的无瘤生存率明显高于nm23-H1低表达者,P<0.01.综合分析nm23-H1表达和SleX表达与预后的关系显示,SleX阳性表达合并nm23-H1低表达的患者预后最差.多因素分析结果显示,原发肿瘤大小、淋巴结转移情况、联合nm23-H1和SleX表达,为重要的独立判断预后的指标.结论:以SleX为代表的Ⅱ类糖原分子在乳腺癌中具有主要表达相关性,其表达与乳腺癌转移和预后不良相关;综合分析nm23-H1表达和SleX表达能更准确地判断乳腺癌的预后.     

nm23—H1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义研究

为探讨转移抑制基因nm23-H1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。应用SABC免疫组化染色方法,检测了38例食管鳞状细胞癌患者中nm23-H1蛋白的表达。发现17例（44.7%)nm23-H1蛋白染色阳性,21例(55.3%)nm23-H1蛋白染色阴性。nm23-H1蛋白表达与淋巴结转移呈负相关,而与其它临床指标无相关。nm23-H1蛋白染色性患者（P＜0.05）,而且在有淋巴结转移的患者中,nm23-H1蛋白的低表达与短的生存时间相关（P＜0.05）。结果表明：nm23-H1蛋白的表达可成为判断食管鳞状细胞癌患者有无淋巴结转移及其预后的指标。     

CD44v6和nm23-H1的表达对大肠癌淋巴结转移的影响

目的探讨CD44v6和nm23-H1基因产物表达与大肠癌淋巴结转移的关系.方法应用SP免疫组化染色法,对76例大肠癌标本进行CD44v6和nm23-H1基因产物测定.结果CD44v6基因产物的高表达和nm23-H1基因产物的低表达与大肠癌淋巴结转移有关(P＜0.01).大肠癌CD44v6和nm23-H1表达无相关性(P＞0.05),但CD44v6阳性表达伴nm23-H1阴性表达的患者发生淋巴结转移的可能性大.结论CD44v6和nm23-H1与大肠癌淋巴结转移密切相关,两者在淋巴结转移中起协同作用,联合检测对判断大肠癌淋巴结转移是一个有用的指标.     

骨肉瘤微血管密度与nm23-H1、PCNA 表达及预后的关系

目的研究骨肉瘤微血管密度与转移抑制基因nm23-H1表达、增殖细胞核抗原(PCNA)指数相关性及其病人预后的关系.方法应用免疫组化方法检测80例骨肉瘤微血管密度(MVD),以及nm23-H1表达和PCNA指数,并应用Cox模型分析其与预后的关系.结果MVD与nm23-H1表达呈负相关,而与PCNA指数呈正相关.Cox模型多因素分析显示MVD、nm23-H1和PCNA均为影响骨肉瘤预后的重要因素.MVD低值组比高值组预后好(P＜0.05).在MVD高值组中,nm23-H1高表达组比低表达组预后亦较好(P＜0.05).结论微血管密度可能是骨肉瘤转移的必要条件,而非充分条件,它与nm23-H1和PCNA相互作用,共同影响骨肉瘤的转移和预后.     

肺癌患者CYP1A1和GSTM1基因多态性检测

目的:探讨CYP1A1与GSTM1基因多态与支气管肺癌癌变的关系.方法:采用回顾性"病例-对照"方法和PCR-RFLP技术,对98例肺癌患者和136名体检健康者(对照组)进行CYP1A1与GSTM1基因多态性检测.结果:对照组和肺癌组CYP1A1 m1、GSTM1缺陷型等位基因频率分别为28%和43%、44%和61%,2组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).CYP1A1(w1/m1、CYP1A1(m1/m1、GSTM1(缺陷型)基因型患肺癌的危险度分别升高3.18倍、2.72倍和2.16倍(P均＜0.05).GSTM1(缺陷型)和CYP1A1(w1/m1或CYP1A1(m1/m1基因型携带者患肺癌的危险度为5.62倍(P＜0.01.吸烟使GSTM1缺陷型携带者和CYP1A1 m1携带者肺癌的患病危险度较单一基因作用危险度显著增加(P＜0.05).结论:CYP1A1 m1和GSTM1缺陷型基因均是肺癌的危险因素,2者存在交互作用,且均与吸烟有协同作用.     

谷胱苷肽转硫酶GSTM1、GSTT1和GSTP1基因多态性与江苏人群直肠癌易感性的关系

目的:探讨谷胱苷肽转硫酶M1、T1、P1(GSTM1、GSTT1和GSTP1)基因多态性和吸烟饮酒习惯与直肠癌易感性的关系.方法:以直肠癌患者210例,人群对照439例为研究对象,调查研究对象的生活习惯,以多重PCR技术检测GSTM1和GSTT1基因缺失,PCR-RFLP技术检测GSTP1基因单核苷酸多态(第105密码子A→G).结果:GSTM1和GSTT1基因缺失频率在病例组和对照组差异无显著性;GSTP1 A/A、A/G和G/G基因型频率分布在病例组和对照组差异无显著性;与GSTP1 A/A基因型携带者相比,G/G基因型者发生直肠癌的危险性无显著升高,调整OR值为1.11(95%CI:0.77～1.60).结论:GSTM1、GSTT1和GSTP1基因多态性与直肠癌易感性无关.     

Ksp-Gpx1-k1k1载体的构建及鉴定

目的 构建含有肾组织特异性启动子(Ksp-cadherin)的Gpx1与k1k1载体质粒,为下一步构建转基因动物、研究在动物模型体内表达和基因治疗提供基础.方法 以KLK1 cDNA、GPX1 cDNA、Ksp-cadherin BAC为模板,PCR扩增获得人源Gpx1、KLK1、Ksp-cadherin cDNA.PCR产物大小与预期结果一致,序列分析完全正确.选择多个相应酶切位点,分步将Ksp-cadherin、Gpx1、KLK1插入至pIRES-EGFP质粒中.构建pKSP-GPX1-IRES-KLK1重组质粒.应用酶切鉴定和序列分析方法验证所构建载体的正确性.结果 成功构建了含有Ksp-cadherin的GpX1与k1k1载体质粒.结论 该重组载体的构建为下一步构建转基因动物,研究其在哺乳动物肾组织内过表达及在移植肾缺血冉灌注损伤的基因治疗中的作用奠定了基础.     

1型糖尿病与HLA-DRB1?DQB1基因相关性研究

目的: 研究中国江苏地区汉族人群1型糖尿病(T1DM)与人类白细胞抗原(HLA)-DRB1?DQB1基因及单倍型频率的相关性?方法:选取江苏地区汉族人群T1DM患者(112例)与对照组(69例),运用聚合酶链反应-寡核苷酸探针序列特异性引物(PCR-SSO)技术,进行HLA-DRB1?DQB1基因分型,两组间等位基因频率比较采用χ2检验,通过Arlequin软件进行单倍型频率的分析?结果:112名T1DM患者中检测到DRB1位点等位基因17个(对照组19个),DQB1位点等位基因7个(对照组7个)?与对照组相比,T1DM组DRB1*0901?DRB1*0405和DRB1*0301频率明显增高,DQB1位点的DQB1*0201与DQB1*0303频率明显高于对照组;与对照组相比,T1DM患者明显升高的单倍型频率为:DRB1*0901-DQB1*0303?DRB1*0301-DQB1*0201?DRB1*0405-DQB1*0401和DRB1*0405-DQB1*0302?结论:中国江苏地区汉族T1DM患者HLA基因DR位点的DRB1*0901?DRB1*0405?DRB1*0301及DQ位点的DQB1*0201?DQB1*0303对T1DM易感?发现了4个新的具有易感作用的单倍型:DRB1*0901-DQB1*0303?DRB1*0301-DQB1*0201?DRB1*0405-DQB1*0401和DRB1*0405 -DQB1*0302?     

结直肠癌组织中Tiam1、Fascin-1及HSPB1的表达及意义

目的探讨结直肠癌组织中Tiam1,Fascin-1及HSPB1的表达及意义。方法制作含100例结直肠癌组织的组织芯片,应用免疫组化SP法检测结直肠癌组织中Tiam1,Fascin-1及HSPB1的表达。结果组织芯片免疫组化染色后,形态可观测率为96%,并且背景清晰,对比鲜明。Tiam1表达阳性率为74%,Fascin-1表达阳性率为51%,HSPB1表达阳性率为68%,显著高于非肿瘤组织。Tiam1,Fascin-1及HSPB1表达与结直肠癌转移显著相关,伴发转移的结直肠癌组织Tiam1,Fascin-1及HSPB1阳性表达明显高于无转移者。通过相关性统计学分析,发现Tiam1与Fascin-1表达呈正相关(r=0.678,P<0.01),Tiam1与HSPB1表达呈正相关(r=0.650,P<0.01)。结论Tiam1,Fascin-1及HSPB1均与结直肠癌转移有关,Fascin-1和HSPB1的高表达可能与Tiam1的调控有关。     

Sp1和Egr-1对LCRG1基因启动子转录活性的调节研究

目的:目前LCRG1基因转录调控机制不清,现拟研究Sp1和Egr-1对人LCRG1基因启动子的转录调节. 方法:利用MatInspector软件分析LCRG1基因启动子区域内潜在的转录因子结合位点,Sp1、wtEgr-1、mtEgr-1真核表达质粒与LCRG1启动子重组质粒的共转染实验,分析其对LCRG1启动子活性的影响. 结果:生物信息学提示LCRG1基因启动子区域存在Sp1和Egr-1等位点,外源性突变型转录因子Egr-1能上调LCRG1基因启动子的活性.结论:突变型转录因子Egr-1可能参与该基因的表达调控.     

HLA-DQ A1, -DQB1 and -DRB1 gene polymorphism--in Malay type 1 diabetes mellitus patients and their use for risk prediction

HLA-DQA1, -DQB1, and -DRB1 gene polymorphism were analyzed to study type 1 DM susceptibility in Malay patients from Southeast Asia (Malaysia and Singapore). Patients showed significant increases in the occurrence of DQA1*0501 (50.7% vs. 20.4%; RR = 3.97; Pc < 0.01), DQB1*0201 (48% vs. 19.1%; RR = 3.86; Pc < 0.05), and DRB1*0301 (38.7 vs. 6.8%; RR = 8.36; 95% Pc < 0.05). Conversely, significant decreases were noted in the occurrence of DQA1*0601 (14.7% vs. 35.2%; RR = 0.33; Pc = 0.008) and DQB1*0601 (4% vs. 23.5%; RR = 0.16; Pc < 0.05) in type 1 DM patients. Using a logistic regression model, we derived a risk prediction model for type 1 DM in our indigenous Malay population based on the identified HLA genotypes. The RR for type 1 DM increases by a factor of 5.68 for every unit increase in the number of DRB1*0301 allele (P < 0.001), and decreases by a factor of 0.18 per unit increase in the number of DQB1*0601 allele (P < 0.001). After adjusting for these two HLA genotypes, DQA1*0501, DQB1*0201 and DQA1*0601 were not statistically significant as risk predictors. The lower incidence of type 1 DM in the Malay population may be contributed by the genotypic combinations of DR and DQ genes as well as the linkage disequilibria between susceptible and protective alleles.     

RGS5和ATP1B1基因与原发性高血压的相关性研究

目的 探讨中国汉族人群中G蛋白信号调节因子5(RGS5)和ATP1B1基因功能区标签单核苷酸多态性(SNP)与原发性高血压的相关性及变异位点间的交互作用.方法 选择启动子、外显子和3'UTR区符合最小等位基因频率在中国北京汉族人群中>5%、R2 ≥0.80的SNP.对906例原发性高血压患者(EH组)进行SNP位点的基因分型,以性别和年龄与EH组匹配的894名血压正常者作为正常对照组.观察不同基因型和等位基因频率在EH组和对照组中的分布,并采用MDR软件分析各位点之间的交互作用.结果 最终3个标签SNP入选.EH组与对照组SNP位点基因型分布和等位基因频率比较差异无统计学意义(P>0.05);由2个基因SNP位点组成的单倍型,在EH组和对照组的分布比较差异也无统计学意义(P>0.05).交互作用分析显示,2个或3个位点模型比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 3个标签SNP与EH无明显相关性,并且可能不存在交互作用.